益气养阴方抗C57小鼠Lewis肺癌转移作用与调节MMP-9、TIMP-1蛋白表达的实验研究

目的免疫组化法观察益气养阴方对C57BL／6小鼠Lewis肺癌瘤体MMP-9、TIMP-1蛋白表达的影响以及抗肺转移作用，探讨该方抗转移作用的机理。方法24只C57BL／6小鼠随机分为3组，每组8只，接种Lewis肺癌瘤株，造模后第2天按如下方案进行干预：荷瘤对照组：0.9％NaCl溶液灌服；中药组：益气养阴方煎汤灌服；顺铂组：顺铂溶液腹腔内注射。第20天处死全部小鼠，称瘤重计算抑瘤率，计数肺转移数，计算抑制肺转移率，免疫组化Envision二步法测定瘤体MMP-9、TIMP-1蛋白表达情况。结果中药组和顺铂组的抑瘤率分别为35.02％和41.18％，具有统计学意义（P〈0.05）。中药组和顺铂组的抑制肺转移率分别为54.20％和39.02％，差异无统计学意义。瘤重与肺转移数之间存在正相关。荷瘤对照组MMP-9和TIMP-1阳性率均为100％，中药组MMP-9阳性率显著低于对照组，TIMP-1阳性表达与对照组比较差异无统计学意义，但中度及强阳性率明显低于对照组。MMP-9和TIMP-1的表达与肺转移数成正相关，两者之间亦存在正相关。结论益气养阴方具有较好的抑瘤作用和抑制肺转移的作用；肺癌均表达MMP-9和TIMP-1蛋白，是促进转移的重要机理和判断指标；益气养阴方能够显著下调肺癌MMP-9的表达，影响TIMP-1的表达，这是其抑制肺癌转移的机理之一。     

苏木对C57BL/6小鼠Lewis肺癌不同时间生长和转移的影响

目的动态观察苏木对Lewis肺癌生长和转移的影响并研究其部分作用机制。方法建立Lewis肺癌C57BL/6小鼠肿瘤模型,随机分为模型组,苏木低、高剂量组,化疗组,化疗加苏木低、高剂量组共6组,连续灌胃给药21天。于第7、14、21天分3批处死小鼠,动态观察各组抑瘤率、抑转移率,流式细胞仪检测小鼠移植瘤细胞CD44的表达,酶联免疫吸附法(ELISA)检测小鼠血清P-选择素浓度。结果除苏木低剂量组外,其余各给药组在3个时间点瘤重均低于模型组(P0.05,P0.01);且化疗加苏木高剂量组低于同期化疗组(P0.05,P0.01)。瘤细胞CD44~+表达:第7天,苏木高剂量组、化疗组均显著低于模型组(P0.01);第14天,化疗加苏木低、高剂量组低于模型组(P0.01,P0.05);第21天,化疗加苏木低、高剂量组显著低于模型组(P0.01)。P-选择素浓度:第7天,各给药组低于模型组(P0.05,P0.01);第14天,用药各组与模型组比较差异无统计学意义(P0.05);第21天,化疗加苏木高剂量组低于模型组(P0.05)。结论苏木及苏木联合化疗可以抑制Lewis肺癌的生长,并可以抑制小鼠瘤细胞CD44、血清P-选择素等黏附因子的表达。其抑制转移的机制可能与降低CD44、P-选择素的表达有关。     

苏木与扶正药物配伍对C57BL/6小鼠Lewis肺癌生长及转移的影响

目的:观察苏木配伍不同扶正药物对Lewis肺癌生长和转移的影响。方法:建立Lewis肺癌C57BL/6小鼠肿瘤模型,随机分为6组:对照组、苏木组、苏木黄芪组、苏木当归组、苏木附子组、苏木麦冬组,连续灌胃给药21 d。于第21天处死小鼠,观察各组抑瘤率、抑转移率。结果:苏木配伍不同的扶正药物对肿瘤均有抑制作用(P0.05),苏木当归组、苏木麦冬组、苏木附子组抑制肿瘤效果优于苏木(P0.05)。结论:苏木配伍扶正药物可抑制肿瘤生长和转移。     

