益髓解毒方对 MDS-RA 骨髓培养体系 IL-3、IFN-γ的影响

探讨益髓解毒方对骨髓增生异常综合征难治性贫血(MDS-RA)造血刺激因子和造血抑制因子的影响.通过 Iscove's 液体培养体系培养,观察 MDS-RA 患者骨髓单个核细胞经益髓解毒方不同剂量作用后,培养体系上清液造血刺激因子 IL-3和造血抑制因子 IFN-γ变化.结果:益髓解毒方大剂量组对 IL-3 和 IFN-γ均有促进作用.提示:益髓解毒方有促进造血刺激因子和造血抑制因子恢复动态平衡的良性趋向作用.     

希髓解毒方对MDS-RA骨髓培养体系IL-3、IFN-γ的影响

探讨益髓解毒方对骨髓增生异常综合征难治性贫血(MDS-RA)造血刺激因子和造血抑制因子的影响。通过Iscove‘s液体培养体系培养，观察MDS-RA患者骨髓单个核细胞经益髓解毒方不同剂量作用后，培养体系上清液造血刺激因子IL-3和造血抑制因子IFN-1变化。结果：益髓解毒方大剂量组对IL-3和IFN-1均有促进作用。提示：益髓解毒方有促进造血刺激因子和造血抑制因子恢复动态平衡的良性趋向作用。     

扶正解毒方含药血清对人肺癌细胞(A549)增殖和凋亡的影响

目的:研究扶正解毒方含药血清对体外培养的人肺腺癌A549细胞增殖和凋亡的影响。方法:在体外培养的肺癌A549细胞株中加入不同浓度的扶正解毒方含药血清,计算细胞抑制率、观察细胞形态学变化、检测细胞凋亡率。结果:MTT提示扶正解毒方含药血清对肺腺癌A549细胞具有特异性抑制效应并存在效应-剂量依赖关系;肺腺癌A549细胞随药物浓度增加及处理时间的延长细胞凋亡特征越明显;细胞凋亡率随着药物剂量的增加和作用时间的延长而增加,存在效应-剂量、效应-时间依赖关系。结论:扶正解毒方含药血清可抑制肺腺癌A549细胞生长、诱导细胞凋亡。     

益气养阴解毒方含药血清对白血病K562/A02细胞凋亡干预作用的初步研究

目的:探讨益气养阴解毒方含药血清对白血病K562/A02细胞凋亡作用的影响。方法:采用血清药理学方法制备益气养阴解毒方含药血清,以不同浓度的含药血清处理体外培养的K562/A02白血病细胞,采用MTT比色法观察益气养阴解毒方含药血清对K562/A02细胞增殖的影响。应用流式细胞术检测益气养阴解毒含药血清诱导K562/A02细胞凋亡的影响。结果:不同浓度益气养阴解毒方含药血清对K562/A02细胞增殖具有抑制作用,并呈剂量依赖关系。高、中、低剂量的益气养阴解毒方含药血清可诱导K562/A02细胞的凋亡,其凋亡作用以中、高剂量中药血清组最强。结论:益气养阴解毒方含药血清具有抑制K562/A02白血病细胞增殖作用,可诱导K562/A02白血病细胞明显凋亡,其作用机理可能与其直接细胞毒作用有关。     

益髓灵诱导HL-60及脐带血单个核细胞凋亡比较研究

为了探讨益髓灵治疗恶性血液病作用机理,本实验重点进行了益髓灵初提物和含益髓灵初提物的兔药血清诱导HL-60细胞凋亡效应的研究,并与其诱导脐带血单个核细胞凋亡作用进行了比较。结果显示,益髓灵初提物和含益髓灵初提物的兔药血清均有较强诱导HL-60细胞凋亡作用,而对脐带血单个核细胞的凋亡诱导作用较弱,同浓度、同时间两种细胞凋亡作用比较,有显著性差异。结论:益髓灵具有选择性诱导白血病细胞凋亡作用,其诱导白血病细胞凋亡是治疗恶性血液病的关键机制之一。     

益髓解毒方治疗骨髓增生异常综合征RA型经验

提出骨髓增生异常综合征RA型主要病机是髓枯气血乏为本,热毒内伏为标,以益髓解毒方加减治疗MDS-RA,疗效较好,并以案例说明。     

健脾补肾活血方对再生障碍性贫血患者骨髓造血细胞凋亡及Caspase-3酶活性的影响

目的:采用体外细胞培养的实验方法,探讨健脾补肾活血方治疗再障、抑制造血细胞凋亡的作用机制。方法:选择慢性再障10例,分离骨髓单个核细胞加入高、低剂量的健脾补肾活血方药后,检测细胞凋亡率及Caspase-3酶活性。结果:再障患者骨髓造血细胞经健脾补肾活血方干预,细胞凋亡率明显下降,高剂量组可降低Caspase-3酶活性。结论:健脾补肾活血方可明显降低骨髓细胞凋亡率,降低Caspase-3酶活性。推测健脾补肾活血方临床治疗再障的作用机制是通过Caspase-3酶通路而减少和抑制骨髓造血细胞凋亡的发生,促进恢复造血。     

