全自动血凝仪动力学法测定肝素类药物抗Ⅹa因子和抗Ⅱa因子效价

目的 《中国药典》2020年版肝素抗Ⅹa因子和抗Ⅱa因子效价测定采用“终点法”测定吸光度值,本研究尝试建立全自动血凝仪“动力学法”测定反应值,检测肝素类药物的抗Ⅹa因子和抗Ⅱa因子效价。方法 使用自定义试剂,按《中国药典》2020年版四部通则1208“肝素生物检定法”中新增的抗Ⅹa因子和抗Ⅱa因子效价测定法编写血凝仪抗Ⅹa因子和抗Ⅱa因子测定程序,在405 nm波长检测吸光度随反应时间的变化,测定反应曲线斜率,以反应曲线斜率为纵坐标,标准品或供试品的浓度对数值为横坐标分别作线性回归,按2020年版《中国药典》四部通则1431中的量反应平行线原理4×4法实验设计,通过BS2000或Biostat 1.0软件计算效价和实验误差。结果 建立了全自动血凝仪“动力学法”测定肝素类产品抗Ⅹa因子和抗Ⅱa因子效价测定方法,并对方法准确性、重复性、适用性等进行验证,结果良好,对4个厂家的4批达肝素钠注射液进行了测定,结果符合规定。结论 全自动血凝仪“动力学法”测定肝素类产品抗Ⅹa因子和抗Ⅱa因子效价结果与“终点法”检测结果一致,实验误差更小,检测时间更短,并且不使用冰醋酸作为终止剂,对实验人员和环境更为友好。该方法自动化程度高,误差小,重复性好,有助于提高我国肝素类药品质控水平,提高产品质量。     

低抗凝肝素来源低分子肝素的研制及药代动力学

 以低抗凝肝素为来源，按生产要求设计工艺，制备了平均分子量为6000d的低分子肝素，测定了其理化指标、抗凝效价和抗FXa活性，研究了其抗血栓形成作用和药代动力学。结果表明，该低分子肝素具有较强的抗FXa活性和抗血栓形成作用，体内生物半衰期长。     

低分子肝素的应用及护理

低分子肝素(LMWH)是由肝素分级或降解而得的较母体分子量小的组分或片段,平均分子量是肝素的1/2～1/3,分子大小的分布也较普通肝素更为均匀.通过增强抗凝血酶Ⅲ(ATⅢ)对凝血因子Ⅹ a和凝血酶(Ⅱa)的抑制起到抗凝效果,具有快速、持久的抗血栓形成和发展作用,作为一类新型高抗血栓活性药物,自1976年以来便成为研究热点.国外多以商品肝素为原料生产,现有十几种商品已经或将要应用于临床,均为注射剂.LMWH相对于UH的优势:血浆半衰期比UH长,皮下注射给药后的生物利用度比UH好,抗凝效应的预测性更好,可根据体质量调整剂量.     

丹参抑制凝血因子Ⅹa和Ⅱa的活性部位研究

目的 确定丹参抑制凝血因子Ⅹa(FⅩa)和凝血因子Ⅱa(FⅡa)的活性部位.方法 利用发色底物法,测定丹参乙醇提取物不同极性溶媒萃取部位对FⅩa和FⅡa的抑制百分率.用凝血酶原时间(PT)试剂盒测定丹参提取物活性部位对于大鼠血浆凝血时间的影响.结果 丹参提取物的乙酸乙酯部位对FⅩa和FⅡa均有较好的抑制活性,并且能够浓度依赖性延长PT.结论 丹参中存在直接抑制FⅩa和FⅡa的化学成分.     

空心莲子草抗病毒活性成分研究

目的研究空心莲子草Alternanthera philoxeroides中抗HBV活性成分。方法以硅胶柱、凝胶柱色谱分离,制备HPLC纯化,采用MS、NMR等波谱方法进行结构鉴定;用ELISA法对各化合物进行抗HBV活性检测。结果从空心莲子草中分离鉴定了10个化合物,分别为齐墩果酸(oleanolicacid,Ⅰ)、3-O-β-D-吡喃葡萄糖醛基齐墩果酸苷(oleanolic acid 3-O-β-D-glucuronopyranoside,Ⅱ)、齐墩果酸-28-O-B-D-吡喃葡萄糖苷(oleanolic acid 28-O-B-D-glucopyranoside,Ⅲ)、竹节参苷Ⅳa甲酯(chikusetsusaponin Ⅳ amethylester,Ⅳ)、4,5-dihydroblumenol(Ⅴ)、N-trans-feruloyl3-methyldopamine(Ⅵ)、N-trans-feruloyl tyramine(Ⅶ)、3β-羟基豆甾-5-烯-7-酮(3β-hydroxystig-mast-5-en-7-one,Ⅷ)、二十四亚甲基环阿尔廷醇(24-methylenecycloartanol,Ⅸ)、环桉烯醇(cycloeucalenol,Ⅹ)。抗HBV活性筛选表明,化合物Ⅰ~Ⅲ,Ⅴ~Ⅶ具有明显的抗HBV活性,化合物Ⅱ和Ⅴ在50LgmL给药剂量时对HBV-DNA克隆转染的人肝癌细胞HepG2-2.2.15的抑制率分别为85.38%和87.37%。结论化合物Ⅳ~Ⅶ首次从该植物中分得,阿魏酰胺类化合物为首次从该属植物中分得的结构类型,化合物Ⅱ和Ⅴ具有较强的抗HBV活性。     

