疏肝和胃丸对大鼠胃黏膜组织EGFR蛋白表达的影响

目的：观察疏肝和胃丸对应激大鼠胃黏膜组织及血清EGFR蛋白表达的影响。探讨该方对胃黏膜的保护作用机制。方法：采用冷水-束缚应激性胃黏膜损伤大鼠模型，在预先给予疏肝和胃丸混悬液给动物灌胃7天后，观察胃黏膜组织及血清EGFR蛋白表达的变化。结果：疏肝和胃丸能增加应激性胃黏膜损伤大鼠胃黏膜组织EGFR蛋白的表达。结论：疏肝和胃丸对应激性胃黏膜损伤大鼠胃黏膜保护作用机制可能与提高黏膜组织EGFR蛋白的表达，促进胃黏膜上皮的新生修复有关。     

疏肝和胃丸对应激大鼠胃黏膜组织血清EGF和TGFα含量的影响

目的:观察疏肝和胃丸对应激大鼠胃黏膜组织及血清EGF和TGFα含量影响。探讨该方对胃黏膜的保护作用机制。方法:采用冷水-束缚应激性胃黏膜损伤大鼠模型,在预先给予疏肝和胃丸混悬液给动物灌胃7d后,观察胃黏膜组织及血清EGF和TGFα含量的变化。结果:疏肝和胃丸能显著提高大鼠胃黏膜及血清EGF、TGFα含量。结论:疏肝和胃丸对应激性胃黏膜损伤大鼠胃黏膜保护作用机制可能与激发体内合成和释放内源性EGF、TGFα,促进胃黏膜的新生修复有关。     

疏肝和胃丸对应激大鼠胃黏膜组织血清EGF和TGFα含量的影响

目的：观察疏肝和胃丸对应激大鼠胃黏膜组织及血清EGF和TGFα含量影响。探讨该方对胃黏膜的保护作用机制。方法：采用冷水-束缚应激性胃黏膜损伤大鼠模型，在预先给予疏肝和胃丸混悬液给动物灌胃7d后，观察胃黏膜组织及血清EGF和TGFα含量的变化。结果：疏肝和胃丸能显著提高大鼠胃黏膜及血清EGF、TGFα含量。结论：疏肝和胃丸对应激性胃黏膜损伤大鼠胃黏膜保护作用机制可能与激发体内合成和释放内源性EGF、TGFα，促进胃黏膜的新生修复有关。     

疏肝和胃丸对胃黏膜损伤大鼠胃组织形态学及黏膜血流量的影响

目的:观察疏肝和胃丸对大鼠胃黏膜胃组织形态学及黏膜血流量的影响。探讨该方对胃黏膜的保护作用机制。方法:采用冷水-束缚应激性胃黏膜损伤大鼠模型,在预先给予疏肝和胃丸混悬液给动物灌胃7天后,观察胃黏膜损伤指数(UI)、胃组织形态学及胃黏膜血流量(GMBF)的变化。结果:疏肝和胃丸能明显减轻胃黏膜组织镜下的损伤程度,能有效防止因应激引起的GMBF下降。结论:疏肝和胃丸对应激性胃黏膜损伤大鼠胃黏膜有保护作用。该方胃黏膜保护作用机制可能与增加GMBF有关。     

疏肝和胃丸抗大鼠幽门结扎胃溃疡的实验研究

目的:观察疏肝和胃丸对大鼠急性胃黏膜损伤的保护作用。方法:采用幽门结扎法复制大鼠胃溃疡模型,观察胃黏膜病理学变化。结果:模型组胃黏膜损伤指数水平均明显升高,与疏肝和胃丸组比较均有显著差异(P<0.05),形态学观察示胃黏膜坏死脱落增多。疏肝和胃丸组降低胃黏膜损伤指数,形态学观察示胃黏膜坏死脱落程度较低。结论:疏肝和胃丸可有效降低胃黏膜损伤指数,减少胃黏膜上皮细胞坏死,对胃黏膜损伤有保护作用。     