岩龙胶囊对Lewis肺癌小鼠Bcl-2、Caspase-3及CyclinD1表达的影响

目的:研究岩龙胶囊对Lewis肺癌荷瘤小鼠瘤细胞的Bcl-2、Caspase-3及CyclinD1的表达,探索其抑瘤机制。方法:将40只Lewis肺癌瘤株转染成功的C57BL/6小鼠随机分为四组:岩龙胶囊高剂量组、岩龙胶囊低剂量组、阳性对照组、阴性对照组各10只。造模第4天,岩龙胶囊两组均灌胃中药,阳性对照组腹腔注射顺铂注射液,阴性对照组用等体积生理盐水灌胃,均每天1次,共给药10天,并记录小鼠一般情况,造模第14天处死小鼠,测取各项指标。结果:与阴性对照组比较,岩龙胶囊高剂量组和阳性对照组的瘤重明显减小,差异有统计学意义(P0.05或P0.001)。岩龙胶囊高、低剂量组和阳性对照组的抑瘤率分别为19.41%、8.68%、39.34%。与阴性对照组比较,岩龙胶囊高剂量组和阳性对照组的肺转移结节数明显减少,差异有统计学意义(P0.05或P0.001)。岩龙胶囊高、低剂量组和阳性对照组的肺转移抑制率分别为40%、32.4%、53.3%。与阴性对照组比较,岩龙胶囊高剂量组和阳性对照组能明显降低Bcl-2和CyclinD1的表达,并能提高Caspase-3的表达,差异有统计学意义(P0.01,P0.001,P0.05)。结论:岩龙胶囊对Lewis肺癌小鼠有一定的抑瘤和抗转移作用,机制可能与降低Bcl-2和CyclinD1的表达,提高Caspase-3的表达有关。     

肺抑瘤膏对气滞血瘀质Lewis肺癌小鼠肿瘤生长及VEGF-C表达的影响

目的通过建立Lewis肺癌病证结合小鼠模型,观察肺抑瘤膏对非小细胞肺癌气滞血瘀质模型的干预作用。方法使用C57BL/6小鼠,建立平和质与气滞血瘀质小鼠模型,并接种Lewis肺癌细胞,造模成功后,随机分两亚组,亚组2予肺抑瘤膏干预,观察瘤体体积、瘤重及血清VEGF-C水平。结果气滞血瘀组亚组1较平和对照组亚组1小鼠在种植瘤瘤体积、瘤重、血清VEGF-C平均光密度方面差异均有统计学意义(P0.05)。各亚组2肿瘤抑制率、VEGF-C平均光密度与对应的亚组1比较,差异均有统计学意义(P0.05)。结论气滞血瘀质组较平和质组皮下种植瘤更易生长。肺抑瘤膏能够不同程度地抑制种植瘤的生长,且可能通过抑制VEGF表达而起到治疗作用。     

桑黄云芝胶囊对Lewis肺癌自发肺转移模型小鼠的抑瘤作用

目的 :通过应用Lewis肺癌移植性肿瘤小鼠模型,观察桑黄云芝胶囊的抑瘤及抗转移作用。 方法: C₅₇BL/6小鼠右腋皮下接种Lewis肺癌瘤株,连续ig给药21 d后,处死动物,摘取瘤体称重,并计算肿瘤生长抑制率。剥离鼠肺,用Bouin氏液固定,解剖镜下计数肺部正反面及肺叶间的转移瘤集落数。 结果: 桑黄云芝胶囊高、中、低3个剂量对Lewis肺癌荷瘤小鼠肿瘤的生长均有明显的抑制作用(与模型组比较,P<0.05),抑瘤率分别为21.2%,21.0%,24.6%。桑黄云芝胶囊高剂量组Lewis肺癌荷瘤小鼠肺转移集落明显少于模型组(P<0.05)。 结论 :桑黄云芝胶囊对Lewis肺癌荷瘤小鼠肿瘤生长具有明显抑制作用,并可抑制Lewis肺癌荷瘤小鼠的肺转移,以高剂量最为明显。     

活血药、益气活血药对肺癌转移过程中Th17/Treg细胞平衡及其机制影响

目的:观察苏木、苏木+黄芪对Lewis荷瘤小鼠肺癌转移过程脾Th17/Treg细胞及其平衡机制影响,为中药逆转肿瘤炎性微环境中免疫逃逸和抑制肿瘤转移机制提供实验依据。方法:复制C57BL/6小鼠Lewis肺癌动物模型,观察肺转移抑制率;流式细胞术检测各组小鼠脾Th17/Treg细胞百分比动态变化;RT-PCR检测各组小鼠CD4+T淋巴细胞Foxp3、RORγtmRNA动态表达水平。结果:从各组药物抑制肺转移率看出,益气活血药苏木+黄芪优于单纯活血药苏木(P<0.05),与环磷酰胺组相似(P>0.05);除苏木黄芪组外,各荷瘤组小鼠脾Th17与Treg细胞随时间迁移呈现出上升趋势,且苏木黄芪组较其余各组有显著差异(P<0.05),Th17/Treg比值亦随时间迁移呈现出上升趋势,与正常组比较均存在比值的平衡失调;Th17与Treg细胞关键转录分子RORγt、Foxp3呈现出与Th17和Treg细胞相应的动态改变。结论:益气活血药苏木+黄芪组在抑制肿瘤形成过程中的炎性微环境优于单纯活血药苏木组和环磷酰胺组;各组药物对肿瘤转移机制均有一定的抑制作用,但益气活血药优于单纯活血药和化疗药物。     

