五子衍宗丸对NTDs胎鼠神经管细胞凋亡的影响

目的：研究五子衍宗丸对全反式维甲酸（all-trans-retinoic acid,ATRA）诱导的神经管畸形（neural tube defects,NTDs）胎鼠模型神经管细胞凋亡的影响。方法：将BALB/c小鼠以雌雄2：1比例合笼,阴栓阳性者为孕鼠。将孕鼠随机分为正常组、模型组、五子衍宗丸先给组、五子衍宗丸和ATRA同时干预组、五子衍宗丸后给组,后3组又各分为高、中、低剂量3个亚组（4.20,2.10,1.05 g·kg^-1）。在胚胎7 d时,模型组、五子衍宗丸先给组的3个亚组、五子衍宗丸和ATRA同时干预组的3个亚组、五子衍宗丸后给组的3个亚组均给孕鼠灌胃50 mg·kg^-1 ATRA 1次。在胚胎11 d时,处死孕鼠取出胚胎,制成横切片后进行HE染色和TUNEL染色,观察各组神经管发育情况和计算神经管细胞凋亡指数。结果：光镜下观察HE染色结果,正常组神经管发育良好,闭合完全;模型组神经管发育不良,闭合不全;五子衍宗丸中、高剂量先给组,五子衍宗丸中、高剂量和ATRA同时干预组神经管发育较好,管壁可见完整的神经上皮层、套层、边缘层,神经上皮细胞排列较致密有序;五子衍宗丸中、高剂量后给组和五子衍宗丸低剂量各组神经管发育不良,神经上皮细胞数量减少、排列无序。光镜下观察TUNEL染色结果,与正常组比较,五子衍宗丸高剂量先给组凋亡指数的差异无统计学意义;其余各组凋亡指数增高的差异均有统计学意义。与模型组比较,五子衍宗丸中、高剂量先给组,五子衍宗丸中、高剂量和ATRA同时干预组凋亡指数显著降低,差异均有统计学意义;五子衍宗丸中、高剂量后给组和五子衍宗丸低剂量各组凋亡指数的差异均无统计学意义。结论：五子衍宗丸可抑制NTDs胎鼠模型神经管细胞的凋亡。     

神昌滴丸对孕鼠致畸性的研究

目的:评价神昌滴丸在妊娠期的毒性。方法:用80只孕鼠,分为3个不同的剂量(0.25、0.5、1.0g/kg)实验组,同时设阴性对照组(采用玉米油作为溶剂),每组19~21只孕鼠。实验组和对照组给药容量为1mL/100g体重,均采用灌胃给药,给药时间为GD6-15。于妊娠第20天处死孕鼠,检查母体妊娠与胎鼠畸形情况。结果:神昌滴丸在1.0g/kg剂量出现母鼠增重下降,与对照组比较差异有统计学意义;各剂量组出现活胎率下降和死胎率增加,但与对照组比较有差异有统计学意义,不存在剂量反应关系;各剂量组的每窝平均活胎数和吸收胎率及致畸率与对照组比较差异无统计学意义。受试剂量下各组的平均胎盘重、胎儿体重、身长、尾长与对照组比较无统计学差异。低剂量组胸骨节数、骶椎数,高剂量组掌骨数与对照组相比差异具有统计学意义外(P<0.05),其它骨骼发育与对照组比较差异无统计学意义。各实验组均未观察到母鼠和胎鼠明显的外观、脏器以及骨骼的畸形。结论:神昌滴丸在1.0g/kg剂量时对孕期SD大鼠存在一定的母体毒性,在受试剂量下无明显的胚胎毒性、胎儿毒性和致畸作用。     

蒙药荜茇提取物胡椒碱对孕鼠的影响

目的:了解蒙药荜茇降血脂有效成分胡椒碱对Wistar孕鼠的影响。方法:妊娠的雌性Wistar大鼠随机分成阴、阳性组及高、中、低剂量组每组12只,称重和编号。孕鼠于妊娠第7~16d分别灌胃胡椒碱(高剂量287.04m g/kg、中剂量71.76mg/kg、低剂量17.94mg/kg),阳性对照组于孕期11d一次腹腔注射环磷酰胺,于妊娠第20d处死。分析胚胎发育指标,检查有无外观畸形和骨骼畸形。结果:与对照组比较,胡椒碱高、中剂量组对孕鼠体重增长及胎鼠生长指标有显著性差异(P0.05);高剂量组对胎鼠外观畸形和骨骼畸形未见显著增加。结论:本实验剂量与条件下荜茇胡椒碱高、中剂量组使孕鼠体重增长、胎鼠生长指标缓慢或下降;低剂量组对胎鼠外观、骨骼和内脏均无显著影响。     

