碳源、氮源和磷源对西洋参悬浮细胞生物量和活性成分积累的影响

 目的研究碳源、氮源和磷源对西洋参悬浮细胞生长,人参皂苷Re,Rb1以及西洋参多糖合成的影响。方法利用组织培养技术结合高效液相色谱法和紫外分光光度法,通过改变培养基碳源种类、氮源和磷源浓度,研究其对西洋参悬浮细胞生长,人参皂苷Re,Rb1以及西洋参多糖含量的影响。结果添加40g·L^-1蔗糖的细胞干重生长率最大,加入30g·L^-1蔗糖得到的人参皂苷Re、Rb1和多糖的含量最高,分别为0.531%,0.145%和3.62%。本实验保持氮源浓度60mmol·L^-1,当培养基中全部为NO₃^-时,细胞干重生长率最低,而人参皂苷Re、Rb1和多糖含量最高,分别为对照组的2.40,1.96和4.41倍。添加5.00mmol·L^-1的KH₂PO₄,细胞干重生长率最大。当培养基中KH₂PO₄浓度为0.63mmol·L^-1时,人参皂苷Re、Rb1和多糖的含量最高。结论本实验确定了西洋参细胞悬浮培养的最佳碳源种类、氮源比例和磷源浓度,表明不同碳源、氮源和磷源对西洋参细胞生长和活性成分有显著影响。     

UPLC-MS/MS同时检测人参健脾丸和人参归脾丸中非法添加西洋参

目的 建立一种可同时测定人参归脾丸和人参健脾丸中非法添加西洋参的超高效液相色谱串联质谱法（UPLC-MS/MS）检测方法。方法 用80%甲醇回流提取制备供试品溶液,使用Waters ACQUITY UPLC HSS T3 C₁₈色谱柱（100 mm×2.1 mm,1.8 μm）,乙腈-水为流动相进行梯度洗脱,流速为0.35 mL·min^–1,柱温为40 ℃,采用电喷雾离子源、多反应监测模式、负离子方式进行扫描。结果 拟人参皂苷F₁₁在5.025~100.500 ng·mL^–1线性关系良好（r=0.998 5）,重复性RSD为1.4%,拟人参皂苷F₁₁在人参归脾丸和人参健脾丸中的回收率分别为97.71%、97.64%,检出限为1 ng·mL^–1,定量限为3 ng·mL^–1。结论 建立的方法灵敏度高、实用性强,可作为人参归脾丸和人参健脾丸中非法投入西洋参的补充检验方法。     

三七皂苷R1和人参皂苷Rg1的大鼠在体肠吸收动力学研究

 目的研究三七皂苷R₁和人参皂苷Rg₁在大鼠胃肠道的吸收动力学,并考察不同的药物浓度和常用的吸收促进剂对其吸收速率的影响。方法进行大鼠在体肠循环实验,研究三七皂苷R₁和人参皂苷Rg₁在胃肠道的吸收情况,并分别考察十二烷基硫酸钠、卡波姆和冰片对吸收的促进作用。结果三七皂苷R₁在胃、十二指肠、空肠、回肠的吸收速率分别为0.056,0.114,0.076,0.085 h^-1,人参皂苷Rg1则为0.052,0.121,0.065,0.055 h^-1;三七皂苷R₁在低、中、高3个浓度下的吸收速率分别为0.122,0.095,0.090 h^-1,人参皂苷Rg1则为0.117,0.113,0.109 h^-1;对不同种类和不同浓度的十二烷基硫酸钠、卡波姆和冰片的促吸收结果进行统计学检验,结果卡波姆和冰片能显著提高肠吸收速率,而十二烷基硫酸钠则没有作用。结论三七皂苷R₁和人参皂苷Rg₁在小肠上段吸收速率较大,而在胃中吸收速率较小;其吸收速率随着浓度的增加而逐渐减小,药物在小肠中的吸收不呈现一级动力学过程,吸收机制除了被动扩散以外,可能还有易化扩散和主动转运;卡波姆和冰片对它们在小肠的吸收有显著促进作用。     

