启膈散及其拆方抑制原代培养食管癌细胞PLC-γ1介导的信号转导的作用

目的观察启膈散及其活血和化痰两个拆方对原代培养的食管癌细胞磷脂酶C-γ1(PLC-γ1)介导的细胞信号转导的影响,以探讨启膈散治疗食管癌的作用机制。方法从外科切除的原发性食管癌组织采集食管上皮细胞进行原代培养,加入启膈散及其活血和化痰两个拆方的水提物,测定细胞生长活性、PLC-γ1、EGFR、PDGFR、PKCα、磷酸化蛋白PY99和MARCKS(Ser152/156)表达水平、细胞内游离钙离子浓度([Ca2 ]I)及PLC-γ1和PKC活性。结果启膈散及其拆方对原代培养的食管癌细胞生长、PLC-γ1、EGFR、PDGFR、PKCα、磷酸化蛋白PY99和磷酸化MARCKS(Ser152/156)表达、[Ca2 ]i及PLC-γ1和PKC活性有不同程度的抑制作用,以活血组作用最强。结论启膈散及其拆方通过不同程度的抑制食管癌细胞PLC-γ1介导的信号转导而抑制肿瘤细胞的生长。     

启膈散通过STAT3信号通路抑制EC-9706细胞移植瘤的生长

目的:研究启膈散对食管癌EC-9706细胞移植瘤抑制作用,并从STAT3信号通路探讨其机理。方法:收集对数期生长的EC-9706细胞,皮下注射于裸鼠右前腋下,8 d后,随机分为模型组、抑制剂组、启膈散组、抑制剂+启膈散组,每2 d测量大小,3周后处死,摘取移植瘤,称重;移植瘤组织H.E染色显微镜下观察一般病理;免疫组化检测移植瘤微血管;Western blot检测移植瘤中蛋白表达。结果:在种植肿瘤第7天,可见有粟米粒大小肿瘤产生;在种植肿瘤第14天,模型组肿瘤大小增速快于用药各组,抑制剂组、启膈散组、启膈散+抑制剂组肿瘤成长相近。与模型组比较,用药组移植瘤的重量明显变轻(P0.05)。镜下可见各组肿瘤细胞大小形态不一,异型性明显,有病理性核分裂像,部分肿瘤区域中出现肿瘤组织坏死,并有少部分淋巴细胞浸润,用药组肿瘤组织坏死区增大。与模型组相比,用药各组CD34表达面积明显下降(P0.05)。与模型组比,除启膈散+抑制剂组的STAT3下降不明显外,其它均下降明显(P0.05);与抑制剂组相比,仅启膈散和启膈散+抑制剂组的STAT3蛋白表达增高(P0.05)。结论:启膈散能有效抑制移植瘤的生长,其机制可能与抑制STAT3信号通路有关。     

养阴清热理气方及其拆方对食管癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用

目的 研究养阴清热理气方及其养阴、清热、理气3个拆方对食管癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用.方法 将57只BALB/c雌性裸鼠随机分为模型组、全方组、清热组、理气组、养阴组各10只,空白组7只,用人食管癌细胞株EC9706细胞植入裸鼠右胁皮下制造荷瘤裸鼠模型,造模后第2天开始灌胃,各用药组分别给予养阴清热理气方及其拆方,每日1次,共90d.观察各组裸鼠饮食量、体重及移植瘤体积的变化;实验结束后称量各组移植瘤重量并计算抑瘤率.结果 各用药组与模型组比较均可增强荷瘤裸鼠精神和活动状态,增加体重(P<0.01),全方组、清热组和养阴组还可提高动物食量(P<0.05).各用药组对裸鼠皮下移植瘤生长均有不同的抑制作用,瘤体体积、重量与模型组比较差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01).各组抑瘤率依次为全方组>养阴组>清热组>理气组,全方组、养阴组抑瘤率与清热组、理气组差异有统计学意义(P<0.05).结论 养阴清热理气方及其拆方具有改善荷瘤裸鼠生存状态和抑制肿瘤生长的作用.     

启膈散加减联合化疗治疗食管癌40例

目的：观察启膈散联合化疗治疗食管癌的疗效。方法：将按国际分类标准收治的40例食管癌患者随机分为治疗组和对照组,分别采用中药联合化疗和单纯化疗的治疗方法,对两组患者的近期疗效和生活质量进行比较。结果：两组近期疗效和患者的生活质量均有显著性差异。结论：中药联合化疗治疗食管癌的疗效明显优于单纯化疗。     

启膈散加减联合化疗治疗中晚期食管癌临床观察

食管癌是人类常见的消化道恶性肿瘤之一,且大多数食管癌患者就诊时已处于晚期,多数已转移,不宜手术,预后很差。为提高食管癌患者寿命和生活质量,2008年1月-2010年3月,笔者应用启膈散加减联合化疗治疗中晚期食管癌,并同时以单纯应用化疗的20例中晚期食管癌患者作对照观察,现将结果报道如下。     

启膈散的研究

启膈散出自《医学心悟》一书,该方组方严谨,配伍得当,多用于治疗食管类疾病且疗效确切.近年来,围绕此方的研究不断深化,临床和药理研究都取得了新进展.根据搜集的文献可以看出,启膈散的临床研究多与治疗食管相关疾病为主,尤其是对于食管癌的治疗应用相对成熟.对其他疗效确切疾病的治疗也多是与"噎膈"症状或病机相近的疾病,这对启膈散...     

