天麻萌发菌胞外酶活性变化规律研究

目的:研究天麻萌发菌03、06菌株不同时期的胞外酶活性变化规律及菌株生长速度,为天麻有性繁殖优良萌发菌菌株筛选提供理论依据。方法:利用木屑-麦麸培养基培养菌株03和06,测量生长量,采用2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)法和3,5-二硝基水杨酸(DNS)法测定不同生长时期2种菌株胞外酶活性。结果:培养前期2种菌株生长速度逐渐增加,03菌株生长速度大于06菌株,后期2种菌株生长速度有所减缓。漆酶和木聚糖酶是天麻萌发菌生长过程中活性较强的胞外酶,06菌株木聚糖酶活性和淀粉酶活性均高于03菌株。结论:通过对2种菌株生长速度、胞外酶活性的比较和分析,初步认为03为优势菌株。     

灵芝菌发酵培养基的优化及灵芝胞外多糖的分离纯化

用正交法研究了不同条件对灵芝菌生长影响,从中选出了灵芝 菌液体深层发酵的优化 培养基：葡萄糖 3.6%,蛋白胨 0.4%,pH 6.0,酵母膏 0.2%,KH2PO40.1%,MgSO 4· 7H2O 0.05%,Vit B1 0.005%,每升发酵液产干菌丝体 15.6 g,粗多糖 0.72 g。 经葡 聚糖凝胶层析对灵芝胞外多糖进行了分离纯化,共有 5 个组分,并用红外光谱、紫外光谱 ,气相色谱等手段进一步分析了灵芝胞外多糖的组成,结果表明灵芝胞外多糖系由甘露糖、 果糖、葡萄糖通过糖 β-D 糖苷键构成。     

灵芝生长过程中灵芝多糖含量变化规律研究

目的：对灵芝人工袋料栽培生长过程中灵芝多糖的含量变化情况进行跟踪测量，研究灵芝多糖在灵芝生长过程中的含量变化规律。方法：采用硫酸一苯酚法对不同生育时期的灵芝培养基和子实体样品中灵芝多糖的含量进行测定，比较不同生育时期灵芝多糖含量的变化规律。结果：在灵芝培养基中，随着灵芝菌丝的生长和成熟，灵芝多糖的含量逐步增加，直到开伞期达到最高值，从孢子弹射期后，灵芝多糖含量急剧下降。在灵芝子实体中，从灵芝现蕾开始，灵芝多糖含量逐步增加，到孢子弹射前达到最高值，孢子弹射后，含量急剧下降。从子实体和培养基中灵芝多糖含量的对比情况来看，在孢子弹射前，子实体中灵芝多糖含量远高于培养基；但在孢子弹射后，子实体和培养基中灵芝多糖含量均急剧下降，二者的灵芝多糖含量没有极显著差异。结论：在灵芝生产中，应该选择在开伞期后、孢子弹射前采收子实体为宜。这时采收的灵芝子实体产品灵芝多糖含量最高，品质最好。将灵芝采收后的培养基用于灵芝多糖的提取，进行合理的开发利用，可以大力提高灵芝生产的经济效益。     

白参菌胞外多糖的研究

白参菌经深层发酵培养的滤液用乙醇沉淀获胞外粗多糖，ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２００柱层析分离纯化得胞外纯多糖。纯度经纸层析，柱层析，高效液相色谱分析证明为均一性多糖。胞外纯多糖酸水解物经纸层析，薄层层析表明它是由葡萄糖组成的一种葡聚糖。胞外纯多糖的紫外光谱分析２６０ｎｍ，２８０ｎｍ处均无吸收峰，表明不含核酸，蛋白质。经红外光谱、核磁共振氢谱分析提示具β－糖苷键。     

