扶正化瘀方药物血清对原代培养大鼠肝细胞增殖及胶原生成率的影响

大鼠灌胃给扶正化瘀方后分离的药物血清，能显著促进正常及损伤肝细胞的增殖，有效地抑制ＣＣ１４所致损伤肝细胞培养上清液中ＡＬＴ、ＡＳＴ活性，抑制正常及损伤肝细胞的胶原生成率。     

肝复康胶囊对实验性肝纤维化大鼠肝细胞的保护作用

目的:探讨中药肝复康对实验性肝纤维化大鼠肝细胞的保护作用.方法:采用四氯化碳致大鼠肝纤维化模型,观察肝复康对肝功能及肝细胞损伤超微结构的影响.结果:肝复康明显改善肝细胞变性及炎细胞浸润等情况,同时明显降低血清转氨酶活性、升高血清白蛋白,降低白球蛋白比例;电镜观察表明肝复康对实验性肝纤维化大鼠肝细胞线粒体等细胞器的损伤有保护作用.结论:肝复康能明显减轻四氯化碳所致的肝细胞损伤,保护肝细胞,改善肝功能.     

胆必清颗粒抑制小鼠肠缺血/再灌注所致肝细胞凋亡

目的:研究胆必清颗粒在肠缺血/再灌注组织损伤中对肝细胞凋亡的影响及机理。方法:采用夹闭肠系膜上动脉1小时再灌注2小时的方法建立肠缺血/再灌注损伤模型,TUNEL法观察肝细胞凋亡的情况,荧光法检测肝细胞内钙离子浓度([Ca2 ]i),比色法检测肝组织中丙二醛(MDA)及髓过氧化物酶(MPO)水平。结果:与假手术组比较,模型组肝细胞凋亡指数、肝细胞[Ca2 ]、iMDA及MPO水平显著增加。与模型组比较,胆必清颗粒显著抑制肝细胞凋亡,降低肝细胞[Ca2 ]i、MDA水平及MPO水平。结论:胆必清颗粒具有抑制肠缺血/再灌注损伤引起的肝细胞的凋亡作用。     

五灵胶囊抗肝细胞损伤的药效成分分析

目的:研究五灵胶囊抗肝细胞损伤的药效成分及保护作用.方法:采用高效液相法(HPLC),将已知的对照品作对照,测定五灵胶囊中所含相应成分的含量;以体外D-Gla N、LPS诱导的大鼠原代肝细胞为靶细胞,经细胞培养观察五灵胶囊及对照品对肝细胞损伤后的保护作用.结果:在与对照品对照条件下,经HPLC分析五灵胶囊中各成分的滞留时间与各对照品时间一致;五灵胶囊和其他3种对照品可使D-GlaN、LPS诱导损伤原代肝细胞的ALT、LDH-L、MAO、GSH-ST、MDA水平显著降低,有效地拮抗D-GlaN和LPS对肝细胞的损伤;在受损肝细胞内测定五灵胶囊的化学成分有五味子醇甲、五味子乙素、隐丹参酮、丹参酮ⅡA.结论:HPLC分析和细胞药效学证实,初步推断五灵胶囊抗肝细胞损伤的部分有效成分是乙素、隐丹参酮、丹参酮ⅡA,而且这些成分对肝细胞的损伤具有一定的保护作用.     

小大黄对药物性肝细胞损伤影响的实验研究

目的:探讨小大黄(PSL)对药物性肝细胞损伤的影响及其作用机制.方法:采用离体肝细胞原代培养技术,以硫代乙酰胺(TAA)复制体外培养SD乳鼠肝细胞损伤模型,通过检测3组(正常对照组、损伤组、小大黄治疗组)培养液中乳酸脱氢酶(LDH)逸出量及四甲基偶氮唑盐(MTT)显色反应,了解肝细胞的损伤和增殖情况,并同时检测了培养液中超氧化物歧化酶(SOD)和一氧化氮(NO)的含量变化.结果:TAA可使培养液中LDH活性增加,肝细胞增生指数下降,SOD减少,NO增加,应用小大黄后可逆转这些改变.结论:小大黄不仅可有效阻止TAA导致的急性肝细胞损伤,而且具有促进肝细胞再生的作用.     

