木瓜药材质量研究

目的考察不同产地木瓜药材的质量。方法采用2010年版《中国药典》规定方法测定不同产地木瓜药材的水分;采用高效液相色谱法测定齐墩果酸和熊果酸的含量。结果源自不同产地的10批木瓜药材中齐墩果酸、熊果酸的含量有显著差异。结论不同产地木瓜药材的质量存在差异。     

薄层扫描法测定棉团铁线莲中齐墩果酸的含量

棉团铁线莲Clematis hexapetala Pall．的干燥根及根茎系威灵仙的基原之一，收载于《中华人民共和国药典》2005年版一部。具有祛风除湿、通络止痛的功效，临床上主要用于风湿痹痛、肢体麻木等病症。该药材主要有效成分为齐墩果酸，药品标准中只做了定性鉴别，缺少定量控制。我们采用薄层扫描法测定了棉团铁线莲（威灵仙药材品种之一）中齐墩果酸的含量，结果稳定，重现性好，可作为该药材的质量控制方法。     

以木通皂苷为例探讨中药中总三萜皂苷含量测定方法

由于缺乏对照品,中药中三萜皂苷类成分的含量通常以比色法测定总皂苷含量来表征。但是,比色法专属性差,测定结果不够准确。因此,该文以木通皂苷为例探讨总三萜皂苷含量测定方法。采用HPLC测定木通药材酸水解产物中3种主要皂苷元阿江榄仁酸、常春藤皂苷元和齐墩果酸的含量。参考2015年版《中国药典》中银杏叶总黄酮醇苷的测定思路,以上述3种皂苷元含量之和乘以转换系数作为木通总三萜皂苷含量。LC-MS/MS分析结果显示mutongsaponin C和saponin PJI是木通中含有的2个最主要的三萜皂苷类化合物,且二者相对分子质量相同。因此,mutongsaponin C的相对分子质量与阿江榄仁酸、常春藤皂苷元和齐墩果酸相对分子质量的比值的均值被定义为转换系数。HPLC方法中采用ACE Excel 3 C18-AR色谱柱(4. 6 mm×150 mm,3μm)进行分离,甲醇-水(含有0. 04%冰醋酸和0. 02%三乙胺)为流动相,梯度洗脱,检测波长210 nm,流速0. 5 m L·min-1。结果显示阿江榄仁酸、齐墩果酸和常春藤皂苷元分别在1. 053～16. 84,0. 200～3. 200,1. 515～24. 24μg线性关系良好,平均加样回收率分别为97. 90%,97. 50%,100. 5%,RSD为2. 0%,2. 9%,2. 9%。方法学考察结果均符合含量测定要求。mutongsaponin C对3种皂苷元的转换系数的均值为2. 31。该方法简便,可靠,可用于木通药材中总三萜皂苷的含量测定,该思路可用于其他中药中总三萜皂苷的测定。     

不同产地桔梗药材中总皂苷及桔梗皂苷D的含量比较

目的:比较不同产地桔梗中总皂苷及桔梗皂苷D的含量差异,为该药材的质量控制与生产提供参考。方法:采用2005年版《中国药典》方法测定桔梗总皂苷含量,2010年版《中国药典》方法测定桔梗皂苷D的含量,对36批桔梗药材总皂苷及桔梗皂苷D含量进行测定。结果:赤峰产区10批样品总皂苷质量分数在5.02%~9.20%,桔梗皂苷D质量分数在0.1%~0.175%,二者含量分布较窄。其他产区桔梗药材含量分布较宽,与内蒙古桔梗药材品质存在较大差异。结论:各产地桔梗的质量总体较好,但不同产地间及同产地各桔梗样品间的质量及其稳定性存在较大差异,浙江产桔梗的桔梗皂苷D和总皂苷含量均较高,而赤峰产桔梗品质稳定性较好;从整体质量评价角度看,桔梗质量标准中宜增加总皂苷含量的限量规定。     

威灵仙商品药材品种调查研究

目的对甘肃、四川、云南、贵州及黑龙江省威灵仙商品药材主流品种进行调查研究。方法通过对中药材市场收集到的样品进行性状鉴别及显微鉴别,参照文献及与自采样品对照进行品种鉴定。结果与结论目前市售威灵仙商品药材主要品种有2000版《中国药典》收载的毛茛科铁线莲属植物威灵仙ClematischineseOsbeck、棉团铁线莲C.hexapetalaPall.及东北铁线莲C.manshuricaRupr.,湖南及浙江地方标准收载的同属植物山木通C.finetianaLevl.etVant.,还有《中国药典》及各地方标准都无收载的同属植物柱果铁线莲C.uncinataChamp、锥花铁线莲C.paniculataThunb、毛蕊铁线莲C.lasiandraMaxim.及菊科旋复花属植物显脉旋复花InulanervosaWall.也作为商品威灵仙在云南及四川市场上流通。     

对中国药典川木通的薄层色谱鉴别方法的商榷

以齐墩果酸为对照品,按中国药典的川木通薄层鉴别法对采集的11批川木通、白木通药材进行鉴别.结果表明,在上述川木通样品中均未检出齐墩果酸,而在白木通样品中检出齐墩果酸.     

