马钱子总生物碱的测定及其提取条件的正交设计优选

目的建立马钱子总生物碱的RP-HPLC测定方法,探讨其提取分离的优化条件.方法以士的宁、马钱子碱为定量指标成分,通过对马钱子氨性氯仿提取、水提取、酸水提取和酸性乙醇提取等提取方法的比较与筛选,确定乙醇浓度、pH值、提取时间、溶剂用量为影响因素,并以L9(34)正交设计表安排试验.结果马钱子药材细粉加6倍量pH=5的50%乙醇提取3次,每次1h为马钱子总生物碱的最佳提取工艺.结论优选的提取条件效率高,可增加马钱子药材的利用率.     

马钱子总生物碱提取纯化工艺及抗肿瘤研究

目的:探讨马钱子总生物碱提取纯化工艺及其体外抗肿瘤研究。方法:采用氨性氯仿浸提、酸水纯化得到总生物碱,HPLC测定提取液及纯化后浓缩液中马钱子碱和士的宁的含量,以转移率为指标考察提取和纯化工艺。采用MTT法,以IC50为指标比较马钱子总生物碱的体外抗肿瘤活性。结果:采用5倍量氯仿提取5次,每次12h;1mol/L盐酸纯化1次为最佳工艺制备马钱子总生物碱,平均得率为3.49%,其中士的宁和马钱子碱分别占46.76%和26.51%。马钱子总生物碱对十种细胞的抑制效果在72h通过IC50值来比较:MGC-803>A2780>LoVo>SMMC-7721>Hela>A549>MDA-MB-231>MKN-45>BGC-823>SGC-7901,总生物碱对MGC-803,A2780细胞株的IC50分别达到了295.79ng/mL,419.07ng/mL。结论:优选的纯化工艺简便,效率高;马钱子总生物碱的抗肿瘤效果显著,值得进一步研究。     

马钱子减毒总生物碱的制备及毒性

目的制备去除大部分士的宁的马钱子减毒总生物碱,并考察马钱子总生物碱减毒前后成分及毒性的变化。方法用不同体积分数的乙醇溶解马钱子总生物碱,经磁力搅拌、离心后制备得到马钱子减毒总生物碱,HPLC法测定马钱子减毒总生物碱中马钱子碱和士的宁的量。用Q-TOF-MS技术比较鉴定了马钱子总生物碱减毒前后的主要生物碱类成分。通过小鼠口服急性毒性试验考察了马钱子总生物碱减毒前后的毒性变化情况。结果以20%乙醇为溶剂制备的马钱子减毒总生物碱去士的宁效果最好,同时不影响其他19种生物碱类含有量。小鼠口服急性毒性LD50实验表明马钱子减毒总生物碱与马钱子总生物碱的LD50分别为31.08 mg/kg、10.92 mg/kg。结论马钱子总生物碱中士的宁占38.49%,减毒后仅占14%,减毒工艺提高了马钱子总生物碱临床使用的安全性。     

马钱子总生物碱的含量测定

目的建立马钱子总生物碱的含量测定方法并用于提取工艺的评价。方法采用酸性染料比色法测定总生物碱含量:以马钱子碱和士的宁为对照品,溴麝香草酚蓝为酸性染料,在pH7.2缓冲溶液条件下,用氯仿萃取。结果马钱子碱在0.0412～0.206mg/mL范围内,士的宁在0.0428～0.214mg/mL范围内浓度与吸光度值呈良好的线性关系。马钱子碱的平均回收率为(101.8±4.6)%(n=5);士的宁的平均回收率为(103.3±2.7)%(n=5)。结论所建立的总生物碱测定方法简便、准确、稳定,可以满足马钱子总生物碱提取工艺考察的需要。     

薄层-酸性染料比色法测定马钱子中士的宁和马钱子碱的含量

目的 :探索一种用可见分光光度计分析马钱子中士的宁和马钱子碱的方法。方法 :使用薄层色谱法分离提纯马钱子的氨性氯仿 (氯仿 -氨水 =9∶ 1)提取液 ,于 42 5 nm波长处检测显色后的氯仿萃取液 ,同时又与用紫外分光光度法直接检测分离出来的士的宁 (2 5 4nm )和马钱子碱 (2 6 4nm )的方法进行了比较。结果 :4.0～ 16 .8μg· m l- 1 的士的宁和马钱子碱染色后具有良好的线性关系 (r士 =0 .9991,r马 =0 .9997)。回收率为 99.82 % ,RSD=0 .87。结论 :酸性染料比色法准确、灵敏、可以替代紫外分光光度法分析马钱子中的士的宁和马碱子碱 (P<0 .0 0 1)     

