蛇床子素对小鼠肺腺癌和人肝癌细胞生长抑制作用的研究

目的：检测天然蛇床子素在体外培养小鼠肺腺癌LA795细胞和人肝癌Bel-7402细胞抑制作用。方法：体外蛇床子素对小鼠肺腺癌细胞IA549和入肝癌细胞Bel-7402的抗肿瘤实验采用MTT法，浓度为6．25、12．5、25、50、75、100μg/mL，作用时间24，48h，计算细胞生长抑制率和半数抑制浓度IC50。结果：蛇床子素体外对小鼠肺腺癌LA795细胞生长抑制率是53．78％，对人肝癌Bel-7402细胞生长抑制率为35．9％，IC50分别为81．3μg／mL和134．8μg/mL，作用48h比24h的细胞生长抑制率要高。结论：蛇床子素体外对小鼠肺腺癌LA795细胞和人肝癌Bel-7402细胞都有细胞生长抑制作用，对小鼠肺腺癌1A795细胞的抑制作用更为显著。     

复合中药多糖对人肝癌Bel-7402细胞株抗癌作用研究

目的：探讨复方中药多糖对人肝癌Bel-7402细胞株的影响。方法：采用T淋巴细胞转化试验观察复合多糖对人肝癌小鼠细胞，屯疫功能的影响；采用MTT法观察复合多糖对Bel-7402株的细胞增殖抑制；采用流式细胞仪观察复合多糖对Bel-7402株细胞凋亡的影响。结果：复合多糖为1．5、0．75、0．25g，kg剂量时可提高Bel-7402小鼠的淋巴细胞转化功能；复合多糖在40、20mg／L浓度时对Bel-7402细胞株增殖具有抑制作用；复合多糖浓度在40、200、10mg／L时作用24、48、72h使Bel-7402株细胞凋亡率增加。结论：复合多糖可提高Bel-7402小鼠的淋巴细胞转化功能；对Bel-7402细胞株增殖具有抑制作用；使Bel-7402株细胞凋亡率增加，并呈现时间、浓度依赖性。     

癌痛消药物血清对人肝癌细胞SMMC-7721和Bel-7404体外增殖及凋亡的影响

目的观察癌痛消药物血清对人肝癌细胞SMMC-7721和Bel-7404体外增殖及凋亡的影响,探讨其作用机制。方法癌痛消饱和溶液按86.4、43.2、21.6 g/kg剂量给予SD大鼠灌胃1周,取血制备含药血清,加入SMMC-7721及Bel-7404肝癌细胞培养液。不同浓度癌痛消药物血清处理人肝癌细胞SMMC-7721和Bel-7404肝癌细胞后,MTT法检测细胞增殖变化,流式细胞术检测细胞凋亡。结果体外研究显示,癌痛消方药物血清低、中、高剂量组对人肝癌细胞SMMC-7721和Bel-7404均具有不同程度的抑制作用,且这种抑制作用在一定范围内呈浓度依赖性,癌痛消药物血清对人肝癌细胞SMMC-7721和Bel-7404有促凋亡作用。结论癌痛消方药物血清在体外对人肝癌细胞SMMC-7721和Bel-7404肝癌细胞有抑制增殖作用和促凋亡作用。     

蜈蚣提取液对肝癌Bel-7404细胞体外抗癌作用的研究

目的研究不同浓度蜈蚣提取液(ECP)对肝癌(HCC)Bel-7404细胞株的敏感性。方法通过MTT实验、细胞药物浓度—时间生长曲线研究不同浓度ECP对Bel-7404细胞株的敏感性;利用光学与电子显微镜观察细胞形态及其超微结构变化。结果①MTT法揭示各浓度ECP对人HCC细胞Bel-7404生长均有抑制作用。②细胞生长曲线图显示Bel-7404活细胞数目与ECP浓度及药物作用时间相关。ECP在5 g/L时,Bel-7404活细胞数先增多,48 h后细胞数开始减少;浓度在10 g/L与20 g/L时,用药后24 h活细胞数就显著减少。各组间活细胞数比较有显著性差异(P<0.01)。③光镜下见ECP作用48 h后,浓度低于5 g/L对Bel-7404细胞无明显的抑制作用,浓度在10 g/L以上时,Bel-7404活细胞数减少,细胞形态改变,细胞坏死。电镜下见治疗组细胞密度增高,染色质凝集固缩,染色质边集,核固缩、核碎裂,及凋亡小体的形成。结论①ECP能抑制人HCC细胞Bel-7404的增殖,且抑制作用呈剂量和时间依赖效应;②ECP低浓度有诱导肿瘤细胞凋亡作用,中、高浓度有直接杀肿瘤细胞作用。     

