体外压力刺激对大鼠“足三里”穴筋膜组织细胞合成释放肿瘤坏死因子-α和干扰素-β影响的研究

目的通过体外实验探讨压力刺激对大鼠"足三里"穴筋膜组织细胞合成释放肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和干扰素-β(INF-β)的影响,为腧穴"扶助正气"的治疗作用提供细胞生物力学方面的实验依据。方法体外培养大鼠"足三里"穴筋膜组织细胞,对细胞实施免疫组织化学鉴定后,实施100 kPa和200 kPa压力刺激,检测细胞外培养液INF-β和TNF-α含量的变化。结果 "足三里"穴筋膜组织细胞Keratin染色阴性,Vimnetin染色阳性,200 kPa压力刺激后,培养液中TNF-α含量增加,INF-β含量降低,差异均有统计学意义。结论 "足三里"穴筋膜组织细胞主要是成纤维细胞,压力刺激对筋膜组织成纤维细胞TNF-α和INF-β合成释放的调节,可能是腧穴接受针灸推拿治疗后特异性发挥"扶助正气"作用的细胞生物力学原理之一。     

体外压力刺激对大鼠筋膜组织细胞合成释放NO和IL-1β影响的研究

目的:通过探讨压力刺激对大鼠筋膜组织细胞合成释放一氧化氮(NO)和白细胞介素-1 β(IL-1 β)的影响,为按摩治病机制提供细胞生物力学方面的实验依据。方法:体外培养大鼠筋膜组织细胞,对细胞进行形态学鉴定后,实施50kPa压力刺激,检测细胞外培养液中NO和IL-1 β含量的变化。结果:筋膜组织细胞主要是成纤维细胞,压力作用后,细胞外培养液中NO和IL-1 β的含量都增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:筋膜组织细胞可以感受机械刺激,并将物理性质的力学信号转换为生物性质的化学信号;其在力学刺激作用下的反应,可能是按摩发挥治病作用的细胞生物力学原理之一。     

循经针刺对大鼠足阳明胃经穴区皮下筋膜内肥大细胞的影响

为探讨肥大细胞在经络活动中的作用,本文对比观察了针刺大鼠一侧“足三里”及“髀关”穴后,两侧足阳明胃经上五对不同穴区皮下筋膜肥大细胞数目的变化,发现各穴区皮下肥大细胞均显著高于经穴旁,针刺后各穴区肥大细胞数目皆明显增加,而经穴旁肥大细胞数目无明显差异。提示肥大细胞可能是经络活动及循经感传过程中的一个重要环节。     

循经电针刺激可激活穴区皮下感觉传入神经-CB-HRP示踪研究

本实验是将1％CB－HRP5μl分别注入大鼠一侧“足三里”或“乳中”穴区皮下,追踪不同节段脊神经节内被标记细胞,观察穴区皮下感觉传入神经的节段性分布及循经电针刺激对此节段性分布的影响,结果发现：“足三里”穴区皮下感觉神经末梢主要投射至L4、L5两脊神经节,“乳中”穴区皮下感觉神经主要投射至T4、T5、T6脊神经节;循经电针刺激可激活“足三里”或“乳中”穴区皮下感觉神经末梢,使其摄取HRP能力增强,因而同一脊神经节阳性标记细胞数增加,不同脊神经节出现阳性标记细胞的节段扩大。以上结果为循经感传的跨神经节段性传入提供了一些形态学依据。     

电针“足三里”穴对大鼠迷走神经放电的影响

目的:观察电针大鼠双侧“足三里”穴对迷走神经放电的影响。方法:将30只健康成年SD雄性大鼠(200~240 g)随机分为对照组、足三里组(电针双侧“足三里”穴)和非经非穴组(电针非经非穴,即“足三里”穴外侧旁开5 mm处),每组10只。足三里组及非经非穴组大鼠以3 Hz脉冲电流持续进行电针刺激30 min,强度以双下肢微颤为宜(约2~4 V)。以双极铂电极分别引导左侧迷走神经传出及传入纤维,采用生物机能试验仪连续记录迷走神经放电频率和峰值。结果:刺激前后,对照组与非经非穴组大鼠迷走神经传出和传入纤维放电频率和峰值均无显著性改变(P>0.05);组内各时间点比较亦无显著性差异(P>0.05)。足三里组电刺激“足三里”穴(7.5±3.4)min后,迷走神经传出纤维放电频率明显加快,峰值增加,与刺激前比较差异均有显著性意义(P<0.01),各参数值均显著高于对照组和非经非穴组相应时间点(P<0.01);而传入纤维放电的各参数值均无明显改变。结论:电针“足三里”穴可以使迷走神经传出纤维放电增强,但对其传入纤维放电无影响。     