低抗凝活性肝素修饰SOD的性质及抗炎活性

 用溴化氰活化低抗凝活性肝素对超氧化物歧化酶进行共价修饰制得修饰酶。经测定结合于酶蛋白上的低抗凝肝素的氨基己糖、己糖醛酸、硫醚基及抗凝效价均降低；修饰后超氧化物歧化酶活性降低；Cu、Zn部分丢失。对不同的炎症模型的抗炎试验表明，修饰酶具有较强的抗炎活性。     

活性导向分离瓜蒌皮中具有抗肾素作用的成分

目的基于活性导向分离瓜蒌皮Trichosanthis Pericarpium中具有抗肾素作用的成分。方法瓜蒌皮经水提醇沉后取上清液,然后透析截留获相对分子质量1 000以上的部分(GLP),GLP经活性跟踪测定、DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换树脂分离和Superdex-75系列凝胶纯化后得GLP-5-1,并对GLP-5-1进行HPGPC法分析、单糖组成测定和肾素抑制活性检测。结果采用活性跟踪方法,从瓜蒌皮中得到一种具有肾素抑制作用的均一多糖GLP-5-1,相对分子质量为3 722,主要由阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖组成,4种单糖的物质的量比为5.5∶4.4∶6.9∶10.0,GLP-5-1表现出较强的肾素抑制活性,其半数抑制浓度(IC_(50))为(87.4±6.8)μg/m L。结论从瓜蒌皮中成功分离到具有肾素抑制作用的低相对分子质量的多糖,为瓜蒌皮的化学物质基础研究提供依据。     

由低抗凝肝素制得低分子肝素的分子量与抗血栓作用的关系

 以生产商品肝素的副产品——低抗凝肝素为原料，通过亚硝酸控制解聚制得低分子肝素粗品。将平均分子量分别为7700，5800和4300d的粗品经凝胶层析纯化制得了分子量为7100，5300和4000d的低分子肝素，测定了其理化指标和抗凝效价。以从刺激开始到血栓形成这段堵塞时间（OT）为药效指标，研究了其抗血栓形成作用,OT值分别为37.97±2.84，63.03±3.42，28.72±1.75min。分子量为5300d的低分子肝素抗血栓形成作用最强。     

低分子肝素分子量及其分布的测定

 目的:建立一种低分子肝素分子量及其分布测定的质量控制方法?方法:采用高效凝胶渗透色谱法(HPGPC),色谱柱为Shodex Asahipak GF-510HQ(7.6mm×300mm)或TSKG 3000SWxl(7.8mm×300mm),理论塔板数以葡萄糖峰计算分别为15 206和15 731;柱温35℃;流速0.5ml·min^-1;示差折光检测器和二极管阵列检测器联用,检测波长为234nm?结果:测得两个低分子肝素样品的重均分子量和分子量分布?结论:HPGPC具有简便、快速和重现性好等特点,适合于该类药物的质量控制?     

黄花倒水莲化学成分及其抗病毒活性研究

目的 研究黄花倒水莲的化学成分及其体外抗病毒活性.方法 采用柱色谱技术分离黄花倒水莲乙醇提取物的醋酸乙酯萃取部位的化学成分;根据光谱数据鉴定分离所得化合物的结构;采用细胞病变抑制法(CPE re-duction assay)测定化合物的体外抗病毒活性.结果 分离并鉴定了10个化合物:棕榈酸(Ⅰ)、1,3-二羟基-2-甲基(口山)酮(Ⅱ)、24乙基一豆甾-7,(E)-22-二烯-3-醇(Ⅲ)、对羟基苯甲醛(Ⅳ)、1,3-二羟基(口山)酮(Ⅴ)、1,3-二羟基-2-甲氧基(口山)酮(Ⅳ)、1-甲氧基-2,3-亚甲二氧基(口山)酮(Ⅶ)、1,7-二羟基-2,3-亚甲二氧基(口山)酮(Ⅷ)、对羟基苯甲酸(Ⅸ)和原儿茶酸甲酯(Ⅹ).其中化合物Ⅱ、Ⅴ、Ⅵ在体外有一定的抗单纯疱疹Ⅰ型病毒(HSV-1)和柯撒奇B3型病毒(Cox B3)的活性.结论 化合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅹ为首次从该植物中分离得到,化合物Ⅱ和Ⅹ为首次从该属植物中分离得到,化合物Ⅱ为新天然产物.首次研究该植物化学成分的抗病毒活性,化合物Ⅱ、Ⅴ、Ⅵ均为1,3-二羟基取代(口山)酮.     

