芪归口服液对大鼠骨髓象、血象、血液流变学的影响

 目的:观察芪归口服液对骨髓造血模型大鼠骨髓象、外周血象、血液流变学的影响?方法:用健康Wistar种大鼠50只,体重(190±10)g,随机分为5组:①正常对照组?②模型对照组?③阳性对照组?④芪归高剂量组?⑤芪归低剂量组?除正常对照组外,其余各组灌胃给药9d,第7天开始用环磷酰胺造模?取大鼠胸骨骨髓进行骨髓象检查分析,取血进行外周血象、血液流变学测定?结果:给模型大鼠灌服18.8g·kg^-1(生药含量0.94g·ml^-1)的芪归口服液后,与模型对照组比较,芪归口服液使大鼠的骨髓有核细胞增生明显活跃P<0.01;改善骨髓象中各系统及各期细胞的比值?显著增加模型大鼠血红蛋白含量P<0.01;升高白细胞总数P<0.01?降低模型大鼠全血高切粘度P<0.01;低切粘度P<0.05;和血浆粘度P<0.05?结论:芪归口服液具有生髓、补气、补血、活血化淤的功效?     

石榴补血糖浆对血虚小鼠造血功能的影响＊

目的 探讨石榴补血糖浆对环磷酰胺血虚证模型小鼠造血功能的影响及其相关机制。方法 采用环磷酰胺构建血虚证模型，分别用石榴补血糖浆、EPO和复方阿胶浆连续干预28d，取小鼠外周血液，分别进行红细胞（RBC）及白细胞（WBC）计数、血红蛋白（HGB）浓度测定以及红细胞比容（HCT），血小板计数（PLT）的含量；取小鼠双侧股骨，收集全部骨髓细胞，进行骨髓有核细胞计数；采用酶联免疫法（Elisa）测定小鼠血清中促红细胞生成素（Erythropoietin，EPO）的含量，Western blot、Real-Time PCR法检测造血干细胞因子（SCF）、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）的含量变化。结果 与对照组比较，石榴补血糖浆（4.6875 mL·kg^-1，9.375 mL·kg^-1，18.75 mL·kg^-1，28.125 mL·kg^-1）组小鼠血液中RBC，WBC，PLT，HCT，HGB均升高（P < 0.05）；与模型组相比，石榴补血糖浆9.375 mL·kg^-1剂量组EPO、SCF、GM-CSF表达量均显著提升（P < 0.05），骨髓有核细胞数增多（P < 0.05）。结论 石榴补血糖浆可以对血虚证模型小鼠起到一定的治疗作用，其作用机理可能与增加造血细胞因子EPO、SCF、GM-CSF的表达，提高骨髓有核细胞数有关。     

熟地黄多糖对血虚模型小鼠的影响

目的 :观察熟地黄多糖 (RGP)对模型小鼠外周血象、骨髓造血干细胞、骨髓有核细胞的影响。方法 :各组小鼠连续灌胃 8～ 9d ,腹腔注射环磷酰胺 (CY)致化学损伤血虚模型 ,取全血测外周血象、骨髓有核细胞计数 ;各组小鼠尾静脉注射同种供体小鼠骨髓细胞悬液 ,取脾脏固定 ,观察外源性脾结节形成 ,各组小鼠以⁶⁰Coγ全身照射7.25Gy ,取脾脏观察内源性脾结节形成 ;各组小鼠⁶⁰Coγ全身照射 7.5Gy ,复制出放射性损伤模型 ,测外周血象和骨髓有核细胞数量。结果 :RGP各组对CY血虚模型小鼠外周血象、骨髓有核细胞下降均有拮抗作用 ,与模型组比较 ,有显著差异。对小鼠脾结节的形成有明显的促进作用 (P<005,P<001) ,对于小鼠外周血象的放射性损伤 ,RGP高剂量组可明显抑制小鼠全血细胞减少 (P<005) ,RGP低剂量组虽可提高损伤小鼠血细胞数量 ,但无统计学意义。结论 :熟地黄多糖对于不同血虚模型小鼠外周血象、骨髓有核细胞下降均有拮抗作用 ,对小鼠造血干细胞具有促进增殖、分化作用。     