藏药普尔那对肝癌HepG2细胞增殖作用的实验研究

观察藏药普尔那提取物对HepG2细胞的增殖作用。采用MTT比色法测定不同质量浓度普尔那根茎乙酸乙酯提取物(GE)、根茎水提物(GW)、叶乙酸乙酯提取物(YE)、叶水提物(YW)对体外培养人肝癌细胞HepG2细胞增殖的影响。125μg/mL的低质量浓度GE、500μg/mL的低质量浓度YE对HepG2细胞增殖具有一定抑制作用。普尔那不同提取部位主要体现细胞增殖的促进作用。应进一步研究藏药普尔那的物质基础、药理活性,进行体外、动物毒性实验,且严格控制其临床使用剂量。     

白附子水提物抑制人骨髓神经母细胞瘤细胞增殖的实验研究

目的 探讨白附子水提物体外对肿瘤细胞增殖的抑制作用.方法 以白附子水提物处理人骨髓神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞24、48 h后,应用细胞增殖检测试剂Kit-8 (CCK-8)细胞增殖和毒性实验检测白附子水提物对SH-SY5Y细胞的增殖抑制作用,运用蛋白印记反应(AV/PI)对该细胞株生长抑制机理进行初步探讨.结果 白附子水提物对SH-SY5Y细胞的增殖具有抑制作用,与细胞作用48 h的半数抑制浓度(IC50)为0.862 mg/mL,与细胞作用24 h的IC50为1.158 mg/ml.Western-blot法检测结果表明,白附子水提物可能通过抑制肿瘤细胞增殖、诱导凋亡抑制其生长.结论 白附子水提物有抑制SH-SY5Y细胞增殖作用.     

膈下逐瘀汤对肝癌Bel-7402细胞增殖的抑制及与磷酸化AKT的相关性研究

目的：观察膈下逐瘀汤对肝癌Bel-7402细胞增殖的抑制及与磷酸化AKT的相关性研究。方法：膈下逐瘀汤配成浓度分别为：膈下逐瘀汤(C1)：0．25×10~(-4)g/mL,膈下逐瘀汤(G2)：0．5×10~(-4)g/mL,膈下逐瘀汤(G3)：1．0×10~(-4)g/mL,膈下逐瘀汤(G4)：2．0×10~(-4)g/mL；顺铂配制成浓度分别为：顺铂(S1)：0．5μg/mL,顺铂(S2)：1．0μg/mL,顺铂(S3)：1．5μg/mL,顺铂(S4)：2．0μg/mL,作用于Bel-7402细胞,用噻唑兰(MTT)比色法检测膈下逐瘀汤各组对Bel-7402细胞生长的影响,并且与顺铂各组相对照,用蛋白印迹试验(Western blot- ting analysis)检测不同浓度药物作用48h、72h时磷酸化AKT的表达水平。结果：膈下逐瘀汤对肝癌Bel-7402细胞的增殖及磷酸化AKT的表达均有显著的抑制作用,膈下逐瘀汤浓度在2．0×10~(-4)g/mL时其48h细胞生长抑制率介于S1组与S2组之间。结论：膈下逐瘀汤抑制肝癌Bel-7402细胞增殖的机制可能是通过抑制了细胞内磷酸化AKT这一途径而起作用。     

叶下珠复方对人肝癌HePG2细胞体外增殖抑制及诱导凋亡作用

目的观察叶下珠复方对人肝癌HePG2细胞体外增殖的抑制作用并探讨其作用机制。方法采用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)和生长曲线测定法,比较不同浓度的叶下珠复方在不同作用时间对体外培养的HePG2细胞增殖的影响;同时应用流式细胞术、荧光显微镜和电镜对HePG2细胞的凋亡率及形态学进行观察。结果叶下珠复方对HePG2细胞增殖有抑制作用,在一定范围内,叶下珠复方的浓度越大、作用时间越长,对HePG2的抑制作用越强,叶下珠复方浓度为500μg/mL作用72h时,其抑制率达93.58%,IC50为240μg/mL。不同浓度的叶下珠复方均具有一定程度诱导HePG2细胞凋亡的作用。结论叶下珠复方在体外能一定程度抑制肝癌细胞增殖,其机制可能与诱导肝癌HePG2细胞凋亡有关。     