中药启膈散诱导K562凋亡的实验研究

目的 :发掘研究中药古方 ,探讨启膈散抗肿瘤机理 ,扩大古方应用范围 ,为扩大启膈散临床应用提供实验依据。方法 :运用 MTT法观测启膈散对 K5 62细胞细胞毒活性、Gimusa染色法观测启膈散对 K5 62细胞形态学改变、ELISA法观察启膈散对 K5 62肿瘤细胞凋亡的影响。结果 :启膈散对瘤株表现出很强的细胞毒活性 ,且细胞毒活性有明显的量效关系 ;经启膈散作用 72小时后 ,部分细胞出现胞浆空泡、核固缩、核边集、核破碎、核小体形成等细胞调亡的特征 ;启膈散对 K5 62细胞凋亡存在时间依赖性。结论 :促进肿瘤细胞的凋亡是启膈散抗肿瘤机理之一     

基于网络药理学探讨启膈散治疗食管癌的作用机制

目的:基于网络药理学方法探讨启膈散治疗食管癌的可能作用机制。方法:在中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)及中药成分数据库(TCMID)筛选并收集启膈散的活性成分及其对应靶标。利用Uniprot数据库获取药物活性成分对应靶标的基因,并与通过人类基因组注释数据库(GeneCards)所获得的人食管癌相关基因做对比,获得启膈散与食管癌重合的潜在作用靶标基因。使用Cytoscape3.6.1软件绘制启膈散的活性成分-作用靶标网络图。通过String数据库获取潜在作用靶标之间的互作关系,并导入Cytoscape3.6.1软件构建靶蛋白互相作用网络图。利用DAVID数据库对启膈散治疗食管癌的潜在作用靶标进行Go分类富集分析和KEGG通路富集分析,并运行R语言得到其高级气泡图。结果:从启膈散中共得到88个候选活性成分,包括槲皮素(quercetin)、β-谷甾醇(beta-sitosterol)、木犀草素(luteolin)、丹参酮ⅡA(tanshinone iia)、柚皮素(naringenin)等,142个潜在作用靶标,包括RAC-α丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(AKT1)、肿瘤抑制因子(TP53)、白细胞介素-6(IL-6)、重组人半胱天冬酶-3(CASP3)、血管内皮生长因子A(VEGFA)等,主要通路有蛋白酪氨酸激酶/信号转导转录激活因子(Jak-STAT)、磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI3K-Akt)、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、核转录因子(NF-kappa B)、肿瘤抑制基因p53等信号通路。结论:启膈散治疗食管癌的作用机制可能与AKT1、TP53、IL-6、CASP3、VEGFA等靶标以及调节Jak-STAT、PI3K-Akt、MAPK、NF-kappa B、p53等信号通路有关。     

启膈散加减治疗食管贲门失驰缓症16例

食管贲门失驰缓症是以食管下端括约肌松驰异常及食管体部缺乏推进性蠕动为特征的食管运动功能障碍性疾病,病因尚不十分清楚。本病以吞咽困难为主要临床表现,兼见反流、胸痛、体重减轻等症状。笔者自2000年10月-2008年12月,笔者运用启膈散加减治疗本病16例,取得较满意疗效,现报道如下。     

启膈散协同顺铂抑制食管癌EC9706细胞生长与miR-21的关系

目的:观察启膈散含药血清联合顺铂对人食管癌细胞EC9706的增殖效应,从miR-21探讨其作用机制。方法:制备启膈散含药血清,MTT法筛选其最佳作用浓度;PCR检测miR-21、PDCD4 mRNA和PTEN mRNA的表达情况;Western-blot检测蛋白PDCD4、PTEN的表达水平。结果:5%含药血清的浓度作用效果最为显著(q>1)。与5%对照血清组比较,除5%含药血清PDCD、PTEN mRNA和0.5μg/m L顺铂组的PTEN mRNA表达量下降外,其余各组的miR-21、PDCD4 mRNA和PTEN mRNA表达均升高(P<0.05);顺铂联合含药血清后,两组miR-21表达和联合高浓度顺铂组的PDCD4 mRNA均比其单用下降(P<0.05),而两组PTEN mRNA和联合低浓度组的PDCD4 mRNA的表达则升高(P<0.05)。与对照组相比,各组PDCD4蛋白表达量升高P<0.05;高浓度顺铂联合含药血清组比单用高顺铂组PDCD4蛋白表达量升高(P<0.05),低浓度顺铂的两组变化不明显(P>0.05);两个浓度顺铂联合含药血清时PTEN的表达量均高于单独使用顺铂(P<0.05)。结论:启膈散能够增加EC9706对顺铂的敏感性,可能是通过miR-21与其调控的下游基因PDCD4与PTEN共同参与完成。