对《中国药典》川木通药材薄层鉴别方法的改进

目的：研究川木通薄层色谱鉴别方法。方法：以齐墩果酸为对照品，按照《中国药典》川木通项下薄层鉴别方法以及改进的方法，对木通药材进行了鉴别。结果：按照药典的方法未检出川木通样品中的齐墩果酸，但在白木通样品中检出齐墩果酸；采用改进的方法，在两种药材中均能检出齐墩果酸。结论：改进后的川木通薄层色谱鉴别方法能改善薄层色谱鉴别效果。     

两面针商品药材的质量评价

目的:对市售两面针商品药材进行质量调查和评价。方法:参照2010年版《中国药典》两面针项下方法,对18批两面针商品药材进行性状鉴别、薄层色谱及高效液相法检测氯化两面针碱含量,并建立两面针HPLC指纹图谱方法,结合相似度评价对样品药材进行鉴别分析。结果:样品性状,薄层鉴别和含量测定的结果显示,9批药材有伪品掺杂现象;样品总灰分的含量是2.4%~6.4%,水分含量是7.0%~12.1%,醇溶性浸出物含量是2.2%~8.6%;HPLC测定中有2批样品检测不到氯化两面针碱,11批样品图谱与对照指纹图谱相似度低于0.8;18批药材均不符合2010年版《中国药典》标准。结论:目前市场上的两面针药材品质参差不齐,伪品掺杂现象比较严重。     

RP-HPLC测定分清五淋丸中齐墩果酸和常春藤皂苷元的含量

分清五淋丸收载于《中国药典））2005年版一部，具有清热泻火，利尿通淋之功效。现尚无含量测定方法，本实验参照《中国药典》2005年版一部相关品种项下和有关文献资料，对处方中主药木通所含的齐墩果酸和常春藤皂苷元进行了HPLC法含量测定的试验摸索，结果满意。可作为分清五淋丸质量控制指标。     

三叶木通不同部位有效成分含量比较研究

用高效液相色谱法测定三叶木通各部位中有效成分齐墩果酸和常春藤皂苷元的含量,结果:(1)常春藤皂苷元的平均含量:果皮＞种子＞茎＞叶＞根,齐墩果酸平均含量:根＞多年生茎＞叶＞果皮＞种子＞1年生茎;(2)三叶木通叶含有与藤茎相同的药用成分,而且含量仅次于茎,因此叶可作为三叶木通药用资源开发的一个新部位.     

威灵仙一种新伪品的生药学和分子生药学鉴别

目的:运用生药学和分子生药学研究思路和方法,对市场上一种威灵仙新伪品进行鉴别,为保障威灵仙药材的安全使用提供实验依据。方法:对威灵仙及其伪品进行性状、显微等生药学研究,描述威灵仙及其伪品的生药学鉴别特征。对威灵仙及其伪品的分子生药学研究,通过试剂盒提取样品的DNA,聚合酶链式反应(PCR)扩增及双向测序获得其内转录间隔区(ITS)序列,根据美国国家生物技术信息中心(NCBI)数据库中已收录的ITS序列进行相似度分析及DNA条形码溯源。结果:威灵仙及伪品的生药学鉴别特征主要有外皮颜色以及有无茎节等;横切面显微特征区别主要为有无髓。分子生药学研究表明,该伪品的基原植物为紫金牛科紫金牛Ardisia japonica。结论:该威灵仙伪品为紫金牛的茎及根茎,该伪品与威灵仙在成分、功能主治方面差别较大,在临床应用上应严格区分。     

