Sysmex XE-2100全自动血液分析仪复检规则的建立及评价

目的:通过参考国际血液学复检专家组推荐的血细胞复检规则,结合实验数据,制定出适合本实验室的Sysmex XE-2100全自动血液分析仪复检规则。方法:采用Sysmex XE-2100全自动血液分析仪检测1841份标本,同时每份标本制备2张血涂片进行手工白细胞分类,观察红细胞、白细胞及血小板形态。按照制定的分类复检初步规则和涂片镜检标准进行评估,计算真阳性、假阳性、真阴性、假阴性及涂片复检率,结合本院实验室的实际情况,对初步复检规则进行部分修改,制定出适合本实验室的Sysmex XE-2100全自动血液分析仪复检规则。结果:通过分类复检初步规则和涂片镜检标准进行评估,真阳性率为28.9%(533/1841)、假阳性率为11.9%(220/1841)、真阴性率为57.0%(1051/1841)、假阴性率为2.0%(37/1841);涂片复检率为40.9%(753/1841)。由于涂片复检率大大超过拟订的复检率,对初步复检规则的部分条款进行了修改,形成了本实验室的Sysmex XE-2100全自动血液分析仪复检规则。应用新规则和涂片镜检阳性标准重新进行评估,真阳性率为14.8%(272/1841)、假阳性率为9.4%(173/1841)、真阴性率为72.6%(1337/1841)、假阴性率为3.2%(59/1841);涂片复检率为24.1%(445/1841)。验证实验结果表明有病理意义的白血病细胞无漏检。结论:通过制定适合该实验室的Sysmex XE-2100全自动血液分析仪复检规则,提高了工作效率,保证了检验结果的质量,可以有效地避免出现病理标本的漏检及错误检验报告,值得推广应用。     

HPLC法同时测定蓝花参中芦丁、橙皮苷及槲皮素的含量

目的:采用HPLC法同时测定蓝花参中芦丁、橙皮苷及槲皮素的含量,为该药材的深入研究及资源开发提供参考依据。方法:采用HPLC-DAD法测定芦丁、橙皮苷及槲皮素含量,检测波长268 nm,乙腈(A)-0.5%乙酸水(B)溶液为流动相进行梯度洗脱。结果:芦丁:y=0.128x+0.279(r=0.9970),线性范围为3.848～48.10μg/mL;橙皮苷:y=0.101x+0.401(r=0.9965),线性范围为4.144～82.88μg/mL;槲皮素:y=0.097x+0.007(r=0.9990),线性范围为1.02～6.12μg/mL。结论:该法精密度、准确性良好,方法简便快捷,可用于蓝花参中芦丁、橙皮苷及槲皮素的含量测定。     

酶转换法检测血清同型半胱氨酸在常规生化检验中的应用

目的:分析常规生化检验中采用酶转换法检测血清同型半胱氨酸(HCY)的应用价值。方法:选取印江县人民医院2016年1月至2018年2月门诊健康体检者120例为研究对象,血清HCY浓度采用全自动生化分析仪进行测定,并行干扰试验、线性试验、回收试验、精密度、参考范围分析,与高效液相色谱法(HPLC)法、荧光偏振免疫分析(FPIA)法进行对比分析。结果:日间变异系数(CV):4.5%、3.9%;批内CV:2.9%、2.5%;总CV:5.6%、5.2%;回收率:104.2%;与HPLC对比,相关性良好(r=0.99,P 0.01),与FPIA比较,相关性良好(r=0.98,P 0.01)。结论:常规生化检验中采用酶转换法检测血清HCY具有操作简单、精密度、灵敏度高等诸多优点,且具有较宽线性范围,测定结果准确。     

Cell-Dyn3500R与直接计数法测定嗜酸性粒细胞的效果比较

目的　探讨雅培Cell-Dyn 3 5 0 0R型全血动血液分析仪 (以下简称CD3 5 0 0R)测定嗜酸性粒细胞的临床应用价值。方法　利用该仪器和手工直接计数法对 3 0例正常人及 61例临床标本进行嗜酸性粒细胞测定。结果　两种方法测定正常人组和临床患者组的结果作t检验 ,P均 >0 .0 5。该仪器对高、中、低值三份标本的重复性试验的CV值分别为 4.3 3 % ,7.3 0 % ,10 .46% ,批内平均CV =7.3 6% ;而直接计数法则为 9.85 % ,11.15 % ,2 0 .76% ,批内平均CV =13 .91%。结论　CD3 5 0 0R测定嗜酸性粒细胞与手工直接计数法的结果无显著性差异 ,而CD3 5 0 0R的精密度优于直接计数法 ,且具有检测速度快、操作方便等优点 ,可于临床应用推广     