姜黄素对Raji细胞体外抗癌作用的实验研究

目的研究姜黄素对Raji细胞体外抗癌作用及其机制,对比研究其对RaIi细胞和人单个核细胞的细胞毒性。方法用MTT法检测姜黄素对Raji细胞及人单个核细胞增殖的影响,Annexin—V／PI双标流式术、缺口末端标记法检测姜黄素对Raji细胞及人单个核细胞凋亡的影响,PI单标流式细胞术测定姜黄素对Raji细胞DNA含量分布的影响。结果(1)姜黄素对Raji细胞具有明显的增殖抑制作用。(2)姜黄素可以时间和剂量依赖性方式诱导Raji细胞凋亡。(3)姜黄素组Raji细胞周期发生变化,细胞周期被阻滞于G0／G1和G2／M期,S期比例减少。(4)姜黄素对人单个核细胞无明显抑制增殖和诱导凋亡作用。结论姜黄素能够调控Raji细胞的细胞周期并诱导其凋亡,从而抑制Raji细胞增殖;姜黄素对人单个核细胞无明显细胞毒作用,而选择性作用于肿瘤细胞。     

穿骨益髓丸对小鼠造血系统等功能的影响

通过骨髓细胞培养发现穿骨益髓丸体外可促进骨髓有核细胞和网织红细胞的生长。对６０Ｃｏ辐射及环磷酰胺１２０ｍｇ／ｋｇｉ．ｐ．所致小鼠贫血模型，穿骨益髓丸２．６ｇ／ｋｇ和５．２ｇ／ｋｇ剂量可明显增加贫血小鼠ＲＢＣ、ＨＢ、ＷＢＣ及ＢＰＣ数量。另外，该药还能增强小鼠抗疲劳、耐缺氧能力，并增进小鼠免疫功能。     

NF-κB介导的MDS双向凋亡机制与中医“正虚”、“瘀毒”病机相关性的实验研究

目的:探讨NF-κB介导的骨髓增生异常综合征(MDS)"双向"凋亡机制与"正虚"、"瘀毒"中医病机之间的相关性。方法:将20例初诊MDS患者参照有关标准分为低危组与高危组,将健脾补肾活血解毒方拆方进行体外骨髓单个核细胞培养,观察不同分组(低危组、高危组)在不同药物(健脾补肾方、活血解毒方及全方)干预下,骨髓单个核细胞凋亡率、细胞内NF-κB活性表达变化,通过以方测证的方法探究MDS"双向"凋亡机制与"正虚"、"瘀毒"中医病机之间的相关性。结果:低危组MDS表现为骨髓细胞凋亡"过度";而高危组MDS则表现为凋亡相对"不足"。健脾补肾活血解毒方中,扶正(健脾补肾)药物有抑制低危组MDS骨髓细胞过度凋亡的作用,而祛邪(活血解毒)药物则有诱导高危组MDS骨髓细胞凋亡的作用。扶正(健脾补肾)药物与祛邪(活血解毒)药物均有不同程度抑制MDS骨髓细胞NF-κB活性的作用。结论:低危组MDS病机本质以"本虚"为主而表现为过度凋亡,高危组MDS病机本质以"标实"为主而表现为凋亡不足。细胞内活化的NF-κB调节MDS的双向凋亡。健脾补肾活血解毒方药能有效改善MDS骨髓细胞的凋亡水平。NF-κB介导的MDS"双向"凋亡机制与"正虚"、"瘀毒"中医病机存在相关性。     

五子衍宗复方改善Sertoli细胞氧化应激损伤的作用

目的探讨五子衍宗复方对Sertoli细胞氧化应激损伤的改善作用。方法将TM4细胞培养液分为空白组、模型组、低、中、高剂量加药组分别给予相应药物处理。酶标仪上检测各组的吸光度值,硫代巴比妥酸比色法测定SOD活性和黄嘌呤氧化酶法测定MDA含量,流式细胞仪测定各组的细胞凋亡率和存活率,PCR检测caspase-3 mRNA的表达。结果五子衍宗复方可提高TM4细胞的活性,增加SOD活性,降低MDA含量,能降低细胞的凋亡率,并提高细胞的存活率,抑制细胞内caspase-3 mRNA的表达,且呈剂量依赖性。结论五子衍宗复方能改善Sertoli细胞的氧化应激损伤,提高细胞的存活率。     