五子衍宗丸对神经管畸形细胞模型凋亡途径的影响

目的探讨五子衍宗丸防治神经管畸形(NTDs)的可能作用机制。方法 PC12细胞随机分为空白组、模型组及五子衍宗丸低、中、高剂量组。除空白组外,其余各组采用全反式维甲酸(atRA)干预PC12细胞构建NTDs模型。五子衍宗丸低、中、高剂量组分别给予含五子衍宗丸的RPMI-1640培养基并使其最终浓度分别为125、250、500μg/ml进行预处理,模型组和空白组加入RPMI-1640培养基。测定各组PC12细胞活力及细胞凋亡率,并提取空白组、模型组及经细胞活力、细胞凋亡率实验确定的最佳剂量五子衍宗丸组细胞总RNA测序,筛选差异表达基因,运用维恩图得到目的差异表达基因集,并进行GO功能和KEGG通路显著性富集分析,对与细胞凋亡相关的差异基因进行共表达网络分析。结果模型组PC12细胞活力显著下降,细胞凋亡率显著增加,五子衍宗丸各剂量组细胞活力增强、细胞凋亡率降低,且以五子衍宗丸低剂量组效果最佳(P0.05或P0.01)。目的差异表达基因集GO功能分析显著富集到内质网应激介导细胞凋亡相关和细胞增殖生长相关的GO条目,KEGG通路分析显著富集到细胞生长和死亡相关的信号通路。与模型组比较,五子衍宗丸低剂量组内质网应激相关基因Ern1、Casp12、Creb3l1下调,抗凋亡基因Birc5上调,与模型组较空白组这些基因上下调方向正好相反。结论五子衍宗丸可抑制细胞凋亡,保护神经元样细胞,其机制与调控内质网应激相关的基因表达,与染色体分离、细胞核分裂、细胞周期等细胞增殖、生长和死亡等生物过程或信号通路相关。     

荜茇胡椒碱致畸试验研究

目的：了解蒙药荜茇降血脂有效成分胡椒碱对Wistar孕鼠的影响。方法：妊娠的雌性Wistar大鼠随机分成阴、阳性组及高、中、低剂量组每组12只,称重和编号。孕鼠于妊娠第7～16d分别灌胃胡椒碱（高剂量287.04mg/kg、中剂量71.76mg/kg、低剂量17.94mg/kg）,阳性对照组于孕期11d一次腹腔注射环磷酰胺,于妊娠第20天处死。分析胚胎发育指标,检查有无外观畸形和骨骼畸形。结果与阴性对照组比较,胡椒碱高、中剂量组对孕鼠体重增长及胎鼠生长指标有显著性差异（P〈0.05）;高剂量组对胚胎吸收率有显著性差异（P〈0.05）;胎鼠外观畸形和骨骼畸形未见显著增加。结论：本实验剂量与条件下荜茇胡椒碱高、中剂量组使孕鼠体重增长、胎鼠生长指标缓慢或下降;高剂量组有胚胎吸收的影响;低剂量组没有显著影响。对胎鼠外观、骨骼和内脏均无显著影响。     

荜茇胡椒碱致畸试验研究

目的：了解蒙药荜茇降血脂有效成分胡椒碱对Wistar孕鼠的影响。方法：妊娠的雌性Wistar大鼠随机分成阴、阳性组及高、中、低剂量组每组12只,称重和编号。孕鼠于妊娠第7～16d分别灌胃胡椒碱（高剂量287.04mg/kg、中剂量71.76mg/kg、低剂量17.94mg/kg）,阳性对照组于孕期11d一次腹腔注射环磷酰胺,于妊娠第20天处死。分析胚胎发育指标,检查有无外观畸形和骨骼畸形。结果与阴性对照组比较,胡椒碱高、中剂量组对孕鼠体重增长及胎鼠生长指标有显著性差异（P〈0.05）;高剂量组对胚胎吸收率有显著性差异（P〈0.05）;胎鼠外观畸形和骨骼畸形未见显著增加。结论：本实验剂量与条件下荜茇胡椒碱高、中剂量组使孕鼠体重增长、胎鼠生长指标缓慢或下降;高剂量组有胚胎吸收的影响;低剂量组没有显著影响。对胎鼠外观、骨骼和内脏均无显著影响。     

桉叶油对小鼠胚胎发育影响的研究

目的 探讨桉叶油对小鼠胚胎发育的影响.方法 25只健康性成熟的昆明种小鼠孕鼠,随机分成5组,每组5只,分别在小鼠妊娠第12～16天用100,200,400 mg/kg·d的桉叶油进行灌胃,每天一次,同时设花生油对照和环磷酰胺阳性对照.观察孕鼠的体质量增长情况;于妊娠第16天处死各组孕鼠,检查母体妊娠及胎鼠发育及畸形情况.结果 桉叶油各实验组胚胎植入总数、活胎数、死胎数与溶剂对照组相比均无显著性差异,桉叶油高、中剂量组孕鼠增重与溶剂对照组比较差异有统计学意义(P<0.05).桉叶油各剂量组活胎鼠平均体质量、身长、尾长均较溶剂对照组高,但只有中剂量组与溶剂对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),而阳性对照组胎鼠平均体质量、尾长明显低于溶剂组,且有显著性差异(P<0.05).胎鼠骨骼骨化情况、前肢芽软骨发育Neubert评分在3个桉叶油实验组与阴性对照组相比均无显著性差异(P>0.05),与阳性对照组相比有显著性差异(P<0.05).结论 在该实验条件下,桉叶油对小鼠无胚胎毒性和致畸作用,在中剂量下对胎鼠的生长发育似有促进作用.环磷酰胺对小鼠有胚胎毒性.     