扶肺煎联合顺铂对Lewis肺癌移植瘤生长及VEGFA、VEGFR-2的影响

目的:观察扶肺煎对C57BL/6小鼠Lewis肺癌移植瘤的抑制作用,研究其对增殖细胞核抗原(PCNA)、血管内皮生长因子(VEGFA)及其受体(VEGFR-2)的影响。方法:70只雄性SPF级C57BL/6小鼠随机建立Lewis肺癌移植瘤模型,分别为空白对照组、模型对照组、扶肺煎低剂量组、扶肺煎中剂量组、扶肺煎高剂量组、顺铂组、扶肺煎中剂量联合顺铂组。每天观察动物一般情况及各组小鼠皮下结节情况并称重。第15天脱颈处死全部小鼠,完整剥离肿瘤组织并称重,计算各组抑瘤率及增效率,检测PCNA、VEGFA及VEGFR-2的表达。结果:扶肺煎联合顺铂组的抑瘤率最高,为65.81%。扶肺煎联合顺铂组增效率为107.91%,表明其对顺铂具有较好的增效作用。扶肺煎联合顺铂组PCNA阳性表达率低于其余各组,但差异无统计学意义(P0.05)。扶肺煎联合顺铂组VEGFA、VEGFR-2的表达量均小于其余各组。结论:扶肺煎联合化疗可降低C57BL/6小鼠Lewis肺癌移植瘤中PCNA的表达并抑制肿瘤生长,降低Lewis肺癌移植瘤中VEGFA、VEGFR-2的表达,起到抑制肿瘤血管生成及增敏增效的作用。     

不同类型活血药及其与益气药配伍对小鼠Lewis肺癌生长转移的干预作用

目的 探讨不同类型活血药及其与益气药黄芪配伍对小鼠Lewis肺癌生长及转移的干预作用.方法 建立小鼠Lewis肺癌动物模型,造模后24h随机分组并开始给药,共分为8组:模型组、环磷酰胺(CTX)组、丹参组、丹参+黄芪组、苏木组、苏木+黄芪组、水蛭组、水蛭+黄芪组,均每日给药1次/日.接种后14、21天处死小鼠,分别检测...     

苏木、苏木+黄芪对荷瘤小鼠CD4~+ CD25~+调节性T细胞及相关调控分子的干预作用

目的:观察苏木、苏木+黄芪对荷瘤小鼠脾CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)表达及相关调控分子的干预作用。方法:复制C57BL/6小鼠Lewis肺癌动物模型,动态观察苏木、苏木+黄芪抑瘤率、肺转移抑制率,流式细胞术检测小鼠脾CD4+CD25+Treg表达,免疫磁珠分选小鼠脾CD4+CD25+细胞,RT-PCR检测小鼠脾CD4+CD25+细胞和瘤组织Foxp3、CTLA-4mRNA表达。结果:苏木组6d、苏木+黄芪组10d瘤重低于荷瘤对照组(P0.05);苏木+黄芪组20d肺转移抑制率为77.75%;15d苏木+黄芪组小鼠脾CD4+CD25+细胞表达低于荷瘤对照组(P0.05);苏木+黄芪组荷瘤小鼠瘤组织CTLA-4、Foxp3mRNA表达及脾CD4+CD25+分选后细胞Foxp3 mRNA表达低于荷瘤对照组(P0.05)。结论:益气活血中药组方苏木+黄芪可调节荷瘤小鼠脾Treg及相关调控分子表达,并且在淋巴组织和肿瘤微环境中都表现出作用。     

