古日古木对小鼠CCl4急性肝损伤模型的影响

目的:探讨古日古木对小鼠四氯化碳(CCl4)肝损伤模型的保护作用。方法:连续9d给予小鼠腹腔注射CCl4制作肝脏损伤模型,通过测定小鼠血清中ALT、AST、总蛋白、白蛋白、白球蛋白比和肝脏组织中SOD、MDA、NO等指标,以及肝脏的组织病理学检查,研究红花对小鼠CCl4肝损伤模型的保护作用。结果:古日古木高、中、低剂量组不同程度抑制CCl4损伤后血浆中ALT和AST的异常增高,提高血清和肝脏中SOD活性,减少MDA形成,降低小鼠肝脏MDA含量,并降低肝组织的NO,升高血浆中总蛋白、白蛋白水平,减轻肝脏疏松化及脂肪变性。结论:古日古木对CCl4所致急性肝损伤有一定的保护作用。     

重庆产叶下珠对大鼠肝细胞CCl4损伤的保护作用

大鼠肝细胞体外与CCL4（10mmol/L）共同孵育后，肝细胞存活率、细胞膜流动性均降低，而LDH、MDA的释放及细胞内Ca^2 浓度均增加。预先加入重庆产叶下珠可以明显抑制上述变化，表明该药对CCl4损伤的肝细胞有保护作用。     

岩柏草总黄酮对大鼠肝损伤保护作用的研究

目的:探讨卷柏对实验性肝损伤大鼠保护作用机理。方法:采用四氯化碳(CCl4)腹腔注射导致大鼠急性肝损伤的动物模型,用岩柏草总黄酮混悬液灌胃给药,并以水飞蓟宾葡甲胺组为实验对照。结果:岩柏草总黄酮能显著地降低CCl4所致大鼠血清中ALT、AST、NO、PGE2和肝组织中MDA的含量;并可使CCl4所致大鼠肝组织中降低的SOD活性升高,改善肝脏组织的病理损伤。结论:岩柏草对CCl4所致大鼠肝损伤具有保护作用,其作用机理可能与降酶、抗脂质过氧化反应、清除自由基、抑制NO过量成生,降低PGE2含量等有关。     

京玉清肝胶囊对实验性肝损伤的保护作用

目的：研究京玉清肝胶囊对小鼠、大鼠实验性肝损伤的保护作用。方法：采用四氯化碳（CCl4）或D-半乳糖胺（D—Gain）所致肝损伤模型为研究对象，观察京玉清肝胶囊对实验性肝损伤的保护作用。结果：京玉清肝胶囊能显著降低CCl4和JD—GaIN所引起急性肝损伤小鼠血清ALT、AST含量；能明显抑制CCl4所引起的慢性肝损伤大鼠血清ALT、AST及肝脏中羟脯氨酸的含量。结论：京玉清肝胶囊对CCl4或JD～GalN引起的小鼠急性肝损伤、CCl4起的大鼠肝损伤有保护作用。     

甘草苷对CCl_4肝脏毒性的保护作用

目的 :研究甘草苷对CCl4造成的肝脏毒性的保护作用。方法 :采用离体肝灌流技术 ,在灌流液中加入CCl4的同时 ,加入甘草苷 ,定时收集灌流液供测XOD含量用。结果 :甘草苷能显著降低灌流液中XOD含量。结论 :甘草苷对CCl4造成的肝脏毒性有保护作用。     

红毛五加多糖对四氯化碳肝损伤大鼠的保护作用

目的:研究红毛五加多糖(AGP)对四氯化碳(CCl4)肝损伤的保护作用.方法:大鼠CCl4肝损伤模型进行实验.结果:AGP能明显抑制CCl4肝损伤大鼠血清AST、ALP、BILIT和肝TG水平的升高及血清TP、TG、TC、Alb和Glu水平的下降;同时使血清升高的NO含量降低.结论:AGP对CCl4肝损伤大鼠有明显保护作用,其机制可能与降低过高的NO含量有关.     

粗叶悬钩子对小鼠急性肝损伤保护作用的研究

目的:研究粗叶悬钩子粗提物(CERA)的保肝作用,探讨其部分作用机理。方法:以CCl4制备小鼠急性肝损伤模型,分别用3种不同浓度的CERA进行干预,观察检测血清ALT、AST和肝匀浆SOD、MDA、NO的含量变化及肝组织病理学变化。结果:CERA能降低CCl4所致小鼠血清中异常增高的ALT、AST及肝组织中异常增高的MDA、NO的含量,同时升高SOD含量,且能改善肝脏病理损伤。结论:CERA对小鼠实验性肝损伤有一定的保护和治疗作用。抑制CCl4引起的脂质过氧化反应、抑制NO的细胞毒效应可能是其保护肝细胞的部分作用机理。     

