黄芩苷对肝癌HepG-2细胞的体外抑制作用

目的:探讨黄芩苷对肝癌HepG-2细胞的体外抑制作用.方法:采用MTT比色法观察黄芩苷抑制肝癌HepD-2细胞增殖;采用流式细胞仪检测黄芩苷对HepG-2细胞细周期分布的影响,同时结合倒置显微镜、HE染色、透射电镜观察黄芩苷诱导肝癌HepG-2细胞凋亡的作用.结果:黄芩苷可抑制肝癌HepG-2细胞增殖,其作用具有时间和浓度依赖性;黄芩苷可诱导细胞凋亡,同时改变细胞周期分布,多数细胞阻滞于S期,与对照组比较,细胞凋亡率差异有显著性(P<0.01).结论:黄芩苷对肝癌HepG-2具有明显的体外抑制作用.     

马齿苋提取物对肝癌细胞HepG-2抑制作用的实验研究

目的观察马齿苋提取物对肝癌HepG-2的抑制作用。方法采用MTT比色法观察马齿苋提取物抑制肝癌HepG-2细胞增殖;采用流式细胞仪检测马齿苋对HepG-2细胞周期分布的影响。结果马齿苋提取物可抑制肝癌HepG-2细胞增殖,其作用具有时间和浓度依赖性;可改变细胞周期分布,多数细胞阻滞于S期,与对照组比较,细胞凋亡率差异有显著性(P<0.01)。结论马齿苋提取物可诱导肝癌HepG-2细胞凋亡,改变细胞周期分布,从而抑制细胞增殖。     

硒酸酯多糖诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡的实验研究

目的:探索硒酸酯多糖(KSC)在体外对人肝癌细胞HepG-2的作用。方法:以KSC为实验药物,通过MTT法检测细胞活力,荧光显微镜观察凋亡细胞形态,流式细胞仪分析凋亡峰及细胞周期等,研究其对HepG-2细胞的诱导凋亡作用。结果:随着作用时间及药物浓度的增加,KSC对HepG-2细胞生长的抑制作用就越明显。120mg.L-1KSC作用72 h,细胞生长抑制率达69.31%,IC50为43.92 mg.L-1。形态学观察可见早期和晚期凋亡细胞及凋亡小体,细胞周期主要受阻于S期。结论:KSC可在体外诱导人肝癌细胞凋亡。     

黄芩苷抑制肝癌HepG-2细胞增殖的实验研究

目的观察黄芩苷对肝癌HepG-2细胞增殖的影响。方法采用MTT比色法观察黄芩苷抑制肝癌HepG-2细胞增殖；采用流式细胞仪检测黄芩苷对HepG-2细胞周期分布的影响。结果黄芩苷可抑制肝癌HepG-2细胞增殖，其作用具有时间和浓度依赖性；黄芩苷可诱导细胞凋亡，同时改变细胞周期分布，多数细胞阻滞于S期，与对照组比较，细胞凋亡率差异有显著性。结论黄芩苷可诱导肝癌HepG-2细胞凋亡，改变细胞周期分布，从而抑制细胞增殖。     

地鳖纤溶蛋白含药血清对人肝癌和乳腺癌抑制作用

目的研究地鳖纤溶蛋白(EFP)及含药血清对人肝癌HepG-2和人乳腺癌MCF-7细胞的增殖抑制作用。方法制备EFP,并制备不同浓度EFP小鼠含药血清;采用MTT法分别将EFP和EFP含药血清加入HepG-2和MCF-7细胞悬液中,分别检测增殖抑制效果。结果 EFP直接用药各组均对HepG-2无抑制作用,而EFP含药血清各组对HepG-2细胞均有明显抑制细胞增殖作用;EFP组和EFP含药血清组均能不同程度的抑制MCF-7细胞增殖。结论 EFP有较强的体外抗肿瘤活性;血清药理学方法更能真实的反映药物作用。     

解毒化瘀方含药血清抑制白血病K562细胞增殖作用的研究

目的：研究解毒化瘀方对白血病K562细胞增殖的影响。方法：应用中药血清药理学方法制备解毒化瘀方的兔血清，用台盼蓝拒染、MTT法、流式细胞仪检测含药血清对K562细胞增殖的影响。结果：台盼蓝拒染试验和MTT法细胞毒作用均显示含药血清可抑制K562细胞的增殖，抑制率随含药血清浓度的增高而增高，流式细胞仪检测细胞凋亡结果显示，中、高剂量含药血清组G1、G2期DNA含量明显减低，凋亡细胞百分率较高。结论：解毒化瘀对白血病K562细胞增殖具有抑制作用．     