疏肝和胃丸抗大鼠幽门结扎胃溃疡的实验研究

目的：观察疏肝和胃丸对大鼠急性胃黏膜损伤的保护作用。方法：采用幽门结扎法复制大鼠胃渍疡模型，观察胃黏膜病理学变化。结果：模型组胃黏膜损伤指数水平均明显升高，与疏肝和胃丸组比较均有显著差异（P〈0．05），形态学观察示胃黏膜坏死脱落增多。疏肝和胃丸组降低胃黏膜损伤指数，形态学观察示胃黏膜坏死脱落程度较低。结论：疏肝和胃丸可有效降低胃黏膜损伤指数，减少胃黏膜上皮细胞坏死，对胃黏膜损伤有保护作用。     

疏肝和胃丸对幽门结扎胃溃疡大鼠胃酸 胃蛋白酶的调节作用

目的：观察疏肝和胃丸抑制胃酸、胃蛋白酶分泌对大鼠急性胃黏膜损伤的保护作用。方法：采用幽门结扎法复制大鼠胃溃疡模型,观察胃酸、胃蛋白酶分泌及胃黏膜病理学变化。结果：模型组胃酸、胃蛋白酶的分泌水平均明显升高,胃黏膜损伤指数水平均明显升高,与疏肝和胃丸组比较均有显著差异（P（0.05）。结论：疏肝和胃丸具有显著抑制胃酸、胃蛋白酶分泌,对胃黏膜损伤具有保护作用。     

艾灸对胃黏膜损伤大鼠胃黏膜表皮生长因子、转化生长因子-α及其受体的影响

目的:观察艾灸对应激性胃黏膜损伤大鼠胃黏膜表皮生长因子(EGF)、转化生长因子-α(TGF-α)与表皮生长因子受体(EGFR)的影响,探讨艾灸修复胃黏膜损伤的作用机制。方法:SD大鼠随机分为正常组、模型组、艾灸组,每组12只。束缚冷应激法制作应激性胃黏膜损伤大鼠模型,在造模之前,艾灸组选取"足三里""中脘""脾俞""胃俞"行艾灸预处理8d。酶联免疫法检测胃黏膜组织中EGF、TGF-α的含量,免疫组化法检测胃黏膜EGFR蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠胃黏膜TGF-α的含量明显增加(P<0.05);与模型组比较,艾灸组大鼠胃黏膜EGF、TGF-α的含量及EGFR蛋白表达明显上调(P<0.05,P<0.01)。结论:预先艾灸"足三里""中脘""脾俞""胃俞"可上调应激性胃黏膜损伤大鼠胃黏膜EGF、TGF-α的含量及EGFR表达,可能与其对胃黏膜的保护作用有关。     

艾灸对胃黏膜损伤大鼠胃黏膜表皮生长因子、转化生长因子-α及其受体的影响

目的:观察艾灸对应激性胃黏膜损伤大鼠胃黏膜表皮生长因子(EGF)、转化生长因子-α(TGF-α)与表皮生长因子受体(EGFR)的影响,探讨艾灸修复胃黏膜损伤的作用机制.方法:SD大鼠随机分为正常组、模型组、艾灸组,每组12只.束缚冷应激法制作应激性胃黏膜损伤大鼠模型,在造模之前,艾灸组选取“足三里”“中脘”“脾俞”“胃俞”行艾灸预处理8d.酶联免疫法检测胃黏膜组织中EGF、TGF-α的含量,免疫组化法检测胃黏膜EGFR蛋白表达.结果:与正常组比较,模型组大鼠胃黏膜TGF-α的含量明显增加(P＜0.05);与模型组比较,艾灸组大鼠胃黏膜EGF、TGF-α的含量及EGFR蛋白表达明显上调(P＜0.05,P＜0.01).结论:预先艾灸“足三里”“中脘”“脾俞”“胃俞”可上调应激性胃黏膜损伤大鼠胃黏膜EGF、TGF-α的含量及EGFR表达,可能与其对胃黏膜的保护作用有关.     

