金银花提取物多指标成分含量及指纹图谱同时检测研究

 目的 建立金银花提取物中7种活性成分（新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、异绿原酸B、异绿原酸A及异绿原酸C）含量及指纹图谱同时检测的方法。 方法 以AkzoNobel Kromasil C₁₈色谱柱（4.6 mm×250 mm,5 μm）,乙腈-0.1％磷酸溶液梯度洗脱,测定波长326 nm,柱温30 ℃,流速1.0 mL·min^-1。结果 7种成分的线性关系良好,精密度、稳定性、重复性的RSD均低于3％,加样回收率为97.98％～99.29％。结论 该方法简便、灵敏、准确,可用于金银花提取物的质量控制。     

咖啡酸分子烙印聚合物的制备及其在金银花抗炎作用评价中的应用研究

目的 制备咖啡酸分子烙印聚合物（MIP）并特异性地去除金银花提取物中的咖啡酸，考察咖啡酸去除前后金银花提取物抑制前列腺素E₂（PGE₂）释放的变化，从整体上评价其抗炎活性。方法 采用溶胶-凝胶法，以粒径为62~105 μm的二氧化硅微珠为载体、咖啡酸为模板分子、(3-氨丙基)三乙氧基硅烷为功能单体、四乙氧基硅烷为交联剂、四氢呋喃为溶剂，合成了咖啡酸MIP。以此MIP作为液相色谱固定相，以甲醇-乙酸（500∶1和9∶1）为流动相，特异性去除了金银花提取物中的咖啡酸。通过脂多糖刺激巨噬细胞RAW264.7释放PGE₂实验评价去除咖啡酸前后金银花提取物的抗炎作用。结果 溶胶-凝胶法制备的咖啡酸MIP能够从复杂体系中特异性地分离和富集微量的咖啡酸，对咖啡酸的容量因子和烙印效率分别为15.8和9.7，最终从金银花提取物2.6 g中分离了咖啡酸146 μg，纯度为92%，回收率为89%。金银花提取物和去除咖啡酸的提取物在质量浓度为100、200、400 μg·mL^–1时对脂多糖诱导的RAW264.7细胞释放PGE₂的抑制率分别为5.8%、35.6%、62.5%和5.4%、13.3%、57.5%，去除微量咖啡酸以后的提取物在3个质量浓度时的抑制率较金银花提取物均有所降低。结论 咖啡酸是金银花提取物抗炎活性的一个重要成分，咖啡酸分子烙印聚合物可以实现金银花提取物中微量咖啡酸的特异性分离，分子烙印技术能够在保证中药完整性的前提下评价中药的药理活性。     

低氧条件下四逆汤及组方药提取物对大鼠血管内皮细胞释放PGI2,TXA2和NO的影响

目的 :观察四逆汤提取物 (DRE)及其组方药提取物对低氧条件下大鼠血管内皮细胞释放血栓素A₂(TXA₂ )、前列环素 (PGI₂ )和一氧化氮 (NO)的影响。方法 :低氧处理的大鼠血管内皮细胞经四逆汤及其组方药提取物作用后 ,取条件培养液 ,采用放射免疫法及Griess反应测定培养液中的PGI₂ ,TXA₂ 和NO的代谢产物 6 酮 前列腺素F_1α(6-keto-PGF_1α) ,血栓素B₂ (TXB₂ )及亚硝酸盐 (NO₂ -)含量。结果 :与对照组比较 ,DRE、甘草提取物 (LE)、干姜提取物 (GE)、附子提取物 (AE)、甘草加附子提取物 (ALE)、干姜加附子提取物 (AGE)可以显著增加低氧处理的大鼠血管内皮细胞培养液中 6-keto-PGF_1α的含量及 6-keto-PGF_1α/TXB₂ 的比值 ,但对TXB₂ 的含量没有显著影响。DRE组对 6-keto-PGF_1α含量的影响显著高于LE ,GE ,AE ,ALE ,AGE组。DRE组对 6-keto-PGF_1α/TXB₂ 比值的影响显著高于GE ,AE ,ALE组。与对照组比较 ,DRE ,LE ,GE ,AE ,AGE ,ALE组显著提高血管内皮细胞培养液中NO₂^-的含量。DRE的药理作用显著高于GE ,AE ,ALE组。结论 :四逆汤提取物增加低氧处理的大鼠血管内皮细胞培养液中NO ,PGI₂含量及PGI₂ /TXA₂ 的比值。四逆汤提取物的药理作用强于组方药提取物。     

