聚酰胺树脂分离纯化复方山楂提取物中总黄酮的研究

目的 研究聚酰胺树脂分离纯化复方山楂提取物的工艺及参数.方法 以总黄酮为考察指标·研究在静态和动态条件下,聚酰胺树脂吸附和洗脱总黄酮的行为.结果 聚酰胺树脂对总黄酮为优惠吸附,在生药质量浓度为0.255 g/mL、pH值4左右、温度为室温条件下吸附性能最好,采用50%和75%乙醇溶液梯度洗脱效果最佳.结论 通过聚酰胺树脂分离纯化后.纯化物中总黄酮保留率高达93.0%,纯化物质量仅为纯化前的8.12%,说明采用聚酰胺树脂分离纯化复方山楂提取物是可行的.     

清肺口服液总黄酮纯化的工艺研究

目的优化聚酰胺树脂分离纯化清肺口服液总黄酮的工艺条件。方法以药液质量浓度、聚酰胺树脂药材质量比、供试品pH为评价指标,考察总黄酮吸附量;以洗脱液体积、醇洗体积分数、洗脱体积流量为评价指标,考察总黄酮洗脱量,并以总黄酮含有量为主要评价指标,正交试验优化聚酰胺树脂纯化工艺。结果最佳纯化工艺参数为药液质量浓度24mg/mL,树脂药材质量比25∶3,上样液pH值4. 0,5 BV水洗除杂,醇洗体积分数80%,醇洗体积6BV,洗脱流量3. 0 mL/min。纯化后,总黄酮含有量从18.5%提高至68.9%,转移率为78.7%。结论采用聚酰胺树脂纯化清肺口服液中总黄酮稳定可靠、效果良好,可为后期药理实验及新药的开发提供基础。     

薄荷总黄酮的纯化工艺优选

目的:优选聚酰胺纯化薄荷总黄酮的工艺条件。方法:以总黄酮含量和吸附-洗脱率为指标,采用单因素试验考察5种不同类型的纯化材料对总黄酮的吸附能力,确定纯化材料,并对其纯化工艺中吸附条件、除杂条件和洗脱条件进行优化。结果:优化工艺条件为上样液质量浓度0.1 g.mL-1,上样量为生药量与聚酰胺体积比1∶6,吸附流速2 BV.h-1,柱床径高比1∶9,待吸附结束后,用3 BV 10%乙醇洗脱除杂,除杂流速4 BV.h-1,再用3 BV 90%乙醇以8 BV.h-1流速洗脱,经聚酰胺(30～60目)纯化后,薄荷总黄酮纯度可达50%。结论:优选的纯化工艺分离效果良好、操作简单、重复性好,可用于分离富集薄荷总黄酮。     

聚酰胺树脂精制绞股蓝总黄酮的工艺优选

目的:优选聚酰胺树脂分离纯化绞股蓝总黄酮的工艺条件.方法:采用紫外分光光度法,以总黄酮含量为考察指标,研究在静态和动态条件下,聚酰胺树脂吸附和洗脱总黄酮的行为,筛选出聚酰胺树脂精制绞股蓝总黄酮的最优工艺参数.结果:最佳工艺参数为生药质量浓度0.35 g·mL-1,上样液pH 3,温度为室温,4 BV 60％乙醇洗脱.此工艺条件下,总黄酮纯度由粗品的23.91％提高到81.97％,纯化物中总黄酮保留率高达90.11％.结论:采用聚酰胺树脂纯化绞股蓝总黄酮效果良好,适用于工业化生产.     

大孔树脂分离纯化紫苏总黄酮的工艺研究

目的:筛选分离纯化紫苏总黄酮的最佳树脂,并确定其工艺条件。方法:以总黄酮吸附量和回收率为考察指标,采用静态吸附分离法确定适合的大孔吸附树脂;采用动态吸附分离法确定分离条件。结果:AB-8树脂对紫苏总黄酮有良好的吸附分离性能。其动态分离纯化工艺条件为:紫苏总黄酮上样液浓度为1.5mg/mL,最大吸附量为11.5mg/g,吸附速度为1.0mL/m in,95%乙醇2倍柱体积1.0mL/m in洗脱,树脂可重复使用3次。结论:该方法操作简便、有效,适于紫苏总黄酮的吸附纯化。     

