加味四逆散体外抗乙型肝炎病毒的实验研究

目的:研究加味四逆散体外抗乙型肝炎病毒(HBV)的作用。方法:通过加味四逆散作用于体外培养的2.2.15细胞株,观察其对细胞的毒性和对HBsAg和HBeAg分泌的抑制效果,以评价其抗HBV作用。结果:加味四逆散对2.2.15细胞的半数毒性浓度(TC50)为>200mg/mL;对2.2.15细胞分泌的HBsAg,HBeAg的半数抑制浓度(IC50)分别为<3.12mg/mL和43.68mg/mL;治疗指数(TI)分别为>64.12和>4.58。结论:加味四逆散在体外细胞培养中对HBsAg和HBeAg均有较强的抑制作用。     

辨邪正盛衰治疗乙型肝炎32例体会

乙型肝炎是因感染乙型肝炎病毒 (HBV)而致的一种传染病 ,在我国有着较高的发病率。祖国医学认为本病主要与感受湿热、疫毒之邪及饮食失当等因素有关。其中 ,感受疫毒之邪又是发病之关键。而病邪能否侵入人体 ,侵入人体后是否致病 ,都取决于人体正气的强弱。正如《内经》中云 :“正气存内 ,邪不可干”,“邪之所凑 ,其气必虚”。现代医学认为肝炎病毒侵入人体后能否发病 ,特别是病情的转归都与人体的免疫功能 ,亦即正气密切相关。基于此 ,笔者在临床中以中医正邪理论为指导 ,依据相关实验室检查结果 ,认为表面抗原 (HBs A g)、e抗原 (H Be…     

加味四逆散保护肝损伤的实验研究

本课题旨在观察加味四逆散抗急性肝损伤的原理。一是采用四氯化碳一次性皮下注射造成急性肝损伤大鼠模型,检测血清ＡＬＴ、ＡＳＴ、ＳＯＤ、ＭＤＡ、ＧＳＨ水平及肝组织ＭＤＡ、ＧＳＨ水平。二是采用Ｄ－氨基半乳糖造成急性大鼠肝损伤模型,检测血清ＳＯＤ、ＭＡＤ、ＧＳＨ水平,并作病理学观察。三是观察加味四逆散对小鼠的急性毒性作用。结果表明：（１）加味四逆散能降低ＣＣ１４所致的急性肝损伤大鼠模型血清升高的ＡＬＴ、ＡＳＴ及ＭＤＡ值,并使降低的ＧＳＨ值及ＧＳＨ值升高;（２）加味四逆散能降低ＣＣ１４所致的急性肝损伤大鼠模型肝组织中升高的ＭＤＡ值,并使降低的ＧＳＨ值升高;（３）加味四逆散能降低Ｄ－Ｇａ１Ｎ所致的急性肝损伤大鼠模型肝组织中升高的ＭＤＡ值,并使降低的ＳＯＤ及ＧＳＨ值升高;（４）加味四逆散能使Ｄ－Ｇａ１Ｎ所致急性肝损伤大鼠模型肝     

加味四逆散治疗脂肪肝的实验研究

目的：探讨加味四逆散在脂肪肝治疗中的作用机理。方法：采用复合致病因素造成大鼠脂肪肝模型，以加味四逆散为治疗组，脂必妥片作对照，观察加味四逆散对模型大鼠的影响。结果：模型组大鼠肝重增加，肝脏脂变严重，血清胆固醇(TC)，三酰甘油(TG)升高，高密度脂蛋白(HDL-C)降低。结论：加味四逆散能显著改善上述病理变化，降低TC、TG，升高HDL-C。     