当归补血汤对再障小鼠骨髓造血及线粒体自噬的实验研究

目的:探讨当归补血汤对再生障碍性贫血小鼠骨髓造血及骨髓单个核细胞线粒体自噬的影响。方法:化学方法制备再障小鼠模型,观察2.7g/kg、5.4g/kg、10.8g/kg当归补血汤对再障小鼠一般症状、外周血白细胞(WBC)、血红蛋白(HCG)、血小板(PLT)和单侧股骨骨髓单个核细胞(BMMNC)数量的影响,光学显微镜下观察其对再障小鼠骨髓病理的影响,估算造血组织增生度,透射电镜下观察其对小鼠骨髓单个核细胞线粒体自噬的影响。结果:当归补血汤可有效改善再障小鼠的骨髓病理形态,提高造血组织增生度,抑制再障造成的线粒体过度自噬。结论:当归补血汤可以促进再障小鼠骨髓造血功能恢复,线粒体自噬的改变可能是机制之一。     

当归补血汤促进造血功能的成分及其作用的研究

目的 :探讨当归补血汤不同的组分或成分对血虚模型小鼠造血功能的作用及其机理。方法 :采用整体实验法、MTT比色法、³H-TdR参入法、半固体造血细胞集落形成技术等 ,测定血虚小鼠外周血象、骨髓有核细胞数和造血干 /祖细胞集落水平。结果 :当归补血汤的多糖与非多糖组分均有补血作用 ,多糖组分作用较强 ,尤以当归多糖的作用更为显著。非多糖组分中以阿魏酸作用最强 ,黄芪异黄酮等也有一定的作用。以上各成分可在不同的作用环节上促进造血细胞的形成。结论 :当归补血汤通过多成分、多环节改善血虚动物的造血功能。     

川芎嗪对骨髓移植小鼠骨髓造血的影响

目的：探讨川芎嗪对同基因骨髓移植（bone marrow transplantation,BMT)小鼠BMT后骨髓造血的影响。方法：建立典型同基因BMT小鼠模型，随机分成两组：骨髓移植（BMT）组和BMT加川芎嗪处理组（川芎嗪组），另设正常组（未做任何处理）。BMT组胃饲生理盐水，每次0.2ml/kw，每天2次。川芎嗪组胃饲磷酸川芎嗪注射液，每次0.2ml/只，每天2次。分别于BMT后第1、7、14天观察外周血细胞，骨髓单个核细胞（BMMNC），采用免疫组化SABC－AP法测定骨髓组织切片中硫酸肝素（HS）表达水平；基质细胞来源因子－1（stromal derived factor,SDF-1)的表达水平；CXC趋化因子受体4（CXCR4）表达水平；基质细胞来源因子－1（stromal derived factor,SDF-1)的表达水平；CXC趋化因子受体4（CXCR4）表达水平。结果：川芎嗪组第7、14天外周血白细胞、红细胞、血小板、BMMNC及CXCR4、HS、SDF－1表达水平均显著高于BMT组（P＜0．05或P＜0．01）。结论：川芎嗪能够在骨髓移植造血重建早期促进骨髓造血。     

黄花倒水莲对辐射损伤小鼠防护作用的研究

目的: 初步探讨黄花倒水莲提取物对小鼠辐射损伤的防护作用。方法: 以辐射损伤小鼠作为研究对象,分别以黄花倒水莲提取物2,4,8 g·kg^-1·d^-1灌胃,阴性对照组、辐射模型组给予等量生理盐水。灌胃5 d后,除阴性对照组外各组小鼠接受6 Gy的⁶⁰Co γ射线一次性全身均匀照射,然后再继续灌胃10 d,最后1次灌胃24 h后,检测各组小鼠外周血中红细胞数(RBC)、白细胞数(WBC)、血小板数(PLT)、淋巴细胞数(Lymph),计算脾指数和胸腺指数,用单细胞凝胶电泳技术检测小鼠脾细胞、骨髓细胞的DNA损伤。结果: 与阴性对照组比,辐射模型组、黄花倒水莲各剂量组小鼠的RBC数、WBC数、PLT数、Lymph数、胸腺指数、脾指数明显减少(P<0.01或P<0.05),脾细胞、骨髓细胞的尾部DNA百分率(Tail DNA%)和尾矩(Tail Moment)明显增大(P<0.01或P<0.05);但与辐射模型组比, 黄花倒水莲各剂量组小鼠的RBC数、WBC数、PLT数、Lymph数、胸腺指数、脾指数明显增加(P<0.01或P<0.05),脾细胞、骨髓细胞的Tail DNA%和Tail Moment明显减少(P<0.01),存在剂量-反应关系。结论: 黄花倒水莲提取物对辐射所致小鼠造血系统和免疫器官损伤有一定的防护作用。     