改构型酸性成纤维细胞生长因子对白花丹素诱导的人胚肝细胞L-O2损伤的保护作用

目的研究改构型酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)对白花丹素引起的人胚肝细胞L-O2损伤的保护作用及机理。方法用白花丹素体外诱导肝细胞损伤,同时用aFGF对肝细胞进行保护,测定培养上清液中的SOD,MDA,LDH值,MTT法测定肝细胞活性。结果与损伤组比较,aFGF对白花丹素引起的胚肝细胞损伤有明显的保护作用(P<0.05)。结论 aFGF可保护肝细胞,其机制可能与其拮抗自由基产生有关。     

复肝宁对实验性肝纤维化大鼠肝细胞的保护作用

目的:探讨中药复肝宁对实验性肝纤维化大鼠肝细胞的保护作用。方法:采用猪血清致大鼠肝纤维化模型,观察复肝宁对肝功能及肝细胞损伤超微结构的影响。结果:复肝宁明显改善肝细胞变性及炎细胞浸润等情况,同时明显降低血清转氨酶活性,升高血清白蛋白,降低白球蛋白比例;电镜观察表明复肝宁对实验性肝纤维化大鼠肝细胞线粒体等细胞器的损伤有保护作用。结论:复肝宁能明显减轻猪血清所致的肝细胞损伤,保护肝细胞,改善肝功能。     

悦肝胶囊对四氯化碳损伤原代培养大鼠肝细胞的保护作用

目的探讨悦肝胶囊对四氯化碳(CC l4)损伤原代培养大鼠肝细胞的保护作用。方法以CC l4诱导大鼠肝细胞损伤模型,观察悦肝胶囊对肝细胞的琥珀酸脱氢酶(SDH)、酸性磷酸酶(ACPase)、葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-Pase)活性和糖原含量以及肝细胞形态结构的影响。结果悦肝胶囊能显著提高SDH、G-6-Pase活性及糖原含量,抑制ACPase活性,并可显著改善受损肝细胞的形态结构变化。结论悦肝胶囊对CC l4损伤原代培养大鼠肝细胞具有保护作用。     

紫茉莉含药血清对乙醇诱导L-02肝细胞损伤的防治作用

目的观察紫茉莉含药血清对乙醇诱导L-02肝细胞损伤的影响。方法采用血清药理学方法制备含药血清。用不同浓度含药血清对L-02肝细胞进行预防处理,1 h后,加入乙醇损伤L-02肝细胞。8 h后,酶标法检测培养液中丙氨酸氨基转移酶(ALT)及天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性和受损细胞中丙二醛(MDA)水平及超氧化物歧化酶(SOD)活性;MTT法检测肝细胞存活率。结果经含药血清处理后,肝细胞培养液中ALT、AST活性明显降低,肝细胞内MDA水平明显降低,SOD活性明显升高;受损肝细胞存活率明显增大。结论紫茉莉含药血清对乙醇诱导L-02肝细胞损伤有一定的防治作用,其机制可能与抗氧化作用有关。     

丹皮酚对急性肝细胞损伤的保护作用

目的在乙醇诱导的体外大鼠肝细胞急性损伤导致谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、丙二醛(MDA)水平升高的模型基础上,探讨丹皮酚对大鼠肝细胞的直接保护作用。方法分别将肝细胞接种于培养瓶中培养传代,利用50 mmol/L乙醇处理12 h建立急性大鼠体外肝细胞急性损伤模型,用含不同浓度丹皮酚(250、125、62.5、31.25、15.625μmol/L)的培养液与急性损伤肝细胞共孵育不同时间(0.5、1、3、6、12、24 h),MTT比色法测定丹皮酚对肝细胞损伤的预防作用,赖氏法测定上清液ALT和AST的水平,硫代巴比妥法测定上清液MDA水平。结果丹皮酚(125μmol/L,12 h)可抑制乙醇对肝细胞的损伤,并明显降低乙醇致急性损伤肝细胞的ALT、AST释放量和MDA水平。结论丹皮酚体外给药抑制乙醇诱导肝细胞的ALT、AST和MDA释放,提示其具有对肝细胞损伤的直接保护作用。     

Mechanisms of protective action of radix Salviae miltiorrhizae (RSM) against experimental hepatic injury in rats]

The results indicated that RSM could significantly inhibit the lipid peroxidation of normal livers and cultured hepatocytes of rats, induce liver microsomal cytochrome P450 in normal rats, increase nucleic acids, proteins, urea and cerolloplasmin of damaged cultured hepatocytes of rats, relieve ultrastructural damage of cultured hepatocytes induced by CCl4. The pharmacological actions mentioned above should be considered as important mechanisms of RSM against liver injury.     

丹参-山楂协同抗大鼠动脉粥样硬化的实验研究

目的:观察丹参-山楂提取物(水浸膏)单用及合用对大鼠动脉粥样硬化模型的干预,探讨两药间的交互协同作用。方法:雄性Wistar大鼠随机分为空白对照组和造模组,造模组采用ip维生素D₃叠加卵清白蛋白激发免疫反应的方法,在高脂饮食的基础上诱导大鼠动脉粥样硬化(AS)。造模8周确定造模成功后,将造模动物分为模型组,丹参组,山楂组,丹参-山楂合用组。各组经口给予相应的药物,连续4周。给药结束后,检测各组大鼠血脂水平和丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD),NO水平。苏木素伊红(HE)染色观察主动脉组织形态学变化。结果:各给药组均可降低TC,TG,低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),MDA水平,提高高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C),SOD,NO水平,合用组效果更明显(P<0.05)。结论:山楂丹参具有协同作用,二者联用效果更明显。     

