花旗松素对人宫颈癌Hela细胞形态及DNA片段的影响

目的:探讨花旗松素对人宫颈癌Hela细胞的影响及其机理。方法:通过倒置显微镜观察花旗松素对人宫颈癌HeLa细胞形态的影响;通过花旗松素诱导肿瘤细胞DNA特征梯度实验,观察其对DNA片段的影响。结果:大部分细胞逐渐形成凋亡小体,且花旗松素能诱导Hela细胞产生200 bp的DNA片段,表明花旗松素诱导Hela细胞死亡与细胞凋亡有关。结论:花旗松素诱导HeLa细胞死亡与细胞凋亡相关。     

自噬在蝙蝠葛碱诱导宫颈癌Hela细胞凋亡中的作用

目的探讨自噬在蝙蝠葛碱诱导宫颈癌Hela细胞凋亡中的作用。方法采用MTT法检测蝙蝠葛碱(3.2,6.4,12.8,25.6μmol·L~(-1))以及蝙蝠葛碱与3-MA联合用药对宫颈癌Hela细胞增殖的影响,应用流式细胞术观察自噬在蝙蝠葛碱诱导宫颈癌Hela细胞凋亡中的作用;Western blot检测蝙蝠葛碱和3-MA对宫颈癌Hela细胞Cleaved caspase-3、Bcl-2、Bax和Beclin-1表达的影响。结果蝙蝠葛碱显著抑制宫颈癌Hela细胞增殖,其抑制作用随着药物浓度的增加和作用时间的延长而增加;而3-MA与蝙蝠葛碱联合应用后,HeLa细胞凋亡率明显减少;蝙蝠葛碱上调Hela细胞Cleaved caspase-3、Bax和Beclin-1的表达(P0.05),下调Bcl-2蛋白表达(P0.05);与蝙蝠葛碱组比较,3-MA与蝙蝠葛碱联合应用组Cleaved caspase-3、Beclin-1、Bax表达均明显降低(P0.05),而Bcl-2蛋白的表达明显升高(P0.05)。结论蝙蝠葛碱能够抑制宫颈癌HeLa细胞的增殖,上调凋亡相关蛋白Cleaved caspase-3、Bax和自噬相关蛋白Beclin-1的表达、下调抗凋亡蛋白Bcl-2表达,从而诱导宫颈癌HeLa细胞凋亡和自噬性死亡。     

中蒙药并头黄芩乙醇提取物体外抗肿瘤实验研究

目的:研究并头黄芩乙醇提取物对人宫颈癌细胞Hela细胞的体外抗肿瘤作用。方法:采用MTT法检测出并头黄芩乙醇提取物对Hela细胞增殖的抑制作用;ELISA检测Bax、Bcl-2蛋白表达的变化。结果:并头黄芩乙醇提取物可明显抑制肿瘤细胞的增殖;并头黄芩乙醇提取物对Hela细胞处理48h后,与对照组相比,并头黄芩乙醇提取物组Bax蛋白表达显著升高,Bcl-2蛋白表达显著降低(P0.05和P0.01)。结论:并头黄芩乙醇提取物体外对Hela细胞有抑制作用,其作用机制与诱导肿瘤细胞的凋亡有关。     

桑皮素对人宫颈癌Hela细胞增殖与凋亡的影响

目的探讨桑皮素对人宫颈癌Hela细胞的增殖抑制及其凋亡诱导作用。方法用10、15、20μmol/L桑皮素作用Hela细胞24 h后,在扫描电镜、透射电镜及倒置显微镜下观察细胞形态学变化;利用MTT法检测桑皮素对Hela细胞的增殖的影响;应用Hoechst单染实验检测Hela细胞的凋亡情况;采用qRT⁃PCR和Western blot检测Bax、Bcl⁃2 mRNA及蛋白的表达。结果桑皮素(2.5、5、7.5、10、15、20、25μmol/L)处理Hela细胞24、48 h,能明显的抑制Hela细胞增殖(P<0.05),且呈浓度依赖性。桑皮素(10、15、20μmol/L)处理Hela细胞24 h,细胞呈现早期凋亡。与0μmol/L桑皮素组比较,桑皮素(10、15、20μmol/L)能显著上调Bax mRNA及蛋白表达(P<0.05),下调Bcl⁃2 mRNA及蛋白表达(P<0.05)。结论桑皮素通过上调Bax表达和下调Bcl⁃2表达,从而诱导Hela细胞发生凋亡。     

