弥散加权磁共振扫描评价川芎嗪对局灶性脑缺血损伤保护作用的实验研究

目的 用弥散加权磁共振技术评价川芎嗪(tetramethylpyrazine,TMP)对大鼠局灶性脑缺血损伤的保护作用。方法 采用局灶性脑缺血模型,将16只雄性SD大鼠,随机分为对照组和实验组(TMP组),每组8只,分别在缺血前腹腔注射生理盐水和TMP。行弥散加权(diffusion—weighted imaging,DWI)磁共振(magnetic resonance imaging,MRI)系列扫描,观察缺血后1、2、6、12、24h脑梗死灶变化,以及24h三苯四氯氮唑(TTC)染色的脑梗死容积。结果TMP组各时间点DWI—MRI扫描脑梗死容积明显小于对照组(P<0．01)。与1h点相比,对照组脑梗死容积在栓塞后2、6、12、24h分别扩大13．3％、29．7％、50．3％、57．3％,TMP组扩大9．9％、21．3％、37．1％、40．5％。缺血24hTTC测算的脑梗死容积大于DWI—MRI测算的脑梗死容积。结论 缺血前注射TMP对大鼠局灶性脑缺血损伤具有作用;采用DWI—MRI扫描动态观察脑缺血灶的演变过程和评价脑保护措施的作用,具有重要的意义。     

缺血再灌注大脑皮质区微血管、神经元的损伤及补阳还五汤干预作用

目的研究沙鼠脑缺血再灌注损伤后大脑皮质区微血管、神经元的变化及补阳还五汤干预作用。方法 45只雄性长爪沙鼠随机分成假手术组、模型组、补阳还五汤预处理组,每组15只。采用Kirino法制作脑缺血再灌注损伤模型。单宁酸-氯化铁法观察微血管形态、微血管密度(MVD)、微血管面积比(MVA),电子显微技术观察血脑屏障超微结构,HE染色法观察神经元形态、神经元密度(ND)。结果与假手术组比较,模型组沙鼠大脑皮质微血管大量闭合、僵直,MVD、MVA明显减少(P<0.05);电镜观察可见微血管周围重度水肿,管腔受压,狭窄、闭塞,管壁迂曲不平,多处基膜片状溶解、断裂,血管周围出现大片电子空白区;HE染色,大脑皮质存活神经元减少,ND降低(P<0.05)。补阳还五汤预处理组沙鼠大脑皮质微血管数量较模型组沙鼠增多,闭塞微血管数量减少,MVD、MVA明显高于模型组沙鼠(P<0.05);血脑屏障、神经元损伤减轻,ND较模型组增加(P<0.05)。结论补阳还五汤预处理可能通过防止微血管因缺血闭塞,增强微血管再通能力,增加脑组织有效血流量,抑制血脑屏障和神经元损伤来保护脑组织。     

宝灵膏对沙鼠脑缺血再灌注损伤的影响

目的 观察宝灵膏对蒙古沙鼠脑缺血再灌注损伤脑组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)表达的影响及是否存在剂量依赖性.方法 采用双侧颈总动脉阻断的方法建立沙鼠脑缺血再灌注损伤模型.沙鼠随机分为假手术组、模型组、宝灵膏高剂量治疗组、宝灵膏中剂量治疗组、宝灵膏低剂量治疗组.采用比色法测量脑组织中SOD、MDA的含量,采用免疫组织化学法检测Bcl-2的阳性细胞数.结果 宝灵膏各剂量治疗组SOD、MDA、Bcl-2与模型组差异明显,宝灵膏高、中剂量组SOD、MDA、Bcl-2与低剂量组亦有明显差异,与假手术组相近.结论 宝灵膏能促进在沙鼠脑缺血再灌注损伤中对抗氧自由基损伤的SOD的表达、降低MDA的表达、上调Bcl-2的表达,从而起到对抗氧自由基对脑组织的损伤及抑制脑神经细胞的凋亡和坏死的作用,并且其作用具有剂量依赖性.     