吉林产西洋参的皂苷成分研究

目的 :研究吉林产西洋参根中的皂苷成分。方法 :西洋参根的甲醇提取物用氯仿和正丁醇萃取 ,正丁醇萃取物经硅胶和RP-8反相硅胶反复柱层析分离 ,得到纯化合物。通过谱学分析鉴定其结构。结果 :分离得到 10个单体皂苷 ,分别鉴定为 24(R)-假人参皂苷RT₅ ( 1) ,人参皂苷Rg₁( 2 ) ,20 (R)-人参皂苷Rg₃( 3 ) ,24(R) 假人参皂苷F₁₁( 4 ) ,人参皂苷Re( 5) ,三七皂苷K( 6) ,人参皂苷Rd( 7) ,人参皂苷Rc( 8) ,人参皂苷Rb₁( 9) ,以及人参皂苷Rb₂(10)。结论 :对吉林产西洋参的皂苷成分进行了较系统的化学研究 ,分离鉴定 10个单体皂苷 ,其中 ,化合物 1为首次从西洋参中分离得到。     

HPLC同时测定薏仁肠肽胶囊中人参皂苷Rg1和三七皂苷R1含量

目的: 采用反相高效液相色谱法测定薏仁肠肽胶囊中人参皂苷Rg₁和三七皂苷R₁含量。 方法: 采用色谱柱为Agilent ZE-C₁₈柱(4.6 mm ×250 mm,5 μm),以乙腈-水(17 ∶83)为流动相,流速为1.0 mL·min^-1,检测波长为203 nm。 结果: 人参皂苷Rg₁在0.4~10.1 μg呈良好的线性关系,r=0.999 8,三七皂苷R₁在0.1~2.5 μg呈良好的线性关系, r =0.999 8,人参皂苷Rg₁平均回收率99.96％ ,RSD为0.25％,三七皂苷R₁平均回收率100.03％,RSD为0.23％。 结论: 本法可同时测定薏仁肠肽胶囊中人参皂苷Rg₁和三七皂苷R₁含量,方法可靠、准确。     

血塞通滴丸的质量标准研究

目的:制定血塞通滴丸的质量标准。方法:以薄层色谱(TLC)法进行定性鉴别,以高效液相色谱(HPLC)法测定人参皂苷Rg₁、人参皂苷Rb₁和三七皂苷R₁,采用C₁₈柱,流动相为乙腈-水系统梯度洗脱,检测波长:203nm,流速:1.0mL·min^-1,柱温:室温。结果:TLC法可以很好地鉴别滴丸中的主要成分;HPLC法测定人参皂苷Rb₁、人参皂苷Rg₁的线性范围为0.2～1.0μg,三七皂苷R₁的线性范围为0.1～0.5μg。其总平均回收率为97.93%。结论:方法可行,重复性好,可用于血塞通滴丸的质量控制。     

转基因西洋参冠瘿组织中人参皂苷类成分的分离鉴定

 目的分离鉴定转基因西洋参冠瘿组织中的化学成分。方法以本研究组转导和培养的西洋参冠瘿组织为实验材料,体积分数为70%乙醇超声提取,硅胶柱色谱分离,用MS,¹H-NMR、¹³C-NMR、HMBC等谱学方法确定结构。结果分离得到5个化合物,分别为20(S)-人参皂苷Rh₁(Ⅰ)、20(S)-人参皂苷Rg₃(Ⅱ)、人参皂苷Re(Ⅲ)、20(S)-达玛烷-3β,6α,12β,20,25-五醇-6-O-α-L-鼠李吡喃糖基-(1→2)-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(Ⅳ)和人参皂苷Rg₁(Ⅴ)。结论上述5个成分均为首次从转基因西洋参冠瘿组织培养物中分离得到,化合物Ⅳ为新天然产物。     

吉林人参根和根茎的化学成分研究

采用Amberlite XAD-4大孔吸附树脂和硅胶柱色谱以及高效液相色谱等方法系统性研究人参根和根茎的化学成分;通过谱学数据分析鉴定化合物的结构。从人参根和根茎的70%乙醇提取物中分离得到28个皂苷类化合物,分别鉴定为高丽人参皂苷R₁(1),人参皂苷Rg₁(2),人参皂苷Rf(3),三七皂苷R₂(4),人参皂苷Rg₂(5),三七皂苷Fe(6),吉林人参苷醇(7),人参皂苷Re₅(8),三七皂苷N(9),三七皂苷R₁(10),人参皂苷Re₂(11),人参皂苷Re₁(12),人参皂苷Re(13),人参皂苷Rs₂(14),人参皂苷Ro甲酯(15),人参皂苷Rd(16),人参皂苷Re₃(17),人参皂苷Re₄(18),20-葡萄糖基-人参皂苷Rf(19),人参皂苷Ro(20),人参皂苷Rc(21),西洋参皂苷R₁(22),人参皂苷Ra₂(23),人参皂苷Rb₁(24),人参皂苷Ra₁(25),人参皂苷Ra₃(26),人参皂苷Rb₂(27),三七皂苷R₄(28)。所有化合物均系20(S)-原人参二醇型或原人参三醇型皂苷。化合物1为首次从吉林栽培人参根和根茎中分离得到;化合物6为首次从人参根和根茎中分离得到;并首次对化合物6,14,19的氢谱信号进行了归属。     