不同分子量硫酸皮肤素的抗血栓活性

 目的 研究不同相对分子质量硫酸皮肤素（DS)的抗血栓活性。方法 采用美国药典的羊血浆法测定不同相对分子质量的DS的抗凝血活性，电刺激大鼠动脉血栓形成法测定其体内抗血栓活性，以及生色底物法测定其激活肝素辅因子Ⅱ(HCⅡ)抗凝血酶活性。结果相对分子质量分别为27.5×10³,8.0×10³,5.3×10³和4.0×10³的DS和低分子硫酸皮肤素(LMWDS₁，LMWDS₂和LMWDS₃)的抗凝效价分别为4.00，2.25，0.94和0.54 u·mg^-1；体内抗血栓活性的血栓堵塞时间（OT)值分别为58.12,50.58,123.90和133.53 min，均较生理盐水组19.79 min显著延长；体外激活HCⅡ抗凝血酶活性分别为223.23,123.71,89.29和58.00u·mg^-1。结论 随着LMWDS相对分子质量的降低，其抗凝血活性降低,体外激活HCII抗凝血酶活性也降低，但体内抗血栓活性增强。     

改良醒脑开窍针刺法联合低分子肝素钙治疗进展性脑梗死疗效分析

目的观察改良醒脑开窍针刺法联合低分子肝素钙治疗进展性脑梗死的临床疗效。方法将80例进展性脑梗死患者随机分为2组。2组患者均给予抗血小板聚集、改善微循环、营养脑神经等内科基础治疗。治疗组40例加用改良醒脑开窍针刺法联合低分子肝素钙治疗;对照组40例加用低分子肝素钙治疗。2组均连续治疗7 d后,比较2组治疗前后神经功能缺损程度评分变化,并观察疗效。结果 2组治疗后神经功能缺损程度评分与本组治疗前比较差异均有统计学意义(P<0.05);治疗组治疗后神经功能缺损程度评分与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);治疗组总有效率87.5%,对照组总有效率67.7%,2组总有效率比较差异有统计学意义(P<0.05),治疗组疗效优于对照组。结论改良醒脑开窍针刺法联合低分子肝素钙治疗进展性脑梗死临床疗效明确,应用安全,能有效改善神经功能缺损症状,促进神经功能恢复,减少并发症的发生。     

水蛭免加热提取物抗凝血作用及其机制研究

目的 :观察水蛭免加热提取物对动物凝血系统、凝血因子活性及纤溶系统的影响 ,并与水蛭煎煮浓缩物进行比较。方法 :动物灌胃给药 ,凝固法测大鼠 PT、APTT,PT法测血浆凝血因子 、 、 、 的活性 ,APTT法测因子 的活性 ,测 EL T观察药物对家兔纤溶活性的影响。结果 :水蛭免加热提取物能延长大鼠 PT、APTT,抑制凝血因子 、 、 的活性 ,对凝血因子 和 活性无明显影响 ;对兔血 EL T无明显影响 ,在延长大鼠 PT、降低大鼠凝血因子 、 活性等方面优于传统的煎煮提取物。结论 :水蛭免加热提取物通过抑制凝血因子 、 、 活性而抑制内、外源性凝血途径 ,对大鼠 PT、凝血因子 、 活性的影响优于传统的煎煮提取物     