电针＂足三里＂穴对肾虚型牙周炎大鼠建模过程中牙槽骨吸收值的影响

目的：通过在肾虚型牙周炎大鼠建模过程中给予电针刺激“足三里”穴与非经非穴点,观察牙槽骨吸收值的变化,探讨电针“足三里”穴对大鼠牙周炎形成的预防作用。方法：36只SD大鼠随机分为对照组（N组）、足三里组（P1组）和非经非穴组（P2组）,3组均以牙颈部钢丝结扎＋肌注醋酸泼尼松龙法制备肾虚型牙周炎大鼠模型。从开始制备模型起,N组不作任何处理,P1组同时给与电针刺激“足三里”穴,P2组则电针刺激“足三里”穴旁外1cm非经非穴点。结果：实验开始1、2、3周时各组牙槽骨吸收值分别为N组：（2．92±0．42）mm、（4．44±0．30）mm、（4．72±O．27）mm,P1组：（0．91±0．58）mm、（1．46±0．93）mm、（2．08±0．77）mm,P2组：（2．84±O．65）mm、（4．21±0．42）mm、（4．51±0．19）mm。1周时各组牙槽骨吸收值之间无差别,2周、3周时P1组牙槽骨吸收值均分别小于N组、P2组（P〈0．05）,N组、P2组之间无差别。结论：电针“足三里”穴可以减轻肾虚型牙周炎大鼠在建模过程中牙槽骨吸收程度,电针非经非穴点无此作用。     

基于古代文献的针灸治疗水肿选穴规律探析

目的：总结古代文献中针灸治疗水肿的选穴规律。方法：以“水肿”“浮肿”“水气”“水病”等检索词检索《中华医典》针灸推拿古籍,筛选、提取相关条文,建立数据库,使用Microsoft Excel、SPSS 26.0、SPSS Modeler18.0分析古代针灸治疗水肿的选穴组方规律。结果：纳入369首针灸穴位处方,其中复方99首,单穴处方270首,共使用128个腧穴。总频数为700,使用频数前5的腧穴分别为水分、足三里、三阴交、陷谷、合谷。腧穴主要归属经脉为足阳明胃经、任脉、足太阴脾经、足太阳膀胱经,其中下肢腧穴较常选用,特定穴中合穴使用频数最高。关联规则分析获得14条腧穴关联规则,其中“三阴交→足三里”支持度最高,核心处方为“三阴交-足三里-合谷-行间-内庭-曲池”。聚类分析显示4组腧穴类别,主要根据水肿部位聚类。结论：古代医家针灸治疗水肿主要围绕“培土制水”“通阳利水”“气行水行”“血行水行”4个基本思路,重视合穴等特定穴的灵活配合,以核心腧穴为中心,搭配病变局部腧穴进行系统治疗。     

体外压力刺激对大鼠筋膜组织成纤维细胞周期和增殖指数影响的研究

目的 通过体外实验探讨压力刺激对大鼠筋膜组织成纤维细胞周期和增殖指数(PI)的影响,为推拿基本力学刺激"舒筋散结"的治疗作用提供细胞生物学方面的实验依据.方法 体外培养大鼠筋膜组织成纤维细胞,对细胞实施压力刺激后,检测细胞周期与PI变化.结果 筋膜组织成纤维细胞接受压力作用后,细胞周期发生阻滞,休止期和DNA合成前期(G0/G1期)细胞增多,分裂前期(S期)细胞减少,PI降低,差异有统计学意义.结论 压力刺激对筋膜组织成纤维细胞周期与PI的抑制性调节,可能是推拿"舒筋散结"的细胞生物力学原理之一.     