莪术瓜蒌汤含药血清抑制PGLH7细胞增殖的实验研究

目的:探讨莪术瓜蒌汤含药血清对体外培养的PGLH7细胞增生、细胞周期和凋亡的影响.方法:不同剂量莪术瓜蒌汤含药血清处理体外培养的PGLH7细胞后,采用MTT法观察血清对细胞增殖的作用;PI染色、流式细胞仪进行细胞周期时相分析;Annexin V-FITC/PI双染色、流式细胞仪检测细胞凋亡率.结果:高剂量莪术瓜蒌汤血清组能明显抑制PGLH7细胞增生;流式细胞仪分析表明:中、高剂量莪术瓜蒌汤血清组处理PGLH7细胞24h、48h后,S期细胞百分率下降;细胞凋亡率上升,呈剂量依赖性.结论:本实验提示莪术瓜蒌汤含药血清可能是通过阻滞细胞周期和诱导细胞凋亡而抑制肺癌细胞的增殖.     

蜂毒素对人胃癌细胞株BGC-823凋亡及其细胞周期的影响

目的：观察蜂毒素体外对人胃癌细胞株BGC-823增殖、凋亡及细胞周期的影响。方法：采用MTT法观察不同浓度的蜂毒素（32,16,8,4,2μg/mL）体外对人胃癌细胞株BGC-823增殖的影响,并用流式细胞仪检测其诱导的细胞凋亡和周期阻滞效应。结果：①与对照组比较,蜂毒素有抑制人胃癌细胞株BGC-823增殖的作用（P〈0.01）,随着药物浓度的增大,其对细胞的抑制率也明显增大,呈现剂量依赖性。②蜂毒素浓度从4μg/mL开始,即可诱导细胞产生凋亡,随着剂量的增加诱导凋亡的效果更加明显。③在细胞周期方面,与阴性对照比较,蜂毒素作用24小时后S期细胞比例上升,而G0/G1期比例明显下降,蜂毒素浓度达到16μg/mL时G0/G1期前出现明显的亚二倍体区。结论：蜂毒素对人胃癌细胞株BGC-823的增殖具有抑制作用,且能够引起该细胞的凋亡及改变其细胞周期。     

红花注射液对HepG-2细胞Bcl-2和Survivin表达的影响

目的: 研究红花注射液在体外对HepG-2细胞B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Survivin基因转录和蛋白表达的影响,探讨红花注射液诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡的机制。 方法: 采用不同剂量的红花注射液(0,50,100,150,200,250 g·L^-1)体外作用于HepG-2细胞,利用MTT法观察红花注射液对HepG-2细胞增殖的抑制作用;以流式细胞术观察细胞凋亡率的变化;通过实时荧光定量 PCR 技术 (real time-PCR) 以及蛋白免疫印迹 (Western blotting) 法检测细胞凋亡相关因子 Bcl-2和Survivin mRNA和蛋白的表达情况。 结果: 红花注射液对体外培养的人肝癌HepG-2细胞的增殖具有抑制作用(P<0.01),且具有剂量、时间相关性;细胞凋亡率随着红花注射液浓度的增加而逐步增高,细胞凋亡相关因子Bcl-2,Survivin的 mRNA 和蛋白表达均下调。 结论: 红花注射液能够抑制HepG-2人肝癌细胞增殖,诱导HepG-2细胞凋亡,可在翻译和转录水平下调Bcl-2,Survivin的表达,这可能是红花注射液诱导HepG-2细胞凋亡的主要机制之一。     

棉酚对人胃癌细胞SGC-7901的抑制作用

目的研究棉酚(gossypol)对胃癌细胞的增殖抑制作用。方法将不同浓度棉酚与胃癌细胞株SGC-7901作用,采用MTT法检测凋亡情况。结果经棉酚处理后增殖能力降低,细胞显示明显凋亡征象,并随药物浓度增加和作用时间延长而增加。结论棉酚在体外能诱导胃癌细胞SGC-7901发生凋亡,抑制细胞增殖,是一种具有潜在抗肿瘤作用的药物,值得进一步临床试验。     

消岩汤剂拆方配伍对肺腺癌A549细胞survivin和caspase-3表达的影响

目的 探讨消岩汤及其各拆方组分对人肺腺癌A549细胞株凋亡的影响及其机制.方法 将消岩汤按照功效进行拆方,分为清热解毒组、活血化瘀组、益气扶正组.以CCK-8法检测各拆方对A549细胞的最有效抑制浓度,采用Western blotting法测定Survivin、Caspase-3蛋白表达,RT-PCR法检测survivin与caspase-3基因表达.结果 消岩汤及其各拆方组分均有明显的抑制A549细胞生长作用,消岩汤及其各拆方组分具有诱导A549细胞凋亡的作用,其机制与下调survivin基因和蛋白表达有关,对caspase-3基因和蛋白表达影响不显著.结论 消岩汤及其各拆方组分体外均有明显的抑制A549细胞生长作用,消岩汤及其各拆方组分可通过下调survivin的表达诱导肿瘤细胞凋亡,清热解毒组方中药是其抗肿瘤作用主要组分.     