加味柴平汤对HBeAg阴性慢性乙型肝炎的临床研究

为观察在"大辨证理论"指导下结合"攻下排毒"和"中药现代药理研究"认识组合而成的加味柴平汤治疗HBeAg阴性慢性乙型肝炎的临床效果,选择119例HBeAg阴性慢性乙型肝炎患者,随机分为治疗组69例,对照组50例。治疗组采用加味柴平汤治疗(每日1剂分2次口服,每周服用6剂),对照组采用拉米夫定治疗(每次100 mg,每日1次),共用药48周。2组患者分别在治疗12,24,36,48周进行肝功能、血清HBV-DNA和临床症状的观察,并对停药后24和48周的患者进行ALT和血清HBV-DNA的随访。治疗组在24周总有效率与对照组比较无统计学差异,但在12,36,48周总有效率高于对照组(P0.05);在12,36,48周改善肝功能方面优于对照组(P0.01或P0.05),但在24周改善ALT方面与对照组比较无统计学差异;在12周改善血清HBV-DNA方面明显低于对照组(P0.01),但在24,36,48周改善血清HBV-DNA方面与对照组比较无统计学差异;在12,24,36周HBV-DNA阴转率低于对照组(P0.01或P0.05),但在48周HBV-DNA阴转率与对照组比较无统计学差异;在12周和24周改善疲乏、纳差、腹胀和胁痛优于对照组(P0.01或P0.05),但在36周和48周改善疲乏和胁痛方面与对照组比较无统计学差异;患者的ALT在停药后24和48周异常率明显低于对照组(P0.01),血清HBV-DNA定量异常率在停药后24周与对照组比较无统计学差异,但在48周则低于对照组(P0.05)。加味柴平汤长期用药与间歇用药相结合对HBeAg阴性慢性乙型肝炎具有较好的临床疗效,应进一步在辨病施治与辨证论治相结合指导下优化和完善其处方组成,并开展其对肝纤维化和生存质量影响的临床研究。     

四君合四逆散加味治疗慢性乙型肝炎64例

笔者以四君合四逆散加味治疗慢性乙型肝炎效果满意,现介绍如下.     

加味小柴胡汤联合阿德福韦酯治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎40例

目的：观察加味小柴胡汤联合阿德福韦酯治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎的临床疗效。方法：选取HBeAg阳性慢性乙型肝炎79例,采用随机数字法表法分为治疗组和对照组。治疗组40例,给予加味小柴胡汤联合阿德福韦酯治疗;对照组39例,单用阿德福韦酯治疗。结果：治疗前两组间的相关指标比较无统计学意义（P〉0.05）,治疗后,12周、48周后中医症状与体征好转率、消退黄疸、改善肝功能均有显著性差异（P〈0.05,P〈0.01）,且明显优于单用阿德福韦酯（P〈0.05或P〈0.01）,两组HBeAg阴转率治疗24周后治疗组优于对照组有显著性差异（P〈0.05）,HBV-DNA转阴率,治疗组与对照组经12周、48周比较有显著性差异,分别为（P〈0.05,P〈0.01）。结论：加味小柴胡汤联合阿德福韦酯治疗慢性乙型肝炎可以有效改善临床症状及体征,提高肝功能复常率、HBVDNA和HBeAg阳性的阴转率。     

加味四逆散防治大鼠酒精性肝病实验研究

目的观察加味四逆散对酒精性肝病大鼠的防护作用。方法采用乙醇灌胃法制备酒精性肝病大鼠模型,以小柴胡颗粒作对照,检测肝功能及肝组织超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、过氧化氢酶(CAT)、脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量,并观察肝组织病理变化。结果加味四逆散可明显减轻肝组织损伤,显著降低MDA含量,使SOD、GSH-PX、CAT含量明显升高。结论加味四逆散具有抗脂质过氧化、保护肝细胞、防治酒精性肝病的作用。     

六月青含药血清对HepG2.2.15细胞系HBsAg与HBeAg表达的影响

目的 观察六月青(Liuyueqing,LYQ)含药血清的体外抗乙型肝炎病毒的作用.方法 以MTT法检测药物在体外对HepG2.2.15细胞的生长抑制作用,采用酶联免疫法(ELISA法)检测HepG2.2.15细胞上清液中HBsAg、HBeAg的滴度.结果 LYQ含药血清对HepG2.2.15细胞50%生长抑制率的给药剂量为11.56 g·(kg·d)-1;而对HepG2.2.15细胞分泌HBsAg 50%生长抑制率的给药剂量为0.178 g·(kg·d)-1,其治疗指数(TI)为64.94;另外,LYQ含药血清对HBeAg抑制作用不明显.结论 LYQ含药血清在体外有显著的抗HBV的作用,且毒性较低.     

