补肝健腰方对腰椎间盘退变大鼠椎间盘IL-1β、IL-6表达的影响

目的:探讨补肝健腰方对腰椎间盘退变大鼠椎间盘IL-1β、IL-6表达的影响。方法:SD大鼠75只,随机分为假手术组、模型组、腰痹通组、芬必得组、补肝健腰组,每组15只,成功制备大鼠腰椎间盘退变模型,分别给予腰痹通胶囊、芬必得、补肝健腰方药物灌胃,检测各组干预前、干预第20天、第40天椎间盘IL-1β、IL-6表达。结果:干预第20天、第40天,腰痹通组、芬必得组、补肝健腰组椎间盘IL-1β、IL-6表达均低于模型组,差异均有统计学意义(P0.05);腰痹通组、芬必得组、补肝健腰组在干预第20天、第40天椎间盘IL-1β、IL-6表达水平均较干预前降低,差异有统计学意义(P0.05);补肝健腰组与腰痹通组、芬必得组比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论:补肝健腰方能降低腰椎间盘退变模型大鼠椎间盘IL-1β、IL-6表达,可能为其防治椎间盘退变疾病的作用机理。     

补肝健腰方对腰椎间盘退变大鼠椎间盘TNF-α及NF-κB表达的影响

目的:观察补肝健腰方对腰椎间盘退变大鼠椎间盘TNF-α(Tumor Necrosis Factor-α)及NF-κB(Nuclear Factor-Kappa B)表达的影响。方法:SD大鼠75只,随机分为假手术组、模型组、腰痹通组、芬必得组、补肝健腰组,每组各15只,成功制备大鼠腰椎间盘退变模型,分别给予腰痹通胶囊、芬必得、补肝健腰方药物灌胃,检测各组干预前、干预第20天和第40天时椎间盘TNF-α及NF-κB表达,进行对比。结果:干预第20天和第40天,腰痹通组、芬必得组、补肝健腰组椎间盘TNF-α及NF-κB表达较模型组下降,差异有统计学意义(P0.05),腰痹通组、芬必得组、补肝健腰组在干预第20天和第40天时椎间盘TNF-α及NF-κB表达水平,分别与本组干预前比较,差异有统计学意义(P0.05),补肝健腰组在以上各时间点与腰痹通组、芬必得组比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论:补肝健腰方能降低腰椎间盘退变模型大鼠椎间盘TNF-α及NF-κB表达,这可能为该方可以防治椎间盘退变疾病的作用机理。     

活血补肾方及其拆方对退变腰椎间盘IL-1β、TNF-α mRNA表达的影响

目的:观察活血补肾方及其拆方对退变椎间盘组织IL-1β、TNF-α mRNA表达的影响。方法:采用纤维环针刺法复制腰椎间盘退变动物模型。造模成功后,将50只新西兰大白兔随机分为活血补肾方、活血方、补肾方、吲哚美辛及模型对照组5组,给药6周。采用逆转录聚合酶链反应检测IL-1β和TNFαmRNA表达情况。结果:与模型组比较,活血补肾方、补肾方、活血方和吲哚美辛组IL-1β、TNFα mRNA的表达均下调(P<0.01)。结论:活血补肾方具有抑制IL-1β、TNFα mRNA表达的作用,这可能是活血补肾方减轻退变椎间盘炎症反应,减缓椎间盘退变,治疗椎间盘源性腰痛的机理之一。     

