益气养阴方抗血管生成抑制肿瘤转移作用的研究

[目的]研究益气养阴方抗血管生成抑制肿瘤转移的效应.[方法]制备接种肿瘤细胞的鸡胚尿囊膜(CAM)模型,采用血清药理学方法制备含药血清.观察含药血清对肿瘤细胞诱导CAM血管生成的影响,并与生理盐水血清组对照.另用小鼠经肌肉接种U14子宫颈癌细胞悬液,观察小鼠实体瘤的瘤质量、抑瘤率、肺部转移率、肺部转移瘤生长情况.[结果]益气养阴方含药血清可抑制肿瘤细胞诱导CAM血管生成,与生理盐水组比较差异具显著性.益气养阴方组的肺部转移结节较模型组明显减少,并且明显改善化疗对机体的免疫损伤.[结论] 益气养阴方对肿瘤细胞诱导的CAM血管生成有明显抑制作用,并且益气养阴方对自发性转移模型有一定的抑制作用.     

扶正散结汤拆方配伍中药对Lewis肺癌转移及血管生成影响的研究

目的:研究扶正散结汤拆方配伍中药对Lewis肺癌荷瘤小鼠肿瘤转移及血管生成机制影响的差异及其协同作用。方法:80只C57小鼠,随机均分为空白组、模型组、顺铂组、扶正组、化痰组、活血组、解毒组、联合组,除空白组外其余小鼠右腋皮下接种Lewis瘤细胞建立肺癌模型,从接种后的第2天开始分别给予相应药物灌胃或腹腔注射,连续14 d后处死,将瘤体剥离常规固定、脱水、包埋切片,免疫组化SP法检测肿瘤组织中VEGF、ES、MMP-2。结果:各给药组肺转移结节数量均低于模型组(P<0.05),以顺铂组和联用组为最少、也最接近,其次依次为扶正组、解毒组和活血组,各组与顺铂组相比,除化痰组外,无显著性差异。顺铂及各配伍组分组均较模型组VEGF、MMP-2表达量降低、ES表达量升高,其中解毒组VEGF表达最低(P<0.05)、联用组ES表达量最高(P<0.05 or P<0.01)、MMP-2表达量最低(P<0.05),而顺铂组不具任何优势。结论:扶正散结汤拆方配伍四法联用具有更好抗肿瘤转移效果,与顺铂相当;在抗肿瘤微血管生成机制方面,各配伍组分作用各有特点,但四法联用具有更优的效果。     

中药复方抗肿瘤血管生成研究简况

肿瘤生长和转移依赖于肿瘤血管形成,病机可归纳为"虚、毒、痰、瘀",治疗有扶正培本、活血化瘀、软坚散结、化痰祛湿、清热解毒等。中药复方可抑制血管内皮生长因子(VEGF),阻断血管内皮细胞迁移、增殖和肿瘤血管生成;抑制血管内皮细胞的生成或促其凋亡;抑制血管外基质降解,目前研究比较明确的是抑制基质金属蛋白酶家族、参麦注射液、平调饮、肺岩宁方、扶正抗癌汤等;其他小柴胡汤等。尚缺乏从微观辨证角度认识中药复方与血管生成关系研究;期望临床实践与实验室研究紧密结合,宏观辨证基础上筛选更有效的中药复方,微观角度验证,丰富中医药族,如基质金属蛋白酶-2(MMP-2);提高内源性或外源性血管生成抑制因子浓度;抑制促血管生成因子的细胞表面受体等。常见中药复方活血化瘀类有瘀毒清、艾迪注射液、桃红四物汤、血府逐瘀汤等;软坚散结类,改良莪术汤、鳖甲煎丸、乌三颗粒、消痰散结方、清热解毒类方、六神丸、清香散等;益气扶正类,参七汤抗肿瘤血管生成的理论内涵。     

肺岩宁方组分对小鼠肿瘤血管生成与MMP-2、MMP-9关系的研究

目的 观察中药肺岩宁方组分对C57BL/6小鼠Lewis肿瘤微血管密度(microvessel density, MVD)与基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2, MMP-2)、MMP-9 mRNA及蛋白表达的影响。     

消痰散结方对人胃癌裸鼠移植瘤血管生成拟态的影响

目的 探讨消痰散结方对人胃癌裸鼠移植瘤血管生成拟态（vasculogenic mimicry,VM）的影响及其机制。 方法 30只裸鼠右前肢腋部皮下移植人胃癌瘤块建立荷瘤模型。造模后的荷瘤鼠随机分为模型组（10只）、消痰散结组（10只）和多西环素组（10只）,分别给予相应药物灌胃治疗4周后,脱颈椎处死荷瘤鼠。剥取肿瘤,称取瘤质量,计算抑瘤率;计数肿瘤中VM的数量;运用免疫组织化学法检测肿瘤中基质金属蛋白酶2（matrix metalloproteinase-2,MMP-2）和基质金属蛋白酶9（matrix metalloproteinase-9,MMP-9）蛋白的表达。     

