HPLC法测定苗药雷山石杉中石杉碱甲的含量

目的采用HPLC法测定苗药雷山石杉中石杉碱甲的含量。方法采用ZORBAXSB—C18色谱柱（150mm×4．6mm，5μm），流动相：0．02mol·L-1磷酸二氢钾-乙腈（92：8），检测波长：310nm，流速1mL·min-1，柱温25℃。结果石杉碱甲在0．01～0．20μg之间与峰面积呈良好线性关系（r=0．99991），平均回收率为99．70％，RSD为0．25％。结论首次对苗药雷山石杉中石杉碱甲的含量进行测定，该方法易行、灵敏、准确。     

HPLC法测定6种石杉科植物中石杉碱甲的含量

目的 测定6种石杉科植物中石杉碱甲的含量。方法 用2％酒石酸溶液提取总碱，HPLC法测定，外标法定量。结果 石杉碱甲在所测定的5种石杉科植物蛇足石杉、皱边石杉、四川石杉、金丝条马尾杉、柳杉叶马尾杉中均有较高分布，分别达到0．0481％，0．0579％，0．0706％，0．0345％，0．1961％，在闽浙马尾杉中含量较少，仅为0．0061％。结论 方法简便、准确，可用于石杉碱甲资源的寻找。     

不同产地皱边石杉中石杉碱甲的含量研究

目的 :采用HPLC测定湖南不同产地皱边石杉中的石杉碱甲含量。方法 :采用NovapakC18柱 ( 5 μm ,15 0mm×4 .6mm) ,流动相 :甲醇∶水 ( 4 0∶6 0 ) ,流速 :1mL·min-1,检测波长 :315nm。结果 :石杉碱甲在 4 .2～ 2 1μg·mL-1范围内与峰面积呈良好的线性关系 ,桑植产皱边石杉中石杉碱甲含量最高。结论 :皱边石杉中石杉碱甲的含量随着外界环境的改变而改变 ,所建立的HPLC方法快捷、灵敏、准确。     

高效液相色谱法测定昆明石杉中石杉碱甲的含量

目的 采用高效液相色谱(HPLC)法测定昆明石杉中石杉碱甲的含量.方法 采用ZORBAX SB-C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5 μm),流动相:0.02mol·L-1磷酸二氢钾-乙腈(92:8),检测波长:310 nm.结果 石杉碱甲在0.015～0.048μg之间与峰面积呈良好线性关系(r=0.999 95),平均回收率为99.63%,RSD为0.56%.结论 首次对昆明石杉中石杉碱甲的含量进行测定,该方法易行、灵敏、准确.     

HPLC法同时测定17种石杉亚科植物石杉碱甲、乙

目的建立HPLC法同时测定17种(含2待发表新种)石杉亚科植物中石杉碱甲(huperzine A)和石杉碱乙(huperzine B)的含有量。方法石杉碱甲、乙酒石酸提取液的分析采用Wondasil C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);以甲醇-醋酸铵溶液为流动相,等度洗脱;体积流量1.0 mL/min;检测波长310 nm;柱温室温。外标法定量。结果石杉碱甲、乙分别在0.002 0~0.30μg、0.001 8~0.27μg范围内线性关系良好(r=0.999 9),平均加样回收率、RSD分别为103.86%(1.85%)、101.3%(1.30%)。17种石杉亚科植物中都含有石杉碱甲、乙,各物种之间含有量有显著性差异;喜马拉雅马尾杉中石杉碱甲含有量最高,达0.22%,柳杉叶马尾杉、有柄马尾杉和马尾杉含量也较高;马尾杉中石杉碱乙含有量最高。结论该方法准确稳定,重复性好,可用于石杉亚科植物中石杉碱甲和石杉碱乙的质量控制。     

千层塔的 23 种原植物中石杉碱甲含量

  目的 测定各种新鲜千层塔原植物中石杉碱甲的含量。 方法 分检千层塔草药原料，核对馆藏标本确定原植物；野外采集上述原植物，从速粉碎与干燥； 2% 酒石酸提取总碱， HPLC 测定石杉碱甲含量，外标法定量。 结果 草药千层塔来源于石杉科石杉属与马尾杉属共计 23 种拟蕨类原植物，其中 18 种含有石杉碱甲，伏帖石杉中含量最高，达 0.200 4% ，而东北石杉等 5 种中未检出石杉碱甲。 结论 目前中国应用的千层塔原植物来源多样，且各种之间石杉碱甲含量差别较大。     

HPLC法测定蛇足石杉中石杉碱甲含量

目的 考察蛇足石杉不同产地、不同部位中石杉碱甲（Hup A）和总碱含量；比较不同提取方法对石杉碱甲含量的影响。方法 采用RP－HPLC法测定Hup A的含量。结果 Hup A在根、茎、叶中的含量煤戏、叶＞根；贵州、广东和安徽产地的Hup A含量分别为0.018%,0.021%,0.020%，提取方法之间差异不显著。结论 Hup A含量在蛇足石杉中的分布为地上部分大于地下部分。不同产地Hup A含量有一定差异。     

蛇足石杉生物碱成分的研究(Ⅳ)

从石杉科植物蛇足石杉中分离出二个生物碱,经光谱鉴定分别为６－β－羟基石杉碱甲和马尾杉碱Ｎ。这两个化合物均首次从该植物中得到。生物实验初步结果表明,６－β－羟基石杉碱甲为又一个强效胆碱酯酶抑制剂,其毒性低于石杉碱甲,而对电鳐ＡＣｈＥ的抑制作用比石杉碱甲强约４倍。     

三种千层塔中石杉碱甲含量测定

目的:通过用HPLC法测定恩施三种千层塔中石杉碱甲的含量。方法:取湖北恩施三种千层塔粉碎后用索氏提取和超声提取联用的方法提取试样,以HPLC法测定其产品中石杉碱甲的含量。色谱柱为Phenomenex C18(250mm×4.6mm,10μm);流动相:乙腈-醋酸铵(88∶12);流速:1mL/min;检测波长310nm。结果:恩施三种千层塔中石杉碱甲其蛇足石杉含量最高,四川石杉其次,皱边石杉含量最低。     

长柄石杉L-赖氨酸脱羧酶基因克隆及序列分析

目的在对长柄石杉Huperzia serrata、闽浙马尾杉Phlegariurus minchegensis、华南马尾杉Phlegariurus austrosinicus和有柄马尾杉Phlegariurus petiolatus 4种石杉科植物的L-赖氨酸脱羧酶(L-lysine decarboxylase,LDC)基因编码区进行克隆的基础上,对长柄石杉的LDC基因全长序列进行分析并预测其蛋白结构。方法采用RT-PCR技术,以石杉科植物叶片提取的总RNA为模板克隆得到LDC基因编码区序列,通过BLAST比对和MEGA5.0软件对克隆的序列进行分析。采用RACE技术获得石杉科广布种长柄石杉的LDC基因全长序列,并对其蛋白的二级结构及三维结构进行预测分析。结果克隆的4种石杉科植物LDC基因序列与数据库中被注释为编码LDC的基因序列保持高度的相似性,长柄石杉LDC蛋白与NCBI中的蛇足石杉LDC氨基酸序列相似度很高,与蕨类植物江南卷柏的同源性也较高。长柄石杉LDC基因编码区全长为1 266 bp,编码403个氨基酸,Gen Bank登录号KF040056。结论克隆得到4种石杉科植物的LDC基因,分析了长柄石杉LDC基因的全长序列并预测其蛋白结构,为进一步阐明石杉科植物石杉碱甲生物合成途径奠定基础。