强精煎对模型小鼠睾丸病理损伤的影响

目的探讨强精煎对模型小鼠睾丸病理损伤的影响。方法应用环磷酰胺所致的睾丸生精障碍小鼠模型,观察强精煎对小鼠睾丸病理形态学的影响。结果模型组小鼠睾丸组织可见明显的病理损伤;强精煎治疗组小鼠睾丸生精小管管壁较厚,细胞层次较宽,各级生精细胞排列较规则,基底面至腔面可见精原细胞、初级精母细胞、精子细胞等各个发育阶段的细胞,细胞增殖旺盛,可见到较多分裂期细胞,腔内可见成熟精子,间质稀少,血管丰富,间质细胞发育良好。结论强精煎具有修复睾丸病理损伤的作用。     

强精煎抑制实验小鼠睾丸生精细胞凋亡的机制研究

目的 观察强精煎对实验小鼠睾丸Fas和Fasl蛋白表达的影响,探讨其抑制生精细胞凋亡的机制.方法 将80只健康雄性昆明种小鼠分为正常组、模型组,强精煎组、黄精赞育胶囊组,除正常组用生理盐水外其他各组均以环磷酰胺注射液40 mg/kg腹腔注射造模,造模成功后,正常组及模型组分别给予蒸馏水,后两组分别给予相应药物灌胃治疗30 d.第31天处死小鼠,利用H-E染色观察小鼠睾丸病理形态,用免疫组织化学SABC法检测Fas和Fasl蛋白在小鼠睾丸实质组织中的表达.结果 与模型组比较,强精煎组和黄精赞育胶囊组睾丸Johnson 评分偏高,Fas和Fasl蛋白的表达率偏低(P＜0.01);与空白组比较,模型组Johnson 评分偏低,Fas和Fasl蛋白表达率偏高(P＜0.01);强精煎组和黄精赞育胶囊组差异无统计学意义(P＞0.05).结论 强精煎可以下调Fas和Fasl蛋白在受损伤小鼠睾丸实质组织中的表达,这可能是其抑制生精细胞凋亡的分子机制之一.     

强精煎对实验小鼠睾丸Bcl-2及Bax蛋白表达影响研究

目的:研究强精煎对实验小鼠睾丸Bcl-2、Bax蛋白表达及Bcl-2/Bax比值的影响。方法:80只成年健康雄性小鼠随机分成正常组、模型组、强精煎组和黄精赞育胶囊组各20只。除正常组外,其余3组采用环磷酰胺腹腔注射建立小鼠生精障碍模型,造模结束后第1天开始正常组和模型组灌胃给蒸馏水,其余两组分别给强精煎冲剂、黄精赞育胶囊混悬液,连续30天。结果:与模型组相比,正常组、强精煎组和黄精赞育胶囊组睾丸生殖细胞凋亡基因Bax蛋白表达率较低(P0.01)、Bcl-2蛋白表达率较高(P0.01)、细胞内Bcl-2/Bax比值较高(P0.01),正常组、强精煎组和黄精赞育胶囊组各组间比较睾丸生殖细胞中Bax、Bcl-2蛋白表达及Bcl-2/Bax比值相近(P0.05)。结论:强精煎治疗小鼠睾丸生精障碍的疗效与Bcl-2、Bax蛋白表达率及Bcl-2/Bax比值密切相关。     

