定志小丸对雌性抑郁模型大鼠海马结构的影响

目的围绕海马结构的形态学研究定志小丸的抗抑郁机制。方法40只雌性大鼠分为对照组、抑郁症模型组（模型组）、蒸馏水组（DW组）和定志小丸组（中药组），Open field法检测行为学得分，ELISA法检测血清皮质醇和雌二醇（E2）含量，HE染色和电镜技术观察海马CA3区神经元形态，免疫组化技术检测齿状回神经干细胞（NSC）增殖。结果与对照组比较，模型组和DW组行为学得分及血清E2含量显著下降，皮质醇水平升高和NSC增殖明显降低，海马CA3区神经元损伤明显；中药组行为学得分和血清E2含量无明显变化，皮质醇明显减少，NSC增殖显著增加，海马CA3区神经元基本正常。结论定志小丸能够保护海马结构，这可能是其抗抑郁机制之一。     

归脾汤对抑郁模型大鼠血清雌二醇、皮质酮及海马形态学的影响

目的:观察归脾汤对抑郁模型大鼠血清皮质酮、雌二醇(E2)水平和海马形态学的影响,初步探讨其防治抑郁症的可能机制.方法:40只Wistar雌性大鼠分为空白组、模型组、对照组、中药组.应用慢性不可预见性中等强度刺激复制抑郁症动物模型.Open-field法检测大鼠行为学得分,放免法测定皮质酮及E2含量,HE染色和扫描电镜观察海马形态学变化.结果:与空白比较,模型组和对照组大鼠的体重、行为学得分、血清皮质酮、E2、FSH、LH含量均有显著性差异,海马损伤明显,而中药组上述指标均无明显差异.结论:归脾汤的抗抑郁机制与其维持正常的皮质酮、E2分泌和海马形态有关.     

百会穴电针和埋线对慢性应激抑郁模型大鼠行为学及血清CORT和ACTH的影响

目的观察百会穴电针、埋线对慢性应激抑郁模型大鼠行为学及血清皮质酮（CORT）和促肾上腺皮质激素（ACTH）的影响,探讨针灸治疗抑郁症的作用机制。方法将32只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、电针组和埋线组,每组8只。应用孤养和长期不可预见的中等强度刺激应激造成大鼠抑郁模型,测定各组大鼠体重、糖水消耗量,采用Open-field法对大鼠进行行为学评分,应用放射免疫分析法检测大鼠血清CORT和ACTH的含量变化。结果与正常组大鼠比较,模型组大鼠体重明显下降,糖水消耗量、行为学评分明显下降;与模型组大鼠相比,电针组大鼠的体重明显增加,糖水消耗量显著增加,行为学评分显著提高（P〈0.01）,血清CORT和ACTH含量显著降低（P〈0.01）;埋线组大鼠糖水消耗量及行为学垂直运动得分显著增加（P〈0.01）,血清ACTH也明显降低（P〈0.01）,但是CORT含量无显著性差异。结论电针与埋线干预均可改善抑郁大鼠的行为学异常;电针能下调血清CORT和ACTH含量,埋线能下调血清ACTH含量,该作用可能是其抗抑郁的重要机制。     

定志小丸对抑郁模型大鼠海马神经干细胞Nestin表达的影响

目的观察定志小丸对抑郁大鼠海马神经干细胞的影响.方法采用慢性不可预见性应激造成大鼠抑郁模型,Openfield法测定行为学,HE染色观察海马神经元形态学,免疫组织化学技术检测Nestin表达.结果抑郁模型大鼠的行为学得分明显降低,海马神经元数量减少,形态异常,Nestin表达少,而定志小丸组海马神经元数量和形态无明显变化,Nestin表达增加.结论定志小丸对海马神经元具有保护作用,能够诱导神经干细胞增殖.     

定志小丸对抑郁大鼠海马血管内皮生长因子表达的影响

目的：研究血管内皮生长因子（VEGF）在定志小丸抗抑郁中的作用.方法：采用慢性不可预见性应激刺激制造大鼠的抑郁症模型,扫描电镜观察海马CA3区血管形态,免疫组化技术检测VEGF表达.结果：与对照组比较,模型组和盐水组CA3区血管口径变大,管壁较薄,内皮细胞形态不规则,VEGF表达减少,中药组血管口径变大,血管壁较厚,内皮细胞形态规则,VEGF表达增加.结论：定志小丸能够促进抑郁大鼠海马VEGF表达.     

