麦芽总生物碱上调多巴胺D2受体抑制垂体瘤细胞泌乳素表达和分泌

目的 研究多巴胺D2受体（D2R）在麦芽总生物碱调控泌乳素（PRL）分泌过程中的作用。方法 大鼠垂体瘤MMQ、GH3细胞分为对照组、溴隐亭（5 μg/mL）组、麦芽总生物碱（4.4、8.8、35.2、70.4 μg/mL）组、氟哌啶醇（10、20、40 μg/mL）组、麦芽总生物碱与氟哌啶醇联合给药组。采用CCK-8法检测细胞活力；Western blotting检测PRL、D2R蛋白表达；ELISA法检测细胞上清PRL水平；qRT-PCR法检测PRL、D2R mRNA表达。结果 与对照组相比，麦芽总生物碱（35.2、70.4 μg/mL）可显著下调MMQ细胞PRL蛋白及mRNA表达、上清PRL水平（P<0.05），显著上调MMQ细胞D2R蛋白及mRNA水平（P<0.05）；氟哌啶醇可显著减弱麦芽总生物碱对MMQ细胞PRL蛋白及mRNA表达、上清PRL水平的下调（P<0.05），并显著减弱麦芽总生物碱对MMQ细胞D2R蛋白及mRNA表达的上调（P<0.05）；麦芽总生物碱对GH3细胞PRL表达、上清PRL水平无显著影响。结论 麦芽总生物碱通过上调D2R表达，从而抑制MMQ细胞PRL的表达和分泌。     

归芪通乳合剂对溴隐亭诱导大鼠产后缺乳的催乳作用

目的观察归芪通乳合剂对缺乳大鼠模型血清催乳素(PRL)、雌二醇(E2)、多巴胺(DA)水平的影响,探讨其催乳机制。方法建立溴隐亭诱导的大鼠缺乳模型,采用酶联免疫法检测归芪通乳合剂对缺乳大鼠血清PRL、E2、DA水平的影响。结果与溴隐亭缺乳大鼠模型组比较,归芪通乳合剂各剂量组能显著提高溴隐亭缺乳大鼠血清PRL、E2含量(P<0.05),降低DA的水平(P<0.05)。结论归芪通乳合剂催乳机制与提高PRL、E2含量及降低DA的水平有关。     

基于“乳为肝窍”理论探讨柴胡疏肝散对高泌乳素血症大鼠乳腺组织及性激素的影响

目的基于"乳为肝窍"理论,探讨柴胡疏肝散对高泌乳素血症大鼠乳腺组织及性激素的作用,探寻肝乳相关的现代科学依据。方法将48只大鼠随机分为正常组8只和造模组40只,造模组大鼠采用皮下注射灭吐灵方法制成高泌乳素血症模型。将造模成功大鼠随机分为模型组、溴隐亭组、柴胡疏肝散高剂量组、柴胡疏肝散中剂量组、柴胡疏肝散高剂量组,每组8只。溴隐亭组灌胃溴隐亭水溶液2 mg/(kg·d),柴胡疏肝散低、中、高剂量组分别灌胃柴胡疏肝散药液3.15 g/(kg·d)、6.3 g/(kg·d)、12.6 g/(kg·d),正常组和模型组灌胃等容量生理盐水,均每日1次,连续30 d。末次灌胃后,腹腔注射麻醉大鼠,测量各组大鼠第3对乳头直径、高度,取血检测血清雌二醇(E_2)、卵泡生成激素(FSH)、泌乳素(PRL)水平,取第3对乳腺组织进行病理观察。结果模型组大鼠乳头直径、乳头高度及血清PRL水平均明显高于正常组(P均0.05),血清E_2和FSH水平均明显低于正常组(P均0.05);溴隐亭组及柴胡疏肝散中、高剂量组大鼠乳头直径、乳头高度及血清PRL水平均明显低于模型组(P均0.05),血清E_2和FSH水平均明显高于模型组(P均0.05)。模型组大鼠乳腺组织呈弥漫性增生,乳腺导管明显扩张,部分导管上皮细胞呈分泌前期改变;柴胡疏肝散高剂量组大鼠乳腺组织增生情况较模型组明显缓解。结论柴胡疏肝散可改善乳腺组织增生性、泌乳性病变,纠正高泌乳素血症大鼠血清性激素紊乱。血清性激素受肝脏代谢功能的影响,作用于乳腺所产生的生理、病理变化,可能是肝乳相关学说的现代调控依据之一。     