威灵仙水提物对阿霉素耐药的人甲状腺未分化癌细胞株HTh74Rdox的作用机制

目的:探讨威灵仙水提物对阿霉素诱导耐药的人甲状腺未分化癌细胞株HTh74Rdox增殖的影响及机制。方法:用不同浓度威灵仙水提物处理HTh74Rdox后观察细胞形态;噻唑蓝(MTT)比色法检测威灵仙水提物对HTh74Rdox细胞的增殖抑制作用;流式细胞术检测HTh74Rdox细胞凋亡;蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测凋亡相关半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)及其活性片段(cleaved-Caspase-3),B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达。结果:威灵仙水提物对HTh74Rdox细胞的增殖有明显抑制作用,联合阿霉素后可减少阿霉素剂量;威灵仙水提物可显著诱导细胞凋亡(P0.01);且能明显提高cleaved-Caspase-3/Caspase-3,Bax/Bcl-2(P0.05)。结论:威灵仙水提物可以抑制HTh74Rdox细胞的增殖,其机制可能与提高cleaved-Caspase-3/Caspase-3,Bax/Bcl-2有关;联合化疗药物使用具有减毒增效的作用。     

基于大数据的风湿科常用中药饮片肾毒性初探

目的运用大数据方法,探讨在中医理论指导下的临床真实环境中,风湿科常用中药(泽泻、细辛、寻骨风、威灵仙)饮片的肾毒性情况及其相关影响因素。方法将储存于计算机系统中的龙华医院近5年间使用过泽泻、细辛、寻骨风、威灵仙的所有患者的个人资料(年龄、用药记录等)、处方以及肾功能(肌酐、尿素氮、24 h尿蛋白定量)等信息共1 256万条,通过大数据系统处理,分析肾毒性情况及其相关影响因素。结果使用泽泻、细辛、寻骨风、威灵仙四味中药的患者肾毒性的发生率分别为,泽泻1.15%,细辛2.46%,威灵仙1.50%,寻骨风0.00%。泽泻肾毒性的发生随着累积用药剂量的增加呈现上升趋势,而威灵仙、细辛未出现此情况。5年间临床使用寻骨风者仅有1例,累积用量300 g,未发生肾毒性情况。泽泻、威灵仙、细辛肾毒性的发生有随着年龄增加而上升的趋势。结论在中医理论指导下,通过君臣佐使配伍使用泽泻、细辛、威灵仙较为安全,肾毒性的发生率远低于相关的文献报道。     

威灵仙类药材的薄层色谱鉴别研究

目的建立威灵仙类药材的薄层色谱鉴别方法。方法以甲醇为溶剂超声提取,采用硅胶G薄层板,以三氯甲烷-丙酮(9∶1)、甲苯-乙酸乙酯-甲酸(20∶3∶0.2)、甲苯-丙酮-乙酸乙酯-甲酸(16∶4∶4∶0.25)、三氯甲烷-甲醇-水(9∶2∶2)为展开剂,对威灵仙类药材进行薄层定性鉴别研究。结果在365nm紫外灯下,威灵仙与混淆品的薄层色谱图有明显差异,在相同的色谱条件下,各样品的斑点颜色、位置、数量和Rf值均有差异,且斑点集中,分离效果好。结论该方法简便、易行、专属性强,可用于鉴别威灵仙类药材。     

威灵仙类药材的紫外谱线组法鉴别研究

目的 利用紫外谱线组法对威灵仙类药材进行鉴别.方法 采用紫外谱线组法,分别对氯仿、无水乙醇、水3种溶剂的威灵仙类药材浸出液进行紫外光谱扫描,并测定其吸收峰数目和其峰位值.结果 威灵仙类药材的紫外谱线组图像、最大吸收峰数目及峰位值具有较大差异.结论 该法简便、准确、灵敏,可鉴别威灵仙类药材.     

威灵仙提取物对糖尿病肾病大鼠的作用

目的:研究威灵仙提取物对糖尿病肾病大鼠模型的治疗作用。方法:SD大鼠,随机分为正常组,模型组,卡托普利组(10 mg·kg-1),威灵仙提取物高、低剂量组(500,250 mg·kg-1),除正常组外,其余各组大鼠ip链脲佐菌素(STZ)制备成糖尿病大鼠模型,ig给药,1次/d,连续给药12周,观察威灵仙提取物对大鼠肾功能尿素氮(BUN),血清肌酸酐(SCr),肌酸酐清除率(CCr),尿白蛋白,尿白蛋白排泄率(UAER),肾肥大指数指标,空腹血糖(FBG),血脂甘油三酯(TG),总胆固醇(TC)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和氧化指标白细胞介素-6(IL-6),丙二醛(MDA),超氧化物歧化酶(SOD),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的影响,以及肾组织病理形态学的变化。结果:与正常组比较,模型组大鼠血清BUN,SCr,CCr,IL-6,尿白蛋白,UAER,肾肥大指数和FBG的水平明显升高,TG,TC和LDL-C的水平明显升高,HDL-C的水平明显降低,肾脏MDA含量明显升高,SOD和GSH-Px的水平明显降低,均具有明显统计学差异(P0.05,P0.01),病理组织显示肾小球基膜和肾小管增厚和膨胀;与模型组比较,威灵仙提取物明显降低糖尿病模型大鼠血清BUN,SCr,CCr,IL-6,尿白蛋白,UAER,肾肥大指数和FBG的水平(P0.05),降低TG,TC和LDL-C的水平(P0.05),升高HDL-C的水平(P0.05),降低肾脏MDA的含量(P0.05),升高SOD和GSH-Px的水平(P0.05),同时显著减轻了糖尿病大鼠肾小球基膜和肾小管增厚和膨胀的程度。结论:威灵仙提取物对糖尿病肾病引起的肾损伤有显著的抑制作用。     