定志小丸对抑郁模型大鼠齿状回神经干细胞和学习记忆能力的影响

目的：观察定志小丸对抑郁模型大鼠海马神经干细胞和学习记忆能力的作用。方法：40只雌性大鼠分为正常对照组、抑郁症模型组、盐水组和定志小丸组。利用Morris水迷宫视频跟踪分析系统评价大鼠学习记忆能力，免疫组织化学方法评价神经干细胞增殖。结果：与正常对照组对比，模型组大鼠的学习记忆能力下降．Nestin阳性细胞数量减少。定志小丸组大鼠学习记忆能力没有明显变化，Nestin阳性细胞数量增加。结论：定志小丸能够对抗慢性应激对学习记忆的损害，可能与其促进神经干细胞增殖有关。     

不同工艺醇提的定志小丸对老龄小鼠学习记忆的影响及机制研究

目的观察不同工艺醇提的定志小丸对自然衰老小鼠学习记忆能力、脑细胞形态的影响,并通过测定血清和脑组织中的生化指标进行药效学的比较,以进一步确定最佳的提取工艺.方法正交实验设计制成9批药液(含生药量0.33g/ml),12～13月龄的KM雄性小鼠,用跳台仪测试学习记忆能力,用生化法测定SOD、MDA和AchE,脑组织切片,观察海马神经元损伤状况.结果(1) 2号及5号定志小丸组小鼠错误潜伏期明显延长,3号和5号定志小丸组小鼠错误次数明显降低.(2) 5号定志小丸组能明显提高血清和脑组织中SOD的含量,降低血清中MDA的含量和脑组织AchE的含量,但对脑组织MDA影响无统计学意义.(3)定志小丸5g/kg治疗组CA1区正常锥体细胞数为176±30个/mm,海马组织结构完整,细胞排列有序,异常细胞明显减少.结论在醇提过程中醇的浓度和用量及提取次数都是影响药效学的关键因素,其中5号药提取物,除了在改善动物学习记忆的行为学方面明显外,对于动物血清、脑组织中影响学习记忆的生化指标也有明显的改善.     

归脾汤对抑郁模型大鼠血清T3 T4和海马神经元形态的影响

目的:观察归脾汤对抑郁模型大鼠血清T3(三碘甲腺原氨酸)、T4(四碘甲腺原氨酸)和海马形态学影响,初步探讨其防治抑郁症的可能机制。方法:40只W istar雌性大鼠分为对照组、模型组、盐水组、中药组。应用慢性不可预见性中等强度刺激复制抑郁症动物模型。Open-field法检测大鼠行为学得分,放免法测定血清中T3和T4含量,电镜观察海马形态学变化。结果:与对照组比较,模型组和盐水组大鼠的体重、行为学得分、血清T3和T4含量均有显著性差异,海马损伤明显,而中药组上述指标均无明显差异。结论:归脾汤的抗抑郁机制与其维持正常的T3、T4分泌及海马形态有关。     

定志小丸对miR-16及5-HT重摄取的影响

该研究观察抗抑郁中药古方定志小丸(DZ)在体内外对miR-16表达水平的影响,从转录后调控的角度探索定志小丸升高5-羟色胺(5-HT)水平的机制。首先建立慢性不可预知中等强度温和刺激(CUMS)结合孤养抑郁大鼠模型,观察不同剂量定志小丸(600,300,150 mg·kg-1)给药3周后对抑郁大鼠行为学指标的影响,高效液相色谱法(HPLC)观察对海马5-羟色胺(5-HT)含量的影响,PCR和Western blot法观察定志小丸对CUMS大鼠海马miR-16及SERT表达水平的影响。并在体外培养的大鼠原代海马神经元细胞中观察定志小丸(10,100,200,500 mg·L-1)作用48 h后对miR-16沉默和皮质酮/谷氨酸损伤导致的细胞模型中miR-16及SERT mRNA表达水平的影响。结果显示,300,600 mg·kg-1定志小丸可显著改善CUMS大鼠行为学评分,升高大鼠海马内5-HT的水平,同时能够升高大鼠海马区miR-16的表达,降低SERT的表达。同时,在大鼠原代海马神经元细胞中,100,200,500 mg·L-1定志小丸可显著升高miR-16沉默和皮质酮/谷氨酸损伤模型细胞中miR-16的表达水平,并显著降低上述造模引起的细胞内SERT表达水平的升高。综上,笔者认为定志小丸可能通过上调miR-16表达水平,释放其对靶基因SERT的抑制作用,抑制5-HT的重摄取,进而升高脑内5-HT的水平,发挥抗抑郁作用。     