白头翁总皂苷提取物的基本理化性质考察

目的： 检测白头翁总皂苷提取物的表观溶解度、表观油水分配系数及其在体外胃肠液中的稳定性。 方法： 以白头翁皂苷类成分（B₃,B_D,B₇）为指标,采用饱和法测定表观溶解度,摇瓶法测定油水分配系数,考察白头翁总皂苷提取物在体外胃肠液中的稳定性。采用ELSD-HPLC测定指标成分含量,流动相甲醇（A）-水（B）梯度洗脱（0~28 min,25%~10%B）。 结果： 3种白头翁皂苷类成分中B₇的溶解能力最强。白头翁总皂苷提取物在不同pH缓冲液中油水分配系数均很小。指标成分在胃蛋白酶、胰蛋白酶环境较稳定,RSD均<5%。 结论： 白头翁总皂苷提取物在弱碱性环境中溶解能力最强。白头翁皂苷类成分的亲脂性较弱,较难通过肠壁的脂质膜与水性层吸收进入体内。白头翁总皂苷在体外胃肠液环境中较稳定。     

HPLC测定复方金银花颗粒中绿原酸与黄芩苷含量

 目的建立复方金银花颗粒中绿原酸和黄芩苷的HPLC含量测定方法。方法采用Eclipse XDB-C₁₈色谱柱(4.6mm×150mm,5μm),流动相:甲醇-0.2%磷酸水溶液,流速:1.0mL·min^-1,检测波长:324nm,柱温:室温。结果绿原酸回归方程为ρ=40282A-13.106,r=0.9999,线性范围为0.86～41.28mg·L^-1,平均回收率为100.14%(RSD=1.26%);黄芩苷回归方程为ρ=22664A-13.889,r=0.9995,线性范围为0.98～47.04mg·L^-1,平均回收率为100.06%(RSD=1.39%)。结论本方法稳定,重现性好,操作简单,是检测复方金银花颗粒中绿原酸与黄芩苷的较理想方法。     

电化学法研究枸杞子及黄精对活性氧自由基的清除作用

 目的:研究枸杞子和黄精对活性氧自由基(O^-·₂和·OH)的清除作用。方法:通过邻苯三酚在碱性环境下自氧化产生O^-·₂,Fenton体系产生·OH,自旋捕集剂PBN捕捉产生的·OH。单扫示波极谱法检测枸杞子和黄精对O^-·₂和·OH的抑制作用。结果:枸杞子和黄精对O^-·₂和·OH具有明显的抑制作用。分别计算了它们的IC₅₀值。枸杞子对O^-·₂和·OH的清除能力为:同仁堂宁夏枸杞>市售宁夏枸杞>河北枸杞>内蒙枸杞。黄精对O^-·₂和·OH的清除效能力:酒制黄精>蜜炙黄精。结论:枸杞子和黄精都能有效地清除活性氧自由基(O^-·₂,·OH)具有抗氧化作用,可能是它们所具有的抗氧化等药理作用机理之一。     