补肾健脾方调节血管相关生长因子表达抑制肝癌细胞侵袭转移的机制研究

目的:探讨补肾健脾方调节血管相关生长因子对人肝癌细胞侵袭转移的影响及其可能机制.方法:以人肝癌SMMC-2771细胞为对象进行实验.分别给予补肾健脾方0、12.5、25、50、100、200、400μg/mL,分别培养48、72 h,计算补肾健脾方对肝癌细胞增殖的抑制作用;将细胞分为对照组和中药干预低、中、高组.中药低...     

消痰散结方对血管生成拟态相关蛋白表达的影响

目的探讨消痰散结方对血管生成拟态（VM）相关蛋白表达的影响。方法30只裸鼠皮下移植人胃癌瘤块建立荷瘤模型。造模后的荷瘤鼠随机分为生理盐水组、消痰散结组、盐酸多西环素组,每组10只,分别给予相应药物灌胃治疗4周后,脱颈椎处死荷瘤鼠。观察移植瘤中VM的形态结构,计数VM的数量;运用免疫组织化学法检测肿瘤中基质金属蛋白酶2（MMP-2）、基质金属蛋白酶9（MMP-9）和层黏连蛋白5γ2链（LN-5γ2）等VM相关蛋白的表达。结果人胃癌裸鼠移植瘤可以形成VM。消痰散结组和盐酸多西环素组VM数量明显少于生理盐水组,差异有统计学意义（P〈0．01）。消痰散结组和盐酸多西环素组MMP-2、MMP-9和LN-5γ2蛋白的阳性表达低于生理盐水组,差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论消痰散结方可抑制裸鼠移植瘤VM的形成,其机制可能与下调MMP-2、MMP-9和LN-5γ2蛋白表达有关。     

益气养阴方对鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)血管生成的影响

目的：评价益气养阴方鸡胚绒毛尿囊膜血管生成的影响。方法：制备CAM模型，比较大鼠含药血清和无药血清对鸡胚绒毛尿囊膜血管生成的影响情况。结果：含药血清对鸡胚绒毛尿囊膜的血管生成产生明显抑制作用。结论：益气养阴方对活体血管的生成具有抑制作用，在肿瘤和其他病理情况下的血管形成治疗中具有一定的应用价值。     

益气活血方对大鼠胃溃疡愈合部位新血管的生成及促血管生成因子表达的作用

目的 探讨益气活血方对胃溃疡愈合部位新血管的生成及促血管生成因子表达的作用.方法 胃溃疡模型大鼠随机分为模型组、奥美拉唑组、益气活血方组、奥美拉唑加益气活血方组.HE染色观察新生血管数量,免疫组化测定胃组织中VEGF和VEGFR表达水平.结果 奥美拉唑组溃疡指数与模型组相比,均有显著性下降(P＜0.01);益气活血方加奥美拉唑组溃疡指数与奥美拉唑组相比有明显下降(P＜0.05).益气活血方组、益气活血方加奥美拉唑组与模型组、奥美拉唑组相比,14 d和21 d时微血管数量明显增多(P＜0.05).实验各组VEGF表达与VEGFR表达,均随胃溃疡愈合进程而增强,愈合后表达降低.模型组,直到28 d时表达增加.结论 益气活血方主要通过增加胃溃疡黏膜组织中VEGF和VEGFR表达,促进新血管的生成,从而提高溃疡愈合质量,中西药合用具有协同增效作用.     

益气养阴法与抗肺癌血管生成探析

本文从中医基础理论方面简述了养阴益气法与抗肺癌血管生成的相关性,以及现代中医药抗血管生成的实验研究,阐明养阴益气法是中医药研究抗肺癌血管生成的一个重要的思路方向,同时也为中医药治疗肺癌的临床决策提供新的向导。     

基于分子反向对接方法的槲皮素抗肿瘤机制研究

目的:确定槲皮素抗肿瘤作用的靶标和分子机制。方法:采用Autodock Vina软件,把槲皮素与91个抗肿瘤的靶蛋白进行对接。利用Ligplot软件对槲皮素与靶蛋白的作用模式进行了分析。结果:槲皮素与多个抗肿瘤靶标具有较好的亲和性,其中与槲皮素结合能在-9.0 kcal·mol-1以下的有8个。结论:槲皮素可以通过抑制基质金属蛋白酶-8、二氢乳氢酸脱氢酶、二氢叶酸还原酶和胸苷酸合成酶以及几种蛋白激酶的活性,发挥抗肿瘤作用。     