桑黄胞内及胞外多糖抗炎作甩的研究

目的 研究桑黄发酵产物中多糖的抗炎活性和免疫调节作用.方法 通过液体深层发酵技术获得桑黄菌丝体和发酵液,并从中提取胞内、外多糖PIP和PIE,采用小鼠耳肿胀、小鼠角叉菜胶足跖肿胀、小鼠棉球肉芽肿等实验模型观察其抗炎作用,同时检测桑黄多糖对致炎小鼠脾脏指数和胸腺指数的影响.结果 桑黄胞内、外多糖PIP和PIE能显著抑制二甲苯所致的小鼠耳肿胀,角叉菜胶所致小鼠足跖肿胀以及棉球肉芽肿的增生,并提高了致炎小鼠的脾脏指数和胸腺指数.结论 桑黄胞内、外多糖PIP和PIE均具有抗炎活性,同时在一定程度上提高了致炎小鼠的免疫能力.     

栽培灵芝生长周期内物质的变化规律及其机制研究

目的 研究灵芝生长周期内不同部位基质中物质量的变化规律,并通过基质中胞外酶活性变化规律初步探究基质中物质量变化的机制。方法 采用熟料袋式栽培灵芝,将灵芝的生长期分为8个阶段,并把基质4等分,研究不同部位基质中总糖、还原糖、水溶性蛋白和游离氨基酸量的变化规律;并通过各部位基质中木质素酶系（漆酶和锰过氧化物酶）、纤维素酶系（羧甲基纤维素酶、半纤维素酶和滤纸酶）和酸性蛋白酶活性变化规律探究不同部位基质中物质量变化的机制。结果 在灵芝的生长周期内,不同部位基质中总糖量呈下降趋势;还原糖量在出原基之前呈升高趋势,出原基之后降低;不同部位基质中水溶性蛋白质总体上呈升高趋势;基质中氨基酸量在菌丝满袋之前一直降低,菌丝满袋之后到菌蕾期其量升高,并在菌蕾期达到峰值,随后其量又呈下降趋势;不同部位基质中漆酶活性变化规律呈U字形,其活性在原基时期最低,锰过氧化物酶活性在营养生长期缓慢升高,菌丝满袋之后其活性下降;不同部位基质中纤维素酶系酶活性和酸性蛋白酶活性总体上呈升高趋势。结论 在灵芝生长周期内,各部位基质中物质量随着灵芝的生长发育呈现不同的变化规律;基质中灵芝胞外酶活性能够影响物质的量,即基质中的灵芝胞外酶活性与物质量具有一定的相关性。     

中国弯颈霉胞外多糖对小鼠免疫细胞影响的初步研究

目的:测定中国弯颈霉(Tolypocladium sinense)胞外多糖对体外小鼠免疫细胞功能的影响.方法:将中国弯颈霉在适宜的条件下进行培养,收集培养液并提取胞外多糖(EPS).采用细胞培养的方法测定EPS对体外培养的小鼠巨噬细胞、胸腺和脾脏淋巴细胞的影响.结果:EPS不仅能够显著提高小鼠巨噬细胞吞噬中性红的能力和对肿瘤细胞的杀伤能力(P＜0.05),而且还能显著促进小鼠胸腺淋巴细胞的增殖(P＜0.05),但EPS对体外培养的小鼠脾脏淋巴细胞的增殖没有显著影响.结论:胸外多糖EPS在一定程度上对小鼠的细胞免疫功能有增强作用.     

灵芝及灵芝多糖对造血的影响

《本草纲目》记载,灵芝无毒,益心气,入心充血,助心充脉,安神,益肺气,补中,增智慧,好颜色,利关节,坚筋骨,祛痰,健胃,活血等功效。灵芝多糖为其主要有效活性成分。有关灵芝及灵芝多糖临床应用减轻放化疗所致骨髓抑制,改善放化疗后实验动物骨髓造血功能,增加白细胞总数,提高存活率以及抗辐射的作用有很多报道,本文就灵芝及灵芝多糖对造血影响的基础研究与临床应用综述如下。     