香舒丸抗大鼠乳腺增生作用及对性激素的调节机制研究

目的观察香舒丸对乳腺增生大鼠的改善作用,探讨其治疗作用的性激素调节机制。方法将雌性SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、他莫昔芬组(3 mg·kg~(-1))及香舒丸低、中、高(2.26、4.52、9.04 g·kg~(-1))剂量组,每组10只。肌肉注射苯甲酸雌二醇与黄体酮复制乳腺增生大鼠模型。大鼠灌胃给药,每天1次,连续90 d。以游标卡尺测量大鼠第2对乳头的高度、直径;HE染色观察乳腺组织病理形态学变化;ELISA法检测血清中雌二醇(E_2)、孕酮(P)、泌乳素(PRL)含量;免疫组化法及Western Blot法检测乳腺组织中雌激素受体(ERα+β)、孕激素受体(PR)表达情况。结果与空白对照组比较,模型组大鼠乳房直径和乳头高度明显增加(P 0.01);乳腺小叶体积增大,小叶内腺泡数量增多,导管扩张,腺上皮增厚;血清中E_2、PRL含量明显升高(P 0.01),P含量明显降低(P 0.01);乳腺组织中ERα、PR蛋白表达明显上调(P 0.01),ERβ蛋白表达明显下调(P 0.01)。与模型组比较,香舒丸各剂量组大鼠乳头高度和直径均明显下降(P 0.01);乳腺小叶腺泡数减少,导管直径明显减小;血清中E_2与PRL含量明显降低(P 0.01),P含量明显升高(P 0.01);乳腺组织中ERα、PR蛋白表达明显下调(P 0.05,P 0.01),ERβ蛋白表达明显上调(P 0.01)。结论香舒丸可能通过调节性激素水平和乳腺组织中雌、孕激素受体的表达,从而发挥抗大鼠乳腺增生的作用。     

乳结平胶囊对治疗大鼠乳腺增生病雌激素作用的实验研究

目的:探讨乳结平胶囊对治疗大鼠乳腺增生病雌激素作用的实验研究。方法:将雌性SD大鼠按体重随机分为正常对照组、模型组、乳结平高、低剂量组,采用苯甲酸雌二醇和黄体酮建立大鼠乳腺增生病模型,治疗组用乳结平高、低剂量治疗30d后,对比各组大鼠乳头高度、体内雌激素水平。结果:乳结平高、低剂量组大鼠乳头红肿或增生均有所减轻;用放射免疫法(R IA)分析测量血清雌二醇(E2)、孕酮(P)、泌乳素(PRL)的水平,泌乳素、雌二醇和孕酮大鼠性激素与模型组比较(P<0.05或P<0.01);病理组织变化减轻,导管上皮细胞层数、腺泡数明显减少,与模型组差异具有显著性(P<0.01)。结论:乳结平胶囊可通过调节乳腺增生大鼠的雌激素水平,改善增生乳腺的病理形态变化,有效地对抗雌激素引起的大鼠乳腺增生。     