RP-HPLC测定四川产红毛五加药材茎皮及叶中不同采收期绿原酸的含量

目的:分析四川产红毛五加药材中不同采收期茎皮及叶中绿原酸含量的差异。方法:测定四川产红毛五加茎皮药材及叶中不同采收期绿原酸的含量。色谱条件:KromasilC₁₈柱(4.6mm×250mm,5μm),柱温30℃。流动相乙腈-2‰磷酸水溶液(10∶90),检测波长327nm,流速1mL·min^-1。结果:绿原酸在0.355～3.55μg与峰面积具有良好的线性关系;回归方程为Y=2.11×10⁶X-2.24×10⁵,r=0.9995(n=6);平均回收率为100.1%,RSD为0.9%(n=9)。结果:红毛五加茎皮药材花期(6～7)月绿原酸含量较低,其苗期(3～4月)、果期(8～9月)的含量均保持在比较高的水平;同采收时间的叶中绿原酸高于茎皮。结论:从成分绿原酸的角度考虑,建议川产红毛五加叶可作为绿原酸提取新的源料,茎皮药材不在花期(6～7月)采收。     

金银花提取液中绿原酸的快速定量

目的：建立金银花提取液中绿原酸的快速含量测定方法。方法：采用反相高效液相色谱法测定金银花提取液中绿原酸的含量,同时测定样品的紫外光谱,选择和高效液相测得绿原酸含量相关性最佳的波长点,建立绿原酸含量的紫外预测方程,并另取11批金银花提取液对预测方程进行检验。结果：高效液相色谱法测定绿原酸在0.09～2.25 μg线性关系良好；加样回收率为100.4%,精密度为1.1%(n=5)。紫外光谱中和绿原酸含量相关性最佳的波长点为294 nm,绿原酸质量浓度(C,mg·mL^-1)与294 nm下的吸光度(A)相关方程C＝2.703 425A-0.129 18(r=0.992 9,n=19)；绿原酸含量测定值和预测值之间具有良好的相关性(r=0.995 2,n=11),方法精密度为0.2％(n=6)。结论：该方法检测金银花提取液中绿原酸含量简捷,快速,准确,可用于金银花提取液的快速质量控制。     

银杏叶和山楂叶的抗氧化作用

 目的：研究银杏叶、山楂叶提取物的抗氧化作用。方法：采用荧光法测定过氧化作用的产物丙二醛含量；分光光度法测定银杏叶、山楂叶提取物对氧自由基(H₂O₂，O₂)的抑制作用。结果：银杏叶(G)、山楂叶(H)的提取物能抑制小鼠肝匀浆在37℃温育下生成的丙二醛，抑制率G为68.5%，H为76.9%。抑制由邻苯三酚在pH8.4自氧化产生的O₂(与对照组相比,G:P＜0.01、H:P＜0.05)，并能降低由H2O2所致的血红蛋白氧化和红细胞的溶血作用(溶血率H₂O₂为10.9%，经G和H抗氧化作用后分别为5.7%和9.2%)。结论：银杏叶、山楂叶提取物对氧自由基具有强的抑制作用。     

葛根提取物对正常及去势大鼠血清雌激素水平影响的研究

目的 :研究葛根提取物对大鼠雌激素水平的影响。方法 :将 80只成年雌性大鼠随机分成 4组 ,每组20只 :正常对照组 ;正常 +灌胃葛根提取物 ,30d ;去势组 ,去势 +灌胃葛根提取物 ,30d。抽血测定血清E₀ ,E₂ ,E₃ ,睾酮等性激素水平 ;FSH ,LH ,PRL ,GH等促性激素水平。结果 :去势后 ,E₂ ,E₃ 显著下降 (P<0.05) ;E₀ 有所下降 ,但差异无显著性 (P>0.05) ,睾酮以及FSH ,LH ,PRL ,GH等垂体分泌激素增高 (P<0.05)。葛根提取物灌注后 ,正常组雌激素和促性激素水平均有不同程度的下降 ;去势动物的E₂ ,E₃ 恢复正常 ;E₀ 和睾酮比正常组增高 (P<0 .05) ,但睾酮水平与去势组比较差异无显著性 (P>0.05)。结论 :葛根提取物可恢复去势大鼠的雌激素水平 ,提高促性激素水平 ;在正常大鼠体内 ,该物质表现为抗雌激素作用。     