红曲霉菌胞外多糖的抗肿瘤活性研究

目的:研究红曲霉胞外多糖(Exopolysaccharide,EPS)的抗肿瘤活性,为阐明红曲胞外多糖的药理作用和临床应用奠定基础。方法:红曲霉菌经液体发酵培养后,醇沉提取发酵液中的胞外多糖并测定其含量;建立H22荷瘤小鼠模型,以胞外多糖的抑瘤率、小鼠的相对生长率和各脏器指数为指标,研究红曲胞外多糖的抗肿瘤活性。结果:中剂量100mg/(kg.d)红曲胞外多糖给药组的药理作用比较明显,抑瘤率达到了44.95%。结论:红曲霉胞外多糖有抗肿瘤作用,并且与剂量相关,但不成正向线性比例关系,而在适当给药剂量时所表现的效果比较明显。     

金耳胞外多糖的结构分析

金耳Tremellaaurantialba系银耳科中名贵药食真菌,具有止咳化痰、补气养心、平肝益胃等功效[1,2]。金耳子实体多糖和菌丝体多糖的结构和药效均有报道[3～10],本实验对从发酵液中提取的胞外多糖进行了分离纯化并对其结构作了初步研究。1实验部分1.1仪器与药品:Biof-2050发酵罐(上海高机实业总公司生产);SYNDER-UF402型超滤装置(SYNDER美国);KA-1000型台式离心机(上海安亭科学仪器厂);玻璃色谱柱(1cm×50cm、1.5cm×60cm);HL-2恒流泵(上海精科实业有限公司制造);TH-1000梯度混合仪(上海沪西仪器厂);BSA-100自动分部收集器(上海长宁…     

桑黄胞内及胞外多糖对荷瘤小鼠减毒增效作用的研究

研究桑黄发酵产物中多糖对荷瘤小鼠的减毒增效作用。通过液体深层发酵技术获得桑黄菌丝体和发酵液,并从中提取胞内、外多糖PIP和PIE,并建立移植性S180肿瘤小鼠模型,分别观察环磷酰胺单用以及与桑黄发酵产物多糖联合应用时抑瘤率、胸腺指数、脾脏指数、体质量以及外周血细胞和IFN-γ含量的变化。结果表明桑黄发酵产物多糖可明显提高化疗小鼠的免疫功能,降低环磷酰胺的毒性,增强其抗肿瘤作用。     

灵芝中灵芝多糖的含量测定研究

灵芝为多孔菌科真菌赤芝Ganoderma lucidum(Leyss·ex Fr·)Karst·或紫芝Ganoderma sinenseZhao·Xu et Zhang的干燥子实体。其化学成分复杂,目前已知主要含有多糖(肽)类、三萜类、核苷类等[1]。灵芝多糖类具有抗肿瘤作用、免疫调节作用、降血糖、降血脂、抗氧化和抗衰老等作用,被认为是灵芝扶正固本的重要有效成分[2]。本研究建立了灵芝多糖的含量测定方法。本实验采用分光光度法,以葡萄糖为对照品,经硫酸蒽酮显色后测定其吸     

灵芝口服液中灵芝多糖含量测定方法研究

1　实验方法1.1　仪器与试剂751型分光光度计 (上海分析仪器厂 ) ;无水葡萄糖、蒽酮、浓硫酸均为分析纯。硫酸蒽酮试剂的配制 :取蒽酮 50ｍｇ ,加浓硫酸10 0ｍｌ使溶解即得 ,贮于棕色瓶中。临用新配。1.2　实验条件的选择(1)最大吸收波长的选择 :λｍａｘ =6 2 5± 1ｎｍ。(2 )加热时间的选择 :沸水中加热 6ｍｉｎ。(3)显色剂稳定性考察 :τ =30ｍｉｎ后保持稳定。1.3　实验方法1.3.1　对照溶液的制备　精密称取经 80℃干燥至恒重的无水葡萄糖 79.81ｍｇ于 10 0ｍｌ烧杯中 ,加热溶解 ,移至 10 0ｍｌ量瓶中 ,稀释至刻度 ,摇匀 ,即得。1.3.2　…     