聚酰胺树脂分离纯化神香草提取液工艺研究

目的考察聚酰胺树脂分离纯化神香草提取液的最佳工艺条件。方法以总黄酮和迷迭香酸为检测指标,采用单因素考察法筛选树脂纯化工艺中的最大上样量、水洗脱体积、洗脱剂用量、上样液浓度、树脂吸附时间、上样液pH值和洗脱速率等参数。结果最佳纯化工艺参数为:神香草提取液浓度为10 mg/mL,最大上样量为12 mL,水洗脱2 BV去除杂质,40%乙醇洗脱9 BV,上样液迷迭香酸浓度86.3μg/mL、总黄酮浓度117.8μg/mL左右,树脂吸附时间为14 h,上样液pH值调至6.5,洗脱速度3.0 BV/h。结论该方法简便易行,分离效果良好,适用于神香草提取液的分离纯化。     

大孔树脂分离纯化紫苏总黄酮的工艺研究

目的：筛选分离纯化紫苏总黄酮的最佳树脂,并确定其工艺条件。方法：以总黄酮吸附量和回收率为考察指标,采用静态吸附分离法确定适合的大孔吸附树脂;采用动态吸附分离法确定分离条件。结果：AB-8树脂对紫苏总黄酮有良好的吸附分离性能。其动态分离纯化工艺条件为：紫苏总黄酮上样液浓度为1.5mg/mL,最大吸附量为11.5mg/g,吸附速度为1.0mL/m in,95%乙醇2倍柱体积1.0mL/m in洗脱,树脂可重复使用3次。结论：该方法操作简便、有效,适于紫苏总黄酮的吸附纯化。     

木姜叶柯总黄酮分离纯化研究

目的优选木姜叶柯总黄酮的分离纯化工艺。方法以总黄酮中主要有效成分根皮苷为优选指标,采用静态与动态吸附洗脱相结合的方法优选木姜叶柯总黄酮分离纯化工艺。结果筛选出分离纯化效果最佳的聚酰胺树脂（80～100目）,其最佳工艺条件为：上柱根皮苷量（mg）与树脂（mL）的比例〈23∶1,上样液中根皮苷浓度为7.68 mg/mL,吸附流速为每小时1倍树脂体积（1 BV/h）,洗脱剂乙醇浓度为20%,洗脱流速为2 BV/h,洗脱剂用量为20 BV。纯化后木姜叶柯总黄酮的含量可达80%以上,根皮苷含量达65%以上。结论所优选的纯化工艺合理可行,可较好地分离纯化木姜叶柯总黄酮。     

大孔吸附树脂富集纯化黄芩总黄酮的工艺研究

目的:筛选纯化黄芩总黄酮的最佳树脂,确定树脂纯化黄芩总黄酮的工艺参数。方法:以黄芩中总黄酮含量为指标,对3种不同型号大孔吸附树脂进行筛选,确定了吸附分离黄芩总黄酮的最佳树脂,并通过单因素考察确定了该树脂分离、纯化黄芩总黄酮的工艺条件。结果:AB-8型树脂对黄芩总黄酮有良好的吸附分离性能,其吸附分离黄芩总黄酮的工艺条件为:上样浓度0.04g生药/mL,最大上样量为树脂的8倍体积,洗脱剂为80%乙醇,洗脱剂用量为7倍量树脂柱体积。结论:AB-8型树脂在所确定的工艺条件下,纯化黄芩总黄酮效果良好,黄芩总黄酮含量可达90%以上。     

卷柏总黄酮纯化工艺研究

目的:研究聚酰胺富集卷柏总黄酮的工艺参数.方法:以总黄酮和阿曼托双黄酮的含量以及总黄酮的收率为考察指标,经聚酰胺吸附柱富集后,分别采用紫外分光光度法和高效液相色谱法测定.结果:纯化工艺条件为:卷柏提取物与聚酰胺比为50:3(mg/mL),树脂径高比为1:6,用10倍量柱体积的50%乙醇除杂,用6倍量柱体积的80%乙醇洗脱,洗脱流速为1.0 mL/min.结论:本法富集纯化卷柏总黄酮工艺稳定可行.     