槐果碱体外对HepG2.2.15细胞分泌HBsAg HBeAg的影响

目的:探讨槐果碱的体外抗乙型肝炎病毒作用。方法:采用HepG2.2.15细胞模型进行体外培养,给予不同浓度槐果碱,以拉米夫定作阳性对照,作用9天后检测上清液中HBsAg、HBeAg的分泌,观察药物对HepG2.2.15细胞分泌HBV病毒抗原的影响,同时以MTT法检测药物在体外对HepG2.2.15细胞的生长抑制作用,从而评价药物的抗HBV作用。结果:药物作用9天后,槐果碱对HepG2.2.15细胞的50%生长抑制率(TC50)为0.002M,对HepG2.2.15细胞分泌HBsAg的50%抑制率(IC50)为4.9uM,其治疗指数(TI=TC50/IC50)为408.16;而拉米夫定对HepG2.2.15细胞分泌HBsAg的抑制率在所选浓度范围内均低于50%。槐果碱对HepG2.2.15细胞分泌HBeAg的抑制率在所选浓度范围内均低于50%,但明显优于拉米夫定对HepG2.2.15细胞分泌HBeAg的抑制率。结论:槐果碱在体外具有显著的抑制HepG2.2.15细胞分泌HBsAg、HBeAg的作用,是一个高效低毒的抗乙肝病毒的有效药物。     

加味四逆散对刀豆蛋白A所致肝损伤小鼠的保护作用

目的：观察加味四逆散对刀豆蛋白A（ConA）所致肝损伤的保护作用。方法：60只NIH小鼠，随机分为正常对照组、模型对照组、联苯双酯组、加味四逆散大、中、小剂量组。除正常对照组外，其他组于实验首日静脉注射ConA 20mg／kg，联苯双酯组按150mg／kg灌胃．加味四逆散大、中、小剂量组分别按40g／kg，20g／kg，10g／kg灌胃。每天1次，连续灌胃3天。末次给药后4h再次尾静脉注射ConA20mg／kg，8h后检测血清ALT活性，IFN—γ和TNF—α含量，SOD活力、MDA和NO含量。结果：加味四逆散大、中剂量组ALT活性降低，加味四逆散治疗组血清IFN—γ、TNF—α含量明显低于模型组，差异有显著性（P〈0．05，P〈0．01）。加味四逆散大、中剂量组均能明显升高肝损伤小鼠血清SOD的活力，降低MDA和NO的含量。结论：大、中剂量加味四逆散对刀豆蛋白A所致小鼠肝损伤具有较好的保护作用。其机制与其抗脂质过氧化损伤及抑制NO的产生及降低IFN-γ，TNF—α等炎症介质含量密切相关。     

甘草甜素对HepG2．2．15细胞株HBV感染的影响

目的探讨甘草甜素（GL）对HepG2．2．15细胞上清液中HBsAg、HBeAg、HBVDNA的作用,及对细胞存活率的影响。方法实时荧光定量PCR检测HBVDNA的表达,ELASA检测HBV所分泌抗原,MTT检测细胞的增殖活性,计算细胞存活率。结果给药后各组HBsAg分泌结果显示总体均数间差异显著（P=0．000）,GL各组与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．01）,抑制作用存在剂量依赖关系;而对HBeAg水平的影响因剂量不同而表现为升高和降低两种趋势,除50pg／mL组外,其余各组与对照组比较,差异均有统计学意义（P〈0．05）,但800μg／mL组HBeAg分泌增加,400μg／mL以下组为HBeAg降低;HBVDNA的表达显示GL各组与对照组比较,差异均有统计学意义（P〈0．05）,但400pg／mL以下组为HBVDNA降低,800μg／mL组出现HBVDNA复制增强;MTT实验显示,200μg／mL以下3个剂量组均可促进细胞增殖（P〈0．01）,400、800μg／mL2组均显著抑制细胞增殖（P〈0．01）;MTT分别与HBeAg和HBVDNA水平呈显著负相关（P〈0．01）,但与HBsAg呈显著正相关（r=0．869,P=0．000）。结论GL对HepG2．2．15细胞株上清中的HBeAg和HBVDNA水平可能具有双向作用,而对HBsAg具有剂量依赖的抑制作用,提示GL的使用应注意选择适应证及合适的剂量。     