艾灸对乳腺增生模型大鼠的干预效果及作用机制研究

目的:观察艾灸对乳腺增生(MGH)模型大鼠的干预效果,以及对MGH模型大鼠血清雌二醇(E_2)、孕激素(P)水平和乳腺组织雌激素受体α(ERα)、孕激素受体(PR)蛋白表达的影响。方法:将40只雌性成熟未孕SD大鼠随机分为空白组、模型组、艾灸组和电针组,每组10只。对模型组、艾灸组和电针组大鼠进行造模,造模成功后,艾灸组和电针组分别进行艾灸和电针干预,空白组和模型组不进行干预。艾灸和电针穴位相同,均分为甲、乙两组,甲组为天宗、肝俞、足三里,乙组为合谷、屋翳、膻中。甲乙两组穴位隔日交替干预,干预5 d,休息2 d为1个疗程,连续干预4个疗程。干预结束后,测量各组大鼠乳头高度和直径,观察各组大鼠乳腺组织形态,并用高通量液相芯片技术检测各组大鼠血清E_2、P水平,免疫印迹法检测各组大鼠乳腺组织ERα、PR蛋白表达。结果:干预后,艾灸组和电针组大鼠乳头高度明显低于模型组,乳头直径明显小于模型组(P0.05);乳腺导管直径均显著缩小,乳腺导管管腔形态相对规则,管腔内脱落组织和分泌物显著减少或消失,乳腺导管上皮细胞数目减少且排列相对规则,乳腺腺泡及乳腺小叶数量均明显减少;血清E_2水平明显低于模型组,血清P水平明显高于模型组,乳腺组织ERα、PR蛋白表达明显低于模型组,差异均有统计学意义(P0.05)。艾灸组和电针组大鼠上述指标比较,差异无统计学意义(P 0.05)。结论:艾灸治疗乳腺增生模型大鼠疗效较好,其机制可能与调节大鼠血清E_2、P水平及ERα、PR蛋白表达有关。     

乳康胶囊对乳腺增生大鼠激素及细胞凋亡水平的影响

目的:观察乳康胶囊对乳腺增生症(Hyperplasia of mammary gland,HMG)大鼠血清激素、细胞凋亡的影响及治疗作用。方法:采用注射苯甲酸雌二醇、黄体酮建立大鼠HMG模型,将造模成功的大鼠随机分为6组,即正常组、模型组、阳性药组和乳康胶囊低、中、高剂量组,给药30天后,测量各组大鼠同侧第2对乳头的高度及直径;采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清雌二醇(Estradiol 2,E_2)、孕酮(Progesterone,P)和促乳素(Prolactin,PRL)的含量;用免疫组化法检测各组大鼠乳腺组织B淋巴细胞瘤相关蛋白质(B-cell lymphoma-associated X protein,Bax)、B淋巴细胞瘤-2基因(B-cell lymphoma 2,Bcl-2)表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠乳头直径、乳头高度增加(P 0.05);与模型组比较,各给药组乳房直径、乳头高度降低(P 0.05);血清E_2、PRL含量降低,P含量升高(P 0.05);乳康胶囊高剂量组乳腺组织Bax表达升高,Bcl-2表达降低(P 0.05);与阳性药组比较,乳康胶囊高剂量组乳房直径减小(P 0.05),乳康胶囊各剂量组E2、PRL、P含量及Bax、Bcl-2表达差异无统计学意义。结论:乳康胶囊能减轻HMG发展,其作用与降低大鼠血清E_2、PRL以及升高P含量有关,可能与通过调节Bax、Bcl-2途径促进细胞凋亡有关。     

安神定志灵对ADHD模型鼠前额叶皮质和纹状体多巴胺D1,D2受体表达的影响

目的:研究安神定志灵对注意缺陷多动障碍(attention deficit hyperactivity disorder,ADHD)动物模型-自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rat,SHR)前额叶皮质、纹状体多巴胺受体D1,D2(DRD1,DRD2)表达的影响,探讨该药治疗ADHD的作用机制。方法:30只SHR鼠随机分为5组(模型组、利他林组、安神定志灵高、中、低剂量组),每组6只,Wistar大鼠6只作为正常对照组。安神定志灵高、中、低剂量组分别按生药剂量34.1,17.1,8.5 g.kg-1 ig;利他林组以2.1 mg.kg-1利他林ig;模型组和正常对照组以10 mL.g-1生理盐水ig。实验2周后处死大鼠,取脑分别用RT-PCR和Western blot检测各组大鼠前额叶皮质、纹状体内DRD1,DRD2 mRNA和蛋白表达水平。结果:模型组与正常对照组比较,DRD1,DRD2 mRNA和蛋白表达水平显著降低(P<0.01);利他林组与模型组比较,DRD1,DRD2 mRNA和蛋白表达水平显著升高(P<0.01);安神定志灵中剂量组与模型组比较,DRD1,DRD2 mRNA和蛋白表达水平显著升高(P<0.01);安神定志灵低剂量组和高剂量组RD1,DRD2mRNA和蛋白表达水平高于空白模型组,但没有统计学差异。结论:安神定志灵可以上调SHR大鼠额叶皮质和纹状体中DRD1,DRD2 mRNA及蛋白的表达水平,说明安神定志灵在调控前额叶-纹状体通路的功能中发挥着重要的作用,而DRD1,DRD2参与了这一调节的过程,最终起到对ADHD的治疗作用。     