葛根素对大鼠应激性胃黏膜损伤的保护作用

目的:研究葛根素对大鼠应激性胃黏膜损伤的保护作用。方法:采用浸水束缚应激法建立大鼠应激性胃溃疡模型。气囊法记录胃运动,激光多普勒血流计测定胃黏膜血流量,比色法测定胃黏膜组织一氧化氮(NO)和内皮素(ET)含量,并观察胃黏膜组织病理学变化。结果:葛根素可以明显减轻浸水应激引起的胃黏膜损伤;抑制胃运动亢进,尤其是降低胃运动指数、收缩时间百分比和高强度收缩次数;增加胃黏膜血流量;同时增加胃黏膜NO含量,并降低ET含量;胃黏膜组织损害程度显著减轻。结论:葛根素对应激性胃黏膜损伤具有明显的保护作用,其作用机制可能是通过舒张胃黏膜血管,升高胃黏膜NO水平,同时抑制胃运动亢进,增加局部胃黏膜血流量而产生作用。     

香枳和胃片对胃黏膜损伤保护的实验研究

目的:研究香枳和胃片对实验性大鼠胃黏膜损伤的保护作用。方法:将实验鼠分为阴性对照组(生理盐水)、香枳和胃片(高、中、低剂量)组和阳性对照组(雷尼替丁),观察香枳和胃片灌服后对无水乙醇所致和幽门结扎型胃黏膜损伤大鼠的影响。结果:与阴性对照组比较,香枳和胃片各剂量组均能明显减少胃液分泌量,降低胃酸总酸度(P<0.05),显著降低溃疡指数(P<0.05),低、中、高各剂量组溃疡抑制率分别达到44.92%,57.42%,64.76%。结论:香枳和胃片对实验性胃黏膜损伤有明显的保护作用。     

疏肝和胃方对非糜烂性胃食管反流病模型大鼠内脏敏感性外周机制的影响

目的:观察疏肝和胃方对非糜烂性胃食管反流病(NERD)模型大鼠食道内脏高敏感外周机制的影响。方法:将60只SD大鼠随机分为空白对照组,生理盐水对照组,模型组,奥美拉唑组,疏肝和胃方组。除空白对照组外其余各组用腹腔注射鸡卵清蛋白(OVA)基础致敏联合食管酸灌注的方法复制NERD大鼠模型,连续给药14天后,观察各组大鼠食管组织超微结构变化、食管组织P物质及CGRP的含量变化。结果:与模型组比较,奥美拉唑组及疏肝和胃方组均能降低NERD模型大鼠P物质及CGRP表达(P<0.05),电镜显示NERD中药组食管组织核仁清晰,染色均匀;细胞间隙均匀。结论:疏肝和胃方可改善NERD大鼠的超微结构变化,下调食管组织中P物质及CGRP的表达,达到降低食道内脏敏感性的目的。     

普胃丸对慢性胃溃疡大鼠胃组织中EGF和EGFR蛋白表达的影响

目的:考察普胃丸(Puwei Pill,PWP)对慢性胃溃疡(chronic gastric ulcer,CGU)大鼠胃组织中促增生因子表皮生长因子(Epidermal Growth Factor,EGF)和表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)蛋白表达的影响。方法:将大鼠随机分为5组,即正常组、假手术组、模型组,PWP组和奥美拉唑肠浴片(OMLZ)组,用醋酸烧灼法建立大鼠CGU模型,通过灌注给药,于16 d后处死大鼠,然后分别采用免疫组化法和Western blot法,观察PWP对胃组织中EGF和EGFR蛋白表达的影响,考察PWP抗CGU的促黏膜增生机制。结果:与模型组比较,PWP与OMLZ组EGF和EGFR的平均阳性密度均显著增加(P<0.01或P<0.05),EGF和EGFR蛋白表达均显著提高(P<0.01或P<0.05),PWP可明显增加胃组织中EGF和EGFR的蛋白表达。结论:PWP通过促进胃组织中EGF和EGFR的蛋白表达来发挥抗CGU的作用。     