HPLC测定片仔癀中4种成分的含量

 目的建立测定片仔癀中三七皂苷R₁、人参皂苷Rg₁、人参皂苷Rb₁及牛磺胆酸钠的含量。方法采用Hypersil BDSC₁₈(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:乙腈(A)-0.5%磷酸溶液(B)梯度洗脱:0～40 min(20%A～40%A),40～90 min(40%A～90%A),90～100 min(90%A);柱温:30℃;流速:1.0 mL·min^-1;检测波长:203 nm。结果测得三七皂苷R₁、人参皂苷Rg₁、人参皂苷Rb₁及牛磺胆酸钠的回收率分别为100.3%,101.6%,103.3%,100.6%。线性范围分别是:三七皂苷R₁ 0.346 4～8.66μg(r=0.9963),人参皂苷Rg₁ 0.432 2～10.805μg(r=0.9964),人参皂苷Rb10.4224～10.56μg(r=0.9999),牛磺胆酸钠0.448～11.2μg(r=0.999 6)。结论采用高效液相色谱梯度洗脱能将片仔癀中的皂苷及胆汁酸较好的分离检测,方法准确可靠,重复性好,结果稳定,可作为该产品质量控制的方法。     

西洋参叶中 20（s）-人参皂苷-Rh1，-Rh2和人参皂苷-Rh3的分离与鉴定

 目的:从西洋参叶中分离、鉴定20(s)-人参皂苷-Rh₁,-Rh₂和人参皂苷-Rh₃,为了深入研究它们的生理活性,方法:以水提取,用多孔树脂吸附,再以体积分数为95%的乙醇洗脱,最后以硅胶柱层析分离。通过理化性质及IR,NMR光谱等方法测定,鉴定其结构。结果:共分得3个化合物,经鉴定后分别证明为20(s)-人参皂苷-Rh₁,-Rh₂,和人参皂苷-Rh₃。结论:人参皂苷-Rh₃为首次从西洋参叶中分离获得。     

黄芪、三七和西洋参中多种有机氯农药残留量分析

目的 :测定黄芪、三七和西洋参中15种有机氯农药残留量。方法 :样品经混合溶剂超声提取、Florisil硅土柱层析净化后 ,采用毛细管气相色谱 电子捕获检测器分析被测农药。结果和结论 :2水平的平均加标回收率在 77.30 %～130.1% ,RSD为0.75 %～31.9%。各被测样品中均含有机氯农药残存。     

基于SNP双峰法的人参花 西洋参花 三七花及其混合物的快速鉴定

目的:建立人参花、西洋参花、三七花及两两之间混合物的快速鉴定方法。方法:收集市售人参花、西洋参花和三七花共计22份,获取样品内转录间隔区2(ITS2)序列。通过数据比对发现,在19~47 bp存在这3种花的单核苷酸多态性(SNP)位点,据此建立混合粉末的双峰法检测方法,判断混合物的物种组成。结果:市售22份商品的DNA条形码序列经BLAST鉴定均为正品,但经SNP位点分析发现,有2份西洋参花样品(S1和S7)SNP位点处出现双峰[胸腺嘧啶(T)/胞嘧啶(C)]、(C/T),判断掺杂有人参花。结论:SNP双峰法可以作为BLAST分析的补充手段,应用于混合物的鉴定,为花茶类产品的市场监管提供参考。     

Quantitative Analysis of Eight Ginsenosides in Red Ginseng Using Ginsenoside Rg1 as Single Reference Standard

Objective: To develop a reversed?phase high?performance liquid chromatography method for the quantification of major ginsenosides in red ginseng (RG, the steamed and dried root of the cultivar of Panax ginseng C. A. Mey). Methods: A feasible method was developed in strict accordance with chromatographic properties of eight ginsenosides. Their contents could be unveiled with conventional external standard method, or as an alternative, using ginsenoside Rg1 as the single reference standard by means of seven conversion factors. Those parameters had been validated on different chromatographic columns and instruments. Results: Twenty-one batches of RG samples were determined. In addition, the chromatograms of RG and confusing species, including Panax ginseng, Panax quinquefolium, and Panax notoginseng, were apparently different. Conclusions: The method was proved to be efficient for the quality control of RG.     