针刺改善大鼠胚泡着床障碍机制初探

目的 观察针刺对胚泡着床障碍大鼠胚泡着床的影响,并初步探讨其作用机制.方法 早孕大鼠随机分为正常组、模型组及针刺组,观察各组大鼠着床率及平均着床胚泡数;放免法检测血清雌二醇（E2）、孕酮（P4）及泌乳素（PRL）的水平;免疫组化及RT—PCR法检测着床点孕激素受体（PR）及泌乳素受体（PRLR）表达的差异。结果 针刺组着床率及平均着床胚泡数较模型组显著提高（P〈0．01）,模型组血清P4、PRL水平、PR、PRLR蛋白及mRNA表达水平均低于正常组和针刺组（P〈0．05）。结论 针刺可在一定程度上促进大鼠胚泡着床,其作用机制可能与针刺调节大鼠体内性激素及其受体表达有关,     

抑乳颗粒对高泌乳素血症大鼠子宫卵巢bc1-2/bax的影响

目的：观察抑乳颗粒（鹿角胶、熟地、炒麦芽、女贞子、仙灵脾、枸杞子、当归、白芍、白术、茯苓）对高泌乳素血症（HPRL）模型大鼠的治疗效果及作用机理。方法：以皮下注射多巴胺受体阻断剂灭吐灵的方法造成高泌乳素血症模型大鼠。造模成功后随机分为模型组、溴隐亭组、抑乳颗粒大剂量组、中剂量组、小剂量组，并设正常对照组分别予以治疗。治疗结束后将大鼠处死，取…．取脏器。用放免法测血清激素水平，通过免疫组化检测bax、bcl-2表达差异观察各组动物子宫卵巢组织细胞凋亡情况，结果：模型组大鼠与正常对照组相比，泌乳素水平明显升高，抑乳颗粒大剂量组、中剂量组可明显降低泌乳素，提高雌、孕激素水平（P〈0．05）。子宫内膜及卵巢颗粒细胞bcl-2表达明显增强。结论：抑乳颗粒对治疗高泌乳素血症有良好疗效，其作用机理可能是通过降低血清泌乳素水平，改善生殖激素分泌；并可有效促进子宫、卵巢发育，调节子宫、卵巢细胞bcl-2、bax表达可能是其作用机理之一。     