血清脂蛋白(a)测定试剂的临床应用评价

目的 评价浙江伊利康生物技术有限公司生产的脂蛋白(a)测定试剂盒.方法 通过试剂的精密度、线性范围、稳定性、回收率、干扰试验等进行系统评估.结果 伊利康脂蛋白(a)测定试剂盒低、中、高值样本日内精密度(用CV日内值表示)分别为3.49、2.52％和1.86％,日间精密度(用CV日间值表示)分别为4.66、4.15％和3.05％.与进口试剂相比,相关系数r2=0.9978,相关方程为Y=0.9722X+ 4.1861,测定结果显著相关(P＜0.05).当甘油三酯(TG)浓度≤20mmol/L,血红蛋白(Hb)浓度≤5g/L,维生素C(Vc)浓度≤2540μmol/L,胆红素(BIL)浓度≤342μmol/L时对本法无显著性干扰.结论 该试剂完全符合临床应用要求,能适用于全自动化分析.     

对免疫透射比浊法载脂蛋白E测定试剂盒的评价

目的:评价伊利康公司免疫透射比浊法载脂蛋白E检测试剂盒.方法:通过试剂的精密度、线性范围、稳定性、回收率、干扰试验等进行系统评估.结果:伊利康载脂蛋白E试剂盒测定批内CV值分别为3.01％、2.18％、1.94％,批间CV值分别为5.02％、4.13％、3.89％.与进口试剂相比,Y=0.9739X+0.7552;r2=0.9931,测定结果显著相关(P＜0.05).当甘油三酯(TG)浓度≤20mmol/L、血红蛋白(Hb)浓度≤5g/L、维生素C(Vc)浓度≤2540μmol/L、胆红素(BIL)浓度≤342 μmol/L时对本法无显著性干扰.结论:该试剂完全符合临床诊断要求,能适用于全自动化分析.     

探讨改良终点法在临床生化检验中的应用

目的:探讨改良终点法应用在临床生化检验中的效果。方法:选择改良终点法和原终点法进行对比,分析改良终点法在临床生化检验中的应用意义,根据美国临床实验室标准化委员会制订的相关规定,对改良终点法和原终点法两种检验方法的相关性、线性进行评价分析。结果:实验发现,改良终点法和原终点法之间具有一定的相关性,两种方法的检测结果在临床上无较大差异,P0.05表示差异无统计学意义。测量正常浓度的样品,改良终点法和原终点法的批内不精密度和总不精密度均为CV2.60%。测量异常浓度的样品,改良终点法CV2.60%,原终点法CV2.60%。检验回归方程为:改良终点法y=1.0705x-0.2183;r=0.9982。原终点法y=1.4404x-2.9397;r=0.9791。结论:经过研究发现,改良终点法应用于临床生化检验,在对高浓度标本进行检验中具有更准确的精密度,改良终点法的测定线性范围更宽,对试剂的成分起到节约的作用,值得在临床大力推广应用。     

大卫颗粒的质量标准提高

目的:提高大卫颗粒的质量标准。方法:对制剂中连翘、金银花、柴胡及甘草进行薄层色谱(TCL)鉴别;采用高效液相色谱法(HPLC)同时测定制剂中绿原酸、连翘酯苷A、黄芩苷的含量。结果:连翘、金银花、柴胡及甘草的TLC图斑点清晰,分离度好,阴性对照无干扰。绿原酸、连翘酯苷A、黄芩苷检测质量浓度线性范围分别为5.228～52.28(r=0.999 9)、5.92～59.20(r=0.999 8)、6.816～68.16μg·mL~(-1)(r=0.999 9);精密度、稳定性、重复性试验的RSD2.0%;平均加样回收率分别为101.84%(RSD=0.44%,n=6)、99.07%(RSD=0.79%,n=6)、101.30%(RSD=0.62%,n=6)。结论:该研究所建标准定性定量方法简便、专属性强、结果准确可靠,可用于大卫颗粒的质量控制。     

