黄芪多糖对肺纤维化大鼠细胞因子及肺组织病理结构的影响

目的 观察肺纤维化大鼠血清中IFN-γ、IL-4、TNF-α的含量、肺组织病理结构变化,进一步探讨黄芪多糖干预治疗肺纤维化的作用机理.方法 Wistar大鼠60只随机分为5组:空白组、博莱霉素(BLM)组、地塞米松组、黄芪多糖组、黄芪水提物组.采用气管内注入BLM复制肺纤维化模型,造模后第2天开始各药物组开始干预治疗,14 d采用酶联免疫吸附法测定血清IFN-γ、IL-4、TNF-α的含量,14 d、28 d采用HE染色观察肺组织病理结构的变化.结果 与空白组相比较,BLM组大鼠血清IFN-γ含量降低,IL-4、TNF-α的含量升高(均P<0.05),肺组织的肺泡炎及纤维化程度升高(均P<0.05);与BLM组比较,黄芪多糖组、黄芪水提物组、地塞米松组大鼠血清IFN-γ含量升高,IL-4、TNF-α含量降低(均P<0.05);肺组织的肺泡炎及纤维化程度降低(P<0.05).结论 应用黄芪多糖可以明显减轻大鼠肺纤维化进程,不仅降低Ⅱ型细胞因子(IL-4)含量,而且升高Ⅰ型细胞因子(IFN-γ)及TNF-α含量,从而调整Ⅰ型/Ⅱ型细胞因子平衡及及TNF-α表达达到抗纤维化作用.     

中医药对肺纤维化大鼠肺组织超微结构的影响

肺纤维化是一种发病机制尚不明确的慢性炎症性肺疾病,中医药(包括针灸)等治疗方法在对其治疗上有着独特的优势。随着现代医学科学技术的发展,许多新的研究手段逐渐应用于肺纤维化的研究,本文查阅近十余年来应用透射电子显微镜研究肺纤维化的文献,总结了传统中医药及针灸治疗对肺纤维化超微结构的影响,以期获得临床用药的实验室基础。     

泻肺汤对肺纤维化大鼠肺组织及血清自由基代谢的影响

目的观察泻肺汤对博来霉素所致肺纤维化大鼠自由基代谢的影响,探讨泻肺汤防治肺纤维化可能的作用机制。方法按照随机数字表法将SPF级SD大鼠随机分为正常对照组,模型对照组,泻肺汤低、中、高剂量组,阳性对照组,每组14只。除正常对照组外,采用经典的博来霉素气管内注射给药法制备大鼠肺纤维化模型,24 h后灌胃给药,正常对照组及模型对照组给予等体积生理盐水,泻肺汤低、中、高剂量组及阳性对照组,连续28 d。第29天腹主动脉采血处死大鼠,取肺组织标本。比色法观察肺组织NO的含有量、一氧化氮合成酶(NOS)的活性、超氧化物歧化酶(SOD)的活性、血清过氧化氢酶(CAT)的活性和羟脯氨酸(Hyp)的含有量。结果与正常对照组相比,模型对照组大鼠体质量明显下降,肺重及肺系数明显升高,肺组织的NO含有量和NOS的活性均明显升高、SOD的活性明显降低,血清中CAT的活性明显降低、Hyp的含有量明显升高(P0.05或P0.01)。与模型对照组比较,泻肺汤高剂量组大鼠体质量明显升高,各干预组大鼠肺重及肺系数明显下降,肺组织的NO含有量和NOS活性均明显降低、SOD的活性明显增强,血清中CAT的活性明显增强、Hyp的含有量明显降低(P0.05或P0.01)。结论泻肺汤对肺纤维化具有一定的保护作用,呈现出量效关系。     

枸杞多糖对培养心肌细胞自由基损伤的超微结构影响

目的：用X－XOD体系在体外诱发培养乳鼠心肌细胞自由基损伤,观察加入枸杞多糖（12.5ug/ml)后心肌细胞超微结构的改变。方法结果：X－XOD体系作用的心肌眼微结构明显破坏,加枸杞多糖后则接近正常。结论：枸杞多糖对培养心肌细胞自由基的损伤有保护作用。     

