温经汤加味对EM肾虚血瘀证大鼠局部微环境Caspase-8，MMP-9， E-cadherin， N-cadherin的影响

目的 探讨温经汤加味对子宫内膜异位症（EM）肾虚血瘀证大鼠的干预作用及其机制研究。方法 SPF级雌性未孕大鼠随机选出正常组,其余大鼠采用“冰水浸泡+皮下注射盐酸肾上腺素法”进行肾虚血瘀证造模,造模结束后,仅开腹不进行内膜移植大鼠,设为假手术组,其余大鼠以自体内膜移植法进行EM造模,EM肾虚血瘀证造模成功大鼠随机分为阳性药组及温经汤加味（中药）低、中、高剂量组。中药低、中、高剂量组分别以5,10,20 g·kg^-1灌胃,每日给药1次,连续4周;阳性药选取达那唑63 mg·kg^-1灌胃,每日给药1次,连续4周。4周后,取各组大鼠内膜组织（异位、在位）进行苏木素-伊红（HE）染色,观察其组织病理学变化;免疫组化（IHC）法、蛋白质免疫印迹（Western blot）法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-8（Caspase-8）,基质金属蛋白酶-9（MMP-9）,上皮细胞钙黏蛋白（E-cadherin）及神经钙黏蛋白（N-cadherin）蛋白表达;实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测Caspase-8,MMP-9,E-cadherin,N-cadherin mRNA表达。结果 经IHC法和Western blot法,与假手术组比较,EM肾虚血瘀证模型组大鼠在位、异位内膜组织中MMP-9,N-cadherin蛋白表达显著升高（P<0.01）,Caspase-8,E-cadherin蛋白表达显著降低（P<0.01）;与模型组比较,达那唑组、中药低、中、高剂量组大鼠在位、异位内膜组织中MMP-9,N-cadherin蛋白明显降低（P<0.05,P<0.01）,Caspase-8,E-cadherin蛋白表达明显升高（P<0.05,P<0.01）。经Real-time PCR法检测,与假手术组大鼠比较,模型组大鼠在位、异位内膜组织中MMP-9,N-cadherin mRNA表达显著升高（P<0.01）,Caspase-8,E-cadherin mRNA表达显著降低（P<0.01）;与模型组大鼠在位内膜比较,达那唑组、中药高、中剂量组在位、异位内膜组织MMP-9,N-cadherin mRNA表达明显降低,Caspase-8,E-cadherin mRNA表达明显升高（P<0.05,P<0.01）。结论 温经汤加味能够通过调节Caspase-8,MMP-9,E-cadherin,N-cadherin等因子水平异常表达,改善EM肾虚血瘀证大鼠免疫抑制、阻断微血管新生,从而起到治疗EM的作用;以上微观指标的变化有望成为体现疾病（EM）,证候（肾虚血瘀证）及病理机制（免疫抑制、微血管新生）的重要标志物。     

温经汤加味对EM肾虚血瘀型大鼠JAK2/STAT3信号通路及其下游因子的影响

目的:探讨温经汤加味对子宫内膜异位症(EM)肾虚血瘀型大鼠的治疗作用及其机制研究.方法:从105只SPF级雌性未孕健康SD大鼠中随机选取10只作为空白组,余采用复合因素法构建肾虚血瘀型大鼠模型,造模成功后随机抽取10只为假手术组,仅开腹,不缝内膜,余采用自体内膜移植法构建EM肾虚血瘀型大鼠模型.从造模成功的56只大鼠中...     