对乙酰氨基酚对小鼠原代培养肝细胞的损伤及阿魏酸钠保护作用的研究

 目的:观察对乙酰氮基酚对肝细胞损伤的影响及阿魏酸钠的保护作用。方法:采用原代肝细胞培养，以细胞存活率及培养液中谷丙转氨酶(ALT)活性的变化为指标。结果:对乙酰氨基酚2μg·ml^-1与细胞共同培养3h可形成稳定损伤，阿魏酸钠可明显提高损伤肝细胞活率，降低ALT活性。结论:阿魏酸钠对肝损伤有保护作用。     

四种中药预防肝硬变发生的实验研究

用以CCl_4为主的复合因素制造大白鼠肝硬变动物模型,同时分别用丹参、红花、当归、桃仁四种中药进行治疗,观察肝硬变形成情况。结果显示:丹参组动物肝脏纤维增生明显减轻、胶原蛋白含量减少,全部鼠均未发生肝硬变;红花抑制纤维增生的作用次于丹参;当归和桃仁抑制肝纤维增生的作用在本实验剂量下不显著。     

桑白皮黄酮提取物对2型糖尿病大鼠非酒精性脂肪肝血管生成相关基因的影响

目的:初步探索桑白皮黄酮提取物对2型糖尿病大鼠非酒精性脂肪肝的治疗作用及机制研究。方法:将24只雄性大鼠随机分为3组,分别为正常组、模型组、桑白皮黄酮组(1.0 g·kg~(-1))。采用腹腔注射小剂量链脲佐菌素(streptozocin,STZ)结合高脂饲料喂养的方法,建立2型糖尿病伴非酒精性脂肪肝的模型,灌胃治疗16周时,观察比较桑白皮黄酮提取物对各组大鼠血清中空腹血糖(FBG),总胆固醇(TC),甘油三酯(TG),低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),糖耐量(OGTT)变化,油红O染色和苏木素-伊红(HE)染色观察肝脏病理改变,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测肝脏血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF),血小板衍生因子(platelet derived growth factor,PDGF)mRNA的表达。结果:灌胃干预16周后,与正常组比较,模型组大鼠FBG,TC,TG,LDL-C,含量均显著高于正常组(P0.05),应用桑白皮黄酮治疗后,上述生化指标较模型组均有显著下降(P0.05)。糖耐量试验显示模型组胰岛素敏感性下降,应用桑白皮黄酮治疗后胰岛素敏感性较模型组有显著改善。油红O染色结果显示模型组肝细胞胞浆内可见大量红染的脂肪滴,而桑白皮黄酮组肝细胞胞浆内未见红染的脂肪滴。HE染色结果显示模型组肝小叶中肝细胞发生明显的小泡样脂肪变性,部分肝细胞中脂滴融合成大的脂肪空泡,小叶中可见点状坏死,周围有炎性细胞浸润,而桑白皮黄酮组肝细胞结构正常。模型组肝脏中VEGF,PDGF mRNA表达量较正常组有显著升高,应用桑白皮黄酮治疗后,肝脏中VEGF,PDGF mRNA表达量明显降低(P0.05)。结论:桑白皮黄酮提取物对实验性2型糖尿病大鼠非酒精性脂肪性肝有一定的防治作用,其作用机制可能与抑制肝脏中VEGF,PDGF mRNA的表达有关。     

六月青多糖对四氯化碳诱导的大鼠肝纤维化的影响

目的:研究六月青多糖(LYQP)对四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl4)所致大鼠肝纤维化的干预作用及机制.方法:SD大鼠随机分成两组,模型组大鼠采用50％ CCl4花生油溶液1 mL·kg-1ig造模,每周2次,连续7周,正常组用生理盐水代替.将病理检查确认肝纤维化已形成的SD大鼠60只随机分为LYQP(600,300,150 mg·kg-1)组,秋水仙碱(0.2 mg·kg-1)组,CCl4模型对照组,每组12只.于造模的第8周开始给药.正常组和CCl4模型对照组ig生理盐水,药物组ig LYQP和秋水仙碱,每日1次,连续ig给药4周.检测大鼠血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、谷胱甘肽-过氧化物酶(GSH-Px)活性以及肝组织中羟脯氨酸(Hyp)的含量,采用Masson染色观察肝组织纤维化程度.结果:LYQP(600,300,150 mg·kg-1)组ALT和AST活性为(13.53±2.30),(19.89±2.13),(26.31±2.87) U·mL-1,(17.14±2.96),(24.85±3.14),(33.63±3.91) U·mL-1,与模型对照组比较,LYQP可明显降低CCl4致大鼠纤维化血清ALT和AST活性;GSH-Px活性为(710.4±35.98),(653.8±25.36),(612.0±27.96) U·mg-1,Hyp含量为(0.382±0.017),(0.446±0.022),(0.517±0.024)mg·g-1与模型对照组比较,LYQP可明显增高GSH-Px活性和降低Hyp含量;Masson染色显示各药物组干预的大鼠肝脏胶原纤维均有所减少.结论:六月青多糖可减轻CCl4诱导的肝纤维化.     