肝复康胶囊对人肝癌细胞系HepG2的影响

目的:探讨肝复康胶囊抑制人肝癌细胞系HepG2增殖的作用机制。方法:采用MTT比色法测定肝复康胶囊对人肝癌细胞系HepG2细胞增殖的影响;用流式细胞仪分析细胞周期、细胞凋亡,分析各时期细胞周期的变化;用免疫细胞化学方法检测药物作用后诱导凋亡蛋白Omi/HtrA2和casepase-3的表达。结果:肝复康胶囊具有较好的抑制HepG2细胞增生的作用,呈现出时间-剂量依赖性;应用肝复康胶囊后HepG2细胞G2期比例升高,G1期和S期细胞比例降低,并使细胞凋亡率升高。结论:肝复康胶囊能够抑制人肝癌细胞系HepG2增殖,促进其凋亡。     

人参配伍五灵脂对A549人肺腺癌细胞增殖抑制及诱导凋亡的实验研究

目的:观察人参配伍五灵脂对A549人肺腺癌细胞增殖及凋亡的影响,以阐明其作用机制,探究其最佳配伍比例,为临床用药提供合理的实验依据。方法:健康Wistar大鼠25只,随机分成5组,每组5只,即正常对照组,人参、五灵脂1∶1,1∶2,2∶1组,复方斑蝥胶囊组。煎取药液后,计算出大鼠等效剂量,按1 mL.100 g^-1给大鼠灌胃,每天2次,连续灌胃3 d。末次灌胃后1 h取血清,加入RPMI 1640培养液,配制成含量为10%的药物血清温育液。运用MTT法检测肿瘤细胞生长曲线及肿瘤细胞抑制率,透射电镜观察其凋亡情况。结果:人参、五灵脂配伍能抑制A549人肺腺癌细胞增殖,并对其细胞的凋亡有诱导作用,且当二者比例为2∶1时效果最显著。结论:提示抑制肿瘤细胞增殖,诱导其调亡可能是人参配伍五灵脂抗癌作用的机制之一。     

从细胞凋亡和周期研究旋覆归连方抑制食管癌Eca9706细胞增殖作用

目的:从细胞增殖、周期和凋亡研究旋覆归连方治疗食管癌作用机制.方法:体外培养食管癌细胞株Eca9706,MTT法检测旋覆归连方抑制细胞增殖作用,观察其时效和量效;1×105/孔细胞接种于6孔板,加入15,25,60 mg·L-1的药物作用48 h,流式细胞仪检测细胞周期和凋亡.结果:旋覆归连方具有很强的抑制Eca9706增殖作用,具有剂量依赖性,IC50 58.11mg·L-1;质量浓度15,25,60 mg·L-1在96 h内抑制率依时增加;早、晚期凋亡率用药组与阴性对照组相比明显增高(P＜0.05);细胞G1/G0期比率也明显增加(P＜0.05),60 mg·L-组出现了明显的凋亡峰.结论:旋覆归连方能抑制食管癌细胞的增殖,具有浓度和时间依赖性,可能与其阻滞了细胞G1/G0期和诱导细胞凋亡有关.     

健脾化瘀方对人肝癌细胞SMMC-7721增殖和凋亡的影响

[目的]探讨健脾化瘀方对人肝癌细胞系SMMC-7721的抑制率及药物浓度和作用时间对细胞抑制率的影响,以及IC_(50)药物浓度下对SMMC-7721凋亡的影响。[方法]采用MTT法,观察不同浓度的健脾化瘀方对人肝癌细胞株SMMC-7721增殖的影响及与药物作用时间之间的关系。用AnnexinV/PI双染色法,用流式细胞仪检测健脾化瘀方对肝癌细胞株SMMC-7721凋亡的影响。[结果]健脾化瘀方浓度在5mg/mL时,对SMMC-7721细胞的增殖有明显的抑制作用,呈剂量依赖和时间依赖效应关系。健脾化瘀方对人肝癌细胞SMMC-7721作用24h后,肝癌细胞凋亡率升高,并有一定的浓度依赖性。[结论]健脾化瘀方有抑制SMMC-7721细胞的增殖,能诱导人肝癌细胞株SMMC-7721的凋亡。