半枝莲含药血清对人卵巢癌SKOV3细胞增殖的影响

目的:探讨半枝莲含药血清对人卵巢癌SKOV3细胞增殖的影响及其机制。方法:体外常规培养人卵巢癌SKOV3细胞,倒置显微镜下观察半枝莲含药血清作用后SKOV3细胞形态的改变,MTT法检测细胞增殖抑制率,应用流式细胞技术检测细胞周期及凋亡率。结果:与空白对照组比较,给药后细胞状态变差,形态和贴壁情况等发生改变。半枝莲含药血清可有效抑制SKOV3细胞生长,低、中、高剂量组抑制率呈递增趋势,同剂量组24 h、48 h、72 h抑制率递增。流式细胞仪检测结果显示,与空白对照组比较,半枝莲含药血清组G0/G1期细胞所占比例增多,空白对照组、半枝莲含药血清低、中、高剂量组48 h细胞凋亡率分别为7.94%、8.36%、17.82%、21.12%。结论:半枝莲含药血清对人卵巢癌SKOV3细胞的增殖有抑制作用,其机制与影响细胞周期和诱导细胞凋亡有关。     

美洲大蠊含药血清对人肝癌HepG2细胞的抑制作用研究

目的:探究美洲大蠊含药血清对人肝癌HepG_2细胞的影响及可能的作用机制。方法:采用MTT法测量HepG_2细胞的增殖抑制率,流式细胞术检测细胞周期及凋亡,酶联免疫吸附试验检测细胞上清中IFN-γ、IL-4、TNF-α的含量。结果:美洲大蠊含药血清组对肝癌HepG_2细胞增殖均有不同程度的抑制作用,作用呈时间-浓度依赖性。其多肽PAP-2组的抑制率明显高于CⅡ-3及脱脂膏组,且PAP-2联用5-FU组抑制率明显高于单用PAP-2组,具协同作用。各血清组均能诱导HepG_2细胞凋亡,并呈浓度依赖性,使细胞周期阻滞于S期或G2/M期。各血清组能下调IFN-γ表达,并呈浓度依赖性,并且联合5-FU用药具有协同作用;均能不同程度上调肝癌HepG_2细胞IL-4、TNF-α的表达,与浓度呈负相关。结论:美洲大蠊含药血清能抑制HepG_2细胞增殖,诱导HepG_2细胞凋亡并抑制细胞周期的发展,且能够调节细胞因子,发挥免疫作用。     

参桃软肝丸含药血清对HepG-2细胞凋亡及细胞周期影响的实验研究

目的：观察参桃软肝丸含药血清对人肝癌细胞HepG-2细胞凋亡及细胞周期的影响,验证参桃软肝丸可能的作用机理。方法：将9只雄性新西兰家兔分为3组,每组3只,实验分空白对照组、实验组和阳性药物对照组,人肝癌细胞株HepG-2细胞接种于RPMI 1640培养液中,细胞培养为3～5d。MTT法观察细胞抑瘤率,流式细胞仪检测细胞凋亡率和细胞周期。结果：参桃软肝丸对人肝癌细胞株HepG2的生长有抑制作用,且随剂量的增加而增强。其中,高浓度组抑瘤率最高可达43.2%。有较好的诱导凋亡作用,凋亡率可达15.6%,且阻滞细胞增殖于G0/G1期。结论：参桃软肝丸对人肝癌细胞HepG-2有较好的抑瘤和诱导细胞凋亡作用,诱导肿瘤细胞凋亡可能是其抗肿瘤作用机制之一。     

荔枝核含药血清对人肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨荔枝核含药血清对人肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响。方法:采用血清药理学方法制备荔枝核、环磷酰胺含药血清以及对照血清,作用于HepG2细胞,MTT法检测各种血清对HepG2细胞增殖的影响,Hochest33258荧光染色观察细胞凋亡,流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡率。结果:荔枝核含药血清处理HepG2细胞后,呈剂量依赖性抑制肿瘤细胞增殖活性;并出现细胞核浓染与核碎裂;流式细胞仪检测HepG2细胞凋亡率明显高于对照组。结论:荔枝核含药血清能抑制人肝癌HepG2细胞增殖,其机制可能与诱导HepG2细胞凋亡有关。     