雾化吸入黄芪多糖配伍丹酚酸B对博来霉素致大鼠肺纤维化模型的影响

目的 探讨黄芪多糖配伍丹酚酸B雾化给药干预博来霉素致大鼠肺纤维化模型的效应研究.方法 将60只SD大鼠随机分为空白组、假手术组、黄芪多糖组、丹酚酸B组、黄芪多糖与丹酚酸B配伍组,每组10只,并采用气管暴露式注入博来霉素方法制备大鼠肺纤维化模型,造模24小时后雾化给药,给药第28天取材.观察大鼠肺功能、肺系数、肺组织病理...     

养肺活血汤对肺纤维化大鼠自由基代谢影响的实验研究

1 材料与方法1.1 动物 SD品种大鼠,雌雄各半,体重180～200g,由南京中医药大学实验动物中心提供。1.2 分组 动物随机分成5组:肺纤维化模型组:按文献方法,将大鼠乙醚麻醉后切开颈部皮肤,由气管注入博莱霉素A_55mg/kg,注完后立即直立旋转,让药液在二肺均匀分布,然后缝合皮肤。(以下各组除空白对照组外,造模方法皆同。)次日始灌以与治疗组等容积的水,连续28d。养肺活血汤分2组:小剂量组7.56g/kg;大剂量组22.68g/kg。于造模第2d灌胃给药,连续28d。阳性对照组:强的松5.4mg/kg。于造模第2d灌胃给药,连续28d。空白对照组:每日灌以等容积水,不造模,连续     

肺纤方对肺纤维化大鼠肺组织自由基损伤的影响

目的观察肺纤方对博来霉素所致肺纤维化大鼠肺组织自由基损伤的影响,探讨其抗肺纤维化的作用机制。方法 144只健康Wistar大鼠随机分成空白对照组、模型组、阳性对照组及肺纤方高、中、低剂量组,每组24只。除空白对照组外,按Szapiel法建立模型,次日灌胃给药,肺纤方高、中、低剂量组(3.2、1.6、0.8 g/kg)均为10 mL/kg,阳性对照组予醋酸泼尼松混悬液(6 mg/kg),空白对照组与模型组予等量生理盐水,1次/d,给药周期21 d。分别在造模7、21 d后分2次取材,前后期各随机杀检10只。测定肺组织谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)的含量。结果与模型组比较,肺纤方高、中剂量组均可显著升高肺纤维化大鼠肺组织中GSH-Px和SOD的含量(P<0.05);其中第21日时,肺纤方高剂量组升高SOD的作用最为显著(P<0.01)。与模型组相比,肺纤方高、中剂量组均可显著降低肺纤维化大鼠肺组织中MDA和NO的含量(P<0.05);其中第21日时,肺纤方高剂量组降低NO含量的作用最为显著(P<0.01)。结论肺纤方能不同程度调节大鼠肺纤维化模型体内的自由基代谢,从而缓解肺泡炎程度,减轻大鼠肺纤维化病变,且呈现一定的量效关系。     

黄芪多糖对糖尿病大鼠血管内皮细胞的影响

探讨黄芪多糖对糖尿病大鼠血管内皮细胞损伤的治疗作用及其机理。 3 0只SD大鼠随机分成正常对照组、四氧嘧啶糖尿病组与糖尿病黄芪多糖 (APS)治疗组 (黄芪多糖 4 0 0mg/kg/d-1腹腔注射 ) ,5周后 ,处死动物取血测血糖浓度 ,血清胰岛素 ,超氧化物歧化酶 (SOD) ,丙二醛 (MDA) ,内皮素 (ET) ,一氧化氮 (NO) ,并应用形态定量的方法比较各组的心肌病理检查结果。结果 ,腹腔注射四氧嘧啶 ( 2 0 0mg/kg)后的SD大鼠血糖浓度显著升高 ,血清NO ,MDA ,SOD ,ET及胰岛素水平明显改变。APS治疗 5周后 ,血糖浓度 ,MDA和ET较未治疗组显著下降 ;而NO ,胰岛素和SOD的含量显著升高。切片光镜下观察 ,糖尿病大鼠心肌毛细血管数量减少 ,基底膜增厚 ,微血管与心肌纤维的比率显著降低 ,这些改变都可被APS改善。黄芪多糖可降低糖尿病大鼠血糖水平 ,对早期糖尿病大鼠内皮细胞具有良好的保护作用 ,这可能与其减轻氧自由基的损伤 ,影响NO ,ET的产生以及促进胰岛B细胞损伤的恢复有关     