鹰嘴豆中3种异黄酮及其乙氧基化衍生物体外协同降糖活性研究

目的：通过对鹰嘴豆中3种异黄酮类化合物染料木素、鹰嘴豆芽素A、刺芒柄花素进行乙氧基化结构修饰,研究其降糖活性及协同降糖活性。方法：对上述3种异黄酮类化合物进行乙氧基化结构修饰,并研究该3种异黄酮类化合物及其衍生物降糖活性,并对化合物进行组合给药,研究其之间存在的协同降糖活性,选择胰岛素抵抗HepG2细胞作为降糖活性筛选模型。结果：获得4个乙氧基化产物,3个母体异黄酮衍生物中染料木素的降糖活性优于鹰嘴豆芽素A和刺芒柄花素,差异具有统计学意义（P<0.05）,3个母体异黄酮衍生物最大给药剂量与阳性药盐酸二甲双胍相比,效果不如盐酸二甲双胍,差异均具有统计学意义（P<0.05或P<0.01）。衍生物中化合物a和d之间差异无统计学意义（P>0.05）,化合物b和c降糖效果均不如化合物a和d,差异具有统计学意义（P<0.05）,其中化合物d较修饰前降糖活性有明显提高（P<0.05）。组合5的降糖活性与盐酸二甲双胍相当,差异无统计学意义（P>0.05）。结论：本研究发现,通过化合物组合,化合物之间可以起到协同作用,发挥更好的降糖效果,为开发具有自主知识产权的降糖药物提供一定的基础。     

低分子肝素透皮吸收制剂的研究

 以低抗凝肝素为原料制备了平均分子量为５６００的低分子肝素，测定了理化指标和抗凝效价。分别制备了不合促进剂和含不同促透剂的低分子肝素和肝素Ｏ／ｗ型软膏。体外经皮渗透动力学实验结果表明，软膏中药物的透皮过程符合Ｆｉｃｋ’Ｓ扩散方程，并筛选软膏的最佳处方为：低分子肝素（或肝素）、Ｎ－甲基吡咯烷酮、基质。将该处方软膏敷于家兔背部脱毛皮肤一定时间，可显著延长血液凝固时间和抑制实验性血栓形成。     

丹参多酚酸盐联合低分子肝素在预防全髋关节置换术后深静脉血栓形成中的作用

目的：观察丹参多酚酸盐注射液联合低分子肝素对人工全髋关节置换术（total hip replacement,THR）后下肢深静脉血栓（deepvein thrombosis,DVT）形成的预防作用。方法：将60例拟进行THR的患者随机分为结合组和肝素组,肝素组采取围手术期常规治疗护理方法并预防性使用低分子肝素,结合组在肝素组治疗基础上给予丹参多酚酸盐静脉点滴。比较2组DVT发生率、术中出血量、术后引流量以及术前和术后14d血小板含量。结果：结合组2例DVT阳性,DVT发生率6.67%;肝素组8例DVT阳性,DVT发生率26.7%,2组比较差异有统计学意义（P〈0.05）,提示结合组对THR术后DVT的形成具有明显的预防作用,且2组术中出血量、术后引流量、术前及术后血小板含量比较,差异均无统计学意义。结论：丹参多酚酸盐注射液联合低分子肝素可显著降低THR后DVT发生率,且在该作用剂量下具有较好的安全性,值得临床推广。     

补阳还五汤联合低分子肝素对股骨转子间骨折术后凝血-纤溶系统的影响

目的：探讨补阳还五汤联合低分子肝素对股骨转子间骨折术后凝血一纤溶系统的影响。方法：采用前瞻随机对照临床试验设计方法。根据性别、年龄、手术时间、手术方式及Evens分型将80例股骨转子间骨折术后病例按照分层随机化的方法以1：1比例分成试验组、对照组。根据《中国骨科大手术静脉血栓栓塞症预防指南》,两组均皮下注射低分子肝素,同时试验组予补阳还五汤每日1剂,连续7d。分别观察两组受试对象试验前、试验后凝血一纤溶系统指标及伤肢彩色多普勒超声检查结果变化。结果：两组患者试验前凝血一纤溶系统指标比较,差异均无统计学意义（P〉0．05）;试验后比较,差异均有统计学意义（P〈0．05）。两组患者试验后伤肢彩色多普勒超声检查结果比较,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：补阳还五汤联合低分子肝素能够改善股骨转子间骨折术后血液高凝状态,激活纤溶系统,预防伤肢深静脉血栓形成,值得临床推广应用。     

复方丹参滴丸联合低分子肝素治疗冠心病心绞痛46例疗效观察

目的：探讨复方丹参滴丸联合低分子肝素治疗冠心病心绞痛临床疗效及安全性。方法：选取我院2011年11月-2013年11月收治的冠心病心绞痛患者46例,随机分为实验组和对照组,每组各23例,对照组采用常规心绞痛药物治疗,实验组在对照组的基础上采用低分子肝素皮下注射及口服复方丹参滴丸联合疗法,统计治疗前后心绞痛症状、两组心电图改善效果以及两组凝血功能并判定效果。结果：治疗组的临床治疗效果以及心电图改善效果均高于对照组（P〈0.05）,两组的PT、APTT指标无统计学差异（P〉0.05）。结论：复方丹参滴丸联合低分子肝素治疗冠心病不稳定型心绞痛效果显著,安全无副作用,值得临床推广使用。