白藜芦醇诱导人胶质瘤细胞U251增殖抑制与凋亡的作用研究

目的:探讨白藜芦醇对人胶质瘤细胞株U251的增殖抑制与凋亡的作用。方法:用不同浓度的白藜芦醇0、25、50、100、200μm/L处理对数生长期的U251细胞72 h,利用MTT比色法检测U251细胞增殖;流式细胞术检测U251细胞凋亡,采用逆转录聚合酶链反应法检测Wnt、β-catenin、p53、p21、Bcl-2和Bax mRNA水平。采用Western blotting检测Wnt、β-catenin、p53、p21、Bcl-2和Bax蛋白的表达水平。结果:白藜芦醇抑制U251细胞的增殖和Wnt、β-catenin、p53、p21和Bcl-2的表达,且呈浓度依赖性;促进U251细胞凋亡和Bax的表达。结论:白藜芦醇诱导U251细胞增殖抑制和凋亡与抑制Wnt/β-actin/p53信号通路激活相关。     

冬凌草甲素对骨肉瘤细胞增殖抑制和凋亡诱导效应的机制研究

目的研究冬凌草甲素对人骨肉瘤细胞株MG-63细胞增殖抑制和凋亡诱导效应的分子机制。方法以流式细胞仪检测细胞周期变化;Western印迹检测CyclinD1、P21以及凋亡相关蛋白Survivin、Bcl-2和Bax表达的变化;TRAP-PCR-ELISA方法检测MG-63细胞端粒酶活性的变化;Z-IETD-fmk阻断试验检测Caspase-8阻断前后,冬凌草甲素对MG-63细胞凋亡影响的变化。结果冬凌草甲素增加G0/G1期MG-63细胞百分率,降低S期MG-63细胞百分率;浓度依赖性抑制MG-63细胞的CyclinD1、Survivin和Bcl-2蛋白表达,上调P21和Bax蛋白表达;浓度依赖性抑制MG-63细胞端粒酶的活性;Z-IETD-fmk阻断Caspase-8活性后,能部分逆转和减弱冬凌草甲素对MG-63细胞的凋亡诱导作用。结论冬凌草甲素通过影响细胞周期调节蛋白、阻断细胞周期G1/S期"稽查点";抑制Survivin、Bcl-2,上调Bax;抑制端粒酶活性以及活化Caspase-8等途径抑制MG-63细胞增殖及诱导MG-63细胞凋亡。     

竹节参水提物对宫颈癌Hela细胞凋亡的影响

目的探讨竹节参水提物对宫颈癌Hela细胞凋亡的影响。方法0(阴性对照)、50、100、150μg/mL竹节参水提物作用于宫颈癌Hela细胞中后培养48 h。采用一步法TUNEL染色测定细胞凋亡,流式细胞计数仪测定宫颈癌Hela细胞周期,Hoechst 33342荧光染色观察不同浓度下细胞形态,半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法测定凋亡相关基因P53、Bax、Caspase-3 mRNA表达水平。结果竹节参水提取物对宫颈癌Hela细胞增殖具有明显的抑制作用,呈浓度依赖性,36 h时竹节参水提取物对宫颈癌Hela细胞增殖抑制基本达到50.0%以上。竹节参水提取物作用于宫颈癌Hela细胞G0/G1期与S期,随着其质量浓度升高,它对于宫颈癌Hela细胞作用集中于G0/G1期。未加入竹节参水提物时Hela细胞形态均一且结构相对完整,而在50、100、150μg/mL下Hela细胞开始出现凋亡,能增加凋亡相关基因P53、Bax、Caspase-3 mRNA表达。结论竹节参水提物体外能抑制宫颈癌Hela细胞增殖,诱导癌细胞的自噬与凋亡,可能与调控凋亡相关基因mRNA表达有关。     

紫草素对子宫内膜癌Ishikawa细胞生长的作用研究

目的研究紫草素体外诱导人子宫内膜癌Ishikawa细胞凋亡的作用,并初步探讨其诱导凋亡的机制,为紫草素的临床应用提供实验依据。方法采用MTT法测定各组药物对Ishikawa细胞的增殖抑制作用;流式细胞术观察紫草素对子宫内膜癌Ishikawa细胞周期及其凋亡率的影响;应用RT-PCR法检测紫草素对子宫内膜癌Ishikawa细胞中Bax及其Bcl-2蛋白表达的影响。结果紫草素对Ishikawa细胞的增殖有明显抑制作用,并呈明显的量效关系和时间依赖性。紫草素主要将细胞阻滞于G1期,并且同一时间点下紫草素诱导Ishikawa细胞凋亡的作用具有浓度依赖性。紫草素诱导子宫内膜癌Ishikawa细胞凋亡的机制与蛋白Bax及Bcl-2表达相关,通过促进Bcl-2表达下调与Bax表达上调从而诱导子宫内膜癌细胞的凋亡(P<0.05)。结论紫草素可以有效抑制子宫内膜癌Ishikawa细胞的增殖,并具有时间和浓度依赖性。促进细胞凋亡并将细胞周期阻止于G1期,其机制可能与抑制Ishikawa细胞中Bax与Bcl-2蛋白的表达有关。     