高效液相色谱法测定大鼠生物样品中人参炔醇的方法学考察

目的:建立生物样品中人参炔醇(panaxynol)的高效液相色谱(HPLC)测定方法。方法:通过对精密度、特异性、回收率、稳定性等考察建立了测定方法,得到标准曲线。结果:生物样品中的panaxynol浓度(C)与色谱峰面积(A)均呈现良好的线性关系,回归方程的相关系数r均大于0.99;panaxynol测定方法的精密度高,重现性好,血浆和各组织样品测定的日内精密度和日间精密度RSD都小于10%;回收率较高,满足生物样品回收率在80～120%的范围,相对标准偏差均小于6%;稳定性好,-20℃冷贮放置不影响测定结果。结论:本法的稳定性、精密度、回收率、专属性和定量线性范围均达到了体内药物分析的要求。     

溶血对血清胰岛素测定结果的影响

目的　探讨溶血对胰岛素结果的影响程度及解决措施。方法　将 4种不同溶血程度的溶血标本 ,放置在 4 ,2 5 ,37℃ 3种不同温度下 1h后 ,用放射免疫法测定各标本的胰岛素浓度 ,再以胰岛素结果的测定值百分比表示影响程度。结果　溶血标本 (Hb 4 .0g/L以下 )于 4℃下放置 1h后 ,可保持 90 %以上的胰岛素。极轻微的溶血标本 (Hb≤ 0 .5 g/L)在 37℃下放置 1h后 ,就可使胰岛素浓度明显降低 ,重度溶血 (Hb≥ 4 .0 g/L)可使胰岛素浓度降低5 0 %以上 ,同 4℃标本相比有极显著性差异 (P <0 .0 1)。轻微的溶血标本 (0 .5 g/L≤Hb≤ 1.0g/L)置于 2 5℃下 1h后 ,胰岛素浓度可保持 90 %以上 ,但重度溶血仍可使胰岛素浓度降低 2 0 %以上 ,同 4℃标本相比有极显著性差异 (P <0 0 1)。结论　温度可明显改变溶血对胰岛素结果的影响程度 ,采用低温措施可显著减少溶血对胰岛素浓度的影响 ,由于溶血是难以完全避免的 ,建议在血标本的分离、运输过程中保持低温环境。     

黄芪中黄芪多糖含量的测定

目的：建立黄芪中黄芪多糖的含量测定方法。方法：采用比色法测定黄芪多糖的含量。结果：测定波长为489nm,葡萄糖在2．0－14．0μg·mL。线性关系良好,平均加样回收率为99．84％,RSD=3．71％（n=6）。结论：该方法简便、准确、重复性好,可用于黄芪中黄芪多糖的含量测定。     

酸性染料比色法测定莱菔子中总生物碱的含量

目的:探讨莱菔子中总生物碱含量测定的方法。方法:采用酸性染料比色法测定莱菔子中总生物碱含量。结果:酸性染料比色法显色的条件为pH4.2的缓冲液10mL,0.04%的溴甲酚绿溶液2.0mL,氯仿萃取4次,每次5mL,检测波长332nm。芥子碱硫氰酸盐在1.696~16.960ug.mL-1范围内,与吸光度呈良好的线性关系,平均回收率99.75%,RSD为1.16%(n=6)。结论:该方法灵敏度高,准确性、重现性好。     

一种闽产青红酒粗多糖和总黄酮的测定

目的:采用分光光度法,测定一种闽产青红酒中粗多糖和总黄酮含量。方法:采用醇沉法,分离酒中粗多糖,以无水D-葡萄糖为对照品,采用苯酚-硫酸法检测粗多糖含量;以芦丁为对照品,在360 nm波长下测定吸光度,计算总黄酮含量。结果:测定葡萄糖范围3.86~12.87μg/mL,回归方程为y=53.32x-0.021,r=0.9984;测定芦丁线性范围7.56~22.68μg/mL,回归方程为y=0.034x-0.022,r=0.9993。结论:通过测定青红酒中粗多糖和总黄酮含量,有利于对产品配方及工艺进行质量控制。     