缺氧诱导因子-1α对肝星状细胞影响的研究进展＊

肝纤维化是慢性肝病进程中肝脏反复损伤和修复的结果，是以细胞外基质过度累积为主要特征的病理过程。肝星状细胞异常活化是肝纤维化的细胞学基础，其活化受多种因素影响，其中，缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）发挥了重要作用。HIF-1α作为机体适应缺氧应激的关键细胞因子，对肝星状细胞的活化、增殖和促细胞外基质形成、促血管新生能力的改变有重要意义。中医药可通过调控HIF-1α的表达以及改善肝脏乏氧微环境减轻肝纤维化的程度，因此HIF-1α有望成为中医药防治肝纤维化的新靶点。本文就HIF-1α的概述、HIF-1α调控肝星状细胞活化、自噬、凋亡等功能以及中医药调控HIF-1α的表达防治肝纤维化等方面作一综述。     

电针对阿尔茨海默病模型大鼠GSK3β信号通路相关蛋白的影响＊

目的 观察电针“百会”“肾俞”穴对阿尔茨海默病（AD）模型大鼠学习记忆能力及海马CA1区GSK3β信号通路相关蛋白的影响及机制研究。方法 30只SPF级SD雄性大鼠随机分成假手术组、模型组和电针组，每组10只。除假手术组外，其余各组大鼠双侧海马区各注射5 μL β淀粉蛋白25-35（Aβ_25-35）制备AD模型，假手术组给予同等剂量生理盐水注射。假手术组、模型组正常喂养，不做干预处理，电针组选取百会及肾俞穴（两侧肾俞穴交替选择）进行电针治疗，频率2 Hz，电流1 mA，每日1次。每个疗程6天，共2个疗程，两个疗程间隔1天。治疗结束后第2天上午8点开始Morris水迷宫（Morris water maze，MWM）检测大鼠学习记忆能力，行为学实验结束后第2天取材。苏木精-伊红染色（Hematoxylin eosin staining，HE）观察海马CA1区病理形态改变。免疫组化法（Immunohistochemical method，IHC）检测大鼠海马区Tau蛋白磷酸化的表达，及糖原合成酶激酶3β（glycogen synthase kinase3β，GSK3β）信号通路相关蛋白表达。免疫印迹法（Western blot，WB）检测磷脂酰肌醇3激酶（phosphatidylinositol 3 kinase，PI3K）、蛋白激酶B（protein kinase B，AKT）、GSK3β相关蛋白的表达。聚合酶链反应（polymerase chain reaction，PCR）检测AKT、GSK3β mRNA的表达。结果 与假手术组相比：模型组大鼠逃避潜伏期明显延长（P < 0.01），穿越平台次数明显减少（P < 0.01），目标象限停留时间明显缩短（P < 0.01）；模型组海马区Tau蛋白磷酸化水平明显提高（P < 0.01），GSK3β蛋白表达水平明显提高（P < 0.01）；模型组PI3K（P85）、AKT（Ser473）、GSK3β（Ser9）蛋白相对表达量降低（P < 0.05）；模型组AKT mRNA表达水平明显降低（P < 0.01），GSK3β mRNA表达水平明显提高（P < 0.01）。与模型组相比：电针组大鼠逃避潜伏期明显缩短（P < 0.01），穿越平台次数明显增加（P < 0.01），目标象限停留时间明显延长（P < 0.01）；电针组海马区Tau蛋白磷酸化水平明显降低（P < 0.01），GSK3β蛋白表达水平明显降低（P < 0.01）；电针组PI3K（P85）、AKT（Ser473）、GSK3β（Ser9）蛋白相对表达量增加（P < 0.05）；电针组AKT mRNA表达水平明显提高（P < 0.01），GSK3β mRNA表达水平明显降低（P < 0.01）。结论 电针治疗能够有效改善AD大鼠学习记忆能力，其机制可能与影响GSK3β信号通路相关蛋白表达从而抑制Tau蛋白磷酸化有关。     