半枝莲多糖对S180荷瘤小鼠红细胞功能的影响

目的: 探讨半枝莲多糖增强荷瘤小鼠红细胞膜流动性及其红细胞免疫调节机制。 方法: 健康雄性小鼠48只,按体重随机分为正常对照组、模型对照组、黄芪多糖对照组(100 mg·kg^-1)、半枝莲多糖低、中、高剂量组(50,100,200 mg·kg^-1)。用荧光分光光度计检测荷瘤小鼠红细胞膜流动性;用紫外分光光度计检测红细胞膜Ca²⁺,Mg²⁺-ATP酶活力、唾液酸(SA)含量、抗氧化酶系的活力。 结果: 与模型对照组比较,半枝莲多糖各剂量组可明显提高S180荷瘤小鼠红细胞膜流动性(P<0.01,P<0.05),可明显提高红细胞膜Ca²⁺,Mg²⁺-ATP酶活力(P<0.01,P<0.05)、及抗氧化酶系的活力(P<0.01,P<0.05);低、中剂量组可增加红细胞膜表面唾液酸含量(P<0.01)。 结论: 半枝莲多糖可能通过改善S180荷瘤小鼠红细胞膜的功能状态,提高膜的流动性,增强红细胞的免疫功能,从而发挥其抗肿瘤作用。     

当归补血汤不同剂型及配伍对骨髓抑制小鼠造血调控的实验研究

 目的本实验通过比较当归补血汤煎剂及颗粒剂对骨髓抑制小鼠造血机能调控的影响来比较它们之间的疗效差异。旨在为中药颗粒剂的疗效提供实验室依据。方法本实验用高效液相色谱仪检测了当归补血汤不同制剂中阿魏酸、黄芪甲苷的含量差异;采用造血祖细胞培养术、外周血像计数法、ELISA等方法对造血祖细胞集落数、外周血像的变化及造血微环境中EPO,TPO,G-CSF的变化进行检测。结果当归补血汤煎剂、颗粒剂能通过平衡骨髓微环境中EPO,TPO,GM-CSF的表达;促进骨髓造血细胞从G_{0/G1期进入G2/M期和S期;促进造血祖细胞增殖,从而提高骨髓抑制小鼠外周血像和骨髓像。结论当归补血汤煎剂、颗粒剂均能改善骨髓抑制小鼠的造血机能,其中配方颗粒剂疗效较为突出。}     

当归补血汤对~(60)Co-γ射线辐照小鼠造血功能损伤的防护作用

目的:观察当归补血汤对~(60)Co-γ射线辐照小鼠造血功能损伤的防护作用。方法:将健康SPF级昆明种雄性小鼠随机分为5组(正常对照组、模型组、当归补血汤低、中、高剂量组),除正常对照组外,采用~(60)Co-γ射线辐射各组小鼠建立急性辐射损伤模型,测定各组小鼠外周血平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)、骨髓有核细胞数(BMC)、骨髓细胞DNA含量,并在光镜下观察小鼠骨髓组织形态学变化。结果:受~(60)Co-γ射线照射后,小鼠MCHC、BMC、骨髓细胞DNA含量均明显减少,骨髓组织形态变化明显。低、中、高剂量当归补血汤均可提高辐射损伤后小鼠MCHC、BMC及骨髓细胞DNA含量,促进辐照小鼠骨髓造血组织损伤的恢复,且高、中剂量当归补血汤对其造血系统的保护作用效果更明显。结论:当归补血汤对辐射小鼠造血系统的损伤有保护和促修复作用,且与剂量相关。     

当归补血汤对移植肌卫星细胞γ射线照射小鼠早期造血重建作用的影响

目的观察当归补血汤对移植骨骼肌卫星细胞的受体小鼠早期造血功能重建的影响。方法分离培养雄性同系小鼠的肌卫星细胞并鉴定。经8Gy137Cs-γ射线照射的雌性昆明种受体鼠随机分为6组:空白对照组、移植肌卫星细胞组、当归补血汤不同剂量(1,3,5,10倍灌胃7 d)干预的移植肌卫星细胞4组。观察移植后8周内受体鼠存活率、外周血血常规、脾脏指数、脾形态学的变化,并采用PCR方法鉴定其造血重建的来源。结果培养的肌卫星细胞呈desmin染色阳性;当归补血汤各剂量组受体鼠脾脏指数、脾结节数、白细胞数、血小板数、血红蛋白数、8周内存活数均高于空白对照组和移植肌卫星细胞组,特别是给药3组及4组(P<0.05);对移植的存活小鼠进行Y染色体PCR分析,证实重建雌性受体鼠造血功能的细胞来自雄性供体。结论经当归补血汤干预后,肌卫星细胞能使受体鼠早期造血功能得以重建。     

