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相似文献
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1.
ITS2序列鉴定筋骨草及其近缘种   总被引:1,自引:0,他引:1  
本研究对筋骨草ITS2区段测序,探讨该片段用于中药筋骨草、白苞筋骨草、白毛夏枯草和夏枯草种间分子鉴别和系统学研究中的意义,我们对核基因ITS2区段进行PCR扩增并测序,获得了该区间的完整序列,所得序列用软件MEGA4.0进行相关分析。测得筋骨草、白苞筋骨草、夏枯草和白毛夏枯草的ITS2片段长度分别为312bp,304bp,303bp,304bp。四个物种ITS2片段序列的遗传距离(Kimura2)为0.010~0.175,各个筋骨草种内的不同产地该序列无差异。用MP法根据ITS2序列的遗传距离建立系统发生树,聚类结果和形态分类相符。根据ITS2序列特征,能有效区分筋骨草和其他易混中药材。ITS2具有做为鉴定的条形码序列的潜力。应用该序列可以有效鉴定筋骨草及其近缘种。  相似文献   

2.
目的:通过研究比较不同种质和表型的当归与地方习用品东当归、牡丹叶当归的差异,建立当归与东当归、牡丹叶当归之间的分子鉴别。方法:对14个不同种质和表型的当归及其地方习惯用品东当归、牡丹叶当归的ITS序列进行测序和分析,探讨该片段在中药当归分子生物学水平上的鉴定意义。结果:测得当归14个个体的ITS-1,5.8S rDNA和ITS-2全序列及18S rRNA基因3′端和26S rRNA基因5′端部分碱基序列,共约664bp,其中ITS1序列长度215bp,5.8S长162 bp,ITS2序列长度为223bp。当归与东当归的遗传距离为8.6,与牡丹叶当归的遗传距离为9.6,而东当归与牡丹叶当归的遗传距离为10.7。结论:从ITS序列结果来看,两种表型的绿茎当归和紫茎当归ITS序列并无区别,栽培和野生的当归其ITS序列也完全相同。用ITS区序列来对不同种质不同表型的当归的遗传多样性进行分析并不适宜。但高度保守的ITS区可以用来鉴定当归与东当归、牡丹叶当归。  相似文献   

3.
不同产地何首乌的ITS序列研究   总被引:2,自引:0,他引:2       下载免费PDF全文
张宏意  石祥刚 《中草药》2007,38(6):911-914
目的研究不同产地何首乌的ITS片段遗传差异性,分析该片段在何首乌道地性的DNA分子鉴别和野生资源品种的鉴定及种质资源研究中的意义。方法从来自不同原产地的何首乌中提取总DNA,以核基因组ITS通用引物为引物进行扩增,扩增产物经纯化后,用PCR产物直接测序法进行测序。结果各样品rDNA的ITS及5.8S rDNA完全序列,18S和26S rDNA部分序列,共约648bp,其中ITS1长度为195bp,5.8S长度为164bp,ITS2长度为189bp。序列间共有17个变异位点。结论ITS序列可对何首乌的道地性做出鉴别,对野生资源品种的鉴定具有较好的分辨性。  相似文献   

4.
蒋明  吴丹  李嵘嵘  管铭  章燕如 《中草药》2015,46(16):2454-2459
目的通过测定和分析11种堇菜属药用植物的核糖体DNA内转录间隔区(r DNA ITS)序列,为该属药用植物的分子鉴定提供依据。方法利用PCR法克隆ITS序列,借助生物信息学工具进行序列分析、遗传距离估算和系统发育树构建。结果 11种堇菜属植物的ITS全长为612~638 bp,ITS1与ITS2的长度为251~265 bp和198~211 bp,5.8 S的长度十分保守,均为163 bp;ITS1、ITS2与5.8 S的信息位点数分别为50、23和3。11种堇菜属植物的遗传距离为0.025~0.137,紫花堇菜与七星莲的遗传距离最大,亲缘关系最远;紫花堇菜和鸡腿堇菜的遗传距离最小,亲缘关系最近。结论克隆到堇菜属11种药用植物的ITS序列,它们的信息位点丰富,可用于分子鉴定。  相似文献   

