茯苓水提液对叠氮钠致原代培养的新生大鼠海马神经细胞线粒体损伤的影响

 目的 从生化和形态学的角度观察茯苓水提液对叠氮钠致原代培养的新生大鼠海马神经细胞线粒体损伤的影响。方法 新生大鼠海马神经细胞原代培养至第11天,吸弃培养液,加入MTT(o.4mg· mL^-1)温育4h,用自动酶标仪在550 nm处检测被神经细胞线粒体酶还原的MTT,的量,以此作为评价细胞活力的指标。通过间接免疫荧光(一杭为鼠抗a-hibulin抗体)的方法,利用激光扫描共聚焦显微镜观察来评价神经细胞骨架改变。结果 叠氮钠与培养细胞孵育能剂量依赖性地损伤细胞,64mmol ·L^{-1孵育4h时,细胞的线粒体酶还原MTT,的能力为对照组的(60.73±5.13)%,微管结构模糊、紊乱。茯苓水提液(10~20 mg·mL-1)与细胞预孵育24 h,能明显抵杭叠氮钠引起的神经细胞线粒体还原MTT的能力下降,微管结构紊乱。结论 茯苓对维持神经细胞线粒体的功能及微管结构方面有重要作用,对防治某些神经退行性疾病如老年性痴呆、血管性痴呆及帕金森氏病等,可能具有一定的应用前景。}     

茯苓水煎液对肾阴虚水肿大鼠的影响

目的:探究不同剂量茯苓水煎液对肾阴虚水肿大鼠体内指标的影响。方法:文章采用尾静脉注射盐酸多柔比星及灌胃给药甲状腺片混悬液的方法诱导形成肾阴虚水肿大鼠模型,并通过测定血清中环磷酸腺苷(cA MP)、环磷酸鸟苷(cG MP)、血清白蛋白(ALB)、血清总蛋白(TP)、肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)及尿液中尿蛋白等指标,考察不同剂量茯苓水煎液对肾阴虚水肿大鼠的影响。结果:与模型组比较,茯苓5倍水煎液组血清Scr、BUN含量显著降低,血清TP含量显著升高,尿蛋白含量显著降低,茯苓10倍水煎液组只有血清Scr含量显著降低。结论:茯苓水煎液对肾阴虚水肿具有一定程度的改善作用,且茯苓5倍水煎液的改善作用较强。     

固天泉胶囊水提液除杂工艺研究

目的:探讨大孔吸附树脂法、壳聚糖澄清法和乙醇沉淀法在固天泉胶囊水提液中除杂结果。方法:比较大孔吸附树脂法、乙醇沉淀法和壳聚糖澄清法所得到的浸膏得率及浸膏中人参皂苷Rg₁,Re的定性分析以及Rg₁、阿魏酸含量测定考察。结果:乙醇沉淀法所得的浸膏得率为17.2％,壳聚糖澄清法所得的浸膏得率为12.8％,大孔吸附树脂法所得的浸膏得率为3.1％,3种方法均能够较好地使水提液澄明,且后两者还能够在降低浸膏得率、保留有效成分、保证制剂稳定性方面优于前者,并能缩短生产周期,降低成本。结论:壳聚糖澄清试剂法较适合于固天泉胶囊水提液除杂工艺。     

冬虫夏草水提液和醇提液HPLC指纹图谱分析

目的:建立冬虫夏草水提液和醇提液的高效液相指纹图谱。方法:采用高效液相色谱对20批冬虫夏草和2批发酵冬虫夏草菌粉的水提液和醇提液进行分析;并对所获得的色谱数据进行相似度计算和聚类分析。结果:建立了冬虫夏草水提液和醇提液指纹图谱,水提液指纹图谱确定了7个共有峰,醇提液指纹图谱确定了8个共有峰;冬虫夏草水提液和醇提液指纹图谱相似度评价结果均显示20批冬虫夏草样本的相似度系数大于0.9,2批发酵冬虫夏草菌粉的相似度系数小于0.9;冬虫夏草水提液和醇提液共有峰聚类分析结果均显示,20批冬虫夏草与2批发酵冬虫夏草菌粉分别聚为不同类。结论:本文所建立的方法稳定可靠,可以对冬虫夏草质量进行综合评价,为其提高产品质量控制提供了依据。     

壳聚糖对黄芩水提液净化除杂工艺的研究

目的 筛选壳聚糖对黄芩水提液的最佳纯化工艺,从而优化黄芩苷的提取工艺.方法 以黄芩苷得重(得重= 粗品黄芩苷重量×黄芩苷浓度)为衡量指标,运用正交实验考察不同影响因素对絮凝效果的影响,同时采用HPLC测定其含量对工艺进行系统评价.结果 壳聚糖对黄芩水提液絮凝的最佳工艺条件:体系pH5,搅拌时间10 min,体系温度40℃,絮凝剂浓度0.5%.结论 壳聚糖对黄芩水提液具有较强的絮凝作用,该方法简单可行,可提高黄芩药材的利用率.     