当归多糖对肺纤维化大鼠肺功能和肺系数的影响

目的:观察甘肃道地药材当归有效成份当归多糖对肺纤维化大鼠肺功能和肺系数的影响,为临床应用当归多糖防治肺纤维化提供依据。方法:60只健康Wistar大鼠,随机分成正常(空白)对照组,模型组,阳性(地塞米松)对照组,当归多糖大、中、小剂量组,每组各10只,除正常对照组外,其余各组采用博莱霉素5mg/kg行气管注射复制大鼠肺纤维化模型。造模第2天起,当归多糖大、中、小剂量组每天1次,剂量依次为200g/kg、100g/kg、50g/kg灌胃;阳性对照组醋酸地塞米松1mg/kg混悬液灌胃,1次/d;正常对照组、模型组用等容积生理盐水灌胃,10mL/kg,连续28天。于第28天给药后行常规处理,比较各组体质量及肺质量,计算肺系数。结果:与空白对照组比较,模型组大鼠肺系数明显升高,气道阻力(Rl、Re)明显升高,肺顺应性(Crs)明显降低,用力肺通气功能(FVC)、用力肺活量(FVC)、第0.3秒用力呼气容积与用力呼气容积的百分比(FEVO.3/FVC)、平静呼气末功能残气量(FRC)等明显降低。与模型组比较,当归多糖组及地塞米松组的肺系数明显降低,Rl、Re不同程度降低,Crs升高,FVC、FEVO.3/FVC、FRC等指标不同程度升高。结论:当归多糖具有明显改善肺纤维化大鼠模型肺功能指标的作用,可减轻肺组织质量,改善其疾病状态,使体质量明显增加,肺系数下降。     

北五味子粗多糖对大鼠自由基代谢的影响

北五味子粗多糖 (CPSC)系从木兰科植物五味子(SchisandraChinensis(Turca)Bail)的干燥成熟果实中提取的含有北五味子总多糖 (占 5 9 93% )、17种以上氨基酸和 16种以上微量元素的蛋白多糖。已有研究报道 ,CPSC能明显提高小鼠耐缺氧、抗疲劳能力 ,可使正常及免疫抑制小鼠免疫器官重量明显增加 ,提高网状内皮系统吞噬功能[1、2 ] 。本文进一步观察CPSC对老年大鼠自由基代谢的影响。1　材料和方法1 1　动物　 2 1～ 2 2月龄Wistar老年大鼠 ,体重 4 5 0±6 0g ,5月龄Wistar大鼠 ,体重 2 0 0± 2 0g ,均雌雄各半 ,合格证号 :医动字第 10 …     

Effect of Feitai on bleomycin-induced pulmonary fibrosis in rats

The current therapeutic approaches for pulmonary fibrosis, which is characterized by fibroblast proliferation and extracellular matrix remodeling, are unsatisfactory. Feitai, consisting of several herbs, is a folk formula for pulmonary tuberculosis therapy in China. To investigate the effects of Feitai on pulmonary fibrosis, Feitai was administered orally to bleomycin (BLM)-treated rats, and the lung toxicity effects were evaluated according to inflammatory cell count, protein concentration, and lactate dehydrogenase (LDH) activity in the bronchoalveolar lavage fluid (BALF), malondialdehyde level and hydroxyproline content in lung tissue 28 days post-BLM. Serial sections of the lung were stained with hematoxylin and eosin (HE) and Masson trichrome, respectively. The degree of fibrosis was assessed quantitatively using LEICA QWin image analyzer. Results showed that Feitai inhibited BLM-induced lung fibrotic lesions in a dose-dependent manner as reflected by decreased the lung hydroxyproline content and lung fibrosis fraction 28 days after BLM instillation. Treatment with Feitai also significantly ameliorated the BLM-induced lung toxicity effects detected in BALF and lung tissue. The effects in vitro on WI-38 human lung fibroblast cell line showed that Feitai significantly reduced the cell proliferation and transforming growth factor (TGF)-beta stimulated type I collagen synthesis. These results strongly demonstrate that Feitai may be useful in the treatment of pulmonary fibrosis.     