内异方对子宫内膜异位症大鼠的治疗作用以及对异位内膜VEGF、HIF-1α、NF-κB和PTEN表达的影响＊

目的 本研究通过观察内异方对子宫内膜异位症（endometriosis,EM）大鼠的治疗作用，并进一步阐明可能的作用机制。方法 清洁级雌性成年（9-10周龄）未孕SD大鼠，体重190-210 g，随机分为假手术组、模型组、内异方治疗组和阳性对照组，每组最终纳入10只大鼠。大鼠在第3个动情期时采用子宫内膜自体移植法建立EM大鼠模型。造模成功后，内异方治疗组给予内异方水煎剂灌胃，阳性对照组给予达那唑溶液灌胃，假手术组和模型组大鼠给予同体积生理盐水灌胃，各组连续给药4周。治疗结束后，解剖异位内膜，采用HE染色观察异位内膜的病理形态学改变情况；采用Western blot检测异位内膜中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)、第10号染色体缺失的磷酸酶(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten,PTEN)与核转录因子-Kappa B(nuclear factor-Kappa B,NF-κB)蛋白表达水平。结果 HE染色结果显示，内异方改善EM大鼠的异位内膜病理学结构改变。Western blot结果显示，内异方抑制EM大鼠的异位内膜组织的VEGF、HIF-1α和NF-κB蛋白表达水平，但促进PTEN蛋白表达水平。结论 内异方具有改善大鼠EM的作用，这种作用可能与抑制异位内膜组织中VEGF、HIF-1α和NF-κB蛋白表达并促进PTEN蛋白表达相关。     

复方宁神精油对失眠大鼠行为学及下丘脑GABA、GLU含量的影响＊

目的 研究复方宁神精油治疗对氯苯丙氨酸（PCPA）致失眠大鼠行为学及下丘脑伽马氨基丁酸（GABA）和谷氨酸（GLU）含量的影响。方法 50只SD大鼠随机分为：空白组、模型组、复方宁神精油高浓度组、复方宁神精油中浓度组、复方宁神精油低浓度组。除空白组外，其余各组大鼠均采用腹腔注射PCPA建立大鼠失眠模型。造模后，各复方精油组分别采用1%、0.5%、0.25% 3种不同浓度精油香熏治疗，空白组和模型组采用蒸馏水香薰。连续7天每天于上午10：00熏治1 h。第7天给药结束后，观察并记录各组大鼠一般状况，通过翻正实验、旷场和高价十字迷宫实验对比各组给药后的差异；采用酶联免疫吸附法（Elisa）测定各组大鼠下丘脑中GABA、Glu含量并统计其比值差异，通过气相色相质谱分析（GC—MS）探究复方宁神精油的化合物活性成分。结果 复方宁神精油高浓度组的睡眠潜伏期减少最明显、睡眠持续时间增高最显著（P < 0.01，P < 0.01）；旷场实验中，复方宁神精油高浓度组可明显增多失眠大鼠总活动距离和总穿格数（P < 0.01，P < 0.01），显著减少修饰次数及中央格停留时间（P < 0.01，P < 0.05）；高架十字迷宫实验中，复方宁神精油高浓度组的开放臂停留次数和停留时间百分比数据增量最明显（P < 0.01，P < 0.01）；各复方宁神精油组下丘脑GLU含量差异无统计学意义，复方宁神精油高浓度组的下丘脑GABA含量增多（P < 0.01）。各复方精油组GLU/GABA均极著性降低（P < 0.01），其中复方宁神精油高浓度组其比值降低最明显。结论 复方宁神精油高浓度组能明显缩短失眠大鼠睡眠潜伏期并延长睡眠持续时间，有效缓解失眠所致的紧张焦虑情绪，激发大鼠自发活动能力和探究能力。其作用靶点可考虑为调节失眠大鼠下丘脑中GABA和GLU含量，从而平衡中枢神经系统功能，精油中的有效活性成分或可考虑为改善失眠调节情绪的主要成分。这为临床推广使用复方宁神精油治疗失眠提供了参考。     