补肝健腰方对腰椎间盘退变大鼠椎间盘MMP-3、TIMP-1 mRNA表达的影响

目的:观察补肝健腰方对腰椎间盘退变大鼠椎间盘MMP-3、TIMP-1 mRNA表达的影响。方法:将SD大鼠75只,随机分为假手术组、模型组、腰痹通组、强力霉素组、补肝健腰组,每组各15只,成功制备大鼠腰椎间盘退变模型,分别给与腰痹通胶囊、强力霉素、补肝健腰方药物灌胃,检测各组干预前,干预第20天、第40天时椎间盘MMP-3、TIMP-1 mRNA表达,进行对比。结果:干预第20天,第40天,腰痹通组、强力霉素组、补肝健腰组椎间盘MMP-3、TIMP-1 mRNA表达较模型组下降,差异有统计学意义(P0.05),腰痹通组、强力霉素组、补肝健腰组在干预第20天,第40天时椎间盘MMP-3、TIMP-1 mRNA表达水平,分别与本组干预前比较,差异有统计学意义(P0.05),补肝健腰组在以上各时间点与腰痹通组、强力霉素组比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论:补肝健腰方能降低腰椎间盘退变模型大鼠椎间盘MMP-3、TIMP-1 mRNA表达,这可能为防治椎间盘退变疾病的作用机理。     

龙丹腰痹宁对腰椎间盘突出症模型大鼠血细胞及血清细胞因子表达的影响

目的:研究龙丹腰痹宁对腰椎间盘突出症模型大鼠血细胞及血清TNF-α、IL-1β、β-NGF细胞因子表达的影响。方法:采取大鼠自体髓核移植法建立腰椎间盘突出症模型。将实验大鼠分为8组,分别为空白组、假手术组、龙丹腰痹宁低、中、高剂量组、中药对照组、西药对照组。给药21 d后处死大鼠,断头取血测血细胞及其分类,ELISA法测定血清细胞因子TNF-α、IL-1β、β-NGF表达情况。结果:假手术组和模型组大鼠白细胞总数明显高于空白组(P0.05);龙丹腰痹宁低、中、高剂量组、中药对照组、西药对照组白细胞总数均明显低于模型组(P0.05)。模型组TNF-α、IL-1β明显高于空白组与假手术组(P0.05);龙丹腰痹宁低、中、高剂量组、中药对照组、西药对照组TNF-α、IL-1β均明显低于模型组(P0.05)。结论:龙丹腰痹宁可降低腰椎间盘突出症模型大鼠白细胞总数并下调血清中TNF-α、IL-1β表达,这可能是龙丹腰痹宁发挥抗炎镇痛作用的主要机制。     

芪麝颈康丸对椎间盘细胞肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-6mRNA表达的影响

目的:探讨芪麝颈康丸抑制颈椎间盘退变的分子机制。方法:将48只大鼠分成4组,切除其中36只(A、B、C 3组)颈后部浅、中层肌,造成颈椎间盘退变模型,D 组为正常假手术组。分别给予芪麝颈康丸(A)及对照药颈复康(B)等药物治疗,C、D 组不给药。4个月后将动物处死,采用原位杂交方法观察分析肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)mRNA 在大鼠颈椎间盘组织中的表达规律及芪麝颈康丸对两者表达的影响,同时观察各组椎问盘退变程度的变化。结果:模型空白(C)组椎间盘退变明显,与 A、D 组比较。差异有显著性(P<0.05,P<0.01)。TNF-α mRNA 阳性信号各组均在椎间盘终板有较高表达,4组程度相似。除 C 组椎间盘髓核软骨样细胞中有明显表达外,其余各组髓核中未见 TNF-α mRNA 阳性信号表达。IL-6mRNA 阳性信号零散地见于各组椎间盘终板,且数量均很少。结论:TNF-α与颈椎间盘退变关系密切,而 IL-6在椎间盘退变过程中所起作用不大。芪麝颈康丸抑制髓核细胞 TNF-α mRNA 的表达可能是其疗效机制。     