马钱子及其制剂药动学研究进展

从给药剂型和给药方式的角度入手,就近年来对马钱子及其相关制剂的的药动学研究进行概述。马钱子碱ig给药的绝对生物利用度为33.0%~47.8%,注射给药绝对生物利用度为75%左右;以马钱子碱为指标,马钱子总碱ig给药后的血药浓度最高,其次是马钱子碱,马钱子粉的血药浓度最低;马钱子碱或马钱子总碱脂质体注射给药后马钱子碱生物利用度有很大提高;另外外用制剂可减少马钱子碱和士的宁在体内的量,有利于降低毒性;口服马钱子制剂可延长马钱子碱和士的宁的体内作用时间,降低峰浓度。马钱子及其相关制剂的药动学研究还较薄弱,有待继续深入探索。     

马钱子散中马钱子总生物碱的含量测定方法研究

目的:建立马钱子散中马钱子总生物碱的含量测定方法。方法:采用酸性染料比色法,溴百里香酚蓝为酸性染料,分别以马钱子碱和士的宁为对照品,测定马钱子散中马钱子总生物碱含量。结果:士的宁、马钱子碱在0.020 0~0.080 2 mg/m L浓度范围内与吸光度均呈良好的线性关系,士的宁、马钱子碱的回收率分别为:95.30%~101.48%(RSD为2.28%),97.14%~105.30%((RSD为2.95%);以马钱子碱计,马钱子散中马钱子总生物碱含量为3.16%。结论:所建立的总生物碱测定方法准确、稳定、重复性好,可用于马钱子散中马钱子总生物碱的含量测定。     

Box-Behnken响应面法优化马钱子提取工艺

目的采用Box-Behnken实验设计优选马钱子生物碱的提取工艺。方法采用HPLC法测定马钱子碱及士的宁含有量,以马钱子碱及士的宁提取率的总评综合效应为指标,通过Box-Behnken试验考察液料比、提取时间、乙醇体积分数对提取工艺的影响,对结果进行二项式方程拟合,利用响应面法优化提取工艺并进行预测分析。结果最佳提取工艺为液料比14∶1,提取时间2 h,乙醇体积分数55%。验证结果表明,预测值与验证值偏差较小(5%)。结论Box-Behnken响应面法用于优化马钱子的提取工艺是可行的,建立的数学模型和实验数据相符。     

马钱子总碱中2种成分的平衡溶解度、油水分配系数、体外透皮特性

目的考察马钱子Strychni Semen总碱中马钱子碱和士的宁的平衡溶解度、油水分配系数、体外透皮特性。方法饱和溶解法测定2种成分在乙醇(10%、20%、30%、60%、90%、无水乙醇)、三氯甲烷、正辛醇、表面活性剂(0.5%吐温、0.5%去氧胆酸钠、0.5%油酸)中的平衡溶解度;摇瓶法测定两者在PBS(pH 2.5、4.0、5.0、5.8、6.8、7.0、7.4、9.0)中的油水分配系数;改良Franz扩散池法评价其在PBS、20%乙醇、无水乙醇中的体外透皮特性。结果马钱子碱、士的宁均在三氯甲烷中的平衡溶解度最高,表面活性剂中最低;在体积分数大于20%的乙醇或pH小于8.0的PBS中,士的宁平衡溶解度高于马钱子碱,并分别在60%乙醇和pH 2.5 PBS中达到最高。2种成分油水分配系数相近,均随pH增加而升高,在pH9.0时最高。两者分别在无水乙醇、pH9.0 PBS中的累计透皮吸收率最高。结论溶剂种类对马钱子碱和士的宁的平衡溶解度、油水分配系数、透皮吸收均有明显影响。本研究可为马钱子总碱经皮给药生物利用度的改善及相关制剂的开发提供参考。     

HPLC法测定不同产地制马钱子中士的宁和马钱子碱的含量

目的分析并比较了不同产地制马钱子中有效成分的含量。方法HPLC分析法。色谱条件:色谱柱Alltima C18(4.6mm×150mm,5μm);流动相:乙腈-水-冰醋酸-三乙胺;流速1.0mL/min;检测波长254nm;柱温30℃。结果士的宁进样量在0.68-4.08μg范围内与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率为99.76%,RSD为0.86%(n=6);马钱子碱进样量在0.56～3.36μg内与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率为99.84%,RSD为0.91%(n=6)。结论不同产地制马钱子的士的宁和马钱子碱的含量差异明显,其中以越南、广西含量最高,湖北、海南含量最低。