宝灵膏对沙鼠缺血再灌注损伤脑梗死面积及神经细胞凋亡的影响

目的 探讨宝灵膏对蒙古沙鼠脑缺血再灌注损伤脑组织梗死面积和神经细胞凋亡的影响及该影响是否存在剂量依赖性.方法 采用双侧颈总动脉阻断的方法 建造沙鼠脑缺血再灌注损伤模型.沙鼠随机分为假手术组、模型组、宝灵膏高剂量组、宝灵膏中剂量组、宝灵膏低剂量组.采用TTC染色法测腩组织梗死面积,采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL)检测脑组织凋亡神经细胞.结果 宝灵膏高、中剂量组TTC染色法测脑组织梗死面积与模型组比较差异显著,与假手术组无统计学意义;低剂量组测得梗死面积与模型组、假手术组比较差异显著.宝灵膏高、中剂量组采用TUNEL法检测脑组织凋亡神经细胞数与模型组比较有差异,与假手术组相近;宝灵膏低剂量组测得凋亡神经细胞数与模型组、假手术组比较有差异.结论 宝灵膏能减轻沙鼠脑缺血再灌注损伤后脑组织梗死面积,抑制脑神经细胞的凋亡,并且其作用具有剂量依赖性.     

熄风通络法与益气活血法对沙土鼠脑缺血神经细胞凋亡的影响

目的比较熄风通络法与益气活血法对沙土鼠脑缺血神经细胞凋亡的影响。方法结扎沙土鼠单侧颈总动脉,造成局灶脑缺血,分别给予熄风通络药物与益气活血药物治疗,于缺血后6h、48h检测神经细胞凋亡程度。结果缺血48h后,模型组沙鼠海马区出现明显神经细胞凋亡,而熄风通络组与益气活血组凋亡神经细胞明显减少,且熄风通络组减少明显优于益气活血组(P’0.05)。结论熄风通络法改善沙鼠脑缺血后神经细胞凋亡作用优于益气活血法。     

头针联合川芎嗪对脑缺血再灌注模型大鼠脑组织MyD88和皮层神经元损伤的影响

目的:观察头针联合川芎嗪(TMP)对脑缺血再灌注模型大鼠神经功能缺损、脑梗死体积、皮层神经元损伤及MyD88表达的影响,探讨头针联合川芎嗪对脑缺血再灌注模型大鼠的脑保护作用及可能的作用机制。方法:165只大鼠随机分为假手术组(A组)、模型组(B组)、头针组(C组)、TMP组(D组)、头针+TMP组(E组)五组。每组根据再灌注时间分为IR1d(n=13)、IR3d(n=10)、IR7d(n=10)三亚组。采用改良的Zea Longa线栓法,制备右侧大脑中动脉缺血2 h再灌注(MCAO/R)大鼠模型;A组不中断大脑中动脉血流。C组和E组大鼠在右侧头部百会至曲鬓穴线进行透刺治疗;D组和E组分别给予腹腔注射TMP 20 mg/kg/次,每日一次。各组大鼠相应时间点进行神经功能评分测定;TTC染色检测再灌注1 d大鼠脑梗死体积;HE染色观察皮层神经元损伤及炎性细胞浸润情况;免疫组化、Western blot技术检测各组大鼠缺血侧脑组织MyD88表达水平。结果:E组大鼠在再灌注1 d、3 d、7 d,神经功能缺损程度均较其余四组明显减轻(P0.05)。在再灌注1 d,E组大鼠相对脑梗死体积最小,与其余四组比较有统计学差异(P0.05)。再灌注各个时间点,E组大鼠缺血侧皮层神经元损伤程度及炎性细胞浸润情况均较其余四组明显减轻;且缺血侧脑组织中MyD88阳性细胞数和相对蛋白含量均较其余四组明显降低(P0.05)。结论:头针联合川芎嗪治疗可显著改善MCAO/R大鼠神经功能缺损,减少梗死体积,减轻皮层神经元损伤、炎性细胞浸润,具有脑保护作用,其机制可能与抑制缺血侧脑组织中MyD88蛋白表达、降低脑缺血再灌注后的炎症级联反应有关。     