水蛭对鸡胚绒毛尿囊膜（CAM）血管生成的影响

目的：评价水蛭对鸡胚绒毛尿囊膜血管生成的影响。方法：制备大鼠含药血清,制备鸡胚绒毛尿囊膜（CAM）模型,比较大鼠水蛭含药血清和空白对照血清对鸡胚绒毛尿囊膜血管生成的影响。结果：水蛭含药血清存在促CAM血管新生作用。结论：水蛭对活体血管的生成具有促进作用,可能为水蛭在治疗缺血性心血管疾病和其他缺血性疾病中的应用提供新的观点。     

黄芪失笑散对鸡胚绒毛尿囊膜促血管生成实验研究

目的通过鸡胚绒毛尿囊膜(chrioall antoic membrane,CAM)模型以探讨黄芪失笑散的促血管生成的作用及机理,为进一步开发及临床应用提供实验依据.方法取SD大鼠16只随机分成模型组、消心痛组、黄芪失笑散大剂量组,消心痛和黄芪失笑散大剂量组分别进行灌胃10天,末次灌胃后1.5h取血制成含药物的血清,黄芪失笑散小剂量组药物血清以黄芪失笑散大剂量和模型组等剂量配置而成.然后分别以贝复济组(碱性成纤维细胞生长因子bFGF)和模型组分别为阳性和阴性对照组作用CAM,通过进行一级及二级血管计数来评价黄芪失笑散的促血管生成活性并初步探讨其作用机理.结果黄芪失笑散大剂量在CAM一级及二级血管数目上均与贝复济组间比较无显著性差异(P＞0.05).结论黄芪失笑散具有显著促血管生成作用.     

黄芪失笑散对鸡胚绒毛尿囊膜促血管生成实验研究

目的：通过鸡胚绒毛尿囊膜（chrioall antoic membrane，CAM）模型以探讨黄芪失笑散的促血管生成的作用及机理，为进一步开发及临床应用提供实验依据。方法：取SD大鼠16只随机分成模型组、消心痛组、黄芪失笑散大剂量组，消心痛和黄芪失笑散大剂量组分别进行灌胃10天，末次灌胃后1．5h取血制成含药物的血清，黄芪失笑散小剂量组药物血清以黄芪失笑散大剂量和模型组等剂量配置而成。然后分别以贝复济组（碱性成纤维细胞生长因子bFGF）和模型组分别为阳性和阴性对照组作用CAM，通过进行一级及二级血管计数来评价黄芪失笑散的促血管生成活性并初步探讨其作用机理。结果：黄芪失笑散大剂量在CAM一级及二级血管数目上均与贝复济组间比较无显著性差异（P〉0．05）。结论：黄芪失笑散具有显著促血管生成作用。     

芦荟多糖的抑瘤作用及其机理研究

目的研究芦荟多糖(AP)的抗瘤作用及其机制。方法采用移植性S180肿瘤小鼠(实体瘤)和H22肝癌小鼠(腹水瘤),单独ip或ivAP,或与环磷酰胺(CTX)、阿霉素(ADM)、氟脲嘧啶(FU)联合用药。连续给药10天后,S180肿瘤小鼠剥取瘤块,称重,减毒试验则于处死前采血,化验血象,计算脾指数和胸腺指数;H22肝癌小鼠停药后观察生存时间,或于停药后24小时取血,放射免疫分析法测IL-2和TNF含量。结果AP25mg/kg·d、50mg/kg·d两个剂量单独给药时,能显著降低S180肉瘤移植小鼠瘤块重量,显著延长H22肝癌移植小鼠的生存时间;与三种抗肿瘤药物合用时,均有不同程度的增效作用,且可减轻化疗药物的副作用;可显著提高荷瘤鼠血清中IL-2、TNF含量。结论AP对移植性S180肿瘤小鼠和H22肝癌小鼠具有抗肿瘤作用及化疗增效和减毒的双重作用,其机理可能是诱生IL-2、TNF及提高机体免疫力。     

灵芝多糖GL-B的抑瘤作用和机制研究

目的：探讨灵芝多糖ＧＬ－Ｂ的抗肿瘤作用及其机制。方法：采用体内体外实验相结合方法，ＭＴＴ法测肿瘤细胞增殖程度，流式细胞仪测细胞凋亡，同时采用生物法ＴＮＦα，ＥＬＩＳＡ测定ＩＴＦγ，并用逆转录聚合酶链反应方法检测ｍＲＮＡ表达。结果；（１）ＧＬ－Ｂ５０，１００，２００μｇ／ｍｌ显著抑制小鼠移植性肉瘤Ｓ１８０的生长；（２）ＧＬ－Ｂ直接加入人急性早幼粒白血病细胞体外培养不能抑制其生长，亦无诱导其凋亡的作用     