艾叶油对小鼠胚胎骨骼发育毒性影响的研究

目的 探讨艾叶油对小鼠胚胎骨骼发育的影响.方法 选用昆明种孕鼠25只,随机分为5组,每组5只,设置阴性对照组(花生油)、艾叶油实验组(高剂量组2 ml/kg、中剂量组1 ml/kg、低剂量组0.5 ml/kg)、阳性对照组(环磷酰胺12.5 mg/kg).实验组和阴性对照组自孕12 d开始灌胃,1次/d,连续5d;阳性对照组于孕13天腹腔注射环磷酰胺(12.5 mg/kg)1次.各组孕鼠均于孕第16天处死后取出1/2数量胎鼠行阿利新蓝和茜素红骨骼双染,对前肢芽进行Neubert评分,观察胎鼠主要骨骼骨化点的发育.结果 在胎鼠肢芽和骨骼发育时,艾叶油高、中、低剂量组与阴性对照组相比无显著性差异(P>0.05).实验组与阳性对照组相比有显著性差异(P<0.05).结论 艾叶油对胎鼠肢芽和骨骼发育无毒性影响.     

刺糖粗多糖对糖尿病大鼠降糖及抗氧化功能的实验研究

目的探讨刺糖粗多糖对糖尿病大鼠降糖及抗氧化功能。方法采用水提醇沉法提取刺糖粗多糖。采用健康雄性昆明小鼠90只,随机取出8只作为空白对照组,注射蒸馏水0.2ml/10g,剩余小鼠制备糖尿病小鼠模型。将糖尿病小鼠随机分为5组:模型组、阳性药物组(盐酸二甲双胍,300mg/kg)、刺糖粗多糖低剂量组(200mg/kg)、中剂量组(400mg/kg)、高剂量组(800mg/kg)。于给药前、给药第2、4周测定小鼠血糖,测定并比较小鼠血清及肝脏中丙二醛(MDA)和总超氧化物歧化酶(T-SOD)的含量测定。结果刺糖粗多糖的最大给药量为9.596g/kg。给药前和给药后第2周、第4周模型组、阳性药物组、刺糖粗多糖低、中、高剂量组小鼠体质量低于空白对照组,差异有统计学意义(P0.05)。给药后第2周及第4周阳性药物组小鼠空腹血糖低于模型组,差异有统计学意义(P0.05)。给药后第4周刺糖粗多糖高剂量组小鼠空腹血糖高于模型组、糖粗多糖低、中剂量组,差异有统计学意义(P0.05)。各组小鼠血清及肝脏中T-SOD含量差异无统计学意义(P0.05)。模型组小鼠血清及肝脏中MDA高于空白对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。阳性药物组及刺糖粗多糖低、中、高剂量组小鼠血清及肝脏中MDA含量低于模型组,差异有统计学意义(P0.05)。刺糖粗多糖高剂量组小鼠肝脏中MDA低于刺糖粗多糖中、低剂量组,差异有统计学意义(P0.05)。结论刺糖粗多糖具有潜在降血糖作用,其降血糖机制可能与氧化应激能力有关。     

春和丹治疗肝纤维化大鼠的实验研究

目的探讨春和丹对肝纤维化大鼠的治疗作用。方法将SD大鼠40只随机分为正常组、模型组、春和丹低剂量组(20g/kg)、春和丹高剂量组(40g/kg)及护肝片组(1.5g/kg),每组8只。除正常组外,其余各组以四氯化碳(CCl4)皮下注射制备大鼠肝纤维化模型。除正常组和模型组外,于实验第5周开始分别给予春和丹和护肝片灌胃给药,连续5周。观察各组肝纤维化指标、肝功能指标及肝组织病理的变化。结果春和丹可明显降低肝纤维化大鼠血清透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(CⅣ)、层粘蛋白(LN)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)及肝组织羟脯氨酸定量(Hyp);明显升高血清白蛋白(Alb);光镜观察肝组织病理明显改善(P<0.05);春和丹低剂量组和春和丹高剂量组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论春和丹抗肝纤维化作用确切,同时够修复肝脏炎症损伤,纠正蛋白质代谢,且不同剂量春和丹与护肝片比较差异无统计学意义(P>0.05)。