豨莶草醇提物调控TLRs/NF-κB通路及NLRP3炎症小体干预痛风性关节炎的机制研究

目的探讨豨莶草醇提物通过Toll样受体(TLRs)/核因子κB(NF-κB)信号通路及NOD样受体蛋白3(NLRP3)干预痛风性关节炎(GA)的作用机制。方法采用脂多糖(LPS)联合尿酸钠结晶(MSU)刺激急性单核细胞白血病细胞(THP-1)源性巨噬细胞,建立GA炎症细胞模型;以豨莶草醇提物300、200、100μg·mL^-1不同浓度进行干预。采用CCK-8法检测细胞活力;ELISA法检测细胞上清中白细胞介素-1β(IL-1β)的水平;qRT-PCR法检测TLRs/NF-κB信号通路相关基因(TLR2、TLR4、MYD88、IRAK-1、TRAF-6、TAK-1、NF-κB、IL-1β)及NLRP3 m RNA的表达;Western Blot法检测NF-κB、NLRP3、IL-1β蛋白的表达。结果与对照组比较,豨莶草醇提物300、200、100μg·mL^-1浓度对THP-1巨噬细胞活力均无明显影响(P>0.05);模型组的IL-1β水平明显升高(P<0.05),TLRs/NF-κB信号通路相关基因及NLRP3 mRNA表达水平均明显上调(P<0.05),NF-κB、NLRP3、IL-1β蛋白表达水平明显上调(P<0.05)。与模型组比较,豨莶草醇提物300、200、100μg·mL^-1浓度组的细胞IL-1β水平明显降低(P<0.05),TLRs/NF-κB信号通路相关基因及NLRP3 mRNA表达水平均不同程度下调(P<0.05),NF-κB、NLRP3及IL-1β蛋白表达水平亦不同程度下调(P<0.05)。结论豨莶草醇提物可能通过调控TLRs/NF-κB信号通路及抑制NLRP3炎症小体活化,减少炎症因子的产生与释放,进而减轻痛风性炎症反应。     

基于TLR4/NF-κB/NLRP3通路的羟基红花黄色素A抑制血管紧张素II诱导的血管外膜成纤维细胞迁移研究

目的 基于通过Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)/核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)/NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3,NLRP3)通路探讨羟基红花黄色素A(hydroxysafflor yellow A,HSYA)抑制血管紧张素II(angiotensin II,ANG II)诱导的血管外膜成纤维细胞（vascular adventitial fibroblasts,VAFs）迁移作用。方法 组织贴块法培养大鼠胸主动脉VAFs,免疫荧光实验检测细胞中Vimentin和α-平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin,α-SMA）蛋白表达,鉴定VAFs。设置对照组、ANG II组、HSYA组、脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）组和LPS+HSYA组,对照组VAFs给予培养基正常培养,其余各组给予1×10-7 mol/L ANG II处理24 h,然后更换为含100 ...     

基于HIF-1α/NF-κB/NLRP3信号通路探讨黄芪百合颗粒对高原低氧模型大鼠急性脑损伤的保护作用

目的：观察黄芪百合颗粒对高原低氧模型大鼠缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)/核转录因子-κB(NF-κB)/NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)信号通路的影响。方法：60只SPF级SD雄性大鼠随机分为正常组、模型组、地塞米松组（5 mg·kg-1）、黄芪百合颗粒高、中、低剂量组（4.1、2.05、1.025 g·kg-1）。其中各中药组连续灌胃给药14 d,1次/d,连续3 d腹腔注射地塞米松作为阳性药物组;第15天将模型组、地塞米松组、黄芪百合颗粒高、中、低剂量组至动物低压模拟舱中模拟高海拔低压低氧环境进行暴露,持续暴露3 d,腹主动脉采血并分离血清,处死后摘取脑组织;苏木素-伊红（HE）染色法观察脑组织病理变化;酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测大鼠血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-1β(IL-1β)的含量;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测各组大鼠HIF-1α、NLRP3、磷酸化NF-κB(p-NF-κB)、NF-κB、消皮素D(GSDMD)和胱天蛋白酶-1(Caspase-1)蛋白的表达水平;实时荧光定量聚合...     