逍遥散加减对高泌乳素血症模型大鼠中枢多巴胺受体ERK信号转导通路的影响

目的:以疏肝健脾为核心,运用逍遥散加减治疗高泌乳素血症(HPRL)模型大鼠,探讨逍遥散加减对HPRL大鼠模型中枢多巴胺受体细胞外调节蛋白激酶(ERK)信号转导通路的作用机制。方法:96只SD雌性大鼠,随机分为正常组,模型组,溴隐亭组(0. 001 g·kg~(-1)),逍遥散加减高、中、低剂量组(60,30,15 g·kg~(-1)),多巴胺第一受体(D1R)拮抗剂组(SCH23390组,SCH23390+逍遥散加减中剂量组,SCH23390+溴隐亭组),多巴胺第二受体(D2R)拮抗剂组(氟哌啶醇组,氟哌啶醇组+逍遥散加减中剂量组,氟哌啶醇组+溴隐亭组)。采用垂体移植法制作HPRL大鼠模型,给药30 d后,采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠下丘脑癌蛋白Ras,Raf蛋白的表达;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测大鼠下丘脑丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)激酶1/2(MEK1/2) mRNA,细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2) mRNA的表达;采用电镜观察卵巢颗粒细胞超微结构。结果:与正常组比较,模型组Ras,Raf蛋白,MEK1/2,ERK1/2 mRNA表达显著降低(P 0. 01);运用SCH23390拮抗DIR后,与模型组比较,SCH23390组Ras,Raf蛋白,MEK1/2,ERK1/2 mRNA表达有升高趋势,运用氟哌啶醇拮抗D2R后,与模型组比较,氟哌啶醇组Ras,Raf蛋白表达有下降趋势,MEK1/2,ERK1/2 mRNA表达显著下降(P 0. 01);运用逍遥散加减治疗后,能显著提高Ras,Raf蛋白,MEK1/2,ERK1/2 mRNA表达(P 0. 01),且逍遥散加减高、中剂量组表达增加最明显(P 0. 01),效果优于溴隐亭组。电镜下模型组卵巢颗粒细胞形态及线粒体数量、结构异常,运用逍遥散加减治疗后,颗粒细胞形态和线粒体结构趋于正常。结论:逍遥散加减通过激动D2R,抑制D1R,调节ERK/MAPK信号通路,并有效改善卵巢颗粒细胞线粒体功能,促进卵泡发育,说明逍遥散加减治疗HPRL是多靶点的作用机制。     

加味逍遥散对HPRL大鼠多巴胺受体cAMP/PKA信号转导通路的研究

目的： 探讨以肝脾为核心,运用逍遥散加减方治疗实验性高催乳激素血症（HPRL）模型大鼠下丘脑多巴胺受体环磷酸腺苷（cAMP）/蛋白激酶A（PKA）信号转导通路机制的影响。 方法： 腹腔注射甲氧氯普胺,制作HPRL大鼠模型。随机分成6组：空白对照组、阴性对照组、阳性对照组（溴隐亭组）、逍遥散加减方高、中、低剂量组。给药30 d后,采用免疫组化法测定大鼠下丘脑PKA阳性表达的数量;采用酶联免疫的法测定大鼠血清cAMP的含量、采用免疫组化法及RT-PCR检测大鼠下丘脑多巴胺D1,D2受体。 结果： 与阴性对照组相比较,逍遥散加减各剂量组下丘脑PKA活性明显降低（P < 0.01）;下丘脑cAMP活性显著降低 （P < 0.01）、下丘脑多巴胺D1受体数量有增高趋势、D2受体数量显著增加（P < 0.01）。 结论： 逍遥散加减方对能通过多巴胺受体cAMP-PKA信号转导通路调节泌乳素水平。     

安神定志灵对自发性高血压大鼠脑中多巴胺受体D3,D4,D5基因表达的影响

目的:研究安神定志灵对注意缺陷多动障碍(attention deficit hyperactivity disorder,ADHD)动物模型大鼠脑边缘系统多巴胺受体D3(dopamine receptor-3,DRD3)、D4 (dopamine receptor-4,DRD4)及D5(dopamine Receptor-5,DRD5)和前额叶皮质DRD4基因表达的影响,探讨该药治疗ADHD可能的作用机制.方法:30只自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rat,SHR)随机分为5组(安神定志灵高、中、低剂量组,利他林组,模型组),6只同龄Wistar大鼠作为正常对照组.安神定志灵高、中、低剂量组分别给予生药剂量34.1,17.1,8.5 g·kg-1,利他林组予2.1 mg· kg-,模型组和正常对照组予10mL· kg-1生理盐水,各用药组每次均以每天相应剂量的1/2 ig,2次/d,连续给药1月后进行实验处理,迅速分离脑组织,采用RT-PCR检测各组大鼠脑边缘系统DRD3,DRD4及DRD5和前额叶皮质DRD4基因表达水平.参照基因表达谱芯片分析,当目的基因表达≥2,认为该基因表达增高;若≤0.5认为基因表达降低.结果:与正常组比较,模型组大鼠不论是脑边缘系统中DRD3,DRD4和DRD5基因表达还是前额叶皮质中DRD4基因表达均降低.与模型组相比,利他林组脑边缘系统中DRD3,DRD4及DRD5基因的表达和前额叶皮质中DRD4基因的表达均回调;安神定志灵低剂量组回调脑边缘系统中DRD3,DRD4,DRD5的表达和前额叶皮质中DRD4的表达,中剂量组仅发现前额叶皮质中DRD4的表达增加,高剂量组上调脑边缘系统中DRD3的表达的同时显著下调前额叶皮质中DRD4的表达.结论:DRD3,DRD4及DRD5与ADHD的发生存在一定的关联性,不同剂量的安神定志灵在调控中脑-皮质-边缘系统多巴胺通路的功能中发挥不同的作用,提示临床给药剂量需结合临床症状和体征等.     