雷公藤甲素诱导结肠癌细胞凋亡的分子机制研究

目的研究雷公藤甲素对人结肠癌HCT-116细胞周期和凋亡的影响及其分子机制。方法采用MTT法检测细胞的增殖;流式细胞仪分析细胞周期和细胞凋亡;Western blot检测细胞中相关蛋白的表达。结果雷公藤甲素可显著抑制HCT-116细胞的增殖活性;流式细胞仪和Western blot结果显示,雷公藤甲素作用HCT-116细胞后,G_0/G_1期细胞比例增多,随着雷公藤甲素浓度的增加,p21蛋白表达上调,周期蛋白Cyclin D1表达下调;并且,雷公藤甲素呈浓度依赖性诱导HCT-116细胞凋亡,凋亡抑制蛋白Bcl-2表达下调,促凋亡蛋白Bax表达上调。结论雷公藤甲素能抑制人结肠癌HCT-116细胞增殖,通过促进p21的表达,抑制Cyclin D1使细胞周期阻滞于G_0/G_1期,并可通过线粒体途径诱导HCT-116细胞凋亡。     

金荞麦提取物对人宫颈癌Hela细胞增殖和诱导凋亡的影响

目的:探讨金荞麦提取物对人宫颈癌Hela细胞增殖、凋亡作用及可能机制。方法:经不同浓度金荞麦提取物(0.4、2、10、50、250 g/ml)处理体外培养的人宫颈癌Hela细胞,采用MTT法检测细胞增殖活性;经6 g/ml金荞麦提取物处理的Hela细胞,相差显微镜和荧光显微镜观察细胞形态,Annexin V-FITC/PI染色法检测细胞凋亡,琼脂糖凝胶电泳法检测DNA碎片,ELISA法检测Caspase-1、3、8、9活性,Western blot法检测PARP、细胞色素C含量、Bcl-2、Bax蛋白表达。结果:与空白对照组比较,金荞麦提取物浓度为0.2 g/ml开始起效,24h内明显抑制Hela细胞增殖,并呈时间和剂量依赖性;与空白对照组比较,6 g/ml金荞麦提取物处理的Hela细胞出现明显的核固缩、核碎裂,细胞凋亡率、DNA碎片明显增加;与金荞麦提取物组比较,金荞麦提取物与caspase抑制剂混合组DNA碎片明显减少,细胞成活率明显升高;与作用0h组比较,6 g/ml金荞麦提取物处理的Hela细胞PARP裂片、细胞色素C、Bax和Caspase-3、8、9明显增加,Bcl-2明显减少。结论:金荞麦提取物可抑制Hela细胞增殖、诱导细胞凋亡,其机制可能与通过促进诱导凋亡蛋白Bax表达和抑制抗凋亡蛋白Bcl-2表达,从而增加细胞色素C和Caspases有关。     

茶氨酸对人宫颈癌Hela细胞增殖作用的影响

目的研究茶氨酸对人宫颈癌Hela细胞增殖和凋亡的影响。方法 MTT法测定茶氨酸不同浓度不同时间对Hela细胞增殖活性的影响;荧光显微镜观察Hela细胞的形态变化;流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果茶氨酸对Hela细胞具有显著增殖抑制作用,并呈浓度和时间依赖性;荧光显微镜观察发现茶氨酸处理组的Hela细胞有典型的凋亡特征;流式细胞仪检测结果显示,与空白组比较,茶氨酸处理后的Hela细胞的凋亡率显著增加(P<0.01)。结论茶氨酸对人宫颈癌Hela细胞的增殖具有抑制作用,且其与诱导Hela细胞凋亡有关。     

箬叶多糖对体外培养的宫颈癌细胞的抑制作用

目的：探讨箸叶多糖对人宫颈癌细胞株Hela的体外增殖的抑制作用。方法：采用M＇IT法检测箬叶多糖对人宫颈癌细胞增殖的抑制作用,并观察细胞形态变化。结果：箬叶多糖对Hela细胞抑制作用较强,量效关系和时效关系良好;形态学观察到细胞凋亡。结论：箬叶多糖对体外培养的宫颈癌Hela细胞有较强的抑制作用。     