Phytochemical analysis and antifertility potential of Cynodon dactylon in female Wistar rats: A herbal approach towards contraception

ObjectiveThe objective of the present study was to evaluate the antifertility activity of ether (ErCD), chloroform (CeCD) and ethyl alcohol (EyCD) extracts of the whole plant of Cynodon dactylon in female Wistar albino rats.MethodsAcute oral toxicity and an antifertility study were performed in female Wistar rats with two dose levels (200 and 400 mg/kg, orally) of EyCD. The estrogenic and progestogenic effects of EyCD were further observed by administering it to immature Wistar rats by investigations of vaginal cornification, hormonal level, uterus weight, biochemical parameters, histopathology of the uterus and deciduoma formation, respectively. Isolation of EyCD was carried out by Flash Chromatography and isolated fraction was estimated by HPLC.ResultsNo toxicity with any of the extract was found up to the dose of 2000 mg/kg body weight. EyCD treated rats exhibited maximum reduction in pregnancy (83.33%). Estimation of EyCD on vaginal cornification, estrogen-induced uterotrophic assay and deciduoma model demonstrated vaginal cornification, significant (P < 0.01) increase in uterine weight and uterine proliferation in histopathology and reduced deciduoma formation respectively. Hormonal and biochemical parameters confirmed the above findings indicating estrogenic potential and antiprogestogenic potential of EyCD that might be attributed to the presence of phytoestrogen (apigenin) in EyCD.ConclusionThe results suggested that extracts of C. dactylon possess significant antifertility activity, which is consistent with the literature reported in folk medicine of this plant in fertility regulation.     

狗牙根化学成分的研究

目的研究狗牙根的化学成分。方法狗牙根95%乙醇提取物正丁醇部位采用MCI、Rp-C18、半制备HPLC进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。结果从中分离得到13个化合物,分别鉴定为monocerin (1)、绿原酸甲酯(2)、4-O-香豆酰基奎宁酸甲酯(3)、5-O-阿魏酰奎宁酸(4)、异血红酸(5)、麦芽酚-β-D-吡喃葡萄糖苷(6)、1, 4-二甲氧基吩嗪(7)、19α-羟基齐墩果酮酸(8)、3-羟基-1-(4-羟基-3,5-二甲氧基苯基)-2-[4-(3-羟基-1-(E)-丙烯基)-2,6-二甲氧基苯氧基]丙基-β-D-吡喃葡萄糖苷(9)、4,5-二咖啡酰基奎宁酸甲酯(10)、苯甲酸(11)、4-羟基-邻茴香醛(12)、阿替匹林C(13)。结论所有化合物均为首次从该植物中分离得到。     

白子菜提取物对SHR大鼠靶器官损伤的保护作用研究

目的 评价白子菜水提物对高血压诱导的组织器官损伤的保护作用.方法 根据基础血压将40只SHR大鼠分成5组:空白对照组(蒸馏水)、阳性对照组(卡托普利,25 mg/kg)、白子菜水提物高、中、低剂量组(2 g生药/kg、1g生药/kg、0.5 g生药/kg),每天灌胃给药,持续7周,每周称重并记录心率1次,第7周末,通过肉眼和显微观察各鼠心、脑、肾和脾脏的外观或病理变化并予以分级评分.结果 经过7周实验,与空白组比较,白子菜高、中剂量组均能明显抑制心肌细胞肥大和肾小球(管)萎缩或代偿性肥大(P＜0.01).高剂量组能显著改善脾脏中央动脉硬化变性现象(P＜0.05),降低左室壁厚/右室壁厚,增加肾皮质厚/肾髓质厚(P＜0.05).而低剂量仅对肾脏病理改变有显著保护作用(P＜0.05).结论 白子菜提取物对高血压引起的主要器官损伤具有明显的保护作用.     