二陈汤加味对慢性阻塞性肺疾病大鼠模型肺组织PPARγ信号通路的影响

目的:探索二陈汤加味对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠模型肺组织中过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)蛋白和mRNA表达的影响,以及血清、肺组织匀浆液和支气管肺泡灌洗液中白细胞介素-6(IL-6),白细胞介素-10(IL-10),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响。方法:将70只SD大鼠随机分为7组,每组10只,分别为正常组、模型组、二陈汤加味高、中、低剂量(40,20,10 g·kg~(-1)·d~(-1))组,消咳喘组(5 g·kg~(-1)·d~(-1)),二陈汤组(5 g·kg~(-1)·d~(-1))。以烟熏与脂多糖(LPS)气管滴注并用的方法来制备大鼠COPD模型。成功后,治疗组灌胃给药,正常及模型组则灌等量的生理盐水。酶联免疫吸附测定(ELISA)检测大鼠血清、肺组织匀浆液和支气管肺泡灌洗液(BALF)中IL-6,IL-10和TNF-α的含量。实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测PPARγmRNA表达,免疫组化(IHC),蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肺组织PPARγ的蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠血清、肺组织匀浆液和BALF中IL-6,TNF-α水平显著升高(P0.01),IL-10水平显著降低(P0.01)。模型组大鼠肺组织PPARγmRNA水平显著降低(P0.01),蛋白表达也明显受抑制(P0.01)。与模型组比较,各治疗组血清、肺组织匀浆液及BALF中IL-6,TNF-α水平均不同程度的降低(P0.01),IL-10则不同程度升高,其中二陈汤加味中剂量组IL-10的兴奋和IL-6,TNF-α的抑制尤为显著。各治疗组大鼠肺组织PPARγmRNA和蛋白水平均有不同程度的升高(P0.01)。结论:二陈汤加味可能通过升高PPARγ的表达,并以此降低IL-6,TNF-α的含量,提升IL-10的含量,来对抗COPD大鼠的炎症反应,改善肺功能。     

基于调控HIF-1α表达探讨温经汤改善大鼠子宫内膜异位症的机制

目的:观察温经汤对子宫内膜异位症(EMs)大鼠缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达及线粒体超微结构的影响,探讨温经汤治疗EMs的作用机制。方法:采用自体内膜移植法复制大鼠EMs模型,小动物超声成像系统检测异位病灶体积,依据体积均衡原则随机分为模型组、温经汤低、中、高剂量组(4.85,9.7,19.4 g·kg~(-1))及孕三烯酮组(0.25 mg·kg~(-1)),每组10只,另设假手术组10只。药物治疗6周后,超声成像系统及卡尺分别测量异位病灶体积,苏木素-伊红(HE)染色观察异位内膜组织形态,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测腹腔液白细胞介素-1β(IL-1β),肿瘤坏死因子-α(TNF-α),转化生长因子-β1(TGF-β1)水平,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测在位或异位内膜组织HIF-1αmRNA及蛋白表达,透射电镜观察异位内膜线粒体超微结构。结果:与假手术组比较,模型组可见异位病灶生成,呈囊泡样结构,病灶内可见典型的子宫内膜组织形态,IL-1β,TNF-α,TGF-β1含量显著升高(P0.01),HIF-1αmRNA及蛋白表达水平明显升高(P0.05,P0.01),透射电镜可见异位内膜胞浆中线粒体数量增加,结构完整;与模型组比较,温经汤各剂量组异位病灶体积显著降低(P0.01),且超声检测结果与卡尺测量结果大体一致,HE染色可见异位内膜柱状上皮细胞破损或脱落、间质细胞疏松;温经汤各剂量组TNF-α含量明显降低,温经汤中、高剂量组IL-1β,TGF-β1含量明显降低(P0.05,P0.01);温经汤各剂量组还可明显降低HIF-1αmRNA及蛋白表达(P0.05,P0.01);且温经汤治疗后异位内膜线粒体明显肿胀,嵴断裂甚至消失,部分线粒体空泡变性,外膜破裂。结论:温经汤对大鼠实验性EMs具有较好的治疗作用,机制与降低HIF-1α表达,改善异位病灶乏氧,诱导异位内膜线粒体损伤有关。     