参蛤养肺胶囊对博莱霉素诱发的肺纤维化大鼠的抗纤维化作用

目的 本研究首次对Sheng-Yangfei-Capsules（SGYC）对博莱霉素致大鼠肺损伤和纤维化的抗纤维化作用进行了研究。方法 将动物随机分为6组,在博来霉素造模给药后第7,14和28天处死动物,并分别取肺组织。对于肺损伤和纤维化进行组织学评估,肺标本进行了HE和Masson染色。对各组动物的体重进行了测定并计算肺重量指数,对单核细胞中单胺氧化酶（MAO）和转化生长因子-β1（TGF-β1）的浓度进行了测定。结果 SGYC能够降低博莱霉素诱导肺纤维化大鼠的体重和肺重量指数。病理学证据表明SGYC能够降低博莱霉素诱导的肺纤维化和巩固。 SGYC可降低肺组织中的MAO和TGF-β1活性。结论 这些发现表明,SGYC可能是一种有希望的候选物,可防止博来霉素诱导的肺损伤或其他间质病变。     

Effect of Feining on bleomycin-induced pulmonary injuries in rats

Ethnopharmacological relevance

The flowers of Gentiana veitchiorum has been widely used in decoction form in the traditional medicine of Tibet against tussis, tracheitis, angina for their anti-inflammatory, antimicrobial and alexipharmic properties.

Aim of the study

The aim of current study was to evaluate the therapeutic effects of Feining, a Chinese herbal formula (national invention patent: ZL200510042636.3) against pulmonary injuries and to clarify the mechanisms involved.

Materials and methods

Experimental pulmonary injuries were induced by bleomycin (BLM) in rats with or without subsequent treatment of Feining or prednisone as positive control. The pulmonary injuries were evaluated by histological analysis. Also, the levels of superoxide dismutase (SOD), malondialdehyde (MDA), glutathione (GSH) and hydroxyproline (Hyp) in the lung tissue were determined. To clarify one of the possible active principles responsible for Feining, high performance liquid chromatography-diode array detector-mass spectrometry (HPLC-DAD-MS) method was applied to identify the components of Gentiana veitchiorum, one of major ingredients of Feining.

Results

Feining significantly improved lung alveolitis scores and reduced the Hyp content of lungs, which is an index of collagen accumulation. Moreover, Feining played a role against the oxidative damages by decreasing the MDA level, whereas increasing SOD and GSH activity, which correlated with oxidation resistance and scavenging of free radicals. In addition, Feining alleviated inflammatory lung injury by decreasing tumor necrosis factor-α (TNF-α) expression. HPLC-DAD-MS analysis revealed that there was 1.97% gentiopicroside in Gentiana veitchiorum.

Conclusion

Feining has certain therapeutic effects against pulmonary injuries.     

复方甘草甜素治疗博莱霉素致肺纤维化大鼠的研究

目的探讨复方甘草甜素(SNMC)在大鼠肺纤维化中的作用机制。方法采用博莱霉素复制大鼠肺纤维化模型并给予相应药物,分别于7,14,28 d时检测各组肺组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)的活性及丙二醛(MDA)的含量变化。结果SNMC能提高肺组织匀浆中的(SOD)活性,降低MDA的含量。而且SNMC大剂量组的作用优于中小剂量组,呈一定的量效关系。结论SNMC对肺纤维化大鼠的作用机制,可能与通过调节其体内自由基水平、减轻自由基对肺组织结构的氧化损伤有关。     