一种在多糖分离纯化过程中新的脱蛋白方法

目的　寻找一种在多糖 (香菇多糖 )分离纯化过程中适宜的脱蛋白方法。方法　以正交试验法为主。结果　通过正交试验法找到了一种在多糖 (香菇多糖 )分离纯化过程中新的脱蛋白方法。 5因素 3水平正交试验的结果表明 ,影响脱蛋白率 ( DPR)的主要因素是 B(正丁醇 )、次主要因素是 D(乙醇 ) ,而因素 C(甲醇 )和 E(氯化钠 )的影响则较小 ;影响 DPR的主次顺序为 B>D>A(氯仿 ) >E>C。 DPR随着正丁醇浓度的增加而变化很大 ,开始缓慢上升 ,然后迅速降低 ;随着乙醇浓度的增大 ,DPR逐渐降低 ;而当氯仿浓度增大时 ,DPR则开始上升 ,然后下降 ;当甲醇浓度增大时 ,DPR则变化很小。脱蛋白的最佳条件是 A2 B2 C1 D1 E2 ,即在氯仿 4 0 %、正丁醇 10 %、甲醇 2 %、乙醇4 0 %、氯化钠 0 .0 1%的条件下 ,杂蛋白的去除率最高。验证性试验结果表明 ,在此条件下 ,杂蛋白的去除率达99.98 %。通过反复试验 ,还找到了适用于工业化生产的包括香菇原料的蒸煮、煮沸样品的浓缩、粗多糖的沉淀和脱色、粗多糖的干燥等在内的原料预处理的最佳工艺。结论　这种新的脱蛋白方法具有工艺简单、无需贵重设备、加工成本低、容易放大等特点 ,特别适合于多糖类产品的精制或其他需要去除杂蛋白的单元操作     

蛇床子香豆素类成分的含量测定及指纹图谱研究

[目的]采用高效液相色谱法(HPLC)同时测定不同批次蛇床子中6种香豆素类成分的含量,并建立指纹图谱分析方法评价其质量。[方法]采用高效液相色谱法测定蛇床子中花椒毒素、异虎耳草素、佛手柑内酯、欧前胡素、蛇床子素与异欧前胡素的含量,并对17批蛇床子药材进行指纹图谱相似度分析。色谱条件为Hedra ODS-2色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);甲醇-0.1%甲酸水梯度洗脱,流速0.5 m L/min,检测波长为320 nm。[结果]测定了不同批次蛇床子中6种化学组分的含量,建立蛇床子HPLC指纹图谱,17批次药材与对照指纹图谱相似度均在0.980以上。[结论]建立的蛇床子中6种香豆素成分同时测定的HPLC方法及指纹图谱可用于蛇床子的质量控制。     

大孔树脂富集三裂叶蟛蜞菊倍半萜内酯A和B的研究

目的 大量富集三裂叶蟛蜞菊倍半萜内酯A，B(WTA，WTB)。方法 采用气相色谱法测定WTA和WTB，并以WTA和WTB的含量、洗脱率、精制度为考察指标，研究D101大孔树脂吸附WTA和WTB的工艺条件及参数。结果 通过大孔树脂吸附后，WTA和WTB的洗脱率达90％，50％乙醇洗脱部分中WTA和WTB的含量为总固物的4．01％～4．09％。结论 可以采用大孔树脂富集WTA和WTB。     

狗脊药材的化学成分表征及原儿茶酸含量测定

目的 鉴定狗脊中的化学成分并建立原儿茶酸的UPLC含量测定方法,比较狗脊药材与饮片中原儿茶酸的含量差异。方法 采用超高效液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱（UPLC-Q-TOF/MS）法,ESI电离源,负离子扫描模式采集狗脊药材质谱数据,根据质谱精确相对分子质量、二级碎片离子、紫外特征吸收光谱,并与文献数据或标准品比对鉴定狗脊药材中的主要化学成分;UPLC色谱条件为采用ACQUITY UPLC CORTECS T3(100 mm×2.1 mm,1.6μm)色谱柱,以0.1%甲酸水溶液（A）-乙腈-甲醇（70∶30,B）为流动相进行梯度洗脱,柱温40℃,体积流量0.4 mL/min,进样量4μL。结果 从狗脊药材中共鉴定出26个化学成分,主要包括糖苷类成分16个、酚酸类成分2个、皂苷类成分1个、苯丙素类成分1个、脂类成分1个、其他类成分5个;原儿茶酸在0.94～202.00μg/mL(R2=0.999 9)线性关系良好,平均回收率为101.90%,检测限为0.20μg/mL,定量限为0.79μg/mL。狗脊饮片中原儿茶酸的含量均符合药典规定标准（大于0.020%）;狗脊药材中原儿茶酸的含量...     