2.2.15细胞生长规律的探讨及在药物筛选中应用

目的　探讨 2 .2 .15细胞生长及其分泌HBsAg和HBeAg的规律以及在药物筛选中的应用。方法　利用HBV的体外细胞培养系统 (2 .2 .15细胞系 )建立抗HBV药物筛选的实验技术常规 ,对 2 .2 .15细胞及其分泌HBsAg和HBeAg的特性进行初步观察 ,并在此基础上对几种药物体外抗HBV活性进行研究。结果　选择每孔接种 0 .1mL浓度为 3× 10 8L-1的 2 .2 .15细胞培养至 8～ 12d为细胞指数生长期 ,滴板后第 1天上清中HBsAg和HBeAg均阳性 ,第 12天达高峰且含量最高。药物阿特福韦二吡呋酯、鞣花鞣质、无环鸟苷、α -干扰素对细胞的半数毒性浓度分别为 0 .6 7M ,0 .4 9g/L ,0 .75g/L ,>10× 10 8IU/L ,对病毒HBsAg和HBeAg的治疗指数 (TI)分别为 2 79,4 .4 7;2 7.2 2 ,5 .4 4 ;1,1;1,1。结论　 2 .2 .15细胞抗HBV药物筛选以 3× 10 8L-1/孔培养至 12d作为常规方法较为合适。阿特福韦二吡呋酯、鞣花鞣质均有显著体外抗病毒作用 ,可以作为阳性药物对照。     

雪灵芝提取物对HepG2．2．15细胞株HBsAg与HBeAg表达的影响

目的:探讨雪灵芝提取物对HepG2.2.15细胞株HBsAg与HBeAg表达的影响.方法:应用HepG2.2.15细胞系培养系统检测雪灵芝提取物对HBsAg与HBeAg表达的影响.结果:雪灵芝醇提物和水提物各剂量组(50～400 mg/L)孵育HepG 2.2.15细胞株72、96h后抑制了HBsAg和HBeAg的表达(与正常对照组比较,P<0.01),并呈浓度和时间依赖性.其中雪灵芝醇提物在实验72、96h对HBeAg最大抑制率分别为63.2%和90.8%;雪灵芝水提取物在实验96 h对HBsAg和HBeAg的最大抑制率分别为52.5%和72.8%.结论:雪灵芝醇提物和水提物体外均有明显的抗乙肝病毒作用,但醇提物细胞毒性较大,而水提物作用确切且毒性较低.     

毛鸡骨草醇提液对HepG2.2.15细胞乙型肝炎表面 抗原及乙型肝炎E抗原的影响

目的:观察毛鸡骨草体外抗乙型肝炎病毒(HBV)的作用。方法:采用MTT法检测毛鸡骨草对HepG2.2.15细胞的半数毒性浓度(TC50)和最大无毒浓度(TC0),采用酶联免疫吸附实验(ELISA)法测定相似文献   

青钱柳提取物对HepG2 2.2.15细胞HBsAg和HBeAg表达的影响

目的研究青钱柳提取物体外抗乙肝病毒作用。方法青钱柳用75%乙醇提取后按溶剂极性萃取,获得的三氯甲烷部位经柱层析得到Fr.2组分。体外培养HepG2 2.2.15细胞,MTT法检测青钱柳提取物Fr.2组分对HepG22.2.15细胞的细胞毒作用,用ELISA法检测HepG2 2.2.15细胞培养液中HBsAg和HBeAg的表达。结果青钱柳提取物Fr.2组分对HepG2 2.2.15细胞无明显的细胞毒作用。与对照组比较,Fr.2组分对HBsAg和HBeAg的表达均有显著性抑制作用(P<0.01或0.05)。结论青钱柳提取物体外具有较强的抗乙肝病毒作用。     

白背叶提取物WF对2215细胞分泌HBsAg和HBeAg的影响

目的 研究白背叶提取物WF对乙肝病毒的抑制作用.方法 接种2215细胞24 h后,加入不同浓度的白背叶提取物WF培养8 d,以细胞形态学的变化为指标评价WF对2215细胞的毒性.收集最大无毒浓度下的培养液,酶联免疫法(ELISA)检测培养液中HBsAg和HBeAg水平.结果 在最大无毒浓度下,WF对2215细胞HBsAg和HBeAg的分泌有明显抑制作用.WF抑制HBsAg的半数有效量(IC_(50))为8.61 μg/ml;抑制HBeAg的IC_(50)为20.87 μg/ml.结论 WF可明显抑制2215细胞HBsAg和HBeAg的分泌,具有显著的抗乙肝病毒作用.