黄芪对肝纤维化大鼠肝损伤保护作用及机制研究

目的:研究黄芪对肝纤维化大鼠肝损伤的保护作用及相关机制。方法:将SD大鼠随机分为正常对照组、肝纤维化模型组、黄芪后处理组和阳性对照组,检测各组大鼠血清中ALT、AST活性和TBIL水平变化;逆转录-聚合酶链反应检测各组大鼠肝脏组织5种主要致纤维化因子p38MAPK、TGF-β1、α-SMA、CTGF和CollegenⅣmRNA表达水平;免疫印迹法检测p38MAPK信号通路上下游蛋白MKK3和ATF-2的表达变化。结果:与肝纤维化模型组比较,黄芪后处理组大鼠血清中ALT、AST和TBIL水平明显降低(P<0.05),肝纤维病理变化明显减轻,p38MAPK、MKK3和ATF-2蛋白表达量均降低(P<0.05)。结论:黄芪通过p38MAPK信号通路对实验性肝纤维化大鼠肝损伤具有效的保护作用。     

沙参麦冬汤对肺间质纤维化大鼠氧自由基损伤及细胞外基质代谢的影响

目的:观察沙参麦冬汤(SM)对肺间质纤维化(PF)模型大鼠的影响。方法:大鼠气管内注射平阳霉素复制PF模型后分为模型对照组、SM组、醋酸泼尼松片(PA)对照组,设空白对照组。连续灌胃28d。检测血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、层黏连蛋白(LN)及透明质酸(HA)含量的动态变化。结果:与空白对照组相比,模型对照组动物同期血清SOD活性降低,而MDA、LN、HA升高,并有显著性差异(P<0.05);与模型对照组比较,SM组动物血清MDA、LN、HA含量均不同程度减少,而血清SOD活性增加(P<0.05)。结论:沙参麦冬汤对PF模型动物的氧自由基损伤有不同程度的干预作用,并能降低其血清LN、HA含量,改善ECM代谢。     

川芎嗪对大鼠缺血心肌线粒体NO及自由基的影响

目的:研究川芎嗪抗大鼠心肌缺血损伤的机制.方法:大鼠随机分对照组,造模缺血组和川芎嗪保护组.采用皮下注射异丙肾上腺素,造成心肌缺血损伤模型;采用HE染色法观察心肌组织病理学损伤;观测心肌线粒体中超氧化物岐化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)及一氧化氮合酶(NOS)活力;测定心肌线粒体丙二醛(MDA)、Ca2 及一氧化氮(NO)含量.结果:川芎嗪可明显减轻受损心肌的变性坏死反应和减少炎性细胞浸润;川芎嗪保护组心肌线粒体SOD、GSH-PX活力较缺血组均有显著性升高(P＜0.01或P＜0.05),而NOS活力、Ca2 、MDA及NO含量明显降低(P＜0.01或P＜0.05).结论:川芎嗪对大鼠心肌缺血损伤有保护作用,其机制可能是:抑制线粒体钙超载,降低线粒体NOS活力从而减轻NO所致的损伤,清除自由基,减少脂质过氧化物的生成.     

白藜芦醇苷对大鼠肺间质纤维化的防治作用

目的:建立博来霉素(BLM)诱导的大鼠肺间质纤维化的动物模型,分别给予3种剂量的白藜芦醇苷(PD),观察PD对大鼠肺间质纤维化的防治作用并探讨其可能的作用机制.方法:192只3月龄健康SD大鼠,随机分为正常对照组(A组),肺纤维化模型组(B组),PD低剂量组(C组),PD中剂量组(D组),PD高剂量组(E组),地塞米松组(F组).每组于第3,7,14,28天各随机处死8只.光镜下观察肺组织形态学变化;观察肺组织匀浆中羟脯氨酸(HyP)含量,PLA2活性及支气管肺泡灌洗液(BALF)中前列腺素E2(PGE2),白三烯C4(LTC4)和转化生长因子-β1(TGF-)含量变化.结果:第3,7,14,28天,模型组肺组织匀浆中PLA2活性,BALF中的PGE2,LTC4和TGF-β1含量均较正常组显著增高(P＜0.01),肺组织HyP含量于第7天开始较正常对照组增高(P＜0.05),第28天达最高峰;与模型组比较,3种剂量的PD( 10,20,40mg· kg-1·d-1)及地塞米松在各观察时间点均可降低肺组织匀浆中PLA2活性和HyP含量及BALF中的PGE2,LTC4和TGF-β1含量(P＜0.05);PD组间比较差异有统计学意义(P＜0.05),其中上述指标E组低于D组,D组低于C组;E组与地塞米松组差异无统计学意义;但上述观察指标仍高于正常组(P＜0.01).病理组织形态学提示,PD各组及地塞米松组肺泡炎及肺纤维化程度较轻.结论:PD具有抑制肺间质纤维化的作用,但不能完全阻止其进展过程.     