小柴胡汤含药血清对肝癌HepG-2细胞的影响

目的:探讨小柴胡汤含药血清抑制HepG-2肝癌细胞增殖的作用机制.方法:大鼠灌服小柴胡汤3.69 g·kg-1,空白组给予等量蒸馏水,1次/d,连续7d,末次给药1h后腹主动脉取血制备小柴胡汤含药血清.以HepG-2肝癌细胞为研究对象,实验分为10％空白血清组,5％,10％,20％含药血清组.采用倒置显微镜观察含药血清对HepG-2细胞作用后的形态改变,噻唑蓝(MTT)法测定其对生长抑制的影响,流式细胞术分析细胞凋亡的情况,罗丹明123(Rh123)荧光染色观察细胞线粒体膜电位的变化.结果:与空白血清组比较,小柴胡汤含药血清能够抑制HepG-2肝癌细胞增殖,10％含药血清抑制细胞增殖具有时间依赖的特点;流式检测结果表明,10％小柴胡汤含药血清作用HepG-2肝癌细胞8h后,凋亡率从6.78％上升至19.51％;Rh123荧光染色显示,细胞线粒体膜电位明显降低.结论:小柴胡汤含药血清能够抑制HepG-2肝癌细胞增殖,促进其凋亡,线粒体途径参与了该过程.     

珍珠梅提取物抑制肝癌HepG-2细胞增殖的实验研究

目的:观察珍珠梅提取物对肝癌HepG-2细胞增殖的影响,探讨其作用机制。方法:采用MTT比色法观察珍珠梅提取物抑制肝癌HepG-2细胞增殖;采用流式细胞仪检测其对HepG-2细胞周期分布的影响,同时结合倒置显微镜、HE染色、透射电镜及免疫细胞化学方法检测凋亡相关基因bcl-2、p53的蛋白表达,观察其诱导肝癌HepG-2细胞凋亡的作用。结果:珍珠梅提取物可抑制肝癌HepG-2细胞增殖,其作用具有时间和浓度依赖性;珍珠梅提取物可诱导细胞凋亡;同时改变细胞周期分布,多数细胞阻滞于G2/M期,与对照组比较,细胞凋亡率差异有显著性(P<0.01);用药前后凋亡相关基因bcl-2、p53蛋白表达均有显著性改变(P<0.01)。结论:珍珠梅提取物可诱导肝癌HepG-2细胞凋亡,改变细胞周期分布,从而抑制细胞增殖。     

半枝莲含药血清对小鼠肝癌细胞生长的抑制和诱导凋亡作用

目的：探讨中药半枝莲提取物（ESB）对小鼠肝癌细胞生长的抑制和诱导凋亡作用。方法：体外培养小鼠H22肝癌细胞,以ESB高、中、低剂量含药血清培养液作用于H22细胞,并设立空白血清及5-氟尿嘧啶组。应用MTT法检测药物对细胞增殖的抑制作用;Hoechst33258染色,荧光显微镜下观察细胞凋亡;流式细胞术检测肿瘤细胞周期及细胞凋亡情况。结果：ESB高、中剂量含药血清组有一定的抑制H22肝癌细胞增殖的作用,且呈明显的时效关系。荧光显微镜下可见部分细胞呈典型凋亡形态学改变。流式细胞仪检测结果显示：细胞周期各时相中,ESB高、中、剂量含药血清组S期细胞所占的比例明显减少,G1期细胞增多,有明显的诱导凋亡作用。其中空白对照、ESB低、中、高剂量组、5-氟尿嘧啶组H22细胞凋亡率分别为0.51%、1.07%、3.15%、7.83%、11.26%。结论：ESB含药血清不仅可直接抑制小鼠H22肝癌细胞生长,而且可有效诱导细胞凋亡。     

归脾汤含药血清对雷公藤醇提物致骨髓细胞凋亡的保护作用

目的:观察归脾汤含药血清对雷公藤醇提物致大鼠骨髓细胞凋亡的保护作用.方法:体外培养大鼠股骨骨髓细胞,经8mg?L-1的雷公藤醇提物作用后,加入5％,10％,15％,20％的归脾汤含药血清,采用MTT比色法检测对骨髓细胞增殖的影响;采用流式细胞仪PI单标法检测对骨髓细胞周期的影响;采用流式细胞仪Annexin V-FITC/PI双标法检测对骨髓细胞凋亡率的影响.结果:与同等浓度的雷公藤醇提物组比较,15％,20％的归脾汤含药血清能显著升高骨髓细胞的存活率和增殖指数(P ＜0.05或P＜0.01),10％,15％,20％的归脾汤含药血清显著降低骨髓细胞凋亡指数(P＜0.05).结论:归脾汤含药血清能显著增加雷公藤醇提物作用后骨髓细胞的存活率,诱导骨髓细胞由相对静止期进入增殖活跃期,并减少细胞凋亡.     