葛根总黄酮联合三氧化二砷体外诱导NB4-R1细胞凋亡的实验研究

目的:探讨葛根总黄酮联合三氧化二砷(As2O3)对维甲酸耐药细胞株NB4-R1增殖及凋亡的影响。方法:采用葛根总黄酮(0、10、30、50μg/mL)联合As2O3(1μmol/L)处理NB4-R1细胞24、48、72 h,MTT法检测细胞增殖抑制率;光学显微镜及荧光显微镜观察细胞形态改变;流式细胞仪检测细胞周期变化;FITC-AnnexinV/PI双染法检测细胞凋亡率,蛋白印迹法检测凋亡相关蛋白表达。结果:(1)一定浓度葛根总黄酮对NB4-R1细胞生长有抑制效应,呈剂量和时间依赖性,相同条件下,葛根总黄酮联合1μmol/L As2O3对NB-R1细胞抗增殖作用强于单用葛根总黄酮,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)FITC-Annexin V/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡结果发现葛根总黄酮(0、10、30、50μg/mL)及葛根总黄酮联合1μmol/L As2O3处理NB4-R1细胞48 h后,早期凋亡率呈浓度依赖,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)瑞氏染色,在光镜下观察到葛根总黄酮和葛根总黄酮+As2O3联用组呈现不同程度的细胞凋亡形态学特征,且联用组较单药组明显。(4)流式细胞术检测细胞周期变化发现葛根总黄酮和葛根总黄酮+As2O3联用可影响细胞进程,表现为S期细胞增多,葛根总黄酮+As2O3联用组比各单用葛根总黄酮组Sub-G1增加更为明显。(5)Western blottimg结果显示葛根总黄酮可上调NB4-R1细胞中JNK表达,下调ERK1/2表达。结论:低浓度葛根总黄酮体外对维甲酸耐药细胞株NB4-R1细胞具有增殖抑制作用,呈时间-浓度依赖性,与1μmol/L As2O3具有协同作用;其诱导凋亡作用机制可能为阻滞NB4-R1细胞周期进程,激活JNK途径,下调ERK通路。     

大孔吸附树脂分离纯化菝葜总黄酮

目的：研究大孔吸附树脂富集、纯化菝葜总黄酮的工艺条件及参数。方法：以总黄酮收率为指标,对工艺条件进行了筛选。结果：6种大孔吸附树脂和1种聚酰胺中,D140型树脂具有最佳的吸附及洗脱参数,其静态吸附容量以干树脂计为14.87 mg·g^-1。最佳吸附条件：药液质量浓度为0.5 g·mL^-1(以生药量计),吸附流速为2 BV·h^-1,吸附量为18 BV；洗脱最佳条件：以10 BV蒸馏水、5 BV的20%乙醇依次洗脱,弃去洗脱液；再用5～10 BV,60%乙醇以流速1 BV·h^-1进行洗脱,总黄酮的收率为84.72%。结论：D140型树脂综合性能较好,适于菝葜总黄酮的分离纯化。     

菜芙蓉花中总黄酮微波提取的研究

目的:研究菜芙蓉花总黄酮的微波提取最佳工艺。方法:通过正交实验,考察了乙醇浓度、微波时间、微波功率及固液比(g/m l)对总黄酮含量的影响。结果:本实验中最佳提取条件为:70%乙醇,微波时间30 s,功率为360 w,固液比为1∶50,颗粒度≤80目。结论:采用微波技术提取菜芙蓉花总黄酮具有良好的应用前景。     

透骨草提取物对肿瘤细胞体外增殖的影响

目的:探讨透骨草提取物对人卵巢癌SK-OV-3细胞、人乳腺癌MCF-7细胞、人宫颈癌Hela细胞、人肝癌HepG-2细胞、人肺癌A549细胞体外增殖的影响。方法:用不同浓度的透骨草提取物分别处理肿瘤细胞,采用MTT法和集落形成试验观察透骨草提取物对肿瘤细胞体外增殖的影响。结果:3.125～100μg/mL透骨草提取物处理的肿瘤细胞增殖抑制率与对照组相比显著增加(P<0.05)。3.125～100μg/mL透骨草提取物处理的肿瘤细胞集落形成率与对照组相比显著降低(P<0.05)。结论:透骨草提取物对人卵巢癌SK-OV-3细胞、人乳腺癌MCF-7细胞、人宫颈癌胞Hela细、人肝癌HepG-2细胞、人肺癌A549细胞增殖有显著的抑制作用,且呈一定的剂量依赖性。     

攀枝花车前草中总黄酮的提取及其含量

目的:提取并测定攀枝花车前草中总黄酮的含量。方法:选取超声波乙醇浸提法提取车前草中黄酮类化合物,正交试验得出黄酮类化合物的最佳提取条件,对提取的黄酮类化合物进行定性分析,采用紫外分光光度法测定其含量。结果:车前草总黄酮的最佳提取条件为70%乙醇浸泡36 h,超声时间35 min,测得车前草内总黄酮的含量为1. 54%,车前草根和叶的平均回收率分别为98. 95%和98. 18%。同一条件下,测得车前草根中总黄酮含量大于叶中总黄酮含量。结论:该方法简单易行、无污染,是提取车前草黄酮类物质的有效途径,也为攀枝花车前草的进一步开发和研究奠定了基础。     