疏肝和胃汤对功能性消化不良大鼠胃窦iNOSmRNA SSR1mRNA表达的影响

目的：在前期研究的基础上,观察具有促胃排空作用的疏肝和胃汤对功能性消化不良（functional dyspepsia,FD）大鼠胃窦组织一氧化氮合酶mRNA（iNOSmRNA）、生长抑素受体1mRNA（SSR1mRNA）表达的影响,以深入探讨该方促胃动力作用机理。方法：实验分成生理盐水组、疏肝和胃汤大、中、小剂量组及莫沙比利组。采用夹尾激怒法造成肝胃不和型功能性消化不良大鼠模型,给药治疗后,取胃窦组织,应用原位杂交技术观察该方对上述指标在胃窦表达的影响。结果：疏肝和胃汤均可不同程度地降低模型大鼠胃窦iNOSmRNA及SSR1mRNA的表达（P〈0.05-0.01）,其作用与莫沙比利相当。结论：疏肝和胃汤可通过降低胃窦iNOSmRNA的表达,随之而降低了iNOS及NO的分泌及合成;并通过降低SSR1mRNA的表达,减少SS受体的表达,从而减少SS的释放。上述作用可能是该方促胃动力的作用机理之所在。     

电针胃经穴对大鼠胃黏膜细胞ERK免疫组化的影响

目的:探讨电针大鼠胃经穴对胃黏膜细胞细胞外信号调节激酶(ERK)免疫组化的影响。方法:72只大鼠随机分为6组,利用链霉蛋白酶消化法分离胃黏膜细胞,分别用PD153035和100mL/L血清孵育胃黏膜细胞,免疫组化法检测ERK的表达。结果:胃经组和胆经组胃黏膜细胞ERK的表达明显高于正常组和模型组(P<0.01);胃经组胃黏膜细胞ERK的表达与胆经组比较显著增强(P<0.01);胃经+PD153035组胃黏膜细胞ERK的表达明显低于胃经组(P<0.01)。结论:电针能上调胃黏膜细胞ERK的表达,ERK可能是胃经与胃相关的客观物质基础之一。     

大鼠寒热型胃粘膜损伤模型的研究

目的 :探索建立证病结合的寒热胃粘膜损伤大鼠模型。方法 :SD大鼠用无水乙醇造成胃热模型 ,用冰NaOH造成胃凉、胃寒模型 ,并观察左金丸与反左金在模型上的药效反应。结果 :形态和组织学观察 ,左金丸都明显减轻乙醇模型大鼠的急性胃粘膜损伤 ,而冰 NaOH模型中反左金与左金丸形态上具有相当的药效 ,病理检测反左金明显优于左金丸。结论 :无水乙醇和冰NaOH造成的寒热胃粘膜损伤模型可用于评价相应药物和方剂的药效。     

和胃理气方对肝郁型功能性消化不良大鼠Ghrelin表达的影响

目的研究肝郁型功能性消化不良大鼠胃排空率以及胃和下丘脑组织Ghrelin蛋白的表达变化,以探究和胃理气方对功能性消化不良干预的可能机制。方法选取40只健康Wistar大鼠,雌雄各半,体质量(200±20)g,随机分为空白组(10只)及模型组(30只)。空白组常规饲养,其余大鼠通过夹尾刺激法建立肝郁型FD大鼠模型,造模14 d。造模结束后按照随机数字表分为模型组、吗丁啉组、和胃理气方组(每组10只)。期间监测大鼠进食以及毛发、行为等一般状况。实验结束后,测量各组大鼠胃排空率,并通过Western blot法测定胃组织以及下丘脑组织Ghrelin蛋白表达。结果模型组胃排空率明显低于和胃理气方组、吗丁啉组(P<0.05);与模型组相比,和胃理气方组和吗丁啉组的胃及下丘脑Ghrelin蛋白表达增加(P<0.05)。结论和胃理气方可能通过上调Ghrelin蛋白表达来有效干预功能性消化不良。     