归脾汤对抑郁模型大鼠血清白细胞介素-1β和海马神经元白细胞介素-1受体I型表达的影响

目的观察归脾汤对抑郁模型大鼠血清白细胞介素-1β（IL-1β）和海马神经元白细胞介素-1受体I型（IL-1RI）表达的影响，探讨其防治抑郁症的可能机制。方法采用慢性不可预见性刺激抑郁模型，将40只WiStar雌性大鼠分为对照组、模型组、盐水组、中药组，在第0日和第22日分别进行体重和行为学评分，放免法检测血清IL-1β含量，免疫组化法检测IL-1RI表达。结果与对照组比较，模型组和盐水组大鼠的体重、行为学评分、血清IL-1β含量和海马神经元IL-1RI表达均有显著差异，而中药组上述指标均无明显差异。结论归脾汤的抗抑郁机制与维持正常的IL-1β分泌和IL-1RI的表达有关。     

定志小丸对抑郁模型大鼠齿状回神经干细胞和学习记忆能力的影响

目的:观察定志小丸对抑郁模型大鼠海马神经干细胞和学习记忆能力的作用.方法:40只雌性大鼠分为正常对照组、抑郁症模型组、盐水组和定志小丸组.利用Morris水迷宫视频跟踪分析系统评价大鼠学习记忆能力,免疫组织化学方法评价神经干细胞增殖.结果:与正常对照组对比,模型组大鼠的学习记忆能力下降,Nestin阳性细胞数量减少.定志小丸组大鼠学习记忆能力没有明显变化,Nestin阳性细胞数量增加.结论:定志小丸能够对抗慢性应激对学习记忆的损害,可能与其促进神经干细胞增殖有关.     

健脾化痰法对抑郁模型大鼠海马内环境的影响

[目的]研究海马内环境稳态在抑郁症中的作用。[方法]40只雌性Wistar大鼠分为对照组、模型组、蒸馏水组和中药组。ELISA法检测血清皮质醇、雌二醇,光镜和电镜观察海马CA3区形态学变化,免疫组化法检测海马脑源性神经生长因子和血管内皮生长因子表达。[结果]与对照组比较,模型组和蒸馏水组皮质醇水平显著升高,雌二醇水平明显下降,海马CA3区神经元损伤严重,脑源性神经生长因子和血管内皮生长因子表达明显降低,中药组上述指标变化不明显。[结论]抑郁状态下,海马内环境稳态被破坏,定志小丸具有一定的维持海马内环境稳态的作用。     

疏肝利胆方干预胆色素结石模型豚鼠的作用机制研究

目的:探讨疏肝利胆方干预胆色素结石模型豚鼠的作用机制。方法:将15只豚鼠随机分为正常组、模型组及中药组,每组各5只。空白组和模型组每只豚鼠给予生理盐水1 m L·d-1灌胃,中药组给予疏肝利胆方灌胃。观察三组豚鼠成石率,并用酶联免疫吸附试验(EnzymeLinked Immuno Sorbent Assay,ELISA)测定豚鼠血清中白介素-15(Interleukin-15,IL-15)、IL-1β、IL-2、前列腺素E2(Prostaglandin E2,PGE2)及胆汁中IL-15、IL-2、C反应蛋白(C reactive protein,CRP)的含量。结果:中药组胆色素结石成石率较模型组明显下降,差异有统计学意义(P0.05);与模型组比较,中药组中血清IL-15、IL-1β、PGE2的含量减少,IL-2的含量增加,差异均有统计学意义(P0.05);与模型组比较,中药组胆汁IL-15、CRP的含量减少,IL-2的含量增加,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:疏肝利胆方可减少胆色素结石成石率,其治疗胆色素结石机制与下调某些促炎细胞因子、调节免疫机理有关。     