杨桃根多糖体外抗氧化作用的研究

目的:探讨杨桃根多糖(Yangtaogen polysaccharide,YTGP)的抗氧化活性。方法:邻苯三酚自氧化法和邻二氮菲-Fe2+/H2 O2体系研究YTGP对自由基的作用,用硫代巴比妥酸法测小鼠肝中丙二醛(MDA)含量。在体外化学模拟条件下测定杨桃根多糖的总还原能力。结果:YTGP能有效抑制MDA的产生,能明显地抑制.OH和O2-的生成。结论:YTGP在体外有明显的抗氧化作用。     

碱性蒙脱石抗酸剂性能测定及评价

 目的 对碱性蒙脱石抗酸剂进行性能测定及评价。方法 测定抗酸剂的活性成分含量、溶解度及粒度等参数,并进行BET、X-射线衍射法(XRD)和扫描电镜(SEM)表征分析,通过急性毒性实验、体外抗酸实验以及胃黏膜保护实验对抗酸剂进行评价。结果 活性成分Ca(OH)₂的含量和溶解度分别为37%和84 mg·L^-1,活性成分Ca(OH)₂负载比较牢固,碱强度大大下降。粒度和比表面积分别为8.3 μm和37.5 m²·g^-1,有利于吸附胃酸和形成胃黏膜保护。X-射线衍射法表征结果显示,抗酸剂保留了蒙脱石的结构,扫描电镜图谱显示,抗酸剂的表面比较光滑,利于黏膜保护。急性毒性实验、体外抗酸实验和胃黏膜保护实验结果表明,抗酸剂安全无毒,并表现出优良的抗酸和胃黏膜保护性能。结论 碱性蒙脱石抗酸剂是一种优良的抗酸剂及胃黏膜保护剂。     

玉郎伞豆甾醇的体外抗氧化活性研究

目的：研究玉郎伞一种甾醇类化合物豆甾醇（stigmaserol）的体外抗氧化活性。方法：配制含磷酸盐缓冲液（pH 8.3）50 mmol·L^-1、连苯三酚0.2 mmol·L^-1 的溶液,建立连苯三酚氧自由化产生氧自由基（O₂^-·）发生体系;配制含邻二氮菲0.75 mmol·L^-1,FeSO₄ 0.75 mmol·L^-1、磷酸盐缓冲液（pH 7.3）150 mmol·L^-1的溶液,建立由邻二氮菲-Fe²⁺/H₂O₂产生羟自由基（·OH）的发生体系,以维生素C（Vit C）为阳性对照,采用紫外-可见分光光度法,测定豆甾醇对O₂^-·和·OH的清除及抑制作用。结果：高、中浓度豆甾醇对·OH有明显的清除作用,清除率分别为39.3%,9.9%（P<0.01或P<0.05）;对O₂^-·有明显的清除作用,清除率分别为61.2%,30.4%（P<0.01）,且能显著减小O₂^-·的生成速率,抑制率分别为38.3%,47.8%（P<0.01）。结论：豆甾醇在体外具有较强的抗氧化活性。     

塞隆骨与虎骨中矿物质元素的比较

目的对比分析国家一类动物药塞隆骨和禁用传统中药材虎骨中的19种矿物质元素的含量.方法骨骼样品经灰化或消解处理后,采用原子吸收光谱法、氢化物原子荧光光谱法、催化极谱法等分析方法测定矿物质元素.结果两种动物骨骼中元素含量差异显著,塞隆骨11种元素高于虎骨,特别是Cu、Zn、Fe、Mn、Se等生命活动必需微量元素塞隆骨极为显著地高于虎骨,而组成骨骼的主要成分Ca、P则为虎骨高于塞隆骨.矿物质元素在头骨、脊梁骨和腿骨中分布非常不平衡,多数元素以头骨中分布最为丰富,而5种常量元素Ca,P,Na,Mg,K的含量为腿骨＞头骨＞脊梁骨.骨骼中主要成分Ca和P的存在形式主要为羟磷灰石Ca10(PO4)6(OH)2.结论塞隆骨骨骼中的矿物质元素与虎骨有可比性,必需微量元素塞隆骨明显优于虎骨.     