烟酰胺对椎间盘Ⅰ、Ⅱ型胶原的调控作用

目的：考察烟酰胺对白介素-1β诱导的体外兔腰椎间盘退变模型中Ⅰ、Ⅱ型胶原的保护作用，并初步探讨其机制。方法：构建兔腰椎间盘组织凝胶培养模型，将其分为正常对照组，烟酰胺对照组（加入0．5mg／ml烟酰胺），退变组（加入10ng／mlIL-1β）和3个烟酰胺治疗组（加入IL-1β的同时，并分别加入0．5mg／ml，0．25mg／ml和0．05mg／ml烟酰胺）。培养3天及1周时取各组髓核和纤维环分别行Ⅰ、Ⅱ型胶原基因RT—PCR检测，培养2周时行Ⅰ、Ⅱ型胶原、iN—OS、TGF—J31及Caspase--3免疫组化检测。结果：①RT—PCR显示3天及1周时，各治疗组Ⅰ、Ⅱ型胶原表达均强于退变组，烟酰胺的保护作用随浓度增加而增强。②Ⅰ、Ⅱ型胶原免疫组化显示，各治疗组椎间盘正常结构和胶原含量均优于退变组，以大剂量烟酰胺治疗组最显著。③iNOS、Caspase--3免疫组化显示，治疗组阳性细胞染色率均低于退变组（P〈0．01）。TGF—β1免疫组化显示，治疗组阳性细胞染色率高于退变组（P〈0．01）。结论：烟酰胺能够抑制IL-1β诱发的椎间盘Ⅰ、Ⅱ型胶原表达及含量的下降，这种保护机制与其抑制iNOS、Caspase--3表达和维持TGF-β1表达的作用有关。     

黄芪桂枝五物汤对膝骨关节炎大鼠软骨损伤及 NLRP3/Caspase1通路的影响

目的:探讨黄芪桂枝五物汤对膝骨关节炎(KOA)大鼠软骨损伤及核苷酸结合寡聚化结构域样受体3 (NLRP3)/天冬氨酸蛋白水解酶1(Caspase1)通路的影响。方法:将120只SD大鼠随机分成对照组、模型组、美洛昔康组、黄芪桂枝五物汤低、中、高剂量组。除对照组外,其余各组建立KOA软骨损伤模型。模型制备成功后对照组、模型组给予等体积的生理盐水;美洛昔康组给予40.0 mg/kg的美洛昔康溶液;黄芪桂枝五物汤低、中、高剂量组分别按20.0、40.0、80.0 mg/kg的剂量给予黄芪桂枝五物汤。实验结束后,进行大鼠关节炎症积分、KOA软骨Mankin's评分,测定机械痛阈(PWPT)及热刺激潜伏期(PWTL);测定膝关节软骨组织中NLRP3、Caspase1 mRNA及蛋白表达水平,白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平。结果:与对照组比较,模型组PWPT、PWTL降低(P0.05);关节炎症积分,Mankin's评分,NLRP3、Caspase1 mRNA及蛋白表达水平,IL-1β、IL-6、TNF-α蛋白表达水平升高(P0.05)。与模型组比较,美洛昔康组和黄芪桂枝五物汤各剂量组PWPT、PWTL升高(P0.05);关节炎症积分,Mankin's评分,NLRP3、Caspase1 mRNA及蛋白表达水平,IL-1β、IL-6、TNF-α蛋白表达水平降低(P0.05),且黄芪桂枝五物汤各剂量组存在明显的剂量-效应关系(P0.05)。与美洛昔康组比较,黄芪桂枝五物汤低、中剂量组PWPT、PWTL较低(P0.05);关节炎症积分,Mankin's评分,NLRP3、Caspase 1 mRNA及蛋白表达水平,IL-1β、IL-6、TNF-α蛋白表达水平较高(P0.05);而黄芪桂枝五物汤高剂量组以上各指标差异无统计学意义(P0.05)。结论:黄芪桂枝五物汤能减轻KOA软骨损伤程度,其高剂量效果尤为明显;其机制与黄芪桂枝五物汤能降低炎症信号通路NLRP3、Caspase1 mRNA及蛋白的表达,进而抑制炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α的表达有关。     