电针“梨状二穴”治疗腰椎间盘突出症大鼠的实验研究

目的：探讨电针“梨状二穴”对腰椎间盘突出症大鼠血清白细胞介素-6（IL-6）、一氧化氮（NO）、前列腺素E2（PGE2）、基质金属蛋白酶-3（MMP-3）等炎症介质表达的影响。方法：将32只SD大鼠随机分为空白组、模型组、电针1组、电针2组。除空白组外，其余3组均按照非压迫性腰椎间盘髓核突出模型的造模方法进行造模。电针1组、电针2组分别给予相应干预措施，在造模结束以及治疗后的第1、3、6天对大鼠后肢热刺激缩爪阈差值进行检测，治疗后的第6天用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定血清标本中IL-6、NO、PGE2、MMP-3的水平。结果：造模后第3天，与空白组比较，模型组、电针1组、电针2组大鼠的缩爪阈值明显下降（P<0.01）；治疗后第6天，模型组治疗前后缩爪阈值比较，差异无统计学意义（P>0.05）；电针1组、电针2组治疗前后比较，缩爪阈值明显升高，差异均有统计学意义（均P<0.01）。治疗后电针1组、电针2组IL-6、NO、PGE2、MMP-3水平明显低于模型组，差异均有统计学意义（均P<0.01）。结论：电针“梨状二穴”降低了腰椎间盘突出症大鼠IL-6、NO、PGE2、MMP-3的表达水平，从而起到抗炎镇痛的作用。     

《中华医典》中针灸治疗腹胀的选穴规律分析

目的：对古籍中针灸治疗腹胀的选穴规律进行分析和总结。方法：以“腹胀”“腹满”“腹中胀”“中满”“胀满”“胪胀”“胪中胀”为检索词，搜索范围设置为“正文”，著作设置为“针灸推拿类”。在中华医典中检索，收集相关条目，对其腧穴频次、归经、所在部位等进行梳理，并运用SPSS Modeler 18软件分析选穴规律。结果：检索得到针灸治疗腹胀的条目共231条，涉及86个腧穴。足三里、内庭、中脘、水分、公孙等腧穴最为常用；胃经、脾经、任脉、膀胱经等经脉的腧穴应用最多；五输穴、俞募穴等特定穴最常用；气海-足三里、气海-太白、足三里-气海-太白是治疗腹胀的组方要穴。结论：研究古籍中针灸治疗腹胀的选穴规律，对现代临床具有一定的指导作用。     

针刺“内关”“中脘”“足三里”对背侧网状亚核神经元放电的影响

目的:观察腧穴"胃病方"即"内关""中脘""足三里"的针刺信号在背侧网状亚核传导与整合的途径。方法:选用健康成年雄性SD大鼠,10%乌拉坦腹腔注射麻醉,人工呼吸。立体定位仪固定头部,暴露菱形窝,玻璃微电极记录延脑背侧网状亚核(SRD)神经元细胞放电。首先记录30 s的神经元背景活动,然后施以手法(捻转角度120°、频率80次/min)刺激"内关"30 s,同时记录SRD神经元的反应;刺激结束,待细胞放电恢复后,再用相同手法分别刺激"中脘"与"足三里"穴。结果:刺激"内关"穴后,放电频率从(1.67±0.35)个/s增加到(17.55±1.40)个/s;刺激"中脘"穴后,放电频率从(2.35±0.43)个/s增加到(16.96±1.83)个/s;刺激"足三里"后,放电频率从(1.83±0.37)个/s增加到(17.39±1.58)个/s。结论:SRD可能为腧穴"胃病方"3穴在中枢传入信息聚合的部位之一。     

Investigation of the Role of Mast Cells in Acupuncture Effects and Their Sensitivity to Physical Stimuli During TCM Treatment