溴隐亭对大鼠泌乳素瘤表达Pit-1的影响

 目的 研究溴隐亭对大鼠泌乳素瘤表达Pit-1的作用。方法 皮下植入17β-雌二醇制备大鼠泌乳素瘤模型,将成年雌性大鼠随机分为2组,正常对照组植入空白硅胶管,17β-雌二醇组植入装有17β-雌二醇的硅胶管;将成功诱发出泌乳素瘤的17β-雌二醇大鼠随机分2组,分为模型组、溴隐亭组(0.225 mg·kg^-1·d^-1),用药4周后处死动物,垂体称重,用放免法测定血清泌乳素水平,用反转录聚合酶链反应方法分析组织垂体Pit-1的表达水平。结果 17β-雌二醇组大鼠血清泌乳素水平和垂体质量均明显高于正常对照组（P<0.001）,组织学及免疫组化观察证实17β-雌二醇组成功诱发出大鼠泌乳素瘤。溴隐亭组Pit-1 mRNA水平、血清泌乳素水平和垂体质量低于模型组（P<0.001）。结论 17β-雌二醇成功诱发出大鼠泌乳素瘤,溴隐亭具有抗高泌乳素血症和抑制泌乳素瘤生长的作用,降低Pit-1的表达水平可能是溴隐亭抗泌乳素瘤的重要机制之一。     

甘麦大枣汤对ADHD动物模型SHR大鼠DRD1、DRD2与肠道菌群分布的影响＊

目的 研究甘麦大枣汤对注意缺陷多动障碍（Attention deficit-hyperactivity disorder，ADHD）模型动物自发性高血压大鼠（Spontaneous hypertension rat，SHR）行为学变化、前额叶皮质层多巴胺受体D1（Dopamine Receptor D1，DRD1）、多巴胺受体D2（Dopamine Receptor D2，DRD2）的表达以及肠道菌群分布的影响。方法 SHR大鼠随机分为甘麦大枣汤组（GMDZ组），利他林组（MPH组）和模型组（Model组），每组8只，另设8只韦斯达-京都大鼠（wistar-kyoto rat，WKY）大鼠为空白对照组（Control组），适应性饲养7天后，各组大鼠药物灌胃21天。进行为期6天的Morris水迷宫实验评估药物对SHR大鼠学习能力、冲动、多动行为的影响；通过蛋白免疫印迹（Western Blot，WB）法与反转录实时荧光定量PCR（Real Time Quantitative PCR，RT-qPCR）检测前额叶皮质层DRD1和DRD2蛋白与信使RNA（messenger RNA，mRNA）表达变化；通过16S高通量测序检测药物对肠道菌群分布的影响。结果 与模型组相比，甘麦大枣汤组和利他林组平均潜伏期缩短，目标象限停留时间延长，穿越平台次数增多，平均速度减慢，总路程缩短。与模型组相比，甘麦大枣汤组和利他林组大鼠DRD1和DRD2的蛋白和mRNA表达水平显著升高。16S高通量测序结果显示，空白对照组与其他三组之间粪便物种多样性存在较大差异；模型组与甘麦大枣汤组、模型组与利他林组之间粪便物种多样性存在一定差异；甘麦大枣汤组与利他林组之间粪便物种多样性差异较小。结论 甘麦大枣汤可以有效改善SHR大鼠关于ADHD的核心症状，上调DRD1、DRD2表达的同时影响肠道菌群的分布。     