Trace heavy metals and harmful elements in roots and rhizomes of herbs: Screening level analysis and health risk assessment

Objective: Heavy metal and harmful element contamination are frequently reported in Chinese herbal medicines (CHMs), and roots and rhizomes parts showed a higher content than other parts. To investigate the residue level and assess the potential human health risk of heavy metals and harmful elements in roots and rhizomes, 720 batches of the sample representing 20 species of herbs from different sources were collected. Methods: The content of Pb, Cd, As, Hg, and Cu in the digests was determined using ICP-MS. The chronic hazard index estimate based on non-cancer hazard quotient (HQ) was applied for potential health risk assessment of Pb, Cd, As, Hg, and Cu via consumption of CHMs. Results: Compared with the Chinese limit standard (Chinese Pharmacopoeia Commission, 2020 edition) of Pb, Cd, As, Hg, and Cu in Ginseng Radix et Rhizoma, the exceedance percentage of Pb in total samples was 14.1%, which were generally far higher than Cd, As, Hg, and Cu. Health risk assessment results based on hazard quotient calculating showed that total HQ of Cu, Pb, As, Cd, and Hg in Pulsatillae Radix and Clematidis Radix et Rhizoma exceeded 1, with the value of 1.543 and 1.235. Besides, Arsenic had the highest HQ value (0.957) in Pulsatillae Radix. Conclusion: Consuming raw materials of Pulsatillae Radix and Clematidis Radix et Rhizoma may pose a potential risk and Arsenic residues in Pulsatillae Radix deserved special attention.     

基于显微和近红外方法定性鉴别中药材威灵仙不同基原品种的比较研究

分别采用显微和近红外方法对中药材威灵仙的2种不同基原品种药材进行显微鉴别和近红外鉴别.结果显示威灵仙的不同基原品种显微特征区别明显;近红外光谱特征峰相关性显著,类别区分明显.显微和近红外方法方法均能鉴别2种不同基原品种,但近红外光谱法简便快捷且无损,可为日后建立标准药材威灵仙近红外指纹图提供基础.     

基于GC-TOF-MS研究威灵仙总皂苷对佐剂性关节炎大鼠血清代谢谱的影响

观察威灵仙总皂苷(TSCR)对佐剂性关节炎(AA)大鼠血清代谢谱的变化,探讨其治疗AA可能的作用机制。采用弗氏完全佐剂诱导AA大鼠模型,观察大鼠的组织病理学变化。利用气相色谱-飞行时间质谱(GC-TOF-MS)结合主成分分析(PCA)和偏最小二乘法-判别分析(PLS-DA),对正常组、AA模型组和TSCR组3组之间的代谢谱进行分析,通过变量重要性投影(VIP)1结合P0.05筛选血清中潜在的生物标志物。与正常组相比,模型组大鼠血清中发现并鉴定出天冬氨酸、肌醇、苯乙醛等17个潜在生物标志物;与模型组相比,给予威灵仙总皂苷治疗16 d后,上述潜在生物标志物均有向正常水平回归的趋势。代谢组学分析揭示威灵仙总皂苷对AA大鼠具有一定的治疗作用,其机制可能与调节脂代谢、氨基酸代谢和能量代谢等有关。     

糖痹汤治疗糖尿病性周围神经病变59例疗效观察

观察糖痹汤治疗糖尿病周围神经病变的疗效。方法：对59例患者在糖尿病常规治疗基础上，加服糖痹汤(黄芪、苍术、葛根、丹参、麦冬、熟地黄、鸡血藤、羌活、威灵仙、独活、海风藤、益母草)，10天为1疗程。结果：显效23例，有效28例，无效8例。总有效率为86．4％。结论：糖痹汤治疗糖尿病周围神经病变疗效显著。