灵黄护肝胶囊对小鼠急性肝损伤的保护作用

目的:研究灵黄护肝胶囊对四氯化碳(CCl4)、D-半乳糖胺(D-Gal)、酒精所致小鼠急性肝损伤的保护作用。方法:用灵黄护肝胶囊预防性给药若干天后,用CCl4、D-Gal、酒精分别造模,检测造模后小鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、肝脏系数等指标。结果:灵黄护肝胶囊能明显抑制小鼠急性肝损伤后ALT、AST、肝脏系数的升高(P<0.01或P<0.05)。结论:灵黄护肝胶囊对CCl4、D-Gal、酒精所致小鼠急性肝损伤均有明显的保护作用。     

丹黄保肝颗粒保肝利胆研究

目的:观察丹黄保肝颗粒对实验性肝损伤模型的改善作用及其利胆作用;方法:建立腹腔注射CCl4、D-半乳糖胺诱发小鼠急性肝损伤模型,观察受试药物的保肝作用;通过胆管插管引流法,观察受试药物对正常大鼠胆汁流量的影响;结果:丹黄保肝颗粒在0.5～2.0 g/kg剂量范围内,能明显抑制CCl4、D-半乳糖胺致肝损伤小鼠肝脏系数增大,降低血清ALT、AST水平,有效改善肝功能;同时药物也能明显提高CCl4所致肝损伤小鼠肝脏抗氧化功能,提高SOD活力,降低MDA含量;此外,丹黄保肝颗粒还能明显增加正常大鼠的胆汁流量,显示出利胆作用;结论:丹黄保肝颗粒具有较好的保肝利胆作用,其机制可能与提高机体抗氧化能力有关。     

肝复乐对实验性肝硬化大鼠模型的保护作用

给大鼠反复ip CCl4诱发肝脏代谢紊乱,脂质沉积,代偿性地使肝内弥漫性纤维增生,肝脏假小叶形成,肝组织中HPA含量增加,形成肝硬化,并可见血清ALT活性升高,TP与ALB减少,A／G比值倒。肝复乐能降低CCl4肝硬化大鼠模型血清和肝组织中TCh和TG含量,升高血清ALB,逆转A/G比值,降低ALT活性,降低肝组织中含HPA含量。表明肝复乐对CCl4肝硬化具有保护作用。     

Effects of Phyllanthus urinaria extract on HepG2 cell viability and oxidative phosphorylation by isolated rat liver mitochondria

Ethnopharmacological relevance

Phyllanthus urinaria is widely used as anti-inflammatory, anti-diarrheal and hepatoprotective medicines in Asian countries such as India, China and Thailand. In Thailand, Phyllanthus urinaria is traditionally used as an adjuvant or alternative medicine for cancer patients, including liver cancer. However, there is limited scientific evidence supporting its use in cancer particularly hepatocellular carcinoma.

Aim of the study

To investigate the cytotoxic effect of Phyllanthus urinaria extract on human hepatocellular carcinoma HepG2 cells and the effect on oxidative phosphorylation by isolated rat liver mitochondria.

Materials and methods

HepG2 cells and isolated rat liver mitochondria were treated with the 50% methanolic extract of Phyllanthus urinaria. Cytotoxicity of the extract was assessed by trypan blue exclusion and MTT assay. Rates of oxygen consumption of isolated mitochondria were determined with a Clark oxygen electrode.

Results

It was found that the hydromethanolic extract induced cell death of HepG2 cells in a dose-dependent fashion. The IC₅₀ of Phyllanthus urinaria extract measured by trypan blue exclusion and MTT assay were 431 ± 65 μg/ml and 445 ± 62 μg/ml, respectively. Morphological changes of the cells were also observed. With isolated rat liver mitochondria, the extract slightly stimulated mitochondrial state 4 respiration but profoundly depressed state 3 respiration and respiratory control ratio.

Conclusions

The extract impairs energy metabolism by acting as inhibitor of oxidative phosphorylation and weak mitochondrial uncoupler. These mitochondrial effects may play a role in the cytotoxic action of Phyllanthus urinaria extract on HepG2 cells. These results provide preliminary experimental evidence supporting the use of Phyllanthus urinaria against hepatocellular carcinoma and open the possibility of considering this plant an adjunctive medicine for the treatment of this deadly disease.     

