启膈散及其拆方抑制人食管癌细胞裸鼠移植瘤作用的机理研究

为了进一步研究启膈散及其拆方在体内的作用，我们运用裸鼠荷瘤动物模型，对启膈散及其拆方抑制肿瘤生长的作用及PLC—γ1蛋白表达进行了观     

启膈散加减联合化疗治疗食管癌40例

目的：观察启膈散联合化疗治疗食管癌的疗效。方法：将按国际分类标准收治的40例食管癌患者随机分为治疗组和对照组,分别采用中药联合化疗和单纯化疗的治疗方法,对两组患者的近期疗效和生活质量进行比较。结果：两组近期疗效和患者的生活质量均有显著性差异。结论：中药联合化疗治疗食管癌的疗效明显优于单纯化疗。     

启膈散加减联合化疗治疗中晚期食管癌临床观察

食管癌是人类常见的消化道恶性肿瘤之一,且大多数食管癌患者就诊时已处于晚期,多数已转移,不宜手术,预后很差。为提高食管癌患者寿命和生活质量,2008年1月-2010年3月,笔者应用启膈散加减联合化疗治疗中晚期食管癌,并同时以单纯应用化疗的20例中晚期食管癌患者作对照观察,现将结果报道如下。     

启膈散的研究

启膈散出自《医学心悟》一书,该方组方严谨,配伍得当,多用于治疗食管类疾病且疗效确切.近年来,围绕此方的研究不断深化,临床和药理研究都取得了新进展.根据搜集的文献可以看出,启膈散的临床研究多与治疗食管相关疾病为主,尤其是对于食管癌的治疗应用相对成熟.对其他疗效确切疾病的治疗也多是与"噎膈"症状或病机相近的疾病,这对启膈散...     

建立启膈方UPLC指纹图谱并验证启膈方对食管癌转移的影响

目的：观察启膈方对食管癌细胞迁移及侵袭的抑制作用,并建立启膈方的超高效液相(ultra performance liquid chromatography, UPLC)指纹图谱。方法：制备启膈方冻干粉,将高分化食管癌细胞Eca109分成对照组和启膈方组,应用划痕实验检测经启膈方干预前后食管癌细胞迁移能力的改变,借助荧光显微镜观察启膈方干预前后细胞形态的变化,采用蛋白芯片观察启膈方干预后肿瘤相关生长因子的变化,采用ACQUITY CSH C18(2.1mm×100 mm, 1.7μm)色谱柱,梯度洗脱、流速0.4 mL/min、检测波长254 nm、柱温40℃,并建立启膈方冻干粉UPLC指纹图谱。结果：启膈方组细胞迁移能力明显低于对照组(P<0.05),荧光显微镜观察显示经启膈方干预后细胞形态规则,蛋白芯片结果显示启膈方能够降低肿瘤相关生长因子的表达,10批启隔方冻干粉相似度均在0.9以上,共标定了17个共有峰,指认出7个色谱峰,分别为迷迭香酸、异槲皮苷、丹酚酸A、丹酚酸B、丹酚酸E、金丝桃苷、紫草酸。结论：启膈方能够降低肿瘤相关生长因子的蛋白表达,从而降低食管癌细胞迁移能力,建立...     

基于网络药理学探讨启膈散治疗食管癌的作用机制

目的:基于网络药理学方法探讨启膈散治疗食管癌的可能作用机制。方法:在中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)及中药成分数据库(TCMID)筛选并收集启膈散的活性成分及其对应靶标。利用Uniprot数据库获取药物活性成分对应靶标的基因,并与通过人类基因组注释数据库(GeneCards)所获得的人食管癌相关基因做对比,获得启膈散与食管癌重合的潜在作用靶标基因。使用Cytoscape3.6.1软件绘制启膈散的活性成分-作用靶标网络图。通过String数据库获取潜在作用靶标之间的互作关系,并导入Cytoscape3.6.1软件构建靶蛋白互相作用网络图。利用DAVID数据库对启膈散治疗食管癌的潜在作用靶标进行Go分类富集分析和KEGG通路富集分析,并运行R语言得到其高级气泡图。结果:从启膈散中共得到88个候选活性成分,包括槲皮素(quercetin)、β-谷甾醇(beta-sitosterol)、木犀草素(luteolin)、丹参酮ⅡA(tanshinone iia)、柚皮素(naringenin)等,142个潜在作用靶标,包括RAC-α丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(AKT1)、肿瘤抑制因子(TP53)、白细胞介素-6(IL-6)、重组人半胱天冬酶-3(CASP3)、血管内皮生长因子A(VEGFA)等,主要通路有蛋白酪氨酸激酶/信号转导转录激活因子(Jak-STAT)、磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI3K-Akt)、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、核转录因子(NF-kappa B)、肿瘤抑制基因p53等信号通路。结论:启膈散治疗食管癌的作用机制可能与AKT1、TP53、IL-6、CASP3、VEGFA等靶标以及调节Jak-STAT、PI3K-Akt、MAPK、NF-kappa B、p53等信号通路有关。     