5.
蒋明  郭志平  章燕如  许鑫  朱欣  蒋晓颖  吕奕 《中草药》2016,47(23):4242-4246
目的克隆和分析7种斑叶兰属药用植物的ITS序列,为该属植物的分子鉴定提供依据。方法利用PCR法克隆ITS序列,在测序的基础上,借助生物信息学软件进行序列分析和系统发育分析。结果 7种斑叶兰属植物的ITS全长为700~702 bp,ITS1的长度为239~240 bp,ITS2为298~300 bp,而5.8 S的长度十分保守,均为162 bp;序列中检测到可变位点107个,其中信息位点34个。7种斑叶兰属植物的遗传距离为0.006~0.110,大花斑叶兰与高斑叶兰的遗传距离最大,亲缘关系最远,而斑叶兰和小斑叶兰的遗传距离最小,关系最近。结论克隆到7种斑叶兰属药用植物的ITS序列,它们信息位点丰富,这些位点可将7种植物完全区分。  相似文献   

6.
目的:本研究主要应用第二内转录间隔区(ITS2)序列作为DNA条形码进行分析,建立对岭南中药广东海桐皮、木棉花与其混淆品的快速鉴定法。方法:收集广东海桐皮等9个物种样本,提取样本基因组DNA,扩增ITS2 基因片段,对其产物进行双向测序。所得序列采用CodonCode Aligner进行拼接。利用MEGA 6.06软件进行种间变异及遗传距离分析,并构建系统进化树。结果:9个物种的ITS2序列长度范围为224-237bp,物种的种内遗传距离(0.000-0.017)明显小于种间遗传距离(0.045-0.820),NJ和ML聚类树显示,各物种样本独聚一支,表现出单系性。结论:ITS2序列能够有效鉴别植物海桐皮、木棉花与其混淆品,为其基原植物鉴定提供依据,为保证用药真实及其临床疗效提供分子鉴定方法。  相似文献   

7.
基于ITS2条形码序列鉴定中药材佩兰及其混伪品   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的:对中药材佩兰及其混伪品进行ITS2条形码鉴定,以确保该药材的质量以及临床疗效。方法:提取佩兰的DNA,利用PCR技术扩增其ITS2序列,双向测序,所得序列经过CodonCodeAligner拼接后,用软件MEGA5进行相关数据分析,计算其种内、种间遗传距离,并构建系统发育树。结果:佩兰药材的ITS2序列长度为218 bp;佩兰种内最大K2P距离为0.009,与混伪品种间最小K2P距离为0.024。ITS2序列的NJ系统聚类树可明显区分佩兰药材及其混伪品,表现出良好的单系性。结论:ITS2条形码序列能够成功鉴定中药材佩兰与其混伪品,为保障临床安全用药提供了新的技术方法。  相似文献   

8.
吴岩斌  张超  吴建国  吴锦忠  郑承剑 《中草药》2022,53(18):5807-5812
目的 应用ITS2和psbA-trnH条形码鉴定金线兰Anoectochilus roxburghii及其近缘种。方法 提取金线兰及其近缘种的DNA,对ITS2和psbA-trnH序列进行扩增和测序,计算物种种内、种间遗传距离,构建邻接法(neighbor-joining,NJ)系统聚类树直观反映鉴定结果。结果 经PCR扩增后测序,金线兰及其近缘种ITS2序列长度为250~254 bp,GC含量为48.2%~51.6%;psbA-trnH序列长度为636~704 bp,GC含量为31.8%~32.0%。根据K2P遗传距离计算,金线兰的种内遗传距离明显小于种间遗传距离。基于ITS2序列构建的NJ树结果显示,除长片金线兰A.longilobus外,金线兰与其余混伪品可以明显区分。基于psb A-trnH序列构建的NJ树结果显示,除长片金线兰和丽蕾金线兰A.lylei外,金线兰与其余金线兰属近缘种可以明显区分。结论 ITS2和psb A-trnH序列可以鉴别金线兰与其遗传距离较远的近缘种。  相似文献   