Objective： To better understand the function of mast cells in acupuncture points （acupoints） in acupuncture-induced analgesia. The author tested their sensitivity to mechanical, thermo and light stimulation. Methods： The tail flick model was applied to measure analgesia in rats, and the author determined the density of mast cells in tissue slices and their degranulation ratio before/after acupuncture. The author also applied the patch-clamp technique to investigate activation of human mast cells （HMC1 cell line） by mechanical stress or noxious heat, and the author optically observed degranulation phenomena of mast cell in response to red laser light. Results： Manual stimulation by acupuncture at Zusanli （ST 36） of the rat resulted in analgesia and the effect was more pronounced than after stimulation of a sham point nearby the acupuncture point. A higher density of mast cells was found at Zusanli （ST 36） than at the sham point,     

电针大鼠耳穴“心”等对孤束核升压反射相关神经元电活动的影响

目的:通过观察电针作用于不同穴位对麻醉大鼠不同状态下平均动脉压(MAP)及孤束核(NTS)与升压反射相关神经元放电的影响,证明NTS神经元在针刺和升压反射信号整合中的作用。方法:在麻醉大鼠生理状态下及颈静脉注射脱羟肾上腺素(PE)引起升压反射的状态下,观察电针耳穴"心"及体穴"内关"足三里"对MAP的影响,同时用电生理学单细胞记录的方法记录和鉴别NTS与升压反射相关神经元细胞外放电活动,同步观察上述两种状态下针刺对单细胞放电的影响。结果:颈静脉注射PE引起升压反射,NTS神经元活动对升压反射的反应以兴奋为主。麻醉大鼠生理状态下和PE引起升压平台期时,电针耳穴"心"和体穴"足三里"能降低大鼠的MAP(P<0.001,P<0.05),"内关"无明显作用。电针3个穴位均能增加大鼠生理状态和升压平台期状态NTS升压反射相关神经元的放电活动,在两种血压状态下电针耳穴"心"和体穴"足三里"引起神经元放电增加的百分比均大于"内关"(P<0.05)。结论:NTS内存在升压反射相关神经元,这类神经元被耳穴"心"及体穴"足三里"激活的百分比与"内关"相比更为显著,与针刺耳穴"心"及体穴"足三里"引起的降压效应反应相一致,说明在NTS内针刺和加压反射信号发生整合。     

电针“足三里”对胃粘膜损伤大鼠Bcl-2、Fas蛋白表达的影响

目的 :观察电针“足三里”对胃粘膜损伤大鼠的细胞保护作用与细胞凋亡调控基因Bcl 2、Fas蛋白表达水平的关系及“足三里”是否具有腧穴相对特异性。方法 :40只大鼠 ,随机分为四组 ,即“足三里”组、非穴组、模型组和空白组 ,每组 1 0只。用无水乙醇按每只 1mL灌胃 ,造成胃粘膜损伤模型。各组检测胃粘膜细胞Bcl 2、Fas蛋白表达水平。结果 :Bcl 2基因蛋白阳性表达在“足三里”组非常明显 ,“足三里”组与模型组比较 ,有明显差异 (P <0 0 5)。Fas基因蛋白阳性表达在“足三里”组不明显 ,“足三里”组与非穴组、模型组比较 ,有极显著差异 (P <0 0 1 )。结论 :电针“足三里”对胃粘膜损伤后的细胞保护作用可能的机理 ,是由于促进了Bcl 2基因蛋白表达 ,抑制了Fas基因蛋白表达 ,并具有腧穴相对特异性。     

Effects of electroacupuncture of unilateral and bilateral "zusanli" (ST 36) on serum TNF-alpha, IL-1 and IL-4 levels in rats with chronic inflammatory pain