启膈散、沙参麦冬汤和通幽汤对人食管癌EC9706细胞Caspase-3介导的细胞凋亡信号转导的影响

目的:研究启膈散、沙参麦冬汤和通幽汤对人食管癌EC9706细胞增殖影响,并从Caspase-3介导的细胞凋亡信号转导通路探讨三方作用机制。方法:体外培养食管鳞癌细胞株EC9706细胞,分别加入启膈散、沙参麦冬汤和通幽汤提取液培养处理细胞,通过MTT染色观察细胞增殖变化,通过Western blot法检测Caspase-3介导的细胞凋亡信号转导通路蛋白表达。结果:启膈散、沙参麦冬汤和通幽汤的IC50值分别是1462、1232、2875μg/m L,均可促进Caspase-3蛋白表达而诱导细胞凋亡,而Cyt.C蛋白表达较弱;启膈散和沙参麦冬汤对FADD、Fas、TNFR1和DR5蛋白表达有不同程度地影响。结论:三方可通过激活Caspase-3诱导细胞凋亡,其中启膈散主要通过非依赖FADD死亡受体途径,沙参麦冬汤主要通过依赖FADD死亡受体途径,通幽汤可能通过其他凋亡蛋白参与的上游信号途径而激活Caspase-3致细胞凋亡。     

启膈散加减联合同步放化疗治疗中晚期食管癌30例临 床 研 究

本研究采用启膈散加减联合同步放化疗治疗中晚期食管癌30例,并与单纯放化疗的对照组比较,现报道如下。     

启膈散协同顺铂抑制食管癌EC9706细胞生长与miR-21的关系

目的:观察启膈散含药血清联合顺铂对人食管癌细胞EC9706的增殖效应,从miR-21探讨其作用机制。方法:制备启膈散含药血清,MTT法筛选其最佳作用浓度;PCR检测miR-21、PDCD4 mRNA和PTEN mRNA的表达情况;Western-blot检测蛋白PDCD4、PTEN的表达水平。结果:5%含药血清的浓度作用效果最为显著(q>1)。与5%对照血清组比较,除5%含药血清PDCD、PTEN mRNA和0.5μg/m L顺铂组的PTEN mRNA表达量下降外,其余各组的miR-21、PDCD4 mRNA和PTEN mRNA表达均升高(P<0.05);顺铂联合含药血清后,两组miR-21表达和联合高浓度顺铂组的PDCD4 mRNA均比其单用下降(P<0.05),而两组PTEN mRNA和联合低浓度组的PDCD4 mRNA的表达则升高(P<0.05)。与对照组相比,各组PDCD4蛋白表达量升高P<0.05;高浓度顺铂联合含药血清组比单用高顺铂组PDCD4蛋白表达量升高(P<0.05),低浓度顺铂的两组变化不明显(P>0.05);两个浓度顺铂联合含药血清时PTEN的表达量均高于单独使用顺铂(P<0.05)。结论:启膈散能够增加EC9706对顺铂的敏感性,可能是通过miR-21与其调控的下游基因PDCD4与PTEN共同参与完成。     

启膈散对食管癌Eca-9706细胞株诱导血管生成的影响北大核心CSCD

目的:研究启膈散对食管癌血管生成的影响。方法:MTT法检测启膈散醇提物对人食管鳞癌Eca-9706细胞株生长抑制作用,收集其IC50浓度的Eca-9706细胞条件培养基,以鸡胚绒毛尿囊膜模型、MTT法、迁移试验和小管形成试验观察条件培养基对血管生成、人脐静脉内皮细胞增殖、迁移和小管形成的影响,ELISA法检测Eca-9706细胞和人脐静脉内皮细胞培养基上清VEGF、IL-6含量。结果:启膈散醇提物可明显抑制Eca-9706细胞增殖,具一定量效关系,IC50为96μg/m L。Eca-9706细胞条件培养基显著增加CAM生成的血管总面积,促进人脐静脉内皮细胞增殖、迁移和小管形成;启膈散醇提物可减少Eca-9706细胞条件培养下CAM血管生成,人脐静脉内皮细胞增殖和小管形成,但增加内皮细胞迁移。启膈散醇提物可减少内皮细胞分泌IL-6和VEGF,但在Eca-9706细胞却使之增加。结论:启膈散醇提物可抑制Eca-9706细胞所致血管生成、内皮细胞增殖和小管形成,增加内皮细胞迁移,减少内皮细胞分泌VEGF和IL-6。