酸性染料比色法测定乌药生物碱提取物中总碱含量

目的建立乌药生物碱提取物中总生物碱含量测定的方法。方法采用酸性染料比色法测定乌药生物碱提取物中总生物碱含量。结果对照品去甲异波尔定的线性范围为4.444～44.44 g/ml,线性方程为Y=0.03785C+0.04626(r=0.9995),平均加样回收率为98.19%,RSD为1.64%(n=9)。结论本法操作简便、准确,可用于乌药生物碱提取物中总碱含量的测定。     

紫外分光光度法测定两面针中总生物碱的含量

目的建立紫外分光光度法测定两面针中总生物碱含量的方法。方法采用紫外分光光度法，以氯化两面针碱为对照，在329nm波长处进行含量测定。结果线性范围为3～8μg／mL，回归方程：Y=97．746X-0．0255，r=0．9991（n=6）。氯化两面针碱的平均回收率为99．5％，RSD=2．32％（n=5）。结论方法简便、提取完全、重现性好、结果准确。     

中药芫花总黄酮含量测定方法研究

目的建立芫花总黄酮的含量测定方法。方法采用NaNO2-Al(NO3)3-NaOH显色法、AlCl3显色法、盐酸-镁粉显色法等3种不同的显色方法测定芫花总黄酮含量。结果采用盐酸-镁粉显色法,以芹菜素为对照品,线性范围为33.6～201.6μg(r=0.999 8),平均回收率为98.57%,相对标准偏差为0.78%(n=9)。结论 NaNO2-Al(NO3)3-NaOH法和AlCl3法不能用于芫花总黄酮的测定;盐酸-镁粉显色法准确度、精密度高、重复性好,是芫花总黄酮定量分析的合理方法。     

分光光度法测定七味铁屑丸中铁的含量

目的：建立七味铁屑丸中铁的含量测定方法。方法七味铁屑丸通过浓硫酸消化处理后,加入盐酸羟胺将其中的铁（Ⅲ）还原为铁（Ⅱ）,在PH为4.5的条件下,用联吡啶分光光度法测定铁含量。结果在1.6μg／mL～16μg／mL范围内具有良好的线性关系（r＝0.9998）,回归方程为y＝0.0552x-0.0009。平均加标回收率为99.66％,RSD＝0.94％（n＝6）。结论本法简便、准确、重现性好,为七味铁屑丸的质量控制和评价提供了依据。     

RP-HPLC法测定乌骨藤药材中Tenacissoside B的含量

目的：建立乌骨藤药材中Tenacissoside B的含量测定方法。方法：采用高效液相色谱法测定乌骨藤中Tenacissoside B的含量,色谱柱使用Diamonsil C18（250mm×4.6mm,5μm）;流动相为甲醇∶水（78∶22）;检测波长为217nm;流速1mL/min;柱温30℃。结果：Tenacissoside B在进样量1.01～10.1μg范围内线性关系良好,回归方程为：y=432.41x-13.14,R2=0.9998;平均回收率为98.30%,RSD为1.78%（n=6）。结论：该方法简便,灵敏,准确,重现性好,可用于乌骨藤药材的含量测定和质量控制。     

HPLC法测定喉喑清胶囊中哈巴俄苷的含量

目的建立高效液相色谱法测定喉喑清胶囊中哈巴俄苷含量的方法。方法色谱柱为Sinochrom ODS-Bp C18（4.6×250mm,5μm）,流动相以乙腈-1%醋酸溶液二元梯度洗脱;流速：1.0mL？min-1;检测波长为280nm。结果该方法的回归方程为Y=2520.34X-0.16,r=0.9999。哈巴哦苷在0.0264～0.528μg范围内呈良好的线性关系。平均回收率为97.20%,RSD为1.11%,符合分析要求。结论方法成熟,结果准确、重复性好,可用于新药喉喑清胶囊的质量控制。     

不同产地猴耳环总黄酮含量比较研究△

目的：测定不同产地猴耳环药材中的总黄酮含量。方法：以芦丁为对照品,三氯化铝（AlCl3）比色,采用紫外可见分光光度法（UV）测定样品总黄酮含量,检测波长406nm。结果：总黄酮在5．09～50．90μg·mL^-1线性关系良好,回归方程为Y=0．0267X＋0．0072,r=0．9991;平均加样回收率为101．23％,RSD=1．93％（n=6）。结论：AlCl3,比色法准确、简便,具有良好的重复性和稳定性,可用于猴耳环药材中总黄酮的含量测定;不同产地猴耳环中总黄酮的含量存在一定的差异。