OBJECTIVE: To observe the effect of electroacupuncture (EA) on serum tumor necrosis factor-alpha (TNF-alpha), IL-1 and IL-4 levels in rats with chronic inflammatory pain, so as to investigate its underlying mechanism in relieving pain. Methods Forty-eight SD rats were randomized into control, model, EA-unilateral ST 36, and EA-bilateral ST 36 groups, with 12 rats in each. Chronic inflammatory pain model was established by intradermal injection of Freund's complete adjuvant (0.1 mL) into the right paw. EA (2 Hz/100 Hz, 1-2-3 mA) was applied to the unilateral "Zusanli" (ST 36) and bilateral "Zusanli" (ST 36) for 30 min, once every 3 days and continuously for 4 weeks. Serum TNF-alpha, IL-1 and IL-4 contents were detected by enzyme linked immunosorbent assay. Results Compared with the control group, serum TNF-alpha, IL-1 and IL-4 contents of the model group increased significantly (P < 0.01), while in comparison with the model group, the levels of the 3 indexes were decreased considerably in both unilateral and bilateral ST 36 groups (P < 0.01). No significant differences were found between the unilateral ST 36 and bilateral ST 36 groups in serum TNF-alpha, IL-1 and IL-4 contents (P > 0.05). CONCLUSION: EA can effectively lower serum TNF-alpha, IL-1 and IL-4 levels in inflammatory pain rats, which may contribute to its effect in relieving inflammatory pain.     

电针对非酒精性脂肪肝大鼠血清及肝组织白介素-18的影响

目的:探讨电针对非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠白介素-18(IL-18)的影响及治疗NAFLD的机制。方法:将44只SD大鼠随机分为造模组33只,空白组11只。造模大鼠喂养高糖高脂饲料5周制备NAFLD模型,造模成功后,随机分为模型组、电针组和非穴组。电针组针刺"足三里""丰隆""三阴交""太冲"穴(连续波,频率2Hz,强度1.5V),非穴组针刺大鼠尾巴中1/3段随机4处,每日治疗1次,连续4周。采用全自动化学分析仪检测大鼠空腹血糖(FBS),放射免疫法检测空腹胰岛素(FINS),计算空腹胰岛素抵抗指数(FIRI),采用双抗体夹心酶联免疫吸附法检测血清及肝组织匀浆IL-18含量变化,HE染色观察肝组织病理学改变。结果:针刺4周后,模型组FBS、FINS、FIRI、肝组织和血清IL-18与空白组比较都显著升高(P<0.01),模型组肝组织出现不同程度的脂肪变性;电针组FBS、FINS、FIRI、肝组织匀浆IL-18和血清IL-18与模型组比较都显著下降(P<0.05),电针组肝组织内脂肪性变减轻;非穴组FBS、FINS、FIRI、肝组织匀浆IL-18和血清IL-18与模型组比较变化都不明显(P>0.05),非穴组肝组织内脂肪性变无明显改善。结论:电针可能通过降低肝组织及血清IL-18,阻断多糖攻击肝脏所致的损伤作用,改善肝脏功能,而实现对NAFLD大鼠的治疗作用。     

针刺“足三里”对大鼠孤束核P物质的影响

目的 :观察延髓孤束核P物质免疫阳性反应产物的分布以及针刺“足三里”穴对其的影响。方法 :将SD大鼠随机分为三组 :电针“足三里”穴组 (n =10 )、电针“足三里”穴旁开 0 5cm组(n =10 )、空白对照组 (n =10 )。应用免疫组织化学ABC法显示延脑组织SP免疫活性切片。结果 :孤束核内P物质的免疫阳性反应产物以膨体型纤维为主 ,呈点状和串珠状 ,其敞开部有少量阳性胞体。主要分布于孤束核的内侧亚核、连合亚核 ,其余亚核内较为稀疏 ;电针“足三里”穴内侧亚核、连合亚核阳性纤维的光密度明显升高 ,其余亚核无明显变化 ;电针“足三里”穴外侧旁开 0 .5cm组与空白组相似 ,各亚核均无明显变化。结论 :针刺“足三里”可能通过抑制NTS内侧亚核和连合亚核SP的释放 ,对胃的功能活动产生兴奋作用     