9.
广佛手rDNA ITS序列测定及特点的初步分析   总被引:3,自引:0,他引:3  
目的分析广佛手及其近缘种香橼的rDNA ITS序列及其规律。方法采用PCR直接测序技术测定广佛手和香橼rDNA ITS序列并作序列变异分析。结果4个植物样品rDNA ITS序列长度为644-672bp。其中5.8S rDNA长度为165bp,编码区较保守。广佛手和香橼的ITS1和ITS2序列平均遗传距离分别为0.0095和0.0142。结论rDNA ITS序列可为鉴定佛手提供分子参照系统。  相似文献   

10.
目的:豆科植物是多种民族药处方中必不可少的组分,利用ITS2序列鉴别15种豆科民族药材及其2种混伪品,以保障临床用药安全有效。方法:以17种豆科植物的ITS2序列为分子标记,对其进行了ITS2片段扩增和测序,并利用MEGA 5.0软件构建NJ系统聚类树,TaxonGap 2.4.1软件计算种内和种间遗传距离。结果:ITS2序列在试验样本中的测序成功率为100%。与数据库中下载的序列合并后,99条序列的长度为215~254 bp,比对长度为291 bp,变异位点数为86.3%。系统聚类树分析结果表明,有11个物种的ITS2序列分别聚成自展值大于70%的单系群,鉴定效率为64.7%;遗传距离分析结果表明,有12个物种的ITS2序列的种间差异大于种内差异,鉴定效率为70.6%。结论:采用系统聚类树法和遗传距离比较法,ITS2序列能够有效鉴别刺果苏木Caesalpinia bonduc(L.)Roxb.、刀豆Canavalia gladiata(Jacq.)DC.、决明Senna tora(Linnaeus)Roxburgh、榼藤Entada phaseoloides(L.)Merr、长柄岩黄芪Hedysarum longigynophorum Ni、红花岩黄芪Hedysarum multijugum Maxim.、鬼箭锦鸡儿Caragana jubata(Pall.)Poir.、白刺花Sophora davidii(Franch.)Skeels、紫花野决明Thermopsis barbata Benth.、披针叶野决明Thermopsis lanceolata R.Br.、天蓝苜蓿Medicago lupulina L.和歪头菜Vicia unijuga A.Br.等12个物种,研究结果为豆科民族类药材的分子鉴别提供了科学依据。  相似文献   

11.
4种中药体外抗结核分枝杆菌H37RV的研究   总被引:6,自引:0,他引:6  
目的研究中药夏枯草、积雪草、筋骨草和青蒿素的体外抗结核分枝杆菌H37RV的活性。方法采用改良罗氏固体培养基试管培养法进行活性检测。结果夏枯草醇提物抗结核效果明显;积雪草苷片、筋骨草及青蒿素均无效。结论夏枯草醇提物抗结核菌效果优于水提物;积雪草醇提物有微弱抑制结核杆菌活性,但其有效成分可能不是积雪草苷;青蒿素及二氢青蒿素无抑制结核分枝杆菌的活性。  相似文献   

12.
夏枯草与白毛夏枯草的性状及组织显微鉴定   总被引:6,自引:0,他引:6  
刘颖  范巧佳 《中药材》2007,30(10):1230-1234
目的:针对"白毛夏枯草"常与"夏枯草"混用的情况,为了更安全、准确地使用两味药材,对夏枯草Pru-nella vulgaris Linn.与白毛夏枯草Ajuga decumbens Thunb.进行比较研究。方法:对两者的根、茎、叶、花和种子等5个部分进行性状鉴定及显微鉴定。结果:两者根的横切面和叶柄切面区别不明显,茎横切面在形状、维管束结构方面区别明显。两者种子切片最大的区别在于有无表面浅沟、沟缘特化的棕黄色毛状突起、果脐外V型厚角组织,还有是否厚壁细胞排列有凸起。两者花粉粒、叶表面气孔指数、栅表比、气孔类型及花冠筒的毛环和腺毛结构也有诸多区别。结论:上述特征可作为夏枯草和白毛夏枯草药材的鉴别依据。  相似文献   