温肾生精饮对生精细胞凋亡和组蛋白H3K9二甲基化的影响

目的研究温肾生精饮对环磷酰胺致小鼠睾丸生精细胞凋亡和组蛋白H3K9二甲基化(H3K9me2)的影响。方法将8周龄的60只昆明种雄性小鼠随机分为对照组、模型组、西药组和中药组,每组15只。对照组腹腔注射0.9%Na Cl溶液,模型组、西药组和中药组连续5天腹腔注射环磷酰胺(80μg·g-1·d-1的)然后将对照组和模型组小鼠灌胃0.9%Na Cl溶液,西药组、中药组小鼠分别灌胃克罗米芬、温肾生精饮。各组均干预30天,检测小鼠的体质量、睾丸重和附性腺重;观察睾丸生精上皮的发育且进行Johnsen评分;TUNEL法检测睾丸生精细胞的凋亡;免疫荧光法检测睾丸生精小管中H3K9me2蛋白的表达。结果与模型组和西药组比较,中药组显著提高了生精障碍小鼠的体质量、附性腺指数和小鼠睾丸组织的Johnsen评分(P0.05),促进了生精上皮的发育,显著减少了小鼠睾丸组织中凋亡的生精小管数和生精小管内凋亡的阳性细胞数(P0.05),上调了精子细胞中H3K9me2的表达水平。结论温肾生精饮能显著修复环磷酰胺致小鼠睾丸生精功能损伤,其修复机制可能与减少睾丸生精细胞凋亡,稳定精子细胞中H3K9me2的表达水平有关。     

精杞胶囊对环磷酰胺诱导大鼠生精细胞凋亡的抑制作用

目的探讨精杞胶囊对环磷酰胺诱导大鼠生精细胞凋亡的抑制作用。方法40只SPF级SD雄性大鼠随机分成5组:正常组、模型组、精杞低剂量组[500 mg/(kg·d)]、精杞高剂量组[1000 mg/(kg·d)]和丙酸睾酮组[5 mg/(kg·d)],每组8只。给药组用药14 d后,除正常组外,其余各组腹腔注射环磷酰胺25 mg/(kg·d)连续5 d,造模期间各给药组延续给药,造模结束后次日处死全部大鼠。HE染色法观察睾丸组织形态;透射电镜观察生精细胞超微结构;ELISA法检测血清睾酮(T)、卵泡生成素(FSH)和黄体生成素(LH)含量及附睾管腔液中唾液酸(SA)的含量;流式细胞仪分析精子细胞凋亡和细胞周期。结果与正常组比较,模型组睾丸曲精细管内各级生精细胞含量较少,结构杂乱,生精细胞核崩解、坏死,线粒体肿胀空泡化,嵴断裂,高尔基复合体结构紊乱。与模型组比较,各给药组病理减轻。与正常组比较,模型组大鼠T、FSH、LH、SA含量及各期细胞存活率、G1期细胞比例降低,凋亡率及S期细胞比例增加(P<0.01)。与模型组比较,给药组T、FSH、LH、SA含量及各期细胞存活率、G2期细胞比例增高,凋亡率及S期细胞比例降低(P<0.05,P<0.01)。与丙酸睾酮组比较,精杞低剂量组的大鼠血清T、FSH、LH及SA含量降低(P<0.01),精杞低、高剂量组细胞存活率下降,早期凋亡率和总凋亡率增加(P<0.05,P<0.01)。结论精杞胶囊对环磷酰胺所诱导的大鼠生精细胞凋亡有抑制作用,其机制可能与调节生殖激素激素水平有关。     

温肾生精饮治疗生精障碍的实验研究

目的：临床上利用温肾生精饮治疗男性生精障碍,已取得了显著疗效,本实验利用生精障碍小鼠模型探讨温肾生精饮促进精子生成的可能作用机制。方法：利用环磷酰胺对昆明小白鼠建立生精上皮损伤模型,对造模后的小鼠分别灌服温肾生精饮或等量生理盐水,灌服20天后检测小鼠附睾尾精子质量,并进行睾丸组织学检查和超微结构观察。结果：中药组小鼠附睾活精子的百分率和精子密度显著高于模型组;中药组小鼠睾丸生精小管结构规则,生精上皮排列整齐,上皮层数较模型组显著增多;中药组小鼠睾丸的超微结构与模型组相比,间质细胞胞质内脂滴较少,线粒体较多,溶酶体较多,间质细胞显示出旺盛的分泌能力。结论：温肾生精饮提高了间质细胞的分泌功能,维持着睾丸生精小管内高水平睾酮,以增加生精上皮层数,促进精子发生,提高正常精子的比率。     