红曲霉菌胞外多糖提取及抗氧化活性测定

目的：红曲霉菌胞外多糖发酵提取优化,测定红曲霉菌胞外多糖清除DPPH能力,分析红曲胞外多糖糖链组成。方法：取摇床转速150r/min和120r/min,收集96h,102h,108h,120h的除细胞发酵液,以1/4、1/2、2/3、1/1,浓缩比减压蒸馏去细胞发酵液,95%的酒精分级醇沉,收集15%、30%、50%、75%醇沉沉淀物,苯酚-硫酸法测多糖含量并计算多糖得率;测定各胞外多糖的DPPH清除能力。结果：摇床转速150r/min多糖得率较高,96h发酵的多糖得率明显高于其它发酵时间,1/4浓缩,红曲霉胞外多糖（Exopolysaccharide,Eps）分布最均匀,2/3浓缩提取胞外多糖量最多;75%醇沉多糖清除DPPH最强。结论：不同的浓缩比和发酵时间对红曲霉菌胞外多糖得率有明显的影响;红曲霉菌胞外多糖有清除DPPH能力,以75%醇沉多糖作用为主。     

红栓菌胞外多糖抗肿瘤及免疫药理作用

目的:考察红栓菌胞外多糖PPS2的抗肿瘤及免疫药理作用.方法:检查了PPS2对实验小鼠体内肉瘤S-180的抑制效果和对脾淋巴细胞的转化率,测定了NK细胞活性、IL-2水平以及EAC瘤株小鼠肿瘤坏死因子的含量.结果:红栓菌胞外多糖可对S-180的抑制率达到52.6%～72.4%,对静止脾淋巴细胞有一定的促进增殖作用,剂量为100μg·mL-1时刺激指数达到1.83,同时,PPS2还能够增加NK细胞活性、明显提高IL-2水平.结论:PPS2具有较理想的抗肿瘤作用,其抑瘤机制可能与免疫调节作用有关.     

灵芝多糖提取工艺研究

近年来，国内外在灵芝多糖的开发应用方面开展了不少工作，但是大多集中于多糖的纯化研究和结构分析，提取步骤多采用传统的水提醇沉法，多糖收率较低。本文考察了提取过程中浸提料液比、提取温度、浸提时间、酸碱盐介质浓度，以及脱盐方法等对提取灵芝多糖纯度和得率的影响，以期优化提取工艺条件，为灵芝产品的开发提供了有益的参考。     

灵芝多糖的含量测定研究

以苯酚-硫酸法对灵芝多糖含量进行测定，并用正交试验设计选择最佳显色条件，该法灵敏度高，重现性好，平均回收率为99.1％，RSD＝1.23％（n＝5）。     

3种灵芝多糖的研究

 目的对3种灵芝多糖的含量、单糖组成和糖蛋白含量进行研究。方法提取和纯化灵芝子实体、菌丝体和发酵液多糖,应用高效液相色谱法和凯氏定氮法对多糖的含量、单糖组成及糖蛋白质含量作了分析、比较。结果3种灵芝多糖含量分别为：子实体含0.75%;菌丝体含2.13%;发酵液含0.982 g·L^-1。3种多糖均由葡萄糖、果糖组成,这两种单糖在子实体和菌丝体多糖中的摩尔比相同,为7∶1;在发酵液多糖中的摩尔比为2∶1。3种灵芝多糖中糖蛋白含量分别为：子实体多糖含12.22%;菌丝体多糖含26.62%;发酵液多糖含2.92%。结论研究结果为综合开发利用灵芝提供了科学依据。     

灵芝肽多糖的化学研究

从灵芝子实体不提取物中分得２种葡聚糖肽ＧＬＳＰ２及ＧＬＳＰ３，凝胶层及高效液相层析法证明均为单一的多糖均一体，测得分子量分别为１２８００及１４１００。完全酸水解、过碘酸盐氧化、Ｓｍｉｔｈ降解，光谱分析、气相色谱及甲基化分析证明，ＧＬＳＰ２为含有β－（１→３）（１→６）及（１→４）甙键的葡聚糖肽，肽的含量占２６．６％；ＧＬＳＰ３为含有β（１→６）及（１→４）甙键的葡２种葡聚糖肽的糖基与肽键中的丝氨酸