魟鱼软骨多糖对Lewis肺癌MMP-9表达的影响

目的:鱼软骨多糖(RCG)对Lewis肺癌基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达的影响。方法:建立小鼠Lewis肺癌模型,将动物分为生理盐水组、不同剂量鱼软骨多糖组、环磷酰胺组,观察肿瘤生长情况,绘制肿瘤生长曲线,计算原发瘤抑制率;采用RT-PCR和Western blot检测瘤组织MMP-9基因和蛋白表达。结果:该多糖各剂量组小鼠的肿瘤生长曲线平缓,小鼠原发瘤抑制率、肺转移数与生理盐水组比较差异有显著性(P<0.05;P<0.01);与生理盐水比较,鱼软骨多糖各剂量组,MMP-9 mRNA和蛋白表达水平显著降低(P<0.01)。结论:鱼软骨多糖明显抑制小鼠Lewis肺癌原发瘤的生长和转移,可能与其抑制肿瘤MMP-9基因和蛋白表达有关。     

益气除痰方对脾虚Lewis肺癌小鼠肿瘤生长、生存期及PRDX-1、PRDX-6表达的影响

目的 观察益气除痰方对脾虚C57BL/6J小鼠Lewis肺癌肿瘤生长、肺转移、生存期及肿瘤组织中过氧化物氧化还原酶PRDX-1、PRDX-6表达的影响。     

Inhibitory effect of Sumu(Lignum Sappan) plus Fuzi(Radix Aconiti Lateralis Praeparata) on a lung carcinoma model

OBJECTIVE: To investigate the inhibitory effect of Sumu(Lignum Sappan) plus Fuzi(Radix Aconiti Lateralis Praeparata)(SF) on the growth and metastasis of Lewis lung carcinoma.METHODS: A lung carcinoma model was established by subcutaneously inoculating Lewis lung carcinoma cells into C57 BL/6 mice. The mice were randomly divided into four groups of 13 mice(control, low-dose, moderate-dose, and high-dose), and gavaged once-daily for 21 consecutive days. The rates of tumor inhibition, metastasis, and metastasis inhibition were observed. The differential expressions of s P-selectin and vascular endothelial growth factor C(VEGFC) were compared between the treatment groups and the control group.RESULTS: The tumor weights differed significantly between the treatment groups and the control group(P 0.05). Administration of SF in the moderate-dosage and low-dose groups significantly inhibited the expression of s P-selectin and VEGFC(both P 0.05), suggesting anti-tumor activity.CONCLUSION: SF can inhibit the growth and metastasis of Lewis lung carcinoma.     

瘤消安抗癌转移的实验研究

目的:为瘤消安抗癌转移的临床应用提供理论依据。方法:选取小鼠子宫颈癌(U_(14))和 Lewis肺癌两种瘤株,分别接种于昆明种小鼠左后肢爪垫皮下和 C_(57)BL/6小鼠右腋皮下,用形态学方法观察瘤消安对各站淋巴结、肺、肝的转移情况和对 Lewis 肺癌瘤重、核分裂以及肿瘤血管生成的影响。结果:瘤消安可明显抑制 U_(14)的肺转移率,大、小剂量组肺转移率分别为25.0%和23.0%;大、小剂量组的 Lewis 肺癌抑瘤率分别为37.6%和35.3%,肺转移率分别为6.7%和20.0%。结论:瘤消安可一定程度地抑制癌转移。     

魟鱼软骨多糖对Lewis肺癌VEGF MMP-2和MMP-9蛋白表达的影响

目的探讨魟鱼软骨多糖(RCG)对Lewis肺癌血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白表达的影响。方法:接种Lewis肺癌细胞,复制肺癌移植瘤模型;将实验分为生理盐水(Saline)组、不同剂量魟鱼软骨多糖(RCG)组、环磷酰胺(CTX)组,给药后观察肿瘤生长情况,计算肿瘤抑制率和肺转移瘤灶数目;采用Westernblot检测瘤组织中VEGF、MMP-2和MMP-9的蛋白表达。结果:与生理盐水组比较,魟鱼软骨多糖各剂量组对肿瘤的抑制率和肺转移数都具有显著性差异(P<0.05;P<0.01);与生理盐水比较,该多糖各剂量组对VEGF、MMP-2和MMP-9的蛋白表达水平显著降低(P<0.01)。结论:魟鱼软骨多糖明显抑制小鼠Lewis肺癌原发瘤的生长和转移,可能与其抑制肿瘤VEGF、MMP-2和MMP-9蛋白的表达有关。     