三七及其混淆品的HPLC指纹图谱鉴定

目的：建立三七及其混淆品的指纹图谱鉴定方法。方法：采用HPLC方法，测定三七、人参、西洋参、姜状三七、三七不同部位及其2种混淆品的指纹图谱。结果：三七与人参、西洋参、姜状三七及其2种混淆品的指纹图谱有明显区别，三七不同部位也有差异。结论：HPLC皂苷指纹图谱鉴别三七及其混淆品具有重复性好、特征性强、方法简便等特点，可作为三七药材的鉴别方法。     

三七及其混淆品蛋白多肽高效毛细管电泳法鉴别

目的：对三七及其混淆品进行蛋白多肽电泳鉴别。方法：采用高效毛细管电泳法对三七及其混淆品蛋白多肽进行分析。结果：三七及其混淆品蛋白多肽高效毛细管电泳谱图有明显的差异。结论：高效毛细管电泳可作为中药三七的生药鉴别方法。     

利用多重等位基因特异PCR鉴别人参、西洋参

目的：查找并发现参类药材的SNP位点,利用多重等位基因特异PCR同时鉴别人参、西洋参。方法：查找GenBank上已收载的参类药材序列,进行比对分析,根据人参、西洋参的SNP位点设计引物,对PCR反应体系进行优选。在此基础上,对20个不同来源的人参、西洋参样品进行PCR扩增,根据各自的特异条带进行鉴别。结果：当退火温度为66 ℃时,出现249 bp条带的为人参,1 049 bp条带的为西洋参。该鉴别反应特异性高、重复性好,能在同一反应中准确鉴别人参、西洋参。结论：多重等位基因特异PCR能成功地对人参、西洋参进行鉴别,在中药材分子鉴定中具有推广应用价值。     

三七不同炮制品中皂苷类成分的含量比较

目的:建立一种RP-HPLC同时测定三七中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、Rb1、Re含量的分析方法,并比较不同炮制品中这4种成分含量的异同。方法:采用高效液相色谱法。色谱条件:色谱柱:Ultimate XB-C18(250mm×4.6 mm,5μm);柱温:25℃;流动相:乙腈-水梯度洗脱;检测波长:203nm。.结果:蒸三七中三七皂苷R1的平均含量为0.806%、Rg1为3.18%、Re为1.00%、Rb1为0.998%,高于相应生三七和油炸三七中相应的成分;其中,生三七中上述成分的含量分别为0.747%、3.24%、0.961%、0.977%,油炸三七中分别为0.765%、2.84%、0.860%、0.847%。结论:三七不同炮制品中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、Rb1、Re的含量存在差异;炮制对三七皂苷类成分的含量有影响。     

大鼠肠道菌群对三七总皂苷体外降解的研究

目的探究雌、雄大鼠肠道菌群对三七总皂苷中3种皂苷(三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1)的体外降解作用。方法将三七总皂苷分别与雌、雄大鼠肠道菌群孵育液在厌氧条件下共同培养24 h,测定不同时间点孵育液中3种皂苷的量。结果雌、雄大鼠肠道菌群对人参皂苷Rb1均有降解作用,雄鼠的降解较雌鼠稍快。雌、雄鼠肠道菌群对三七皂苷R1和人参皂苷Rg1均无明显降解作用。结论在离体条件下,三七总皂苷中人参皂苷Rb1会被肠道菌群降解,而三七皂苷R1和人参皂苷Rg1则较为稳定。     

HPLC-ELSD及紫外分光光度法测定三七中皂苷的含量

采用反相高效液相色谱蒸发激光散射检测器测定三七中人参皂苷Rg1的含量。色谱柱为CLC-ODS(6．0mm×150mm),流动相为乙腈-水(3070),蒸发激光散射检测器。定量方法简单,准确。回收率为100．50％,RSD为1．82％。并用紫外分光光度法测定了三七中总皂苷的含量,结果和HPLC法基本一致,说明该方法定量准确,回收率为101．50％,RSD为1．44％。结论认为两方法均可以控制三七的质量。     

HPLC法测定人参提取物中人参皂苷Re和人参皂苷Rg1的含量

目的研究高效液相色谱法测定人参提取物中人参皂苷Re和人参皂苷Rg1。方法采用反相高效液相色谱法,KNAUER-C18(250mm×4.6mm,5μm)柱,乙腈:1%磷酸溶液(20:80)为流动相,流速为1.0ml·min-1,检测波长203nm,柱温为30℃,进样量10μl。结果人参皂苷Re和人参皂苷Rg1的平均回收率分别为100.2%和98.8%。结论该方法简便、准确、重复性好,可用于人参提取物中人参皂苷Re和人参皂苷Rg1的含量测定。