半夏类药材不同提取物对人肝癌细胞Bel-7402生长抑制作用的研究

目的:观察并比较半夏类药材的不同提取物对体外培养的人肝癌细胞Bel-7402的生长抑制作用。方法:应用MTT技术,检测半夏类药材不同提取物对人肝癌细胞Bel-7402的抑制作用。并观察了不同提取物抑制作用的量效关系。结果:所有乙酸乙酯提取的部位都有比较好地抑制Bel-7402细胞增殖的作用(P<0.01);乙醇提取部位有一定抑制作用(P<0.05);而所有石油醚提取部位都无明显作用。此外,乙酸乙酯和乙醇提取部分对肝癌Bel-7402细胞生长抑制作用,存在着显著的量效关系,其中以亳州掌叶半夏最为明显。结论:半夏乙酸乙酯和乙醇提取物有抑制体外培养肝癌细胞增殖的作用,呈现出显著的量效关系。     

苦参碱体外诱导人肝癌细胞系Bel-7404分化及机制

目的:研究苦参碱对人肝癌细胞系体外诱导分化作用,并探讨其作用机制。方法:不同浓度苦参碱体外作用于Bel-7404细胞,噻唑蓝比色法(MTT法)绘制生长曲线,光镜下观察细胞形态变化,分别以软琼脂集落形成试验、细胞黏附试验、运动试验、侵袭试验检测细胞生物学特性变化,以流式细胞仪分析细胞周期变化。结果:0.5-1.0g/L苦参碱作用于Bel-7404细胞后,明显抑制细胞增殖,细胞形态向正常转化,克隆形成率显著降低,细胞黏附力明显上升,运动力和侵袭力则显著下降。细胞周期分析G1期细胞堆积,G2和S期细胞显著降低。结论:一定浓度的苦参碱具有抑制Bel-7404细胞生长增殖和诱导分化作用,其作用机制可能与细胞周期调节有关。     

徐长卿对溃疡性结肠炎模型大鼠核因子κB信号通路的影响

目的:从炎症反应探讨徐长卿治疗溃疡性结肠炎(UC)的机制.方法:将60只雄性SD大鼠随机分为6组:正常组,模型组,柳氮磺吡啶组,徐长卿低、中、高剂量组.除正常组外,其余5组大鼠均以三硝基苯磺酸(TNBS)灌肠造模.灌肠24 h后,徐长卿低中高剂量组分别每天给予徐长卿0.4 g/kg、0.8 g/kg、1.6 g/kg体...     

Antiviral activity against human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1) and type 2 (HIV-2) of ethnobotanically selected Ethiopian medicinal plants

Ethiopian medicinal plants used for the treatment of a variety of ailments including infectious diseases were screened for activity against human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1) and type 2 (HIV-2). Seventy-one polar and nonpolar extracts derived from 21 plants belonging to 14 families were tested for inhibition of viral replication using HIV-1 (III(B)) and HIV-2 (ROD) strains. Selective inhibition of viral growth was assessed by the simultaneous determination of the in vitro cytotoxicity of each of the extracts against MT-4 cells. Six extracts made from the root bark of Bersama abyssinica Fresen, the leaves of Combretum paniculatum Vent., and Dodonaea angustifolia L.f., and the stem bark of Ximenia americana L. displayed antiviral activity at concentrations that were nontoxic to MT-4 cells. The highest selective inhibition of HIV-1 replication was observed with the acetone fraction of C. paniculatum and the methanol fraction of D. angustifolia which showed selectivity indices (ratio of 50% cytotoxic concentration to 50% effective antiviral concentration) of 6.4 and 4.9, and afforded cell protection of viral induced cytopathic effect of 100% and 99%, respectively, when compared with control samples. The greatest degree of antiviral activity against HIV-2 was achieved with the acetone extract of C. paniculatum (EC(50): 3 microg/mL), which also showed the highest selectivity index (32). The 50% cytotoxic concentration ranged from 0.5 microg/mL for the hexane extract of D. angustifolia L.f., the most cytotoxic of the extracts tested, to >250 microg/mL for some extracts such as the methanol fraction of Alcea rosea L., the least toxic tested. Only the polar extracts that were obtained by extraction with hydroalcohol, methanol or acetone exhibited inhibition of viral growth at subtoxic concentrations. The results obtained in this study enable the selection of extracts which show some specificity of action and support the further investigation of these extracts for their potential as new lead antiretroviral compounds.     

