补肾复方冲剂及其拆方对免疫介导再障小鼠骨髓造血和T淋巴细胞亚群的影响

目的:研究补肾复方冲剂及其拆方(温阳益气方、滋阴方)对免疫介导再障小鼠骨髓造血的作用机制。方法:建立免疫介导再障小鼠模型,随机分为模型、补肾复方冲剂、温阳益气、滋阴、环孢素(CSA)组,每组12只。并设正常对照组。模型、正常对照组注射生理盐水,其他组注射相应药物,14d后,检测血常规、骨髓有核细胞(BMNC)数、T淋巴细胞亚群,观察股骨骨髓病理学改变。结果:与正常对照组比较,模型组的外周血细胞、BMNC数显著降低(P0.01);T淋巴细胞亚群失衡。补肾复方冲剂组的外周血细胞、BMNC计数高于模型组(P0.05);WBC,RBC,HGB,BMNC数高于温阳益气、滋阴组(P0.05或P0.01)。与模型组比较,补肾复方冲剂、CSA组的CD_3~+CD_(19)~-,CD_3~+CD_4~-CD_8~+细胞比例降低(P0.05),CD_3~+CD_4~+CD_8~-细胞比例升高(P0.05)。补肾复方冲剂组的CD_3~+CD_(19)~-,CD_3~+CD_4~-CD_8~+细胞比例低于温阳益气组(P0.05)。滋阴组的T淋巴细胞比例和模型组比较,差别无统计学意义(P0.05)。病理学观察发现补肾复方冲剂、温阳益气、CSA组骨髓增生仍低下,但可见散在造血灶。结论:补肾复方冲剂可改善再障小鼠骨髓造血,疗效优于单用温阳益气或滋阴法,其机制与调节T淋巴细胞亚群失衡有关。     

补肾泻肝方对再生障碍性贫血外周血IFN-γ、IL-2的影响

目的:探讨补肾泻肝方对慢性再生障碍性贫血(CAA)患者外周血γ-扰素(IFN-γ)、白介索-2(IL-2)的影响。方法:CAA患者60例分为肾阴虚、肝火伏热组(35例),肾阳虚、阴亏瘀热组(25例),采用酶联免疫法测定补肾泻肝方治疗前后外周血IFN-γ、IL-2,并与正常对照组(20名)比较。结果:总有效率88.33％,基本治愈、缓解率55％,肾阴虚组的疗效优于肾阳虚组。治疗前治疗组IFN-γ、IL-2水平与正常对照组比较明显增高(p<0.001,p<0.001),肾阴虚组与肾阳虚组治疗前后比较有显著差异(p<0.001,p<0.05)。结论:补肾泻肝方通过降低再障患者体内IFN-γ、IL-2水平,以解除负调控因子对造血抑制,促进骨髓造血功能恢复的作用。     

补肾益髓方对慢性再生障碍性贫血骨髓分泌造血细胞因子的影响

目的 :研究补肾益髓方对慢性再生障碍性贫血患者骨髓分泌造血细胞因子的调控作用 ,探讨补肾益髓方治疗慢性再生障碍性贫血的作用机制。方法 :6 0例患者随机分为治疗组 4 0例 ,对照组 2 0例 ,于治疗前后进行骨髓细胞培养 ,用ELISA法测细胞因子分泌水平。结果 :治疗前正向调节因子 (IL 3)降低 ,负向调节因子 (IFN γ、TNF α)升高 ;治疗后正向调节因子上升 ,负向调节因子下降 ,且治疗组优于对照组。结论 :慢性再生障碍性贫血患者骨髓细胞分泌细胞因子功能紊乱 ,补肾益髓方对骨髓分泌造血细胞因子水平具有调节作用。     