昆布多糖硫酸酯对非激素依赖型人前列腺癌细胞PC-3的作用研究

目的研究昆布多糖硫酸酯(LAMS)对体外培养的非激素依赖型人前列腺癌细胞株PC-3的作用。方法利用WST-8法检测LAMS对体外培养的非激素依赖型人前列腺癌细胞株PC-3细胞生长的抑制作用,利用流式细胞术(FCM)分析LAMS对细胞周期和凋亡的影响,利用荧光显微镜观察PC-3细胞形态。结果随着LAMS浓度的增加和作用时间的延长,对非激素依赖型人前列腺癌细胞株PC-3细胞的生长抑制率逐渐增高,呈时间-剂量效应;流式细胞仪分析,PC-3细胞凋亡率逐渐增高;但PC-3细胞的凋亡率与作用时间的延长无明显关系;荧光显微镜观察,PC-3细胞凋亡小体逐渐增多,甚至出现细胞死亡;随着LAMS浓度增加PC-3细胞G1期细胞比例逐渐减少,S+G2期细胞比例呈剂量依赖性增加,表明存在S+G2期阻滞。结论LAMS能抑制体外PC-3细胞的生长,并促进其S+G2期阻滞和凋亡,可能是其抑制前列腺癌的机制之一。     

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??OBJECTIVE To investigate the relationship between chemotherapy resistance and cancer stem cells, probe the way to reverse drug resistance, and guide the rational medical treatment. METHODS Hepatocellular carcinoma cell lines, parent and chemoresistant HepG-2, were cultured with fluorouracil (5-FU). CCK-8 cell proliferation assay was used to determine the inhibition of 5-Fu and all-trans retinoic acid (ATRA), a cell differentiation inducer. The content difference of cancer stem cells between parent and chemoresistant HepG-2 cell lines was examined by flow cytometry. Western blot and realtime PCR were preformed to probe the difference of related gene expression level between parent and chemoresistant HepG-2 cell lines. RESULTS Our data supported that the inhibitory effect of 5-Fu alone on chemoresistant HepG-2 cells proliferation was lower than on parent HepG-2 cells. After the addition of ATRA, chemoresistant HepG-2 cells proliferation was reduced obviously. Flow cytometry RESULTS revealed that compared with parent HepG-2 cells, the ratio of CD44 and CD326 positive cells in chemoresistant HepG-2 cells was much more than that in parent HepG-2 cells. Furthermore, realtime PCR and Western blot suggested that ABCG2, BMI and OCT4 expressions were increased in chemoresistant HepG-2 cells than those in parent HepG-2 cells, while ATRA could attenuate these differences on protein expressions. CONCLUSION Cancer stem cells enrichment relates to chemotherapy resistance, which can be reversed by ATRA through down-regulation cancer stem cells associated gene expression. This can provide new ideas for clinical rational use of anti-tumor drugs.     

蜈蚣多糖对Hela细胞的增殖抑制作用研究

目的 研究蜈蚣多糖对人宫颈癌细胞Hela细胞的抑制作用及作用机制.方法 用MTT法检测蜈蚣多糖对Hela细胞生长的抑制作用;流式细胞仪和Annexin V-FITC/PI双荧光染色分别检测蜈蚣多糖对Hela细胞周期及凋亡情况的影响.结果 在一定浓度范围内蜈蚣多糖可显著抑制Hela细胞的增殖,改变Hela细胞的细胞周期,使细胞阻滞于G2/M期,并能诱导细胞凋亡.结论 蜈蚣多糖可能通过改变Hela细胞的细胞周期,诱导细胞凋亡,从而对Hela细胞的增殖有一定的抑制作用.     

八角莽草酸诱导人肝癌细胞HepG-2凋亡及其机制研究

目的：研究八角莽草酸诱导人肝癌细胞HepG-2凋亡的作用和机制。方法：取对数生长期人肝癌HepG-2细胞,随机分为药物组和对照组,用0.125,0.5,1 g·L^-1不同浓度八角莽草酸作用人肝癌HepG-2细胞,采用MTT法测定莽草酸对HepG-2细胞增殖的影响;通过流式细胞仪检测在以上浓度的莽草酸对肝癌HepG-2细胞周期的影响;通过免疫细胞化学检测凋亡相关基因B细胞淋巴瘤白血病2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax蛋白）表达的改变。结果：MTT实验结果表明,各质量浓度0.125,0.5,1 g·L^-1的莽草酸对人肝癌HepG-2的生长具有显著的抑制作用（P<0.05）,呈现时间依赖性和剂量依赖性;流式结果表明莽草酸将人肝癌HepG-2细胞阻滞在G₁期,使细胞不能顺利地进入细胞DNA合成期S期,从而抑制了该细胞的增殖。免疫细胞化学检测凋亡相关基因Bcl-2蛋白表达明显减少、Bax表达明显增加;Bcl-2/Bax比例明显降低。结论：八角莽草酸在体外诱导人肝癌HepG-2细胞大量阻滞在G₁期,进入S期细胞减少,抑制细胞增殖,其作用可能通过降低Bcl-2/Bax比例来诱导细胞凋亡而实现的。