虎杖对肺纤维化大鼠肺成纤维细胞MMP-2，TIMP-1mRNA表达的影响

目的:观察虎杖对大鼠肺纤维化形成的影响,并探讨其作用机制.方法:将雄性SD大鼠随机分成正常对照组、模型组、阳性对照组、虎杖预防组、虎杖3 d治疗组、7 d治疗组和14 d治疗组.除正常对照组外其余各组均气管内注射博莱霉素诱导肺纤维化.阳性对照组造模当天予0.5%地塞米松4 mL·kg~(-1)·d~(-1)灌胃;正常对照组和模型组于造模后当天开始灌胃生理盐水4 mL·kg~(-1)·d~(-1);虎杖预防组、虎杖3,7,14 d治疗组分别在造模前2 d、造模后第3,7,14天开始胃饲受试药物4 mL·kg~(-1)·d~(-1)(含生药量1 g·mL~(-1)),进行动态观察.HE,Masson染色行肺组织病理学检查,胰酶消化法行肺成纤维细胞培养,并用RT-PCR法检测MMP-2,FIMP-lmRNA的表达.结果:与模型组比较,阳性对照组、虎杖预防组及各治疗组,肺泡炎、肺纤维化程度及胶原沉积均明显减轻.肺成纤维细胞MMP-2mRNA表达除第42天与模型组相似,无统计学意义,其余之前的时间点均较模型组减弱(P<0.05或P<0.01);TIMP-1mRNA表达也均较模型组减弱(P<0.05或P<0.01),其持续抑制时间更长,直至第42天.结论:虎杖通过抑制不同时期肺成纤维细胞MMP-2,TIMP-1mRNA的异常高表达以减轻肺泡炎及肺纤维化的程度,可能是其延缓肺纤维化的作用机制之一.     

Antifibrosis effects of total glucosides of Danggui-Buxue-Tang in a rat model of bleomycin-induced pulmonary fibrosis

Aim of the study

The present study examined the antifibrosis effects of DBTG (total glucosides of Danggui-Buxue-Tang) on bleomycin-induced pulmonary injury and fibrosis in rats.

Materials and methods

Animals were randomly divided into six groups: (1) saline control group; (2) Bleomycin group in which rats were endotracheally instillated with bleomycin (5 mg/kg); (3-5) Bleomycin and DBTG group, in which DBTG were given to rats daily (16.32 or 64 mg/kg/day, i.g.) one day after bleomycin injection for 4 weeks until the end of the treatment; (6) Bleomycin and positive control group. Animals were sacrificed at 7, 14, and 28 days post bleomycin administration and lungs were removed. Lung specimens were stained with hematoxylin and eosin (HE) and Masson trichrome for histological evaluation of lung injury and fibrosis by light microscopy. Body weight and lung index from various groups were measured, as well as TNF-α, TGF-β1 and type I collagen concentrations in lung homogenates.

Results

DBTG reduced bleomycin-induced weight loss, decreased the lung index and histological evidence supported the ability of DBTG to attenuate bleomycin-induced lung fibrosis and consolidation. DBTG could partly dose-dependently decrease TNF-α and TGF-β1 activity, as well as it decrease type I collagen expression in lung tissues.

Conclusions

The findings of the present study provide evidence that DBTG may serve as a novel target for potential therapeutic treatment of lung fibrosis.