电针足阳明经穴对家兔胃粘膜损伤细胞保护作用的研究

本实验采用无水乙醇灌胃造成胃粘膜损伤后 ,分别电针足阳明经“四白”、“梁门”、“足三里”三个不同段代表穴 ,及“足三里”外 2cm的对照点 ,观察其对胃粘膜损伤后的细胞保护作用 ,以证实足阳明经与胃的相关性。结果发现 ,分别电针“四白”、“梁门”、“足三里”7日后 ,均能使胃粘膜损伤指数显著降低。电针“足三里”后 ,胃液及胃粘膜PGE2 与其他各组比较均显著增高 (P <0 0 5或 0 0 1 ) ,血清NO与模型组、电针“足三里”外 2cm组比较亦见明显增高 (P <0 0 5) ;电针“四白”、“梁门”、“足三里”以及空白组胃粘膜EGF与未经电针的模型组比较均有显著差异 (P <0 0 5或0 0 1 )。提示 ,电针家兔足阳明经不同节段的腧穴均对胃粘膜损伤细胞有保护作用 ,其中以“足三里”最满意 ,说明足阳明经与胃具有相关性 ,与此同时 ,同一经脉的穴位对相关脏腑的作用亦有着相对的特异性     

经皮穴位电刺激“足三里”对运动性疲劳胃黏膜损伤大鼠胃黏膜6-酮-前列腺素_(1α)、血栓素B_2的影响

目的:观察经皮穴位电刺激(TEAS)"足三里"穴对运动性疲劳致胃黏膜损伤大鼠胃黏膜的保护作用,探讨TEAS"足三里"穴的胃黏膜保护作用机制。方法:大鼠随机分为正常组、模型组、TEAS组,每组8只。采用跑台运动法建立运动性疲劳致胃黏膜损伤模型。采用TEAS"足三里"穴干预(连续波、频率2Hz、强度5mA)治疗30min,每日1次,共15d。评价水平运动分数、垂直运动分数、力竭运动时间、胃黏膜损伤指数,放射免疫分析法检测胃黏膜6-酮-前列腺素1α(6-keto-PGF1α)、血栓素B2(TXB2)含量。结果:与正常组比较,模型组大鼠水平运动分数、垂直运动分数、力竭运动时间均明显减少(P<0.01),胃黏膜损伤指数增加(P<0.01),同时胃黏膜6-keto-PGF1α、TXB2含量明显降低(P<0.01);与模型组比较,TEAS组水平运动分数、垂直运动分数、力竭运动时间均增加(P<0.05),胃黏膜损伤指数降低(P<0.05),胃黏膜6-keto-PGF1α、TXB2含量升高(P<0.01,P<0.05)。结论:经皮穴位电刺激"足三里"穴对运动性疲劳致胃黏膜损伤有一定的保护作用,可能与改善胃黏膜6-keto-PGF1α、TXB2有关。     

电针、手针“足三里”对慢性关节炎大鼠血清炎性细胞因子含量的影响

目的:观察不同针刺方法对慢性佐剂性关节炎大鼠血清中致炎类因子白介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和抗炎类因子白介素2(IL-2)、白介素4(IL-4)及白介素10(IL-10)含量的影响,比较不同针刺方法的效应。方法:将SD大鼠随机分为正常组、模型组、电针单穴组、电针双穴组和手针单穴组,每组12只。大鼠右后肢足跖皮内注射0.1mL弗氏完全佐剂制造佐剂性关节炎模型。针刺各组于造模第11天起取"足三里"穴进行治疗,每次30min,每周治疗2次,共4周。以酶联免疫法检测大鼠血清中IL-1β、TNF-α、IL-2、IL-4及IL-10含量。结果:与正常组相比,模型组大鼠血清中IL-1β、TNF-α、IL-4及IL-10的含量均显著升高(P<0.001)。与模型组相比,各治疗组大鼠血清中致炎类因子IL-1β和TNF-α含量明显降低(P<0.001,P<0.05),抗炎类因子IL-2含量明显升高(P<0.05);各治疗组大鼠血清中的IL-4、IL-10水平在炎性反应升高后向正常方向回落(P<0.001,P<0.05)。电针单穴组、电针双穴组和手针单穴组之间各指标的差异无统计学意义(P>0.05)。结论:三种针刺方法即电针单穴、电针双穴和手针单穴均可提高慢性佐剂性关节炎大鼠的抗炎修复功能,且三种针刺方法治疗效应相当,其机制可能是通过对机体炎性细胞因子的良性诱导,改变相关炎性细胞因子的合成与释放。