当归补血汤对慢性轻度不可预见性刺激抑郁模型大鼠行为学及HPA轴的影响

目的:观察当归补血汤对慢性轻度不可预见性刺激郁模型大鼠行为学和下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴(HPA轴)的影响。方法:将120只SD雄性大鼠随机分为正常组、模型组、当归补血汤高、中、低剂量组(8,4,2 g·kg-1)和阳性药组(盐酸氟西汀,3.33 mg·kg-1)。除正常组外,其余各组采用慢性轻度不可预见性刺激法(CUMS)制备抑郁大鼠模型。各给药组动物灌胃给相应药物,正常组和模型组大鼠灌胃给予等体积生理盐水;每日1次,连续21 d。分别于第0,7,14,21天采用强迫游泳实验、悬尾实验和旷场实验等方法对抑郁模型大鼠的行为学改变进行检测,并于21 d采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测大鼠血清促肾上腺皮质激素(ACTH)和皮质酮(CORT)水平,采用实时荧光定量聚合酶链式反应法(Real-time PCR)检测大鼠下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素(CRH),下丘脑、垂体和海马糖皮质激素受体(GR)mRNA表达水平。结果:当归补血汤高、中剂量组可显著减少抑郁模型大鼠强迫游泳实验和悬尾实验的不动时间(P0.05);显著增多旷场实验穿格数次数(P0.05);显著降低血清CORT和ACTH水平(P0.05);当归补血汤高剂量组可下调CRH mRNA表达水平;上调下丘脑、垂体和海马的GR mRNA的表达水平(P0.05)。结论:当归补血汤具有改善CUMS大鼠抑郁行为的作用,表现出抗抑郁作用,其调节HPA轴功能是抗抑郁作用的重要机制之一。     

菟丝子总黄酮对多囊卵巢综合征大鼠模型的影响

目的:探讨菟丝子总黄酮对脱氢表雄酮(dehydroepiandrosterone,DHEA)联合人绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin,HCG)致大鼠多囊卵巢综合征(olycystic ovary syndrome,PCOS)模型的影响。方法:70只SD大鼠,10只正常组除外,其余大鼠上午颈背部注射DHEA 0. 06 mg·g-1,下午皮下注射1. 5 U HCG/只,连续21 d。造模第16天,阴道涂片,实施动情周期监测。挑选成模大鼠60只,分为模型组,达英-35组(0. 339 2 mg·kg-1),菟丝子总黄酮高、中、低剂量组(0. 2,0. 1,0. 05 g·kg-1),每组10只。分组当天按照组别分别进行给药,正常组和模型组给予等体积溶剂,连续给药21 d。末次给药2 h后,腹主动脉取血,测血清睾酮(testosterone,T),雌二醇(estrogen,E2),促黄体生成素(luteinizing hormone,LH)和卵泡刺激素(follicle stimulating hormone,FSH)的含量;脱颈处死大鼠,取每只大鼠同一部位的卵巢固定于10%甲醛溶液中,进行苏木素-伊红(HE)染色光镜观察卵巢的形态变化;取另一相同部位的卵巢,免疫组化法测量卵巢中雄激素受体(androgen receptor,AR)和凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2 (B-cell lymphoma-2,Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2-associated X protein,Bax),观察相关蛋白在卵巢中的表达情况;取下丘脑和垂体,免疫组化法检测下丘脑中促性腺激素释放激素(gonadotropinreleasing hormone,GnRH),垂体促性腺激素释放激素受体(gonadorelin releasing hormone receptor,GnRHR)的表达情况。结果:PCOS大鼠模型复制成功。与模型组比较,各给药组可以显著降低PCOS大鼠血清T,E2和LH含量,显著升高血清FSH含量(P 0. 01);显著升高卵巢Bcl-2水平(P 0. 01),不同程度升高垂体GnRHR水平(P 0. 05,P 0. 01);不同程度降低卵巢AR和Bax水平(P 0. 05,P 0. 01),显著降低下丘脑中GnRH水平(P 0. 01)和显著改善PCOS大鼠卵巢组织的病理性改变。结论:PCOS大鼠模型复制成功。菟丝子总黄酮可能通过调节雌雄激素分泌、抑制卵巢凋亡蛋白的表达、影响下丘脑-垂体-卵巢轴途径发挥对PCOS模型大鼠的保护作用。     