魟鱼软骨多糖对小鼠Lewis肺癌的作用及分子机制探讨

目的:研究魟鱼软骨多糖(RCG)对小鼠Lew is肺癌的作用,并初步探讨其作用机制。方法:建立小鼠Lew is肺癌模型,将实验分为生理盐水(Saline)组、不同剂量魟鱼软骨多糖(RCG)组、环磷酰胺(CTX)组,计算原发瘤抑制率及肺转移数;采用RT-PCR和W estern b lot检测原发瘤组织VEGF、bFGF mRNA和蛋白表达。结果:应用魟鱼软骨多糖各剂量组,小鼠原发瘤抑制率、肺转移数与生理盐水组比较差异有显著性(P<0.05,P<0.01);与生理盐水比较,魟鱼软骨多糖各剂量组,VEGF、bFGF mRNA和蛋白表达水平显著降低(P<0.01)。结论:魟鱼软骨多糖明显抑制小鼠Lew is肺癌原发瘤的生长和转移,可能与其抑制肿瘤VEGF、bFGF mRNA和蛋白表达有关。     

九节龙皂苷Ⅰ对小鼠Lewis肺癌和裸鼠肝癌SMMC-7721的抑制作用

目的:研究九节龙皂苷Ⅰ对小鼠Lewis肺癌和裸鼠肝癌SMMC-7721的抑制作用.方法:C57BL/6小鼠足跖接种稀释3倍的Lewis肺癌细胞悬液20μl制备肺转移模型,灌胃给药14 d后,截下荷瘤足,计算原位抑癌率,继续给药至25 d,计算肺转移集落数和转移抑制率;BALB/c/nu裸鼠背部皮下接种肝癌SMMC-7721细胞5×106个/ml复制人肝癌实体瘤模型,连续给药16 d,动态测量肿瘤体积、体重,画肿瘤生长曲线,实验结束后,剥离瘤块,计算抑瘤率.结果:九节龙皂苷Ⅰ 25 mg/kg～100 mg/kg对小鼠Lewis肺癌原位癌抑制率和肺转移均分别在40.5%～54.0%和45.4%～69.1%之间,对裸鼠肝癌SMMC-7721实体瘤的抑制率在45.6%～56.3%之间.结论:九节龙皂苷Ⅰ对Lewis肺癌转移瘤和裸鼠肝癌SMMC-7721均有抑制作用.     

白花蛇舌草抑制Lewis肺癌小鼠自发转移的实验研究

目的:观察白花蛇舌草对Lewis肺癌小鼠自发转移的影响.方法:在C57BL小鼠右侧腋下皮下注射接种肺癌Lewis瘤细胞悬液,复制自发转移模型,观察小鼠体重变化、实体瘤生长情况、肺转移瘤生长情况、免疫器官指数等指标变化.结果:白花蛇舌草作用组的小鼠,小鼠生活质量得到明显改善,免疫器官指数、抑瘤率明显增加,肺部转移结节数较空白组明显减少.结论:白花蛇舌草可抑制Lewis肺癌小鼠自发转移.     

益气养阴方抗血管生成抑制肿瘤转移作用的研究

[目的]研究益气养阴方抗血管生成抑制肿瘤转移的效应.[方法]制备接种肿瘤细胞的鸡胚尿囊膜(CAM)模型,采用血清药理学方法制备含药血清.观察含药血清对肿瘤细胞诱导CAM血管生成的影响,并与生理盐水血清组对照.另用小鼠经肌肉接种U14子宫颈癌细胞悬液,观察小鼠实体瘤的瘤质量、抑瘤率、肺部转移率、肺部转移瘤生长情况.[结果]益气养阴方含药血清可抑制肿瘤细胞诱导CAM血管生成,与生理盐水组比较差异具显著性.益气养阴方组的肺部转移结节较模型组明显减少,并且明显改善化疗对机体的免疫损伤.[结论] 益气养阴方对肿瘤细胞诱导的CAM血管生成有明显抑制作用,并且益气养阴方对自发性转移模型有一定的抑制作用.     

乳宁Ⅱ号对TA2小鼠乳腺癌MA-891移植瘤中血管内皮生长因子表达的影响

目的研究乳宁Ⅱ号对TA2小鼠乳腺癌移植瘤中血管内皮生长因子(VEGF)表达及肺转移的影响。方法将体外培养的MA-891小鼠乳腺癌细胞接种于TA2小鼠右腋部皮下,造成小鼠移植瘤肺转移模型,同时予乳宁Ⅱ号治疗。结果乳宁Ⅱ号可抑制移植瘤生长,减少肺转移的发生(P<0．05),降低肿瘤组织中VEGF蛋白及VEGF mRNA表达(P<0．05)。结论乳宁Ⅱ号可通过降低肿瘤组织中VEGF蛋白及VEGF mRNA表达,发挥抑瘤和抗转移作用。