榄仁叶提取物对D-GalN诱导的小鼠急性肝损伤的防护作用

目的 :研究榄仁叶提取物 (TCE)对小鼠急性肝损伤的防护作用及可能机制。方法 :在体实验 ,建立小鼠D-氨基半乳糖 (D- GalN)肝损伤模型 ,检测TCE对血清天冬氨酸氨基转移酶 (AST)、丙氨酸氨基转移酶 (ALT)活性的影响 ,观察肝脏组织结构的变化并测定肝线粒体肿胀度。离体实验 ,建立原代小鼠肝细胞D-GalN损伤模型 ,运用MTT法检测TCE对细胞活性的影响 ,并测定细胞上清AST及超氧化物歧化酶 (SOD)活力变化。结果 :在体实验 ,一定剂量TCE能有效抑制D GalN引起的小鼠血清AST及ALT活性的显著上升 (2.95 ,3.35倍 ) ,明显减轻D-GalN损伤引起的小鼠肝脏组织结构的破坏并抑制线粒体对外加Ca²⁺ 诱发肿胀敏感性的下降。离体实验 ,不同浓度TCE可剂量依赖性抑制D-GalN引起的MTT下降 ,抑制甚至完全对抗D-GalN引起的原代肝细胞上清AST的显著上升(1.9倍 )及SOD的明显下降 (48.0% )。结论 :TCE对D-GalN诱导的急性肝损伤具有效的防护作用 ,其机理可能与对抗脂质过氧化、保护线粒体及肝细胞有关。     

抗纤复方对纤维肝大鼠肝细胞基底膜基质生成的影响

目的 :探讨抗纤复方对体外培养纤维肝大鼠肝细胞基底膜基质生成的影响。方法 :常规培养正常与 DMN纤维肝大鼠肝细胞 ,然后改用抗纤复方原液与抗纤复方药物血清温育肝细胞 48小时后 ,免疫组化 S-P法显色细胞纤维连接蛋白( FN)、层连蛋白 ( LM)和 IV型胶原蛋白 ( IV-C)的变化。结果 :正常肝细胞基底膜基质合成处于抑制状态 ,肝纤维化时肝细胞基底膜基质合成增加。抗纤复方能显著抑制纤维肝肝细胞 F N,L M及 IV-C的表达 ,抗纤复方药物血清效果优于原液。结论 :抗纤复方具有抑制 DMN纤维肝肝细胞基底膜基质的异常合成作用。     

螃蟹甲大孔吸附树脂50%乙醇洗脱物对大鼠CCl4肝损伤的保护作用

目的:探讨螃蟹甲中大孔吸附树脂50%乙醇洗脱物对四氢化碳(CCl_4)致急性肝损伤的保护作用及其可能机制。方法:60只Wistar大鼠随机分为正常组,模型组,联苯双酯组(联苯双酯滴丸100 mg·kg~(-1)),螃蟹甲大孔吸附树脂50%乙醇洗脱物(EPY-50)高、中、低剂量组(400,200,50 mg·kg~(-1)),连续ig给药4 d,正常组和模型组均ig给予纯化水,第3天给药1 h后,ip 15%CCl_4橄榄油,正常组ip橄榄油,染毒2,22 h后再次给药,末次给药1 h后,眼眶静脉丛采血,测血清中丙氨酸转氨酶(ALT),天冬氨酸转氨酶(AST),丙二醛(MDA),超氧化物歧化酶(SOD)的水平,处死大鼠剖取肝脏,测肝指数及肝组织中MDA,SOD,谷胱甘肽还原酶(GSH)含量,并做肝脏组织病理学检查。结果:与正常组比较,模型组大鼠血清中AST,ALT水平显著增加(P0.01),肝组织匀浆液中的MDA含量明显升高(P0.05),SOD,GSH含量均明显降低(P0.05),肝脏指数显著增加(P0.01),表明CCl_4造模成功。与模型组比较,EPY-50高、中剂量组能显著降低CCl_4致急性肝损伤大鼠血清中AST,ALT水平(P0.05,P0.01),并显著减少肝组织中MDA含量,提高SOD,GSH的含量,降低肝指数(P0.05,P0.01),改善肝组织病理状态。结论:EPY-50对大鼠CCl_4致急性肝损伤有保护作用,其作用机制可能与其抗氧化活性有关。