腰痹通胶囊对白介素-1β致腰椎间软骨细胞退变性影响研究

目的考察腰痹通胶囊对白介素-1β(IL-1β)致软骨细胞退变性的影响。方法分离培养大鼠腰椎间软骨细胞,确定腰痹通胶囊对软骨细胞的增殖影响;测定细胞上清液中一氧化氮(NO)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、前列腺素2(PGE2)的浓度,iNOS、COX2蛋白表达水平,给药前后动态钙离子变化以及抗凋亡作用。结果腰痹通胶囊5个浓度对软骨细胞的生长无明显毒性作用;与IL-1β组比较,腰痹通胶囊能明显抑制软骨细胞释放NO、TNF-α、PGE2(P 0.01,P 0.01,P 0.01);下调iNOS、COX2蛋白表达水平(P 0.01,P 0.01);抑制钙离子的内流(P 0.01);流式检测结果显示,腰痹通胶囊组能明显减少IL-1β引起的细胞早期凋亡(P 0.01)。结论腰痹通胶囊具有一定的抗炎抗凋亡作用,能减轻软骨细胞的退变性变化。     

独活寄生汤提取物治疗椎间盘退变性疾病机理实验研究

目的：探讨独活寄生汤治疗腰椎间盘退变性疾病的机理。方法：选取6-8月龄雄性新西兰白兔24只,随机分为3组各8只。退变组和中药组白兔制作椎间盘退变模型,中药组给予独活寄生汤的水煎剂喂养,退变组、对照组不予中药喂养,8周后,每组取1只白兔对其进行椎间盘切片观察;24周后,对每组剩余的白兔取L4-L5椎间盘染色观察,培养软骨终板细胞,进行细胞形态学的观察,并测其上清液中的白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）。结果：对照组软骨终板矢面观,周边较厚而中央较薄,中央部血管芽较多且较膨大,周边部血管较少且较细小。对照组软骨终板结构,可见深层软骨细胞胞体较大,胞核相对较小,呈圆形或椭圆形而表层软骨终板细胞胞体扁平,胞核亦呈扁平状,在软骨终板与椎体股之间可见潮标。中药组软骨终板厚,细胞数目较多,血管芽直接与软骨终板接触,潮标未见前移。退变组软骨终板较对照组明显变薄,细胞数亦减少,潮标明显前移,血管芽周围钙化,包裹血管芽大部分。退变组软骨终板变薄,细胞数减少,染色较淡。中药组软骨终板细胞培养液中IL-6和TNF-α的含量均高于对照组和退变组（P〈0．05）,IL-1β的含量高于对照组（P〈0．05）,但低于退变组（P〈0．05）。结论：独活寄生汤提取物对腰椎间盘退变模型白兔腰椎间盘IL-1β、IL-6、TNF-α有促进作用,可能为其治疗腰椎间盘退变性疾病的机制之一。     

颈背肌切断复制家兔颈椎病模型颈椎间盘IL-1β、TNF-α含量变化的实验研究

目的通过对家兔颈椎病模型的建立,了解颈椎间盘IL-1β、TNF-α含量的变化及基因治疗对家兔退变椎间盘内细胞因子含量变化的影响。方法选用25只4个月龄新西兰兔,体质量2~3 kg,雌雄不分。随机分为正常对照组、模型浅层组、模型全层组、基因治疗浅层组、基因治疗全层组。建立家兔颈椎动力平衡失调模型,诱导颈椎间盘退变(正常对照组不做处理)。术后7个月,基因治疗组则将带有转化生长因子β1(TGF-β1)基因的重组质粒DNA注入C2—5椎间盘中(每个椎间盘用量为20μL)。8个月后用双抗夹心ELISA法检测各组动物颈椎间盘中IL-1β、TNF-α含量。结果模型组与正常对照组比较,颈椎间盘中IL-1β、TNF-α含量均明显升高(P均<0.01);基因治疗组与模型组比较,IL-1β、TNF-α含量明显降低(P均<0.05)。结论基因治疗能对退变颈椎间盘组织释放的多种细胞因子和炎性递质起明显的抑制作用。     