九香虫水提液化学成分及其对乳腺癌细胞增殖的抑制作用

目的研究九香虫水提液化学成分及其对乳腺癌细胞增殖的抑制作用。方法制备九香虫水提液,采用GC-MS法分析九香虫水提液化学成分,利用SDS-PAGE电泳分析其蛋白组成。采用MTT法与形态学观察法检测九香虫水提液对人乳腺癌细胞MDA-MB-453、HCC-1937及小鼠乳腺癌细胞4T1增殖的抑制作用。结果九香虫水提液主要化学成分为L-苹果酸、L-核糖、半乳糖酸等;蛋白含有量为0. 843 mg/m L;蛋白分子量主要分布在75、35、30、25、12 k Da;水提液对人乳腺癌MDA-MB-453、HCC-1937细胞及小鼠乳腺癌4T1细胞体外增殖具有显著抑制作用,且呈剂量相关性,IC50值分别为0. 142、0. 059、0. 190 g/m L。结论九香虫水提液主要为氨基酸、脂肪酸、糖类物质,蛋白含有量较高,对人乳腺癌MDA-MB-453、HCC-1937细胞及小鼠乳腺癌4T1细胞的体外增殖具有显著抑制作用。     

夏枯草水提液及水提醇沉上清液降血压药效评价

目的： 探讨夏枯草水提液及水提醇沉上清液对自发性高血压大鼠（spontaneously hypertensive rat,SHR）血压的量效和时效关系。 方法： 采用水提、水提醇沉2种方法处理夏枯草,以SHR大鼠（n=72）为模型,以卡托普利作为阳性对照,考察不同剂量（2.5,5,10 g·kg^-1）的夏枯草水提液和醇沉上清液单次灌胃给药后不同时间点（0,2,5,7,10 h）对SHR 大鼠收缩压、舒张压、平均动脉压、心率等指标的影响。 结果： 给药后2 h 夏枯草水提液和醇沉上清液不同剂量均能显著降低SHR收缩压（p<0.05）,醇沉上清液高剂量（10 g·kg^-1）组能显著降低SHR舒张压（P<0.05）;给药后5 h,夏枯草水提液低剂量（2.5 g·kg^-1）组开始对SHR收缩压无显著影响,醇沉高剂量（10 g·kg^-1）组进一步降低舒张压;给药后7 h,仅醇沉上清液高剂量对SHR收缩压有显著影响（P<0.05）,其余各组对SHR舒张压、SHR平均动脉压和心率均无显著性影响。 结论： 夏枯草水提醇沉所得的上清液在去除部分杂质的情况下保留和富集了夏枯草降血压有效组分,为进一步研究夏枯草降血压物质基础及其制剂工艺提供参考。     

松根液对发酵茯苓菌丝产量和多糖成分的影响

目的观察松根液对发酵茯苓菌丝产量和多糖含量的影响及发酵茯苓菌丝与天然茯苓多糖含量的差别。方法加松根液与不加松根液发酵培养茯苓菌丝,将两者在菌丝产量、水溶性多糖含量方面进行比较;并将发酵菌丝与天然茯苓进行水溶性多糖含量比较。结果加松根液发酵培养的茯苓菌丝产量有提高,但水溶性多糖含量下降;发酵菌丝较天然茯苓水溶性多糖含量显著提高。结论松根液对发酵茯苓菌丝产量和多糖含量的影响不同;发酵茯苓菌丝多糖含量高于天然茯苓。     