蒙药给旺-9味对D-氨基半乳糖诱导急性肝衰竭模型大鼠免疫功能的影响＊

目的 观察蒙药给旺-9味对D-氨基半乳糖（D-Galactosamine，D-GalN）诱导急性肝衰竭（Acute liver failure，ALF）大鼠免疫功能的影响。方法 健康清洁级雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、阳性组、蒙药给旺-9味低中高剂量六组，各12只，连续给药10天。除空白组外，其余5组采用单次腹腔注射D-GalN（600 mg·kg^-1）建立ALF模型；空白组腹腔注射同等剂量的生理盐水。造模48 h取血清测定天冬氨酸氨基转移酶（Aspartate aminotransferase，AST）、丙氨酸氨基转移酶（Alanine aminotransferase，ALT），肝组织细胞因子白介素-2、6（Interleukin-2、6，IL-2、6），肿瘤坏死因子-α（Tumor necrosis factor α，TNF-α），干扰素-γ（Interferon-γ，IFN-γ）；取各组大鼠肝脏组织标本，进行组织形态学检查。结果 蒙药给旺-9味能显著降低D-GalN诱导的ALF大鼠血清ALT，差异有统计学意义（P < 0.05），显著降低IL-2、IL-6、TNF-α、IFN-γ水平，差异有统计学意义（P < 0.01）。组织形态学结果显示：蒙药组可明显减轻肝组织细胞水肿，炎症变性，坏死表现，蒙药高剂量组肝细胞坏死程度最轻。结论 蒙药给旺-9味可显著改善肝功能，其机制可能与调节免疫功能，减轻炎症反应有关。     

掌小横纹穴按摩辅助消风止咳汤加味对咳嗽变异性哮喘患儿IL-17A、CCL11表达水平的影响＊

目的 分析掌小横纹穴按摩辅助消风止咳汤加味对咳嗽变异性哮喘患儿白介素-17A（Interleukin - 17 A，IL-17A）、趋化因子（C-C 基元）配体11（Chemokines （C-C primitives） ligand 11，CCL11）表达水平的影响。方法 本文选取2019年1月-2020年2月在我院就诊的咳嗽变异性哮喘患儿176例，按照随机数字分配法分为消风止咳汤加味治疗组和联合治疗组，各88例。消风止咳汤加味治疗组给予消风止咳汤加味进行治疗，联合治疗组在消风止咳汤加味治疗组的基础上给予掌小横纹穴按摩进行治疗。检测IL-17A、CCL11水平，用力肺活量（Forced vital capacity，FVC）、第一秒用力呼气容积（Forced expiratory volume in the first second，FEV1）、最大呼气峰流速（peak expiratory flow，PEF）、1秒率（FEV1/FVC）水平，免疫球蛋白A（Immunoglobulin A，IgA）、免疫球蛋白G（Immunoglobulin G，IgG）、免疫球蛋白E（Immunoglobulin E，IgE）、免疫球蛋白M（Immunoglobulin M，IgM）水平，统计患儿的咳嗽缓解时间，咳嗽消失时间和临床疗效，并观察患儿的不良反应。结果 治疗后IL-17A、CCL11、IgE水平，咳嗽缓解时间和咳嗽消失时间低于治疗前，FVC、FEV1、PEF、FEV1/FVC、IgA、IgG、IgM水平高于治疗前；治疗后联合治疗组IL-17A、CCL11、IgE水平，咳嗽缓解时间和咳嗽消失时间低于消风止咳汤加味治疗组，FVC、FEV1、PEF、FEV1/FVC、IgA、IgG、IgM水平高于消风止咳汤加味治疗组；联合治疗组临床疗效总有效率高于消风止咳汤加味治疗组，有统计学差异（P < 0.05）。结论 掌小横纹穴按摩辅助消风止咳汤加味可缓解咳嗽变异性哮喘患儿病情的发展，降低IL-17A、CCL11水平，增患儿的肺功能和免疫功能，缩短咳嗽缓解时间和咳嗽消失时间，效果显著。