颈背肌切断复制家兔颈椎病模型颈椎间盘IL-1β、TNF—α含量变化的实验研究

目的 通过对家兔颈椎病模型的建立，了解颈椎间盘IL-1β、TNF-α含量的变化及基因治疗对家兔退变椎间盘内细胞因子含量变化的影响。方法 选用25只4个月龄新西兰兔，体质量2～3kg，雌雄不分。随机分为正常对照组、模型浅层组、模型全层组、基因治疗浅层组、基因治疗全层组。建立家兔颈椎动力平衡失调模型，诱导颈椎间盘退变（正常对照组不做处理）。术后7个月，基因治疗组则将带有转化生长因子岛（TGF-β1）基因的重组质粒DNA注入C2-5椎间盘中（每个椎间盘用量为20μL）。8个月后用双抗夹心ELISA法检测各组动物颈椎间盘中IL-1β、TNF-α含量。结果 模型组与正常对照组比较，颈椎间盘中IL-1β、TNF-α含量均明显升高（P均〈0．01）；基因治疗组与模型组比较，IL-1β、TNF-α含量明显降低（P均〈0．05）。结论 基因治疗能对退变颈椎间盘组织释放的多种细胞因子和炎性递质起明显的抑制作用。     

腰痛宁胶囊治疗腰椎间盘突出症组方机制探析

腰痛病是常见的病症，主要表现为腰脊或脊旁部位的急性或慢性疼痛，临床上多以腰椎间盘突出为代表。腰痛宁胶囊由马钱子粉、土鳖虫、川牛膝、甘草、麻黄、乳香及没药（醋制）、全蝎、僵蚕（麸炒）、麸炒苍术制备而成，临床上对腰痛病取得满意的疗效。现通过中医学分析腰椎间盘突出证的病因病机，从方剂学的思维角度下探析腰痛宁胶囊治疗腰椎间盘突出症的组方机制，为临床应用腰痛宁胶囊提供理论依据。     

腰痛宁对腰椎间盘突出症模型大鼠神经根损伤的保护作用

目的 探讨腰痛宁对腰椎间盘突出症模型大鼠的治疗作用及其可能机制.方法 36只SD大鼠随机分为假手术组、模型组和腰痛宁组,每组12只.利用硅胶片压迫L5神经根建立大鼠腰椎间盘突出症动物模型,运用组织形态学和分子生物学技术观察腰痛宁对神经根的影响及神经生长因子(NGF)表达的变化.结果 模型组大鼠运动功能障碍,神经根处神经纤维、卫星细胞以及神经元细胞的显微结构发生了改变;神经根和比目鱼肌组织NGF表达水平明显升高(P<0.05或P<0.01).腰痛宁组大鼠运动功能明显改善,神经根处髓鞘和神经元细胞的显微结构完整;与模型组比较,NGF表达差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01).结论 腰痛宁可以改善腰椎间盘突出症动物模型的运动功能障碍,其机理可能是抑制神经根损伤后局部NGF的高表达,促进其支配的靶器官NGF表达.     

腰腹联合手法治疗腰椎间盘突出症的生化指标分析

目的：观察腰腹部联合手法治疗腰椎间盘突出症的生化指标。方法：将75例患者随机分为3组,每组25例：对照组采用常规输液和卧床休息治疗;治疗1组采用传统手法治疗配合常规输液和卧床休息治疗;治疗2组采用腰腹部联合手法配合常规输液和卧床休息治疗。3组患者分别于治疗前与治疗结束后进行血浆血栓素B2（TXB2）、6-酮-前列腺素F1α（6-K-PGF1α）、白细胞介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的测定。结果：3组治疗后TXB2、IL-1β、TNF-α含量均明显降低,6-K-PGF1α含量治疗后较治疗前明显升高。对照组与治疗1组比较差异无统计学意义（P〉0.05）;治疗2组与对照组、治疗组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：本研究中腰腹联合手法治疗后生化指标有明显改善。说明腰腹联合手法可加速血液循环,促进机体新陈代谢,有利于神经根水肿的消退。这可能是其效果优良的作用机制之一。     