AB-8大孔树脂并聚酰胺柱层析纯化瘤果黑种草子总黄酮

研究AB-8大孔树脂并聚酰胺柱层析纯化瘤果黑种草子总黄酮工艺。方法：用紫外分光光度法测定瘤果黑种草子总黄酮含量,以总黄酮洗脱量为指标,筛选AB-8大孔树脂纯化工艺。结果：合适的上样条件：pH值为3,上样液浓度为4．90mg·mL^-1,吸附流速为1BV／h,洗脱剂为30％乙醇。结论：AB-8大孔树脂并聚酰胺树脂适合于瘤果黑种草子总黄酮的分离纯化。     

透骨草提取物对人肝癌SMMC-7721细胞凋亡及凋亡相关因子的影响

[目的]观察透骨草提取物对人肝癌SMMC-7721细胞凋亡的影响,探讨透骨草提取物诱导SMMC-7721细胞凋亡的分子机制。[方法]流式细胞术检测透骨草提取物诱导SMMC-7721细胞凋亡的影响;免疫组化法检测透骨草提取物对SMMC-7721细胞caspase-9、-3、-7和x连锁凋亡抑制蛋白（XIAP）表达的影响。[结果]40．91μg／mL透骨草提取物处理的SMMC-7721细胞凋亡率为（26．84±1．23）％,明显高于对照组（P〈0．05）。40．9μg／mL透骨草提取物处理的SMMC-7721细胞Caspase-9、-3、-7蛋白表达明显低于与对照组（P〈0．05）,而XIAP蛋白表达明显高于对照组（P〈0．05）。瞄论]透骨草提取物能通过XIAP／Caspase信号通路抑制SMMC-7721细胞凋亡。关键词：透骨草提取物;SMMC-7721细胞;凋亡;Caspase-9中图分类号：R285．5文献标识码：A文章编号：1672—1519（2013）10—0612—03     

阳离子交换树脂纯化喘平复方总生物碱的工艺研究

目的考察弱酸性阳离子交换树脂纯化喘平复方总生物碱的影响因素,为工业生产中建立合理、经济、简便的生物碱富集纯化工艺提供参考.方法以薄层色谱法为定性方法检测生物碱的泄漏,以高效液相色谱法测定喘平复方生物碱的含量为指标,对影响离子交换树脂纯化生物碱的因素进行考察.结果优化条件为:上柱液pH=3.5,上样液浓度为1 g/mL(生药量计),上柱液流速为1 mL/min,洗脱剂采用1%碳酸钠,使用2倍树脂床体积的洗脱液.结论该条件下得到的浸膏固体物少,浸膏中总生物碱含量高,且可以连续操作,利于企业大规模生产.     

透骨草提取物对人结肠癌SWⅢ-C细胞增殖及Bcl-2、Bax蛋白表达的影响

目的:观察透骨草提取物对人结肠癌SWⅢ-C细胞增殖的影响,探讨透骨草提取物对SWⅢ-C细胞增殖影响的分子机制。方法:MTT法检测透骨草提取物对SWⅢ-C细胞增殖的影响,荧光显微镜观察透骨草提取物对SWⅢ-C细胞形态的影响,免疫组化方法检测SWⅢ-C细胞Bcl-2和Bax蛋白的表达。结果:6.25~100μg/mL透骨草提取物处理的SWⅢ-C细胞增殖抑制率与对照组相比显著增加(P0.05),而且随透骨草浓度的增加,抑制率逐渐增加。透骨草提取物对SWⅢ-C细胞的半数抑制浓度(IC50)为38.36μg/mL。荧光显微镜下可见,38.36μg/mL透骨草提取物处理的SWⅢ-C细胞,体积缩小,细胞核固缩、呈新月状且边集。38.36μg/mL透骨草提取物处理的SWⅢ-C细胞Bcl-2蛋白表达显著低于对照组(P0.05),而Bax蛋白表达明显高于对照组(P0.05)。结论:透骨草提取物可以抑制人结肠癌SWⅢ-C细胞增殖,诱导SWⅢ-C细胞凋亡,其机制可能与下调Bcl-2蛋白表达、上调Bax蛋白表达有关。