补肾药对再生障碍性贫血骨髓造血祖细胞作用的研究

利用体外甲基纤维素半固体培养方法,观察补肾中药复方对65例慢性再生障碍性贫血患者骨髓造血祖细胞的作用,探讨补肾中药治疗慢性再生障碍性贫血的机理。结果表明,补肾阴肾阳三个中药复方对慢性再生障碍性贫血患者骨髓造血祖细胞增殖具有良好的促进作用(P<0.001),从而证实了补肾中药治疗慢性再生障碍性贫血是作用于造血干细胞,并提示可能对造血干细胞增殖有直接的促进作用:     

补肾生血汤联合间充质细胞治疗再生障碍性贫血临床研究

目的观察补肾生血汤联合间充质细胞对再生障碍性贫血患者免疫功能及骨髓造血微环境的影响。方法将86例再生障碍性贫血患者随机分为2组,对照组43例给予骨髓间充质细胞治疗,1次/周;研究组43例在对照组治疗基础上给予补肾生血汤治疗。2组均治疗4周。检测2组治疗前后血常规、骨髓象、T淋巴细胞亚群、骨髓血清碱性成纤维生长因子(b FGF)、骨髓微血管密度(MVD)和血管内皮生长因子(VEGF)水平。结果研究组治疗后Hb、WBC、Plt、中性粒细胞、CD4~+、CD4~+CD25~+Foxp3~+、CD3~+CD4~+IL-4~+、骨髓增生活跃率、骨髓b FGF、MVD、VEGF水平均明显高于对照组(P均0.05);转铁蛋白饱和度、CD8~+、CD3~+CD4~+IL-17~+、CD3~+CD4~+INF-γ~+、Th1/Th2、非造血细胞百分率均明显低于对照组(P均0.05)。结论补肾生血汤联合间充质细胞治疗再生障碍性贫血可调整机体免疫功能紊乱和改善骨髓造血微环境。     

补肾活血方治疗免疫介导型再生障碍性贫血小鼠的实验研究

目的观察中药补肾活血方治疗免疫介导型再生障碍性贫血小鼠的疗效,并探讨其作用机制。方法建立免疫介导型再生障碍性贫血动物模型,观察中药补肾活血方的疗效,并从造血祖细胞集落培养和骨髓基质细胞黏附功能,造血调控因子等方面探讨其作用机制。结果中药补肾活血方可改善免疫介导型再障小鼠的外周血象,增加骨髓有核细胞计数,延长其生存期,促进红系造血祖细胞 CFU-E、BFU-E 的增殖、分化,调节 T 细胞亚群,抑制 Ts 的活性,促进白细胞介素-10(IL-10)的分泌,抑制造血负调控因子白细胞介素-2(IL-2)、干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的活性。结论中药补肾活血方通过促进 CFU-E、BFU-E的增殖、分化以及调节细胞免疫功能而达到治疗的目的。     

二归补肾方治疗慢性再生障碍性贫血15例总结

目的:探讨二归补肾方治疗肾阳虚型慢性再生障碍性贫血的临床疗效。方法:将30例随机分为治疗组和对照组各 15例,分别给予二归补肾方、康力龙片治疗6月。并对两组病人治疗前后外周血象、骨髓象及临床有效率进行比较。结果:治 疗组和对照组总有效率分别为86.7%、53.3%,两组比较,P<0.05,两组治疗后血红蛋白、白细胞、中性粒细胞、网织细胞、血 小板均有明显上升,而淋巴细胞明显下降,与本组治疗前相比有显著性差异(P<0.05)。治疗组治疗后除PLT与对照组相比 无显著性差异(P>0.05)外,血红蛋白、白细胞、中性粒细胞、网织红细胞、淋巴细胞及骨髓象与对照组比较有显著性差异(P< 0.05)。结论:二归补肾方治疗肾阳虚型慢性再生障碍性贫血有确切疗效。     

再生障碍性贫血的中医药治疗及实验研究的进展

本文综述了近年来再生障碍性贫血的中医药治疗及实验研究的进展。急性再障采用清热解毒、凉血止血合补肾生血的方法治疗;慢性再障的治疗分为补肾法、补肾健脾法、活血化瘀法、补肾泻肝法、清热利湿法以及调理补泻综合疗法。实验研究主要围绕中医药对骨髓造血干/祖细胞、造血微环境的影响及对机体免疫机能的作用三方面进行。     