溃结灵含药血清对Caco-2细胞损伤模型ITF基因和MUC2蛋白表达的影响

目的:观察溃结灵含药血清对人克隆结肠腺癌(Caco-2)细胞损伤模型肠三叶因子(ITF)基因和MUC2蛋白表达的影响.方法:三硝基苯磺酸(TNBS)灌肠法复制溃疡性结肠炎(UC)大鼠模型,采用UC模型大鼠血清刺激Caco-2细胞,造成细胞损伤模型,分别用荧光实时定量-PCR (RT-PCR)法及免疫组化法检测溃结灵含药血清对Caco-2细胞损伤模型ITF mRNA及MUC2蛋白表达的影响.结果:与正常血清组ITF mRNA MUC2蛋白相对表达量(1.00±0.11),(8.62±3.16)比较,模型血清组(1.20±0.16,11.22±2.37),均明显增高(P ＜0.05,P＜0.01);与模型血清组比较,溃结灵含药血清组ITF mRNA(1.76±0.37)及MUC2蛋白表达量(13.94±2.59)均明显增高(P ＜0.05,P ＜0.05).结论:溃结灵含药血清可上调Caco-2细胞损伤模型ITF基因和MUC2蛋白表达.     

静宁颗粒对治疗小儿注意缺陷多动障碍的作用机制研究＊

目的 观察静宁颗粒对注意力缺陷多动障碍（attention deficit hyperactivity disorder，ADHD）模型大鼠行为学及脑内多巴胺能神经的影响，研究静宁颗粒对小儿注意力缺陷多动障碍的治疗作用，探讨静宁颗粒对ADHD模型大鼠的行为学影响的生物学机制，为治疗小儿注意力缺陷多动障碍开发安全长效的中药制剂。方法 采用自发性高血压大鼠（spontaneously hypertensive rats，SHR）作为ADHD的模型大鼠，采用静宁颗粒（20.25 g·kg^-1、10.125 g·kg^-1、5.062 5 g·kg^-1）、盐酸哌甲酯缓释片（6.75 mg·kg^-1）和小儿黄龙颗粒（0.937 5 g·kg^-1）连续给药17 d进行治疗，另设正常对照组，常规饲养。以大鼠自由行动的移动距离、移动速率、敞箱中心区域活动累计时间、身体拉长累计时间等行为学指标，评价药物的药效；采用PCR、Western Blot法测定大鼠大脑前额叶、纹状体部位DRD1、DRD2基因及受体表达水平。结果 与正常对照组比较，模型大鼠移动距离、移动速率、敞箱中心区域累计活动时间、身体拉长累计时间明显升高（P ＜ 0.05，P ＜ 0.01）；与模型组比较，静宁颗粒连续给药17 d后，各剂量可显著降低移动距离、移动速率、敞箱中心区域累计活动时间、身体拉长累计时间（P ＜ 0.05，P ＜ 0.01），改善ADHD模型大鼠多动及焦虑的症状；并可升高ADHD模型大鼠大脑前额叶皮质、纹状体部位DRD1、DRD2蛋白表达量（P ＜ 0.05，P ＜ 0.01）。结论 静宁颗粒减少ADHD模型大鼠的自主活动，改善ADHD模型大鼠的注意定势转移能力的缺陷，其作用机制可能与升高ADHD模型大鼠大脑前额叶、纹状体部位DRD1、DRD2 mRNA及受体表达水平有关。