生血增白汤对骨髓移植后小鼠骨髓细胞周期和细胞凋亡的影响

目的探讨生血增白汤对骨髓移植后小鼠骨髓中细胞周期和细胞凋亡的影响及其促进骨髓造血重建的机制。方法将实验动物随机分为5组:正常组、模型组、粒细胞-集落刺激因子组(G-CSF组)、生血组、生血+G-CSF组(联合组);建立小鼠骨髓移植模型,生血组及联合组胃饲生血增白汤浓缩煎剂。骨髓移植后第9、14、24天,采用流式细胞仪检测骨髓单核细胞凋亡率(APO)并分析细胞周期变化,进行外周血细胞和骨髓单核细胞计数,并做骨髓组织学观察。结果骨髓移植后第14天,生血组外周血细胞中血红蛋白高于模型组及G-CSF组(P<0.05),联合组高于模型组(P<0.05);骨髓移植后第24天,生血组外周血细胞中白细胞高于模型组(P<0.05)。骨髓移植后第24天时,G-CSF组、生血组和联合组骨髓单核细胞计数均高于模型组(P<0.01)。骨髓移植后第24天,生血组第24天APO明显低于同期模型组及G-CSF组(P<0.01)。结论生血增白汤能促进骨髓造血细胞的增殖分化,抑制骨髓细胞凋亡,可能是生血增白汤重建造血的机制之一。     

生血增白汤在小鼠骨髓移植后造血重建中的作用

目的 探讨生血增白汤对骨髓移植后小鼠骨髓中细胞间黏附分子(ICAM-1)、干细胞因子(SCF)表达水平的影响.方法 将实验动物采用随机数字表法分为5组各30只:正常组,未做任何处理;对照组、G-CSF组、生血组、生血+G-CSF组,建立小鼠骨髓移植模型,生血组及生血+G-CSF组胃饲生血增白汤浓缩煎剂.骨髓移植后的第9...     

当归补血汤干预移植肌卫星细胞受体小鼠造血功能重建的研究

目的 观察当归补血汤对移植骨骼肌卫星细胞（muscle satellite cell,MSC）受体小鼠造血功能重建的影响。方法 分离雄性同系小鼠的MSC并培养鉴定。经8Gy137Cs γ射线照射的雌性昆明种受体鼠随机分为6组：空白对照组、移植MSC组、当归补血汤不同剂量（1、3、5、10倍临床等效剂量灌胃7天）干预的移植雄性MSC 4组。观察移植后1、2、3周受体鼠脾集落形成单位（colony forming unit spleen,CFU S）数、外周血白细胞（WBC）、血红蛋白（Hb）、血小板（PLT）的变化,3周存活率等指标,并采用PCR方法鉴定其造血重建的来源。结果 培养的MSC呈desmin染色阳性;第2周时移植MSC各组WBC明显升高（P<005）,给药2、3、4组Hb明显回升（P<005）;第3周时与移植MSC组比较,给药3、4组WBC及Hb升高明显（P<005）,给药4组PLT恢复显著（P<005）。第2周时与空白对照组比较,给药3、4组CFU S明显增多（P<005）,对移植的存活小鼠进行Y染色体PCR分析,证实重建雌性受体鼠造血功能的细胞来自雄性供体。结论 当归补血汤干预有助于移植MSC的受体鼠造血功能重建。     

当归补血汤载药血清对骨髓基质细胞增殖及细胞因子表达的影响

目的:观察当归补血汤载药血清对小鼠骨髓基质细胞增殖及细胞因子分泌的影响。方法:分离骨髓基质细胞,接种于96孔板培养,在相差显微镜下观察细胞形态和生长状况;将细胞分4组,用含有不同剂量的当归补血汤载药血清作用,采用MTT法检测各组细胞的增殖活性及ELISA法检测造血生长因子GM-CSF和IL-3的表达情况。结果:在不同浓度的载药血清作用下,骨髓基质细胞增殖和分泌GM-CSF和IL-3显著(P<0.05),呈剂量依赖性,但浓度过高可减弱细胞的增殖分泌效应。结论:当归补血汤载药血清能够促进骨髓基质细胞的增殖以及GM-CSF和IL-3的分泌。     