舒郁宁心汤对抑郁模型大鼠海马凋亡的影响

目的:探讨舒郁宁心汤抗抑郁功效的作用机理。方法:40只SD大鼠随机分为正常组、模型组、中药组、氟西汀组。建立慢性应激抑郁大鼠模型。TUNEL法检测大鼠海马凋亡细胞,免疫组化方法观察大鼠海马Bcl-2表达的变化。结果:模型组海马CA3区细胞凋亡数比正常组增加,差异有统计学意义(P0.01);舒郁宁心中药组、氟西汀组海马CA3区细胞凋亡数较模型组减少,差异有统计学意义(P0.01)。与空白对照组比较,模型组大鼠海马Bcl-2表达降低,差异有统计学意义(P0.01或P0.05);与模型组相比中药组、氟西汀组大鼠海马区Bcl-2表达升高,差异有统计学意义(P0.01或P0.05)。结论:舒郁宁心汤可能通过减少海马神经元细胞凋亡,发挥抗抑郁作用。     

补肾活血方对SAMP8小鼠学习记忆及海马神经干细胞影响实验研究

目的观察补肾活血方对快速老化SAMP8小鼠行为学及海马内神经干细胞的影响,以期为补肾活血方治疗阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)的临床应用提供实验依据。方法7月龄的SAMP8雄性小鼠随机分为3组,分别为模型组、中药组和西药对照组,同月龄的SAMR1小鼠作为正常对照组。中药组按照6 g/kg补肾活血方灌胃给药,西药组给予3 mg/kg的盐酸多奈哌齐灌胃,正常组和模型组小鼠给予同体积的生理盐水灌胃。连续灌胃4周后采用水迷宫、免疫组织化学法和Western Blot法观察小鼠行为学、海马区NeuN和Nestin的表达。结果与正常老化SAMR1小鼠相比,模型组SAMP8小鼠学习记忆能力明显下降,海马组织Nestin和NeuN的表达减少(P<0.05);与模型组相比,给予补肾活血方和盐酸多奈哌齐西药干预后,SAMP8小鼠学习记忆能力有所改善,海马组织内Nestin和NeuN的表达增多(P<0.05);中药组和西药对照组SAMP8小鼠相比,学习记忆、海马组织Nestin和NeuN的表达无显著性差异(P>0.05)。结论补肾活血方通过上调SAMP8快速老化小鼠海马组织Nestin和NeuN的表达,促进神经干细胞的增殖和向神经元分化,从而改善SAMP8小鼠的学习认知记忆能力,对AD起治疗作用。     

金草片对子宫肌瘤模型大鼠子宫组织一氧化氮合酶表达的影响

目的：探讨金草片对子宫肌瘤模型大鼠子宫组织一氧化氮合酶（NOS）表达的影响,及该模型与临床发病机理的相关性。方法：以雌激素和雌、孕激素肌肉注射造成大鼠子宫肌瘤模型,测定子宫组织的总型NOS和诱导型NOS（iNOS）的水平;用放射配体结合分析法测定子宫组织雌激素受体（ER）水平;用放射免疫法测定血清雌二醇（E2）和孕酮（P）水平。结果：模型组大鼠子宫组织总型NOS和诱导型iNOS表达均明显增强,E2、ER和P水平升高;P水平与NOS表达相关,与iNOS表达不直接相关。金草片组可明显降低子宫组织NOSi、NOS和ER表达,降低血清E2和P水平,与模型组比较差异显著。结论：金草片可抑制子宫肌瘤模型大鼠子宫组织NOS表达,其作用可能是该品种治疗子宫肌瘤的作用机理之一。     

针刺治疗轻中度血管性痴呆临床观察

目的:观察“益气调血、扶本培源”针法治疗轻中度血管性痴呆的临床疗效。方法:将63例轻中度血管性痴呆的患者随机分为针刺组32例和对照组31例,针刺组施与“益气调血、扶本培源”针法,对照组给与喜得镇,分别于治疗前和治疗12周后,观察简易精神状态检查表(MMSE)、Bless行为量表(BBS)、中医证候积分表(SDSVD)等指标,进行疗效评价。结果:针刺组治疗后,认知能力、行为能力、中医证候评分均较治疗前明显改善(P<0.01),对照组治疗后,认知能力、行为能力较治疗前明显改善(P<0.05),中医证候评分无明显变化;治疗后,认知能力、行为能力、中医证候评分等指标针刺组明显优于对照组,(P<0.01)。结论:“益气调血、扶本培源”针法可显著改善轻中度血管性痴呆患者认知、行为能力和中医证候,疗效明显优于对照组。