雷公藤甲素诱导H22细胞凋亡作用研究

目的研究雷公藤甲素对H22细胞的诱导凋亡作用。方法MTT法测定雷公藤甲素对H22肿瘤细胞的抑制率,并通过细胞形态学观测及DNA凝胶电泳分析检测雷公藤甲素对H22细胞的诱导凋亡作用。结果雷公藤甲素80μg/L抑制率达41.6%,与浓度成正相关,IC50为85.79μg/L;电镜结果表明,40μg/L以上浓度可明显诱导H22细胞出现凋亡特征;DNA电泳显示明显的梯状条带。结论雷公藤甲素能诱导H22细胞凋亡,表明其具有一定的抗肝癌作用。     

Antimicrobial activity of aqueous and methanol extracts of Juniperus oxycedrus L

Aqueous and methanol extracts of the leaves of Juniperus oxycedrus were investigated for their in vitro antimicrobial properties. The plant was collected from Pelitli Village of Gebze, Kocaeli, in the Marmara region of Turkey. Juniperus oxycedrus is widely used as traditional folk medicine in Turkey for treatment of different infectious diseases. The antimicrobial activity of the extracts against 143 laboratory strains belonging to 56 bacterial species, and 31 isolates of 5 fungi species were evaluated based on the inhibition zone using the disc-diffusion assay, minimal inhibition concentration (MIC) and minimal bactericidal concentration (MBC) values. The aqueous extract of J. oxycedrus had no antimicrobial effect against the test microorganisms whereas the methanol extract had inhibitory effects on the growth of 57 strains of 24 bacterial species in the genera of Acinetobacter, Bacillus, Brevundimonas, Brucella, Enterobacter, Escherichia, Micrococcus, Pseudomonas, Staphylococcus, and Xanthomonas. In addition 11 Candida albicans isolates at a concentration of 31.25-250 micro g/ml were also inhibited.     

MTT法检测多种肿瘤细胞对硒酸酯多糖的敏感性研究

目的:采用MTT法检测多种肿瘤细胞对硒酸酯多糖(KSC)的敏感性。方法:以30、60、120mg/L3种不同浓度的KSC分别处理HepG-2、Bel-7402、MCF-7、SGC-7901、A5495种肿瘤细胞,采用MTT法检测KSC对5种肿瘤细胞的抑制率。结果:KSC对多种肿瘤细胞都有明显的抑制增殖作用,KSC120mg/L作用72h后,对上述5种细胞株的抑制率分别为69.31%、62.24%、53.29%、52.03%、33.62%。结论:KSC对多种肿瘤细胞都有抑制作用,尤其是对肝癌细胞的抑制作用最强,具有治疗肝癌潜在的应用价值。     

苏木不同提取物对两种口腔致龋菌的影响

目的观察苏木不同提取物对常见口腔致龋菌的影响。方法测定苏木不同提取物对粘性放线菌和变形链球菌的MIC、MBC值,观察苏木不同提取物对这两种菌的抑制产酸和抑制黏附的效果。结果苏木4种提取物对粘性放线菌和变形链球菌最低抑菌浓度(MIC)为1.25~2.50 g/L,最低杀菌浓度(MBC)均为5 g/L。1/2 MIC乙醇提取物对粘性放线菌的抑制产酸的效果最好,1/2 MIC水提取物对变形链球菌的抑制产酸效果最好,这两组效果与阳性对照组相比没有统计学差异。实验组中抑制黏附效果最好的是1/2 MIC乙醇提取物,1/2 MIC乙醇提取物对粘性放线菌和变形链球菌抑制黏附率分别为41.83%和46.40%。结论苏木4种提取物对粘性放线菌和变形链球菌都有很好的抑菌杀菌效果。其中1/2 MIC乙醇提物对粘性放线菌有好的抑制产酸效果,1/2 MIC水提取物对变形链球菌抑制产酸效果好,苏木不同提取物对粘性放线菌和变形链球菌都有抑制黏附的效果。     