桑黄麦角甾醇生物合成关键酶PlERG24基因克隆与表达分析

目的 克隆桑黄菌丝甾醇C14还原酶（ERG24）基因全长,并进行生物信息学及表达模式的初步分析。方法 基于桑黄菌丝转录组数据设计PlERG24基因引物,采用PCR技术获得其cDNA全长序列,并通过Ex PASy等在线分析软件对其进行生物信息学分析,同时利用实时荧光定量PCR技术分析该基因的表达模式。结果 从桑黄菌丝中克隆到1 412 bp的PlERG24基因,开放阅读框长度为1 326 bp,编码441个氨基酸,理论相对分子质量为49 358.61,等电点为5.28,为不含信号肽的疏水性蛋白,推测定位于质膜,具有6个磷酸化位点;系统进化树分析表明,该序列与暴马桑黄的ERG24基因同源性最高。表达模式分析表明,在桑黄菌丝生长的一个周期内,PlERG24基因表达在25 d时达到最高6.36。结论 获得了PlERG24基因全长序列,为进一步研究该基因的功能以及利用基因工程等手段改良麦角甾醇生物合成途径奠定基础。     

Efficacy and Safety of Cissus quadrangularis L. in Clinical Use: A Systematic Review and Meta‐analysis of Randomized Controlled Trials

Cissus quadrangularis L. (Cissus) is a medicinal plant commonly used for centuries for various conditions, but lacks critical appraisal of its clinical effects. This study aimed to determine the efficacy and safety of Cissus in all conditions. Publications from 12 electronic databases were searched from inception through November 2016. A total of nine studies with 1108 patients were included. Each outcome was pooled using a random effects model. Effects of Cissus on hemorrhoid symptoms were not different from any comparators but had significant effects on bone pain. Effects of Cissus combination products on body weight reduction, low‐density lipoprotein, triglyceride, total cholesterol, and fasting blood sugar were superior to placebo, with weighted mean difference of ?5.19 kg (?8.82, ?1.55), ?14.43 mg/dl (?20.06, ?8.80), ?37.50 mg/dl (?48.71, ?26.29), ?50.50 mg/dl (?70.97, ?30.04), and ?10.39 mg/dl (?14.60, ?6.18), respectively. No serious adverse effects were reported. Quality of evidence based on Grades of Recommendations Assessment Development and Evaluation (GRADE) indicated low (bone fractures) to high quality (hemorrhoids, body weight reduction).In conclusion, Cissus had benefit for bone fractures, but not for hemorrhoids. For obesity/overweight, only combination products are pooled and show benefit. However, high‐quality studies remain needed. Copyright © 2017 John Wiley & Sons, Ltd.     

Effect of Vigna radiata, Tamarix ramosissima and Carthamus lanatus extracts on Leishmania major and Leishmania tropica: An in vitro study

Objective: Current therapy strategies of leishmaniasis have some problems such as high cost, toxicity and side effects. Plant extracts can be a source of drugs to control leishmaniasis. In this study, the effect of hydroalcoholic and chloroformic extracts of Vigna radiata, Tamarix ramosissima, and Carthamus lanatus on Leishmania major and L. tropica was studied. Methods: The plant samples were collected from west of Iran and their extracts were prepared. Anti-promastigote activity assay of all extracts was done using tetrazolium-dye assay. Results: Only high concentrations of V. radiata and C. lanatus were able to inhibit Leishmania, while both high and low concentrations of T. ramosissima had antileishmanial effect. No difference was observed between hydroalcoholic with chloroformic extract of each plant. Conclusion: Altogether, the results revealed the antileishmanial activity of T. ramosissima extracts against L. major and L. tropica, indicating its potential as an antileishmanial agent.