Ca(OH)2处理铁棍山药块茎保鲜技术对品质的影响

试验研究了 Ca(OH)2处理对铁棍山药采后贮藏过程中块茎品质的影响.结果表明:Ca(OH)2处理可以有效地阻止水分的散失,对淀粉、山药多糖的影响较小.对氨基酸的影响较大,使得其含量下降,导致营养成分丧失.     

灯盏细辛的抗氧化活性研究

目的:研究灯盏细辛6个化合物的抗氧化活性.方法:以灯盏细辛为原料,采用有机溶剂提取法和色谱柱法对灯盏细辛中化学成分进行提取与分离,利用核磁共振等波谱学方法进行结构鉴定,体外法检测6个化合物对1-二苯基-2-苦味酰肼自由基清除法( DPPH),2,2′-联氨-双-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)自由基清除法(ABTS),O2·自由基和·OH自由基的清除能力,并以维生素C(Vc)为阳性对照,结果:6个化合物者对DPPH,ABTS,O-2·,·OH自由基均具有清除作用,且与浓度呈良好的量效关系,6个化合物清除自由基能力与Vc相似.结论:灯盏细辛中的6个化合物均具有较强的抗氧化活性.     

五味子红色素抗氧化活性

目的:研究五味子红色素的抗氧化作用.方法:采用紫外-可见分光光度法,以维生素C(VC)和维生素E(VE)作为阳性对照品,通过测定清除二苯代苦味酰基自由基( DPPH·)、超氧阴离子自由基(O2-·)、羟基自由基(·OH)的能力,研究五味子红色素的抗氧化活性.结果:五味子红色素清除3种自由基的EC50分别为:清除DPPH·能力(27.95 mg·L-1)、清除·OH能力(98.03 mg·L-1)、清除O2-·能力(154.270 mg·L-1),其清除自由基能力与VC相差不大,远强于VE.结论:五味子红色素具有较强的抗氧化活性,且成明显的量效关系.     

健脾颗粒提取工艺的优选实验研究

目的　确定健脾颗粒中挥发油和橙皮苷的提取工艺条件。方法　以挥发油增量为指标 ,考察蒸馏液体积与挥发油增量之间的关系 ;考察加水量、煎煮时间及 Ca(OH ) 2 量等因素对橙皮苷提取效果的影响。结果　陈皮挥发油与橙皮苷最佳提取条件为 :药材加 11倍水进行水蒸汽蒸馏 ,收集 5倍体积的蒸馏液 ,药渣加(8+6 +4)倍水和药材投料量 12 %的 Ca(OH) 2 ,回流 (0 .5 +0 .5 +0 .5 ) h。结论　该最佳工艺是稳定可行的     

陈皮挥发油与橙皮苷提取工艺的实验研究

目的 :研究陈皮挥发油和橙皮苷提取的最佳工艺条件。方法 :以挥发油增量为指标 ,以及提取的产物和橙皮苷含量来考察加水量、蒸馏时间及 Ca(OH) 2 加量等因素对提取效果的影响。结果 :最佳提取条件为 :药材加 12倍水进行水蒸汽蒸馏 ,收集 6倍体积的蒸馏液 ,药渣加 (9+7)倍水和药材投料量 12 %的 Ca(OH) 2 ,回流 (0 .5 +0 .5 ) h。结论 :该最佳工艺是稳定可行的。