清癌汤体外抗肿瘤作用及其机制研究

目的：探讨清癌汤体外对肿瘤细胞的增殖、凋亡及p53表达的影响。方法：倒置显微镜下观察加药后细胞形态的变化,MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡情况,JC-1检测细胞膜电位变化情况,免疫荧光法检测细胞内p53蛋白表达情况。结果：清癌汤在高浓度作用下,肿瘤细胞形态发生了明显变化,对人乳腺癌细胞（MCF-7）、人肝癌细胞（HepG2）、人胃癌细胞（MGC-803）具有明显的抑制作用,并呈浓度依赖性,而对大鼠肾上腺嗜铬瘤细胞（PC12）无明显抑制作用。清癌汤可诱导MGC-803发生凋亡并呈明显的浓度依赖性,降低线粒体膜电位,从而引起细胞凋亡,并能升高p53蛋白的表达量。结论：清癌汤具有良好的体外抗肿瘤作用,且无明显神经毒性,该作用与其诱导细胞凋亡包括降低线粒体膜电位和上调p53蛋白表达有关。     

基于网络药理学和分子对接技术探讨经典名方泻白散治疗肺炎的潜在作用机制＊

目的 采用网络药理学方法和分子对接技术探讨经典名方泻白散治疗肺炎潜在作用机制。方法 通过检索TCMSP、BATMAN-TCM数据库获取泻白散活性成分及作用靶点，通过DisGeNET、Gene Cards数据库获取肺炎的相关靶点，筛选得到泻白散治疗肺炎的活性成分及作用靶点，采用Cytoscape 3.6.0构建药物-成分-靶点-疾病作用网络。利用STRING数据库和Cytoscape 3.6.0软件构建泻白散治疗肺炎靶点间蛋白质-蛋白质互作关系（PPI）网络并筛选得到关键靶点及其PPI网络。利用DAVID数据库对关键靶点进行基因本体（gene ontology，GO）富集分析与基因组百科全书（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes，KEGG）通路分析。最后利用AutoDock工具对泻白散成分和靶点进行分子对接。结果 本研究通过构建药物-靶点-疾病网络，发现泻白散中74个活性成分可以作用于与肺炎相关的53个靶点，其中槲皮素、血根碱、山柰酚、β-谷甾醇等成分是潜在药效成分。利用拓扑学筛选得到关键靶点9个，包括白细胞介素8（IL8）、白细胞介素6（IL6）、白细胞介素1β（IL1B）、肿瘤坏死因子（TNF）等；GO分析获得90个条目，泻白散治疗肺炎可能涉及炎症反应、免疫应答、细胞因子活性等过程，KEGG分析获得41个条目，炎症性肠病、百日咳等通路可能是泻白散治疗肺炎的潜在通路，分子对接结果显示方中主要活性成分槲皮素、血根碱、山奈酚、β-谷甾醇等与核心靶点IL8， IL6， IL4和TNF等均能实现自发结合。结论 中医经典名方泻白散中槲皮素、血根碱、山奈酚等活性成分可能通过炎症性肠病、百日咳等通路实现对肺炎的防治。     

冬凌草甲素抑制血管生成活性及作用机制

目的:研究冬凌草甲素抑制血管生成的活性及其作用机制。方法:采用体外和体内两种模式,研究冬凌草甲素在血管生成方面的抑制效应。通过体外培养心脏微血管内皮细胞,噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞的活力,酶联免疫吸附(ELISA)法测定血管内皮生长因子(VEGF)的含量;体内选择斑马鱼(Fli1-GFP)生物模式,观察冬凌草甲素对胚胎期血管生成和成鱼期血管损伤后再生的影响,并采用相对荧光定量PCR法检测VEGF通路上主要相关基因VEGFA,血管内皮细胞生长因子受体(VEGFR)2,VEGFR3的表达量。结果:冬凌草甲素具有抑制血管生成活性的作用,可抑制体外内皮细胞活力,其半抑制浓度(IC50)8.04 mg·L~(-1),可使细胞血清中VEGF的表达量明显下降;可抑制斑马鱼胚胎期体节间血管生成,且抑制成鱼期血管损伤后再生,可能通过降低体内VEGFA,VEGFR2,VEGFR3基因的表达量从而抑制血管生成。结论:冬凌草甲素可有效抑制血管生成,为其抗肿瘤血管生成治疗提供了重要的科学依据。     

肿瘤血管形成方式及机制研究进展

肿瘤血管的形成对肿瘤的生长具有重要的影响,本文通过对肿瘤血管形成过程、方式及机制相关文献的综合查阅和总结,系统阐述了近年来肿瘤性毛细血管内皮细胞芽生、脉管共同选择、微血管套叠式生长、肾小球样血管新生、血管生成拟态、马赛克血管、成血管细胞募集、血管选定方式等肿瘤血管形成方式及其机制等热点研究进展,为临床科研提供思路。