健脾补肾活血方对再生障碍性贫血患者骨髓造血细胞Fas及FasL影响

本文采用细胞培养的实验方法,探讨健脾补肾活血方治疗再生障碍性贫血、抑制造血细胞凋亡的作用机理。临床实验研究中选择慢性再障15例,分离骨髓单个核细胞加入高、低剂量的健脾补肾活血方药后,检测细胞凋亡率及Fas及FasL。结果,再障患者骨髓造血细胞经健脾补肾活血方干预作用,细胞凋亡率明显下降。说明健脾补肾活血方可明显降低骨髓细胞凋亡率,进而促进恢复造血。     

补肾活血方与益气补肾方治疗慢性再生障碍性贫血对照研究

目的:观察补肾活血方与益气补肾方治疗慢性再生障碍性贫血的临床效果。方法:94例随机分为两组各47例。对照组用补肾益气方治疗,观察组用补肾活血方治疗,对比两组治疗前后外周血IFN-γ、TNF-α和临床治疗有效率。结果:总有效率观察组与对照组比较差异无统计学意义(P0.05),治疗后血清IFN-γ和TNF-α观察组低于对照组(P0.05)。结论:补肾活血方和补肾益气方治疗慢性再生障碍性贫血均有明显临床效果,但补肾活血方能更显著地降低造血负调控因子水平,改善造血组织血供。     

愈障汤对慢性再生障碍性贫血患者骨髓CD34细胞体外增殖的影响

目的:观察愈障汤对慢性再生障碍性贫血(CAA)患者骨髓CD34细胞体外增殖的影响,探讨其作用机制.方法:采用单克隆抗体-免疫磁株分离系统(MACS)分离纯化CAA患者骨髓CD34细胞,并进行细胞培养.采用氚标-胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)掺入法和液体闪烁技术,检测愈障汤对骨髓CD34细胞的增殖作用.结果:愈障汤组骨髓CD34细胞呈浓度依赖性增殖.其放射活性(cpm)与其它各浓度组比较差异有显著性(P＜0.05或P＜0.01).结论:愈障汤在体外有促进CAA患者骨髓CD34细胞增殖的作用.其治疗CAA的机制可能是通过增殖与抑凋亡的双向调节作用来实现的.     

复方活血汤对免疫诱导再生障碍性贫血小鼠骨髓微环境的作用研究

目的 :探讨临床上治疗再生障碍性贫血 (再障 )加用活血化瘀药物提高疗效的机制。方法 :建立免疫介导的再障小鼠模型 ,胃饲 1 0 0 %复方活血汤注射液每次 0 2ml,每天 2次 ,第 1 0天观察骨髓组织学、体外成纤维细胞集落形成单位 (CFU -F)、培养基质细胞层的粘附能力 ,骨髓氧分压 (PO2 )。结果 :复方活血汤组小鼠白细胞计数 ,骨髓有核细胞计数 ,骨髓造血组织容量、CFU -F计数 ,均较再障组有明显升高 (P <0 0 1 ) ;且基质细胞粘附功能、骨髓PO2 已恢复至正常。结论 :复方活血汤可促进再障小鼠骨髓微环境的修复及供氧 ,从而促进骨髓造血。     

再生障碍性贫血患者T细胞CD45RA/RO表达与中医辨证分型的相关性

目的；应用统计学判别分析方法，建立再生障碍性贫血（AA）的中医辨证分型判别方程，探讨T细胞CD45RA／RO与辨证分型的关系。方法：采用流式细胞技术对34例AA患者及34例健康对照者外周血免疫学指标进行检测，同时对AA患者进行辨证分型。结果：筛选出CD45RA^＋绝对值等5个最有意义的免疫指标，组成AA辨证分型判别方程，其判别总正确率为76．5％。与健康对照组比较，CD8^＋ CD^45；RO^＋（％）在AA辨证分型各组中显著上升（P〈0．05或P〈0．01）。结论：AA患者CD8^＋CD^45RO^＋（％）表达显著增高，证实了患者体内T细胞异常活化后转化为记忆T细胞，进而导致骨髓衰竭的免疫学发病机制，说明中医辨证分型确有其客观物质基础。CD45RA^＋绝对值在辨证分型中变化显著，可作为AA中医辨证分型的一个客观指标。     