四味蒙药体外抗真菌实验研究及超微结构观察

目的观察四味蒙药水提及醇提物对红色毛癣菌、须癣毛癣菌、犬小孢子菌、白色念珠菌和糠秕马拉色菌的体外抗真菌作用,并观察大花葵水提物对白色念珠菌和糠秕马拉色菌超微结构的改变。方法采用试管内药基法测定四味蒙药水、醇提物的最小抑菌浓度(MIC),扫描电镜下观察大花葵水提物作用后白色念珠菌和糠秕马拉色菌超微结构的变化。结果四种蒙药的水、醇提物分别在不同浓度时对受试菌种有较强的抑制作用,且大花葵水、醇提物对红色毛癣菌、须癣毛癣菌、犬小孢子菌的MIC为8.3 g/L。大花葵水提物对白色念珠菌和糠秕马拉色菌的MIC分别为50 g/L、12.5 g/L。经蒙药作用后,在扫描电镜下观察白色念珠菌和糠秕马拉色菌表面出现皱缩、剥脱、裂纹等改变。结论 MIC和超微结构改变提示四味蒙药能有效抑制真菌,为其抗真菌作用机制的研究提供了线索。     

蛇葡萄素的血管生成抑制作用

目的:探讨蛇葡萄素对内皮细胞及肿瘤细胞的生长及其血管生成的影响。方法:体外用MTT法对牛主动脉内皮细胞进行增殖抑制实验;用ELISA法、免疫组化染色法以及流式细胞仪观察蛇葡萄素对人肝癌细胞Bel-7402分泌VEGF、bFGF的抑制作用;体内观察蛇葡萄素对人肝癌Bel-7402裸鼠移植瘤的抑制作用。结果:蛇葡萄素对牛主动脉内皮细胞的增殖在6.4~51.2μg/m l呈现浓度依赖性抑制作用,IC50=22.0±4.0μg/m l。ELISA法测定结果显示,12.8μg/m l、25.6μg/m l、38.4μg/m l蛇葡萄素对肝癌Bel-7402细胞分泌VEGF的抑制率分别为14.2%、40.0%及49.6%。免疫组化染色结果显示,12.8μg/m l以上的蛇葡萄素能使细胞体积缩小,分泌VEGF、bFGF明显减少。流式细胞仪检测VEGF、bFGF结果,25.6μg/m l及38.4μg/m l蛇葡萄素对VGEF的抑制率分别为32.2%及57.4%,对bFGF的抑制率分别为54.9%及62.6%。蛇葡萄素浓度为100、150、200 mg/kg时对人肝癌Bel-7402裸鼠移植瘤的抑制率分别可达24.3%、41.4%及45.7%。结论:蛇葡萄素在体外能有效抑制内皮细胞增殖及人肝癌Bel-7402细胞分泌VEGF和bFGF,具有抑制血管生成的作用;体内能有效抑制人肝癌Bel-7402裸鼠移植瘤的生长,提示蛇葡萄素也许可作为一个肿瘤血管生成抑制剂用于肿瘤防治。     

Antiviral potency of mistletoe (Viscum album ssp. album) extracts against human parainfluenza virus type 2 in Vero cells

Various extracts from the leaves of mistletoe (Viscum album L. ssp. album) were investigated for their antiviral activity on human parainfluenza virus type 2 (HPIV-2) growth in Vero cells. Plant extracts were prepared using distilled water, 50% ethanol, petroleum ether, chloroform and acetone. The 50% effective dose (ED(50)) of aqueous extract for HPIV-2 replication was 0.53 +/- 0.12 micro g/mL, and the antiviral index (AI), which was based on the ratio of the 50% inhibitory concentration (CD(50)) for host cell viability to the ED(50) for parainfluenza virus replication, was 10.05. The aqueous extract was found to be the most selective inhibitor. Furthermore, the aqueous extract at a concentration of 1 micro g/mL was found to inhibit HPIV-2 replication and the virus production was suppressed to more than 99% without any toxic effect on host cells. The chloroform extract was also found to be moderately active. In an effort to further analyse the mechanism of antiviral activity, the effectiveness of the aqueous extract on different steps of virus replication was examined. The antiviral activity could neither be attributed to the direct inactivation of the HPIV-2 nor to the inhibition of adsorption to Vero cells. The active aqueous extract has shown a dose-dependent antiviral activity on virus replication.