红花多糖对人宫颈癌Hela细胞增殖和VEGF表达的影响

目的:通过研究红花多糖对人宫颈癌Hela细胞增殖和血管内皮生长因子(VEGF)表达情况的影响,探讨红花多糖抗宫颈癌作用的分子机制。方法:体外培养人宫颈癌Hela细胞,加入含不同质量浓度(0.02,0.04,0.08,0.16,0.32,0.64和1.28 g·L-1)红花多糖的培养液,培养48 h,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测红花多糖对Hela细胞增殖的影响;以不同质量浓度(0.16,0.32,0.64 g·L-1)的红花多糖处理Hela细胞48 h,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞上清液中VEGF的表达,实时定量荧光聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测VEGF mRNA的表达,免疫印迹法(Western blot)检测VEGF蛋白表达的变化。结果:与空白组比较,(0.16,0.32,0.64 g·L-1)的红花多糖作用于宫颈癌Hela细胞48 h后能显著抑制细胞的体外增殖,呈现剂量依赖性(P0.05)。红花多糖能明显下调Hela细胞VEGF mRNA和蛋白的表达(P0.05)。结论:红花多糖可通过抑制VEGF的表达抑制宫颈癌Hela细胞的增殖,发挥抗肿瘤作用。     

二脱甲氧基姜黄素对体外培养宫颈癌Hela细胞Caspase-8的影响

目的:观察二脱甲氧基姜黄素对体外培养人宫颈癌Hela细胞Caspase-8的作用。方法:MTT法检测二脱甲氧基姜黄素对体外培养人宫颈癌细胞Hela的抑制作用;分光光度计检测其对Caspase-8酶活性的影响;免疫组化法检测其对人宫颈癌细胞Hela Caspase-8蛋白表达的影响。结果:二脱甲氧基姜黄素对人宫颈癌细胞Hela有明显的抑制作用(P0.001),且呈剂量关系,与姜黄素有显著差异(P0.001);二脱甲氧基姜黄素能增强Caspase-8酶活性,增强Caspase-8蛋白的表达。结论:二脱甲氧基姜黄素能激活Caspase-8蛋白活性,这可能也是其体外抑制宫颈癌细胞Hela生长的机理之一。     

4’-去甲基-4’-氧-环丁甲酰基-去氧鬼臼毒素及鬼臼苦素抑制肿瘤细胞生长作用研究

目的:探讨不同浓度4’-去甲基-4’-氧-环丁甲酰基-去氧鬼臼毒素对宫颈癌细胞Hela和黑色素瘤细胞B16增殖的抑制作用;鬼臼苦素对Hela细胞、肝癌Hep G2细胞、肺癌A549细胞及骨肉瘤MG-63细胞增殖的抑制作用。方法:采用MTT法检测不同浓度的4’-去甲基-4’-氧-环丁甲酰基-去氧鬼臼毒素及鬼臼苦素对以上多种癌细胞的抑制作用。结果:不同浓度4’-去甲基-4’-氧-环丁甲酰基-去氧鬼臼毒素与对照组(0.1%DMSO)相比,对肿瘤细胞生长抑制率明显升高,均有显著性差异(P<0.05);不同浓度鬼臼苦素与对照组(0.1%DMSO)相比,对肿瘤细胞生长抑制率也明显升高,均有显著性差异(P<0.05)。结论:4’-去甲基-4’-氧-环丁甲酰基-去氧鬼臼毒素对Hela细胞和B16细胞增殖具有明显的抑制作用,鬼臼苦素对Hela、MG-63、Hep G2及A549细胞具有明显的抑制作用。     

越橘花色苷对宫颈癌Hela细胞凋亡及抗氧化能力的影响

目的探讨越橘花色苷对宫颈癌Hela细胞的作用机制。方法以不同浓度的越橘花色苷作用于宫颈癌Hela细胞48h后,通过Gimsa染色观察越橘花色苷抑制Hela细胞的形态学改变,通过流式双染观察Hela细胞凋亡情况,通过RT．PCR观察Hela内P53的表达,并测定Hela细胞内的SOD、GSH、MDA值。结果Gimsa染色可见越橘花色苷可使Hela细胞光泽度下降,细胞数减少,稀疏,细胞变小、核固缩。流式双染可见,随着橘花色苷浓度升高,凋亡率升高。与对照组比较,越橘花色苷浓度达到30mg／ml时,P53的表达量最高,差异有统计学意义（P〈0．05）。与对照组比较,30mg／ml和40mg／ml的越橘花色苷组SOD和GSH含量升高,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论越橘花色苷可通过上调抑癌基因P53的表达,增强细胞凋亡,并提高Hela细胞的抗氧化能力,从而达到抑制宫颈癌Hela细胞的作用。     