脾气虚对大鼠睾丸生精细胞凋亡的影响

目的：观察脾气虚对大鼠睾丸生精细胞凋亡的影响,探讨脾气虚引起不育的病理机制。方法：选用雄性Wistar大鼠40只,随机分为正常组、脾气虚21天模型组、35天模型组及50天模型组。采用双因素复合法即苦寒泻下加劳倦过度法（大黄灌胃加游泳法）建立脾气虚模型,流式细胞术分别检测各组大鼠睾丸凋亡细胞数及各级生精细胞百分比。结果：正常组出现低平的凋亡峰,各模型组出现明显的凋亡峰,且随着造模时间的延长凋亡峰增高。各模型组1C和4C生精细胞百分比较正常组明显降低,以50天模型组为甚。结论：脾气虚可引起睾丸生精细胞大量凋亡,各级生精细胞数量减少,这可能是脾气虚引起睾丸生精功能障碍从而导致不育的根本机制。     

扶精煎抑制小鼠生殖细胞凋亡作用的机制研究

目的:观察中药制剂扶精煎口服液对小鼠生殖细胞凋亡及抗氧化作用的影响。方法:运用环磷酰胺腹腔注射法制造小鼠生殖细胞损伤模型,并用扶精煎口服液灌胃治疗3周。用流式细胞仪检测小鼠生殖细胞凋亡率、睾丸组织超氧化物歧化酶(SOD)活力、丙二醛(MDA)含量。结果:与模型组比较,扶精煎大、中剂量组SOD活力显著升高,差异有显著性意义(P<0.05);生殖细胞凋亡率、MDA含量显著降低,差异有显著或非常显著性意义(P<0.05,P<0.01)。扶精煎小剂量组MDA含量亦显著降低,差异有显著性意义(P<0.05)。扶精煎各组间存在量效关系。结论:通过增强机体抗氧化能力,减轻自由基对细胞DNA的损伤,是扶精煎降低生殖细胞凋亡率的途径之一。     

调免毓麟汤对免疫性不育大鼠睾丸生精细胞凋亡的影响

目的:观察免疫性不育大鼠睾丸生精细胞凋亡的变化以及调免毓麟汤对免疫性不育大鼠睾丸生精细胞凋亡的影响.方法:采用同种异体抗原主动免疫法复制免疫性不育雄性大鼠模型,并予分组给药(调免毓麟汤低、中、高剂量组和醋酸强的松组分别给予相应药物,正常组及模型组予生理盐水灌胃).结果:模型组大鼠睾丸生精细胞凋亡数、凋亡率与各治疗组比较有极显著性差异(P＜0.01),调免毓麟汤低剂量组与醋酸强的松组比较差异不显著(P＞0.05),调免毓麟汤中、高剂量组与醋酸强的松组比较有极显著性差异(P＜0.01).结论:调免毓麟汤中、高剂量组能显著降低模型大鼠生精细胞凋亡率,提高模型大鼠各级生精细胞数量.     

电针对肥胖c57BL/6小鼠生精细胞凋亡的影响

目的:研究电针对肥胖c57BL/6小鼠生精细胞凋亡的影响。方法:SPF级雄性C57BL/6小鼠随机分为6组:正常组、模型组、阳性对照组(45 mg·kg~(-1))、电针7、14、21 d组,每组10只。正常组用普通饲料喂养外,其余各组小鼠采用高脂饮食诱导8周,制备肥胖小鼠模型。造模成功后,电针组选取关元、肾俞、三阴交电针干预。观察各组小鼠的体质量、Lee's指数、血清CHO、TG、LP和ADPN水平及性激素LH、FSH和T的差异,检测睾丸组织Bax和Bcl-2蛋白的表达情况和生精细胞凋亡率。结果:电针干预组明显降低Lee's指数、血清CHO、TG、LP、ADPN水平,促凋亡蛋白Bax表达下调,抗凋亡蛋白Bcl-2表达上调,凋亡指数下降。结论:电针能有效干预肥胖小鼠生精细胞的凋亡,降低小鼠体质量和肥胖程度,且干预效果与电针干预时间有一定相关性。