化浊降逆和胃汤对胆汁反流性胃炎模型大鼠血清胃泌素、胃窦黏膜前列腺素E2的影响

目的观察化浊降逆和胃汤对胆汁反流性胃炎模型大鼠血清胃泌素、胃窦黏膜前列腺素(PG)E2的影响,并探讨其作用机制。方法将40只Wistar大鼠随机分为4组,即空白对照组、模型对照组、化浊降逆和胃汤组及阳性药对照组,每组10只。除空白对照组外,其余3组均制备胆汁反流性胃炎大鼠模型。化浊降逆和胃汤组、阳性药对照组分别予化浊降逆和胃汤、甲氧氯普胺各6.7 mL/kg灌胃,空白对照组和模型对照组予等容积蒸馏水灌胃。每日2次,连续4周。检测血清胃泌素,刮取胃窦黏膜,检测PGE2。结果模型对照组血清胃泌素、胃窦黏膜PGE2均较空白对照组降低(P<0.05),提示造模成功。化浊降逆和胃汤组、阳性药对照组血清胃泌素、胃窦黏膜PGE2较模型对照组升高(P<0.01)。化浊降逆和胃汤组与阳性药对照组血清胃泌素、胃窦黏膜PGE2比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论化浊降逆和胃汤通过改善胃分泌功能促进黏膜血液循环,营养胃黏膜等途径,恢复其分泌胃泌素的能力;同时化浊降逆和胃汤能通过提高胃窦黏膜PGE2含量,增强胃黏膜抵抗力,产生细胞保护作用。     

Effects of moxibustion pretreatment on extracellular signal-regulated kinase signaling transduction pathway in the gastric tissues of rats with gastric mucosal damage

Objective

To observe the effects of moxibustion pretreatment on the protein expressions of epidermal growth factor receptor (EGFR), phosphorylation extracellular signal-regulated kinase 1/2 (p-ERK1/2) and activated protein-1 (AP-1), the key factors of extracellular signal-regulated kinase signaling transduction pathway in gastric tissue of rats with stress-induced gastric mucosal damage, and to discuss the mechanisms of moxibustion therapy in promoting the restoration of damaged gastric mucosa.

Methods

Thirty Sprague-Dawley (SD) rats were randomly divided into a normal group, a model group, and a moxibustion group using the random digits table, 10 in each group. Except the rats in the normal group, rats in the other two groups were used to make stress-induced gastric mucosal damage model using restraint and cold stress. Before modeling, rats in the moxibustion group were alternately treated with moxibustion at Zusanli (ST 36) and Zhongwan (CV 12), or Pishu (BL 20) and Weishu (BL 21), once a day, for a total of 8 d. Histological changes of gastric mucosa were observed under the light microscopy, the expression of gastric tissue p-ERK1/2 was detected by immunohistochemistry assay, and the protein levels of EGFR and AP-1 were measured by Western blots.

Results

Compared with rats in the normal group, gastric mucosal damage was more serious, and protein expressions of gastric tissue EGFR, p-ERK1/2 and AP-1 increased in the model group (P<0.01, P<0.05, P<0.05). Compared with rats in the model group, gastric mucosal damage was milder, and protein expressions of gastric tissue EGFR, p-ERK1/2 and AP-1 increased in the moxibustion group (all P<0.01).

Conclusion

Moxibustion at Zusanli (ST 36), Zhongwan (CV 12), Pishu (BL 20) and Weishu (BL 21) could increase EGFR, p-ERK1/2 and AP-1 expression levels in gastric tissue of stress-induced gastric mucosal damage rats, maintain the information transfer function of ERK signaling transduction pathway, and promote restoration of gastric mucosal damage.