13.
目的:初步确定中药白毛夏枯草镇咳、祛痰作用的成分。方法:白毛夏枯草的提取物依次用石油醚、醋酸乙酯、正丁醇进行萃取,得到3个部位。小鼠被灌胃给予石油醚部位2.1g.kg-1,醋酸乙酯部位1.47g.kg-1,正丁醇部位1.71g.kg-1,记录浓氨水引起小鼠咳嗽的潜伏期和5min内的咳嗽次数。此外,计算小鼠呼吸道排出的酚红量。同时,通过3个部位的HPLC图谱的色谱峰平行比较其化学成分。结果:3个部位中的醋酸乙酯部位能显著延长潜伏期,减少咳嗽次数,同时增加酚红的排出量。而且,木犀草素和芹菜素被证实存在在这个部位。结论:白毛夏枯草醋酸乙酯部位有镇咳、祛痰作用,其中含有的木犀草素和芹菜素可能是其中的2个活性成分。  相似文献   

14.
目的:进一步研究金疮小草(又称白毛夏枯草)中的neo-克罗烷二萜.方法:采用硅胶柱层析对二萜化合物进行分离,利用NMR对结构进行鉴定.结果:从氯仿提取部位分离已知化合物金疮小草素A,C,D(Ajugacumbins A,C,D,1,2,3),ajugamarin A1(4)和新的neo-克罗烷二萜:金疮小草素H(ajugacumbin H,5).  相似文献   

15.
夏枯草提取物对α-淀粉酶抑制作用的初步研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的探讨夏枯草提取物对α-淀粉酶的抑制作用。方法采用水提和水提醇沉方法得到夏枯草水提物、浸膏、粗多糖,通过Van Loon′s碘比色法检测α-淀粉酶活性,以夏枯草水提物测定该酶动力学。结果夏枯草水提物对α-淀粉酶有抑制作用,呈量效关系,对该酶抑制类型为反竞争性抑制。夏枯草浸膏对α-淀粉酶抑制作用较水提物明显。结论夏枯草水提物、浸膏对α-淀粉酶存在抑制作用,有效部位可能在浸膏部分,为深入研究夏枯草提取物抑制单糖吸收作用提供了依据。  相似文献   

16.
夏枯草对Raji细胞生长和凋亡相关基因蛋白表达的影响   总被引:9,自引:0,他引:9  
张可杰  张明智  王庆端  刘文励 《中药材》2006,29(11):1207-1210
目的:探讨夏枯草体外抗淋巴瘤的作用,为临床应用夏枯草治疗淋巴瘤提供实验依据。方法:1.用MTT法测定夏枯草注射液对Raji细胞的生长抑制率,计算出IC50值。同时,用MTT法绘制两种浓度夏枯草注射液(50mg/m l,100 mg/m l)作用于Raji细胞的生长曲线。2.用倒置显微镜、姬姆萨染色法、MTT染色法光镜下观察细胞形态,用免疫细胞化学法检测夏枯草注射液对凋亡相关基因bc l-2、bax蛋白表达的影响,并用图文分析系统进行定量分析。结果:1.夏苦草注射液对Raji细胞生长具有明显的抑制作用,IC50(实际夏枯草浓度)为0.118 mg/m l,且在一定的剂量范围内夏枯草对Raji细胞的抑制作用具有明显的剂量依赖性,相关系数为0.97。2.夏枯草注射液(50mg/m l)作用于Raji细胞后,倒置显微镜,姬姆萨染色,MTT染色光镜下观察,均可见典型的凋亡细胞的形态学特征。免疫细胞化学结果显示,50 mg/m l夏枯草注射液作用于Raji细胞48 h后,bc l-2蛋白表达增强,而bax表示减弱,与对照组相比有显著性差异(P<0.01)。结论:夏枯草可明显抑制Raji细胞增殖,可望成为新的抗淋巴瘤药物,诱导Raji细胞凋亡可能是其发挥抗肿瘤作用的机制之一。  相似文献   