补肾解毒活血法与益气补血法对骨髓抑制小鼠造血功能影响的比较研究

目的:比较补肾解毒活血法与益气补血法对环磷酰胺(CTX)所致骨髓抑制小鼠造血功能的影响及其作用机制的不同特点.方法:昆明种小鼠80只,随机分为4组,正常对照组、模型组、补肾解毒活血组(20.55 g·kg -1·d-1)和益气补血组(17.47 g·kg-1·d-1).采用CTX 100 mg·kg-1 ip,连续3d,制成骨髓抑制小鼠模型.各组于造模完成后次日开始ig连续10d.分别于造模前及造模后1,3,5,7,10,14 d动态检测外周血象;于末次给药次日后进行骨髓有核细胞计数(BMNC)及粒-单核系集落形成单位( CFU-GM)、红系集落形成单位(CFU-E)、和红系爆式集落形成单位(BFU-E)集落计数.结果:补肾解毒活血方和益气补血方均可明显升高模型小鼠的WBC,PLT,BMNC,可促进造血祖细胞(HPC)增殖,CFU-GM,CFU-E,BFU-E集落数均显著高于模型组(P＜0.01);补肾解毒活血方对血小板的恢复优于益气补血方.结论:补肾解毒活血方和益气补血方均可促进骨髓造血祖细胞集落生成,具有减轻和改善化疗后骨髓抑制的效果,而前者尤可减轻血小板减少、促进其恢复;其作用机制可能在骨髓细胞分化过程或造血微环境等途径上有不同.     

消岩汤对Lewis肺癌小鼠化疗后骨髓抑制的影响

目的通过荷瘤动物实验,从外周血血细胞比例、免疫细胞亚型及细胞因子相关指标等方面研究消岩汤对骨髓抑制的影响。方法 Lewis肺癌细胞接种小鼠,荷瘤小鼠ip环磷酰胺(CTX)100 mg/(kg·d),连续3 d,制备荷瘤小鼠化疗后骨髓抑制模型。成模小鼠随机分为模型组、消岩汤组、吉粒芬组、消岩汤与吉粒芬联用组(联用组),每组10只,另取正常小鼠10只为对照组,消岩汤组ig消岩汤水煎液18.2 g/(kg·d),分2次给药,连用7 d,吉粒芬组sc吉粒芬12μg/kg,连用7 d,联用组为两药合用。观察各组小鼠一般血常规、外周血免疫细胞亚群、血清中白细胞介素-3(IL-3)、白细胞介素-6(IL-6)、促红细胞生成素(EPO)、粒细胞巨噬细胞刺激因子(GM-CSF)的变化。结果与对照组比较,模型组小鼠外周血白细胞(WBC)、红细胞(RBC)、血红蛋白(Hb)、血小板数量(PLT)降低(P0.05),尤以WBC减少为主(P0.05);模型组CD3+CD8+T、CD4+CD8+T、CD4/CD8明显降低(P0.05);模型组小鼠血清中IL-3、IL-6水平明显降低(P0.05)。与模型组比较,消岩汤组和吉粒芬组WBC数值均增加(P0.05),消岩汤组、联用组CD3+CD8+T、CD4+CD8+T明显提高(P0.05),各组NK细胞比较无显著差异(P0.05),消岩汤组和联用组显著升高小鼠血清中IL-3、IL-6、EPO、GM-CSF水平,吉粒芬组显著升高IL-3、IL-6水平(P0.05)。与吉粒芬组比较,联用组小鼠外周血WBC增加更明显(P0.05),且RBC、PLT增加更显著(P0.05),Treg细胞明显减少(P0.05)。结论消岩汤能改善化疗后骨髓抑制小鼠的外周血象,以及T细胞亚群的免疫功能,改善化疗后骨髓抑制程度,且消岩汤与吉粒芬联用效果更佳,其机制可能与促进小鼠血清造血因子IL-3、IL-6、EPO、GM-CSF的生成,从而缓解化疗导致的骨髓抑制程度有关。