三七总皂甙对免疫介导性再生障碍性贫血小鼠造血祖细胞的增殖作用

目的：探讨三七总皂甙(PNS)对免疫介导性再生障碍性贫血(再障)小鼠模型血细胞生成的作用。方法：采用免疫介导法进行再障造模,Balb／c小鼠经^60Coγ射线亚致死量照射后,自尾静脉输入DBA／2小鼠的淋巴细胞,随机分成4组,即模型组、PNS治疗高、中和低剂量组(每只3．2、1．6、0．8mg／d),并设正常对照组。腹腔注射给药,模型组和正常对照组注射生理盐水。治疗12天后,做血白细胞计数、骨髓病理检查和粒系、红系造血祖细胞(CFU-GM、CFU-E)集落培养。结果：(1)PNS升高白细胞数,与模型组比较,PNS高、中和低剂量组的白细胞数提高率分别为(34．3±2．9)％,(29．2±1．7)％和(14．5±1．6)％(P<0．01或P<0．05)。(2)改善骨髓抑制,骨髓病理检查模型组出现大片空白区,被大量的脂肪组织代替,而PNS治疗组造血组织结构较完整,造血细胞量丰富。(3)促进造血祖细胞增殖,高、中和低剂量PNS对CFU—GM集落提高率分别为(64．4±2．8)％、(67．3±2．4)％和(21．9±1．8)％(均P<0．01);CFU—E集落的提高率分别为(31．9±3．6)％、(20．7±2．4)％和(12．8±2．6)％(P<0．01或P<0．05)。结论：免疫介导性再障小鼠在骨髓抑制、造血功能低下时,PNS通过促进骨髓粒系、红系造血祖细胞的增殖,改善骨髓造血组织增生,从而促进血细胞的生成。     

川芎嗪对免疫介导再生障碍性贫血小鼠骨髓细胞CD34抗原表达的影响

目的：探讨川芎嗪对免疫再生障碍性贫血（再障）小鼠骨髓细胞ＣＤ３４抗原分子表达的影响。方法：建立免疫介导的再障小鼠模型，６．０Ｇｙ＾６０Ｃｏγ－射线照射和尾静脉输注淋巴细胞造成小鼠再障。分为正常组、再障组（对照组）、川芎嗪组，除正常组外均胃饲川芎嗪注射液４ｍｇ／次，１天２次，第１０天用流式细胞仪检测各组小鼠骨髓细胞膜上ＣＤ３４抗原表达量。结果：川芎嗪ＣＤ３４抗原表达量的荧光强度（７７．６±．６．５）     

昆明山海棠提取物对异基因骨髓移植小鼠调节性T细胞的影响

目的 研究昆明山海棠（THH）提取物减轻异基因骨髓移植小鼠移植物抗宿主病（GVHD）作用及可能机制。     

补肾活血法对再障小鼠骨髓基质黏附分子的影响

目的:观察补肾活血法对再障小鼠骨髓基质黏附能力及黏附分子CD106/CD49d的影响。方法:用免疫介导法复制小鼠再障模型,并给予补肾活血方药(参芪益肾饮),体外培养再障小鼠骨髓基质细胞,碘化丙啶染色检测其细胞周期,用流式细胞仪测定骨髓基质黏附分子表达水平。结果:再障小鼠骨髓基质细胞绝大部分处于G0/G1期,处于S期及G2+M期的细胞比例明显降低,中药组小鼠骨髓基质细胞处于S期及G2+M期的比例较模型组小鼠明显增加;模型组骨髓基质细胞黏附能力下降,中药组基质细胞黏附能力回升,与正常组无区别;模型组骨髓基质细胞CD106、CD49d表达均降低,中药组CD106、CD49d水平有所升高。结论:补肾活血法提高再障小鼠骨髓基质黏附分子表达水平,可能是其治疗再障的机制之一。     