叶下珠化学成分及其抗乙肝病毒活性的研究

对大戟科叶下珠属植物叶下珠的干燥全草进行了化学成分及其抗乙肝病毒活性的研究，共分得１１个化合物，其中２个新化合物为去氢诃子次酸甲酯、短叶苏木酚酸甲酯。通过抗病毒、抗乙肝表面抗原及保肝试验，肯定了叶下珠的抗乙肝病毒活性。     

草苁蓉水萃取物对四氯化碳致肝损伤小鼠肝脏氧化应激的干预作用

目的:研究草苁蓉水萃取物(BRAF)对四氯化碳(CCl4)诱发的急性肝损伤小鼠肝脏氧化应激的干预作用.方法:将实验小鼠随机分为对照组、模型组、水飞蓟素阳性对照组(50 mg· kg-1)及BRAF高、低剂量组(200,100 mg·kg-1).每日给小鼠灌胃水飞蓟素或BRAF 1次,共7d.实验末期,腹腔注射CCl4建立小鼠急性肝损伤模型,苏木素-伊红(HE)染色法观察肝组织病理学变化,比色法检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)活性及肝脏超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)、Na+-K+-ATP酶(Na+-K+-ATPase)、Ca2+-Mg2+-ATP酶(Ca2+-Mg2+-ATPase)活性及还原型谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)含量.结果:BRAF明显降低CCl4致急性肝损伤小鼠血清ALT,AST和ALP水平,减轻肝组织损伤,升高肝脏SOD,CAT,GPx和GSH水平,升高肝线粒体SOD,Na+-K+-ATPase和Ca2+-Mg2+-ATPase活性,降低肝匀浆及线粒体MDA含量.结论:BRAF降低CCl4致急性肝损伤小鼠肝脏氧化应激,对CCl4致小鼠急性肝损伤具有保护作用.     

姜黄素对小鼠实验性肝损伤的保护作用

目的 :探讨姜黄素对肝脏损伤的保护作用。方法 :分别建立四氯化碳、D-半乳糖胺及卡介苗加脂多糖诱导小鼠肝脏损伤模型 ,以测定血清谷丙氨酸转换酶 (ALT)、谷草氨基酸转换酶 (AST)、一氧化氮 (NO)和肝匀浆丙二醛 (MDA)含量为指标观察姜黄素对肝脏损伤的保护作用。结果 :姜黄素与阳性对照药联苯双酯相仿 ,均能明显降低动物模型的血清ALT ,AST ,NO和肝匀浆MDA含量。结论 :姜黄素具有明显的保肝作用。     

龙葵碱诱导HepG2细胞凋亡的线粒体通路研究

 目的观察龙葵碱诱导HepG₂细胞凋亡与线粒体通路的关系。方法MTT法测定龙葵碱对HepG₂细胞的细胞毒作用;AO/EB双染,激光共聚焦扫描显微镜观察龙葵碱对HepG₂细胞形态学的影响;TMRE和Fluo-3/AM双染,激光共聚焦扫描显微镜同时观察细胞线粒体膜电位和细胞内[Ca²⁺]_i的变化。结果龙葵碱对HepG₂细胞有细胞毒作用;龙葵碱诱导HepG₂细胞形态出现凋亡形态时TMRE和Fluo-3/AM双染观察表明,龙葵碱在降低线粒体膜电位的同时能够升高细胞内[Ca²⁺]_i浓度。结论龙葵碱降低膜电位,开放细胞膜PT通道,使细胞内Ca²⁺顺浓度梯度转运,从而升高细胞内Ca²⁺浓度启动细胞凋亡机制。     

Fuzheng Huayu inhibits carbon tetrachloride-induced liver fibrosis in mice through activating hepatic NK cells

Aim of the study

Fuzheng Huayu (FZHY) is a Chinese compound herbal preparation which consists of six Chinese herbs. This study examines the preventative effects of FZHY on liver fibrosis induced by carbon tetrachloride (CCl₄) and explores its possible mechanisms of action.

Materials and methods

Liver fibrosis was induced in male C57BL/6N mice by injecting a 10% CCl₄ solution intraperitoneal twice a week for six weeks. After 6 weeks of treatment, serum ALT and AST assay, liver tissue histological examination and immunostaining were carried out to examine the liver function and fibrosis degree. The expression levels of alpha-smooth muscle actin (SMA) were measured by quantitative real-time PCR and western blot. Hepatic natural killer (NK) cells were isolated from liver and evaluated by FACS.

Results

Upon pathological examination, the FZHY-treated mice showed significantly reduced liver damage. The expression of α-SMA increased markedly upon treatment with CCl₄ and the increase was reversed by FZHY treatment. FZHY treatment also enhanced the activation of hepatic NK cells and the production of interferon-gamma (IFN-γ). The protective effects of FZHY were reversed in the mice that were depleted of NK cells by anti-ASGM-1 Ab treatment.

Conclusions

FZHY can efficiently inhibit CCl₄-induced liver fibrosis. Furthermore, the depletion of NK cells attenuates the protective effects of FZHY. We conclude that FZHY could be an effective drug for liver fibrosis, and its mechanism of action involves the activation of hepatic NK cells.     