脑泰方提取物预处理对脑缺血再灌注沙土鼠海马神经元的影响

目的 :探讨脑泰方提取物预处理减轻沙土鼠脑缺血再灌注损伤的作用。方法 :采用钳夹双侧颈总动脉建立沙土鼠脑缺血模型 ,将 6 5只沙土鼠随机分为假手术组 ,脑缺血再灌注损伤组 (IR组 )、脑缺血预处理组 (IPC组 )、脑泰方提取物预处理组 (NPC组 ) ,根据再灌注不同时间 (2 4、4 8、72h和 7天 )。将IR组、IPC组、NPC组各分 4个亚组 (n =5 )。观察各时相沙鼠海马CA1区神经元状况 ,海马CA1区存活神经元数目。结果 :(1)IPC组、NPC组与IR组同期比较 ,海马CA1区存活神经元数目明显增多 (P <0 .0 5 ) ,脑组织结构明显改善 ;(2 )各组不同时相比较 :随着再灌注时间延长 ,海马CA1区存活神经元数目逐渐减少 ,至第 7天达最低 ;(3)药物预处理组与缺血预处理组比较 :海马CA1区存活神经元数目差异无显著性意义 (P >0 .0 5 )。结论 :脑泰方提取物预处理具有抑制沙土鼠脑缺血再灌注损伤的作用     

葛根素固体脂质纳米粒保护长爪沙鼠脑缺血-再灌注损伤的分子机制初探

目的:探讨葛根素固体脂质纳米粒灌服给药对长爪沙鼠脑缺血-再灌注损伤的保护作用及其分子机制,为葛根素固体脂质纳米粒口服新剂型应用提供初步实验依据。方法:将长爪沙鼠随机分成假手术组、脑缺血-再灌注损伤模型组、葛根素固体脂质纳米粒组和葛根素注射液对照组,采用夹闭双侧颈总动脉的方法制作长爪沙鼠前脑缺血-再灌注损伤模型,应用HE染色及免疫组织化学法观察脑组织形态学变化及Bcl-2、Caspase-3和HSP70的蛋白表达变化。结果:脑缺血-再灌注24 h后,与模型组比较,葛根素固体脂质纳米粒组脑组织病理变化改善,在海马区和皮质区Bcl-2及HSP70阳性细胞表达显著升高(P0.01),而Caspase-3阳性细胞表达比模型组显著降低(P0.01);葛根素注射剂对照组脑保护作用结果及机制与葛根素固体脂质纳米粒组结果一致。结论:葛根素固体脂质纳米粒口服给药可通过诱导HSP70及Bcl-2蛋白水平高表达并同时降低Caspase-3蛋白表达对脑缺血-再灌注损伤起保护作用。     

补阳还五汤对前脑缺血再灌注损伤沙鼠p38MAPK/神经细胞凋亡通路的影响

目的:探讨补阳还五汤注射对脑缺血再灌注损伤的治疗作用及机制。方法:88只雄性蒙古沙鼠随机分成对照组、模型组和补阳还五汤高剂量组(51.48mg/kg)、低剂量组(25.74mg/kg)。Kirino的方法制作沙鼠前脑缺血模型。术后1、6h,1d、3d、7d尼氏染色观察海马区神经细胞组织形态变化,免疫组化法和Western-Blot法检测海马区磷酸化p38MAPK和Caspase-3蛋白的表达,TUNEL法检测凋亡细胞,术后7～13d八臂迷宫法测试动物学习记忆功能。结果:与对照组比较,脑缺血后海马神经元结构损伤明显、磷酸化p38MAPK表达水平、Caspase-3蛋白表达、凋亡神经细胞数量增加;大鼠的习记忆功能下降;与模型组比较,补阳还五汤组中大鼠的习记忆功能得到改善、神经元形态结构损伤减轻、磷酸化p38MAPK蛋白、Caspase-3蛋白以及神经细胞凋亡数量回降,上述变化在高剂量补阳还五汤组更为明显。结论:补阳还五汤对脑缺血再灌注损伤有治疗作用,其机制与调控p38MAPK信号通路,抑制神经细胞凋亡有关。     

刺五加提取物对实验性急性脑缺血的保护作用

目的 观察刺五加提取物对急性脑缺血大鼠和沙鼠脑毛细血管通透性、脑指数及脑含水量的影响。方法 用结扎双侧颈总动脉法建立动物急性脑缺血模型，股静脉iv伊文思蓝和测脑组织干重的方法观察刺五加提取物对急性脑缺血大鼠和沙鼠脑毛细血管通透性、脑指数及脑含水量的影响。结果 刺五加提取物对急性脑缺血大鼠和沙鼠脑毛细血管通透性、脑指数及脑含水量都有非常明显的降低作用。结论 刺五加提取物对实验性脑缺血有保护作用，且明显优于刺五加注射液。