翻白草水提液对大鼠胰岛细胞脂毒性损伤的保护作用

目的探讨翻白草水提液对大鼠胰岛细胞脂毒性损伤的影响。方法棕榈酸诱导Wistar大鼠原代胰岛细胞凋亡模型后,FDA/PI双染和流式法检测细胞凋亡,ELISA法测定GSIS水平,qPCR检测FAS、CPT-1 mRNA表达,Western blot检测AMPK蛋白表达,硫代巴比妥酸法测定细胞内丙二醛(MDA)活性,分光光度计法测定细胞还原型谷胱甘肽(GSH)活性。结果与对照组比较,棕榈酸组GSH活性、CPT-1 mRNA表达、p-AMPK蛋白表达显著降低,MDA含量、FAS mRNA表达显著增加(P0.05),而翻白草水提液+棕榈酸能明显逆转棕榈酸组上述作用。与翻白草水提液+棕榈酸组比较,BML-275(AMPK选择性抑制剂)组GSH活性、CPT-1 mRNA表达显著降低,MDA活性、FAS mRNA表达显著增加(P0.05)。结论翻白草水提液可能通过激活AMPK,抑制脂肪酸合成,促进脂肪酸β氧化,从而抑制氧化应激所致胰岛细胞脂性凋亡,最终改善胰岛素分泌功能。     

生脉散皂苷部位对大鼠培养心肌细胞内游离钙的调节作用

目的：研究生脉散皂苷部位对培养的大鼠单个心肌细胞内Ca^2+浓度的影响。方法：以Fluo-3AM负载心肌细胞，采用激光扫描共聚焦显微镜检测单个细胞内Ca^2+浓度的变化，结果：生脉散皂苷部位10μg/ml可明显增加心肌细胞内Ca^2+浓度，并使其持续在高水平（P＜0．01），，随后加入高Ca^2+和高K^+，对细胞内Ca^2+浓度无明显影响。生脉散泉苷部位100μg/ml诱导心肌细胞内Ca^2+浓度迅速明显增加后又迅速下降至静脉水平（P＜0．01），外加Ca^2+高K^+，不能刺激细胞内Ca^2+浓度明显增加，结论：生脉散皂苷部位对心肌细胞内Ca^2+浓度变化的影响与其浓度有关。     

茯苓素预防大鼠肾移植急性排斥反应的实验研究

目的探讨茯苓素(Poria cocos)预防大鼠肾脏移植急性排斥反应的作用和机制。方法以Wist-ar大鼠为供者,SD大鼠为受者,建立原位(腹腔)肾脏移植模型,移植前按照分组分别以生理盐水、茯苓素25mg.kg-1.d-1、茯苓素50 mg.kg-1.d-1和环孢素A(CsA)5 mg.kg-1.d-1灌胃。术后观察大鼠移植肾功能和存活时间,测定各组术后1周外周血中白细胞介素2(IL-2)和γ干扰素(IFN-γ)含量以及CD4+、CD8+细胞百分比和CD4+/CD8+的比值,并观察移植肾的病理变化。结果茯苓素50 mg.kg-1.d-1组和CsA组移植肾和受者存活时间较茯苓素25 mg.kg-1.d-1组和生理盐水组显著延长(P0.05),而且病理损害程度较茯苓素25 mg.kg-1.d-1组和生理盐水组明显减轻,但茯苓素50 mg.kg-1.d-1组较CsA组移植肾存活时间显著减少(P0.05)。各组移植肾功能和尿量变化与存活时间和移植肾病理变化相一致,茯苓素50 mg.kg-1.d-1组和CsA组肾功能异常发生时间明显晚于茯苓素25 mg.kg-1.d-1组和生理盐水组。茯苓素50 mg.kg-1.d-1组外周血IL-2和IFN-γ的含量较茯苓素25 mg.kg-1.d-1组和生理盐水组显著降低(P0.01),但显著高于CsA组(P0.01);茯苓素50 mg.kg-1.d-1组外周血CD4+细胞百分比显著低于茯苓素25 mg.kg-1.d-1组(P0.05)和生理盐水组(P0.01),CD8+细胞百分比显著低于生理盐水组(P0.05)。结论茯苓素对肾脏移植急性排斥反应有较好的抑制作用且与剂量呈正相关,但效果不如CsA。     

电针对局灶性脑缺血大鼠脑细胞内Ca2+含量的影响

目的：研究电针对局灶性脑缺血大鼠脑细胞内Ca^2+的调节作用。方法：利用激光共聚焦扫描显微镜观察缺血区活体脑片中脑细胞内Ca^2+的变化。结果：缺血1h，皮质部细胞内Ca^2+含量还未出现明显变化，而纹状体部细胞内Ca^2+的含量明显升高；缺血3h，皮质部和纹状体细胞内Ca^2+含量均出现显著的升高，且纹状体细胞内Ca^2+含量明显高于皮质部；缺血3h并给予电针治疗30min后，则皮质部和纹状体细胞内Ca^2+含量均出现明显的下降。结论：电针可迅速调节缺血区脑细胞内的Ca^2+含量，抑制胞内Ca^2+超载，从而保护脑缺血后继发神经元的损伤。     