环维黄杨星D对心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用和对心肌细胞内游离钙浓度的影响

目的:研究环维黄杨星D(CVB-D)对培养乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用和对急性分离大鼠心肌细胞内游离Ca²⁺浓度的影响。方法:采用培养的乳鼠心肌细胞建立缺氧/复氧损伤模型,测定心肌细胞搏动频率、细胞存活率、肌酸激酶(CK)的含量;应用特异性荧光指示剂Fluo-3/AM负载急性分离的大鼠心肌细胞,用激光共聚焦显微镜检测胞内游离钙的变化。结果:缺氧/复氧损伤+环维黄杨星D组(H/R+CVB-D)乳鼠心肌细胞搏动频率、细胞存活率与缺氧/复氧损伤组比较明显升高,CK含量与缺氧/复氧损伤组比较明显下降。对急性分离大鼠心肌细胞内[Ca²⁺]i逐步升高,并呈剂量依赖性;在有外钙和无外钙时,CVB-D对胞内钙的升高有显著差异(P<0.05);在无外钙并加入内罗啶孵育后,CVB-D引起的胞内[Ca²⁺]i轻度升高,但与无钙组相比无显著性差异(P>0.05)。结论:环维黄杨星D对培养乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤有保护作用,对急性分离大鼠有升高心肌细胞内游离钙离子浓度的作用,[Ca²⁺]的升高既源于内钙释放又源于外钙内流。     

狭基线纹香茶菜对四氯化碳所致大鼠急性肝损伤的保护作用

目的:研究狭基线纹香茶菜对四氯化碳(CCl4)所致大鼠急性肝损伤的保护作用。方法:60只大鼠随机分为正常组、模型组、高、中、低剂量给药组、阳性药对照组6个组。给药组按15,7.5,3.75 g.kg^-1剂量,以狭基线纹香茶菜水提物灌胃;阳性药对照组按45 mg.kg^-1给联苯双酯;每天1次,连续10天。给药第1,4,7,10天(共4次),模型组和给药组按2 mL.kg^-1腹腔注射10%CCl4造模。第11天,末次给药24 h后,取血,测定血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)及总胆红素(T-Bil),同时测体重、肝脏重、脾重和胸腺重,求脏器系数,并取肝组织作病理观察。结果:狭基线纹香茶菜可显著降低急性肝损伤大鼠血清ALT,AST,ALP水平和T-Bil含量,对肝重量增大和胸腺萎缩有抑制作用。病理检查结果也显示有明显的保肝作用。结论:狭基线纹香茶菜对CCl₄所致大鼠急性肝损伤有保护作用。     

黄珠子草有效成分短叶苏木酚及8,9-单环氧短叶苏木酚对大鼠肝损伤的保护作用

目的:探讨黄珠子草有效成分短叶苏木酚及8,9-单环氧短叶苏木酚保肝作用及机制。方法:SD大鼠ip四氯化碳(CCl ₄)或ig乙醇造成急性和慢性肝损伤,比色分析法检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸转移酶(AST)和总胆红素(TB IL)水平评价肝功能;分别用硫代巴比妥酸比色法和黄嘌呤氧化酶法测定血清、肝脏组织中丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性,并观察对血液流变学参数的影响。结果:短叶苏木酚和8,9-单环氧短叶苏木酚对CC l₄致ALT升高均有降低作用,对AST升高无明显影响;亦可拮抗乙醇诱致的大鼠血清TB IL的病理性升高;对肝损伤大鼠血清和肝脏MDA的升高、SOD活性的降低呈现出不同的改善作用;降低异常升高的血液流变学各项指标。结论:黄珠子草有效成分短叶苏木酚及8,9-单环氧短叶苏木酚对急慢性肝损伤具有保护作用,其机制与对抗自由基脂质过氧化及改善血液循环有关。     

灵芝多糖对小鼠腹腔巨噬细胞胞浆游离Ca2+浓度的影响

 目的:探讨灵芝多糖(GLP)对免疫细胞信号转导过程的影响?方法:采用激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)技术,动态监测GLP均一体组分GLB₇对小鼠腹腔巨噬细胞(MΦ)胞浆游离Ca²⁺浓度([Ca²⁺]i)的影响?结果:GLB₇(20μg·ml^-1)引起小鼠腹腔MΦ中[Ca²⁺]i明显升高,升高值为(248±18)%(n=6);GLB₇引起小鼠腹腔MΦ外钙内流及MΦ内IP₃敏感和IP₃非敏感钙池释放Ca²⁺,[Ca²⁺]i升高值分别为(76±10)%,(58±10)%,(41±8)%(n=6);GLB₇对MΦ[Ca²⁺]i的影响与K⁺通道及其引起的膜电位变化无关?结论:MΦ是灵芝多糖作用的靶细胞;GLB₇引起MΦ中[Ca²⁺]i快速升高,可能是灵芝多糖产生作用的重要途径?