花旗松素和3,3'-二甲氧基鞣花酸-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷对肿瘤细胞的增殖抑制作用

目的 探讨从红蓼成熟果实中分离出来的花旗松素和3,3’-二甲氧基鞣花酸-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷对人体肿瘤细胞的增殖抑制作用.方法 用结晶紫染色法检测花旗松素和3,3’-二甲氧基鞣花酸-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷对人胃癌MGC细胞、人肝癌HepG-2细胞和人盲肠癌Hce-8693细胞的增殖抑制作用.结果 花旗松素和3,3’-二甲氧基鞣花酸-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷在1～500 μg/mL质量浓度范围内对MGC细胞、HepG-2细胞和Hce-8693细胞均有一定的生长抑制作用,随着剂量的增大和作用时间的延长,呈较好的剂量-时间-效应关系;同等条件下,花旗松素比3,3’-二甲氧基鞣花酸-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷的抑制作用强.结论 花旗松素与3,3’-二甲氧基鞣花酸-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷均有体外抗肿瘤活性,能抑制MGC细胞、HepG-2细胞和Hce-8693细胞的增殖.     

葡萄籽原花青素对人宫颈癌细胞的辐射增敏作用

目的:研究葡萄籽原花青素对人宫颈癌Hela细胞重离子辐射的增敏作用。方法:SRB法检测葡萄籽原花青素对人宫颈癌Hela细胞的增殖抑制作用,集落形成法检测其对重离子辐射的增敏作用,实时荧光定量检测葡萄籽原花青素对Hela细胞MRE-11基因mRNA的表达影响。结果:葡萄籽原花青素对人宫颈癌Hela细胞呈现剂量依赖性杀伤,但整体抑制率较低,IC50值为110.3μg/ml,单独应用抗肿瘤效果较弱;30μg/ml葡萄籽原花青素预处理后,人宫颈癌Hela细胞对重离子辐射的敏感性增加,增敏比为1.25;单独重离子辐射后,人宫颈癌Hela细胞Mre-11 mRNA表达显著上调,30μg/ml葡萄籽原花青素预处理可以降低由重离子辐射引起的Mre-11 mRNA表达的上调。结论:葡萄籽原花青素具有对人宫颈癌Hela细胞重离子辐射增敏作用,可能通过抑制Mre-11基因的表达而抑制DNA损伤修复。     

硒化枸杞多糖硫酸酯的制备及其抗氧化活性对人宫颈癌Hela细胞生长的体外抑制作用

 目的 制备硒化枸杞多糖硫酸酯（Se-LBPS）,考察其抗氧化活性和对人宫颈癌Hela细胞生长的抑制作用。方法 以自制的枸杞多糖硫酸酯（LBPS）为原料, 在乙酸催化下与亚硒酸钠反应,合成Se-LBPS。以付里叶红外光谱对产物进行表征。用分光光度法考察Se-LBPS的抗氧化活性,用MTT法考察其对人宫颈癌Hela细胞的体外抑制作用。结果 Se-LBPS对羟自由基的清除率可达60.51%,对超氧自由基的清除率可达47.9%。Se-LBPS对Hela细胞生长的抑制率优于LBPS和硒化枸杞多糖（Se-LBP）,Se-LBPS对Hela细胞的抑制率与其浓度正相关,在200 μg·mL^-1时抑制率可达59.67%。结论 Se-LBPS具有明显的抗氧化性,优于硒化红薯叶多糖。Se-LBPS对Hela细胞生长具有显著的抑制作用,其抑制效果优于叶酸。
     

榄香烯乳对人宫颈癌Hela细胞转录因子ELK1及其靶基因的影响

目的观察中药榄香烯乳对人宫颈癌Hela细胞转录因子ELK1及其靶基因的影响，以深入了解榄香烯乳的抗癌机制。方法用MTT法检测药物对细胞的抑制作用，双荧光素酶报告系统检测药物对转录因子ELK1的影响，Western Blot检测磷酸化ELK1及其靶基因c-fos表达。结果榄香烯乳能明显抑制人宫颈癌Hela细胞的生长，其半数生长抑制剂量为80．6μg／mL；榄香烯乳处理组荧光素酶活性下降，磷酸化的ELK1及其靶基因c—fos的表达均下调。结论榄香烯乳可能通过下调转录因子ELK1的磷酸化水平，抑制c—fos的表达，从而抑制人宫颈癌Hela细胞的生长。