补肾通络法治疗非重型再生障碍性贫血的远期疗效评价

目的:对补肾通络法治疗非重型再生障碍性贫血进行回顾性分析,评价其远期疗效。方法:回顾性分析2008年6月至2018年6月在潍坊医学院附属医院中医科门诊及住院的140例非重型再生障碍性贫血患者的资料,另按照2∶1的比例随机选取此期间单纯应用西药治疗的70例非重型再障患者作为对照组,分别进行随访观察及相关研究,比较两组患者外周血象、骨髓象及临床疗效,并使用中医经络检测仪测定人体经络能量指数,进行数据分析。结果:①治疗后患者的外周血象较治疗前均有不同程度的上升,尤其是血红蛋白、白细胞的数量升高明显,治疗组优于对照组(P0.05);②患者的骨髓象较前改善不明显;③患者经补肾通络法治疗后症状较前改善(P0.05);④治疗前后患者自律神经系统数值与体能均较前发生变化,使用补肾通络法治疗组优于单纯使用西药对照组(P0.05);⑤使用补肾通络法治疗的患者平均生存时间及中位生存时间均高于单纯使用西药治疗的患者(P0.05);⑥使用西药加补肾通络法治疗非重型再障患者的不良反应与单纯应用西药治疗差异无统计学意义(P0.05),但前者的不良反应消失时间较短。结论:补肾通络法治疗非重型再障有提高疗效、缩短疗程、延长生存时间、调节自律神经系统功能、改善精神状态、提升体能、缩短不良反应时间的优点,在常规西药治疗的基础上使用补肾通络法治疗非重型再障的远期疗效优于常规西医治疗。     

补肾泻肝方治疗再生障碍性贫血临床疗效与IFN-γmRNA基因表达关系的研究

目的 :观察补肾泻肝方治疗再生障碍性贫血临床疗效与 IF N-γm RNA基因表达关系。方法 :2 1例患者均以补肾泻肝方为主治疗 ,用 RT-PCR技术分析 IFN-γ基因表达。结果 :2 1例患者中有效 12例 ,皆为肾阴虚、肝火伏热型 ;无效9例 ,皆为肾阳虚、阴亏瘀热型。用 RT-PCR技术分析 IF N-γ基因表达 ,12例中有 9例阳性 ,治疗后阳性者 2例 ,阴性者 7例 ;而无效的 9例中无一例阳性。结论 :补肾泻肝方治疗再障疗效较好 ,IFN -γm RNA基因表达在中医辨证分型和预测补肾泻肝方的疗效与治疗机理方面有重要的作用。     

补肾填精法对再生障碍性贫血模型大鼠外周血细胞的影响

目的：观察补肾填精法对再生障碍性贫血（AA）模型大鼠血常规和网织红细胞的影响和作用。方法：将清洁级Wistar大鼠36只随机分为对照组、模型组、治疗组（补肾填精中药）3组,每组各12只;对照组正常饲喂,模型组和治疗组用5-氟尿嘧啶（5-FU）与马利兰合用诱导建立大鼠AA模型,之后治疗组每天给予补肾填精中药10g/kg.d灌胃,连续4周,4周后观察各组大鼠外周血WBC、RBC、Hb、PLT及网织红细胞的变化。结果：模型组与治疗组外周血细胞以上各值水平显著低于对照组,治疗后治疗组外周血细胞以上各值水平提高,差异有统计学意义。结论：补肾填精法能够提高再障模型大鼠的外周血细胞的数量,对再生障碍性贫血具有肯定的治疗作用。