大枣中性多糖对小鼠腹腔巨噬细胞胞浆游离Ca^2＋浓度的影响

目的：探讨大枣中性多糖（JDP－N）对小鼠腹腔巨噬细胞（MΦ）胞浆游离Ca^2 浓度（[Ca^2 ]i)的影响。方法：采用激光扫描共聚焦显微镜技术（LSCM）测定[Ca^2 ]i。结果：JDP－N能引起MΦ内Ca^2 浓度[Ca^2 ]i明显升高,[Ca^2 ]i的升高是由胞外Ca^2 内流和通过IICP（IP3-induced calcium release)和CICR（calcium-induced calcium release)机制释放细胞内贮存Ca^2 引起。结论：[Ca^2 ]i升高是JDP－N活化MΦ的重要信号转导通路。     

针刺镇痛与中枢神经系统神经元内外游离钙离子浓度的关系

[目的]探讨针刺镇痛与中枢神经系统神经元内外游离钙离子浓度的关系.[方法]首先通过大鼠痛阈的变化,观察外源性升高中脑中央灰质（PAG）部位游离Ca^2＋浓度对针刺效应的影响.其次,通过实验性疼痛大鼠模型,观察疼痛刺激及针刺镇痛对PAG细胞内游离Ca^2＋浓度的影响.[结果]外源性升高PAG部位游离Ca^2＋浓度后,针刺提高大鼠痛阈的效应受到抑制.疼痛刺激使大鼠PAG部位神经元内游离Ca^2＋浓度显著升高,针刺镇痛则可使其明显降低.[结论]中枢神经系统神经元内游离Ca^2＋可能是伤害性刺激信息和针刺信息相互作用的物质基础之一.     

党参药物血清对大鼠壁细胞内游离钙离子浓度的影响

目的:探讨党参单味药提取物对大鼠壁细胞胞内游离钙离子浓度的作用.方法:取SD大鼠连续给党参提取物5天,每天一次,末次给药后两小时心脏采血制备含药血清;将分离后壁细胞用荧光指示剂-Flou3-AM负载,然后用共聚焦显微镜检测胞内游离钙离子浓度;钙离子浓度以荧光强度(FI)表示.结果:党参药物血清高、中剂量组与对照组相比均有显著性差异(P＜0.05).结论:党参药物血清可剂量依赖性地减少胃泌素刺激的壁细胞胞内游离钙离子浓度的增高,这可能是我们以往发现它减少胃酸分泌而治疗溃疡性疾病的机制之一.     

灵芝多糖对小鼠腹腔巨噬细胞胞浆游离Ca2+浓度的影响

 目的:探讨灵芝多糖(GLP)对免疫细胞信号转导过程的影响?方法:采用激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)技术,动态监测GLP均一体组分GLB₇对小鼠腹腔巨噬细胞(MΦ)胞浆游离Ca²⁺浓度([Ca²⁺]i)的影响?结果:GLB₇(20μg·ml^-1)引起小鼠腹腔MΦ中[Ca²⁺]i明显升高,升高值为(248±18)%(n=6);GLB₇引起小鼠腹腔MΦ外钙内流及MΦ内IP₃敏感和IP₃非敏感钙池释放Ca²⁺,[Ca²⁺]i升高值分别为(76±10)%,(58±10)%,(41±8)%(n=6);GLB₇对MΦ[Ca²⁺]i的影响与K⁺通道及其引起的膜电位变化无关?结论:MΦ是灵芝多糖作用的靶细胞;GLB₇引起MΦ中[Ca²⁺]i快速升高,可能是灵芝多糖产生作用的重要途径?     

雷公藤红素对血管平滑肌细胞内游离Ca2+和H+浓度的影响

目的；观察雷公藤红素对血管平滑肌细胞内游离Ｃａ＾２＋和Ｈ＾＋浓度的影响。方法：采用荧光染色法，参激光扫描焦显微镜动态研究了不同浓度的胎牛血清对单个血管平滑肌内游离Ｃａ＾２＋和Ｈ＾＋浓度变化的影响效应。结果：３０％胎牛血清可以引起细胞内一快速的，持续的游离Ｃａ＾２＋浓度升高，而３０％胎牛血清加０．３ｍｇ／Ｌ雷公藤红素则可以产生抑制细胞内游离Ｃａ＾２＋浓度升高的效应；