电针对神经病理性疼痛大鼠脊髓胶质纤维酸性蛋白活性及肿瘤坏死因子-α和白介素-1β表达的影响

目的:观察电针治疗神经病理性疼痛大鼠对脊髓背角胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的活化以及促炎性细胞因子TNF-α(肿瘤坏死因子-α)和IL-1β(白介素-1β)表达的影响。方法:72只SD大鼠随机分为3组:假手术组(仅分离坐骨神经)、模型组[结扎坐骨神经造成慢性压迫性损伤(CCI)]和电针组(手术后连续6 d取"足三里""环跳"穴给予电针治疗)。手术前1天和手术后第7天测定各组动物的机械性痛阈和热痛阈。采用免疫组化的方法观察大鼠脊髓L4-L5GFAP的变化,并用荧光定量多聚酶链反应技术分别检测TNF-α mRNA和IL-1βmRNA表达变化。结果:CCI可导致大鼠机械性痛阈和热痛阈明显降低,显著激活损伤侧脊髓GFAP,脊髓中TNF-α和IL-1β mRNA的表达明显增多(均P0.05)。给予电针治疗后能明显改善CCI大鼠痛敏状态,并显著降低损伤侧脊髓GFAP活性和TNF-α和IL-1β mRNA的表达(均P0.05)。结论:电针"足三里""环跳"可明显减轻CCI大鼠的疼痛反应,其作用与其降低脊髓GFAP、TNF-α mRNA和IL-1β mRNA的表达有关。     

前列舒通胶囊对慢性前列腺炎大鼠前列腺组织中IL-10及TNF-α表达的影响

目的:观察前列舒通胶囊对慢性前列腺炎(chronic prostatitis,CP)模型大鼠前列腺组织中IL-10及TNF-α含量变化的影响,探讨前列舒通胶囊对慢性前列腺炎的保护机制。方法:采用前列腺内注射消痔灵方法复制慢性前列腺模型,将30只成年雄性Sprague-Darley大鼠随机分为假手术组、模型组和前列舒通胶囊治疗组,给药28天后处死大鼠取前列腺组织,采用ELISA法和半定量RT-PCR法检测各组前列腺组织中IL-10和TNF-α表达的变化。结果:与模型组相比,前列舒通胶囊治疗组前列腺组织中IL-10的表达水平明显增高,TNF-α的表达水平明显下调。结论:前列舒通胶囊对慢性前列腺炎大鼠的治疗作用,其作用机制可能与上调IL-10,降低TNF-α的表达有关。     

复方杜仲片对腰椎间盘突出症患者外周血中IL-1及其1βmRNA表达的影响

目的:检测急性腰椎间盘突出症(LIDH)患者外周血中白介素1(IL-1)及其1βmRNA表达水平,探讨中药复方杜仲片治疗LIDH的分子作用机制.方法:采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术分析LIDH患者治疗前后及正常人外周血中IL-1及其mRNA表达水平的变化.结果:LIDH患者...     

“四天穴”针方对动静力失衡性颈椎病模型大鼠炎性因子mRNA表达的影响

[目的]通过观察＂四天穴＂针方对动静力失衡性颈椎病模型大鼠椎间盘炎性因子基因表达的影响,探讨其对颈椎病大鼠椎间盘退变的作用机制。[方法]Wistar大鼠60只,随机分为4组,即假手术组、模型组、四天穴针刺组、夹脊穴针刺组,建立动静力失衡性颈椎模型,分别给予四天穴及夹脊穴针刺,逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）法检测＂四天穴＂针方对颈椎病模型大鼠治疗后1周、2周、4周颈椎间盘白细胞介素-1β（IL-1β）及一氧化氮合酶（iNOS）mRNA表达的影响。[结果]＂四天穴＂针方能明显降低颈椎间盘内IL-1βmRNA、iNOSmRNA的表达。[结论]＂四天穴＂针方可有效减缓颈椎间盘退变,其作用机制可能与降低IL-1βmRNA、iNOSmRNA表达有关。