17.
Fu XR  Sun ZC  Zhang MZ 《中药材》2012,35(3):433-438
目的:研究夏枯草提取物对人B淋巴瘤Raji细胞及T淋巴瘤Jurkat细胞增殖的影响及其差异,探讨夏枯草提取物体外抗淋巴瘤的作用机制。方法:不同浓度的夏枯草提取物分别作用于Raji细胞及Jurkat细胞;48 h后分别收集各组细胞,应用MTT法、琼脂糖凝胶电泳法及流式细胞技术分别检测每组细胞的增殖抑制率、细胞凋亡率及细胞凋亡情况;Western blot检测BCL-2及BAX蛋白表达变化。结果:不同浓度的夏枯草提取物对Raji及Jurkat细胞均有明显的增殖抑制作用(P0.01),且对Raji细胞的抑制作用大于Jurkat,其对Raji细胞IC50(18.01±0.92)μg/mL显著低于Jurkat细胞(25.47±0.96)μg/mL(P0.05);凝胶电泳检测结果表明夏枯草提取物处理Raji及Jurkat细胞后均出现凋亡相关DNA Ladder;随夏枯草提取物浓度的增加,Raji及Jurkat细胞的早期凋亡率均显著增加,与空白对照组比较差异显著(P0.01),浓度为15、20、25μg/mL的夏枯草提取物作用于Raji及Jurkat细胞后的早期凋亡率分别为(9.4±0.25)%、(21.68±0.46)%、(35.03±0.35)%和(4.06±0.14)%、(13.59±0.23)%、(22.92±0.20)%,同浓度条件下,Raji细胞的早期凋亡率显著高于Jurkat细胞(P0.01);随夏枯草提取物浓度增加,实验组细胞中BCL-2蛋白的表达逐渐减弱,BAX蛋白的表达逐渐增强,与空白对照组比较均有显著性差异(P0.05),同浓度条件下,Raji细胞内BCL-2蛋白表达的下降程度、BAX蛋白表达的增加程度显著高于Jur-kat细胞(P0.05)。结论:夏枯草提取物具有抑制淋巴瘤细胞增殖的作用,其机制可能与调节BCL-2和Bax蛋白的表达以诱导细胞凋亡有关,且夏枯草提取物对Raji细胞的抑制作用大于Jurkat细胞。  相似文献   

18.
目的通过高效液相色谱电喷雾串联质谱(HPLC-ESI-MS/MS)手段鉴定夏枯草的主要化学成分。方法夏枯草采用水加热提取,提取液采用HPLC-ESI-MS/MS鉴定其所含的主要化学成分。结果通过保留时间、一级质谱和二级质谱信息从夏枯草水提液中鉴定或推测了8个主要化学成分的结构,其中5个有机酸类化合物通过对照品得到了鉴定。结论通过HPLC-ES〉MS/MS分析研究,夏枯草水提液的主要活性成分为有机酸类化合物。  相似文献   

19.
HPLC测定筋骨草中乙酰哈巴苷的含量   总被引:7,自引:0,他引:7  
目的:建立筋骨草中乙酰哈巴苷的含量测定方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱:PhenomenexLuna C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相乙腈-水(15:85);流速1.0 mL.min-1,检测波长197 nm。结果:乙酰哈巴苷含量测定的线性范围为0.6~3.6μg(r=0.999 3),平均加样回收率为99.1%,RSD为2.5%。结论:不同产地的筋骨草中乙酰哈巴苷的含量为0.40%~6.39%;本法简便,灵敏准确,可用于筋骨草的质量控制。  相似文献   

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