复方活血汤对再生障碍性贫血小鼠骨髓造血细胞粘附分子及细胞周期蛋白表达作用

目的：探讨复方活血汤（简称中药）对免疫诱导的再生障碍性贫血（再障）小鼠骨髓造血细胞粘附分子及细胞周期蛋白表达的作用。方法：建立免疫诱导的再障小鼠模型，喂饲１００％复方活血汤每次０２ｍｌ，每日２次，第１３日用流式细胞仪检测小鼠骨髓单个核细胞β１整合素家族（ＣＤ４９ｄ／ＣＤ２９，α４β１；又称ＶｅｒｙＬａｔｅＡｎｔｉｇｅｎｓ，ＶＬＡ家族）及细胞周期蛋白Ｄ２的表达水平。结果：中药组ＣＤ４９ｄ表达明显高于再障组（Ｐ＜００５），且与正常组无明显差异；中药组细胞周期蛋白Ｄ２表达明显高于再障组（Ｐ＜００１）；而其Ｇ０＋Ｇ１期细胞数显著低于再障组（Ｐ＜００１）。结论：复方活血汤能增强免疫再障小鼠骨髓造血细胞粘附分子ＣＤ４９ｄ和细胞周期蛋白Ｄ２的表达，促进造血细胞的增生。     

复方活血汤对再生障碍性贫血小鼠骨髓造血细胞粘附分子 …

目的：探讨复方活血汤对免疫诱导的再生障碍性贫血小鼠骨髓造血细胞粘附分子及细胞周期蛋白表达的作用。方法;建立免疫诱导的再障小鼠模型,喂饲１００％复方活血汤每次０．２ｍｌ,每日２次,第１３日用流式细胞仪检测小鼠骨髓单个核细胞β１整合素家族及细胞周期蛋白Ｄ２的表达水平。结果：中药组ＣＤ４９ｄ表达明显高于再障组,且与正常组无明显差异;中药组细胞周期蛋白Ｄ２表达明显高于再障组;而其Ｇ０＋Ｇ１期细胞数显著低于     

炙甘草汤对"再障"模型小鼠骨髓造血组织影响的实验研究

目的：探讨炙甘草汤治病再生障碍性贫血的作用机理。方法：将成年健康小鼠随机分为4组，除正常组外，其余各组一次全身进行3.0Gy^60Co-γ射线照射，在照射第三天行环磷酰胺和氯霉素腹腔注射建成再障模型，观察该方对再障模型小鼠骨髓造血细胞，Caspeasc-3（天冬酰酸特异性半胱胺酸蛋白酶），Ki-67（人抗增殖细胞核抗原）的影响。结果：经炙甘草汤治疗的再障小鼠比模型组的再障小鼠在骨髓造血细胞上和Ki-67表达上明显提高，经炙甘草汤治疗的再障小鼠比模型组的再障小鼠在Caspease-3表达上明显减低。结论：炙甘草汤对再障小鼠造血细胞具有明显的保护和修复作用，对抑制细胞凋亡和促进细胞增生也有一定的作用。     

补肾中药对免疫介导的再障小鼠IL－1、IL－2、IL－6活性的影响

６０Ｃｏ照射所致再障小鼠ＩＬ－１显著低于正常，补肾中药（补肾生髓Ⅰ号方）治疗后，ＩＬ－１活性明显增加；再障小鼠ＩＬ－６活性显著低于正常，治疗后ＩＬ－６水平增高至接近正常，且与ＩＬ－１呈显著正相关（ｒ＝０．９０４）；再障小鼠ＩＬ－２的产生较正常明显增多，治疗组ＩＬ－２水平虽有所下降但无统计学意义。结果表明补肾中药可通过调节免疫活性因子ＩＬ－１、ＩＬ－６、ＩＬ－６的活性而促进骨髓造血重建。     

复方活血汤对辐射损伤小鼠骨髓基质细胞粘附功能的影响

目的：研究常用活血化瘀中药对急性放射损伤小鼠骨髓基质细胞粘附功能的影响。方法：小鼠接受８ＧＹ＾６０Ｃｏγ射线照射后立即腹腔注射１００％复方活血汤液０．２ｍｌ，每天２次，连续６天，第７天取股骨骨髓制备有核细胞（ＢＭＣ）悬液，按长期骨髓细胞培养技术，第１２天计数成纤维细胞集落形成单位（ＣＦＵ－Ｆ），第２８天观察培养的基质细胞层对正常小鼠ＢＭＣ的粘附能力。结果：正常小鼠骨髓培养的基质细胞层粘附正常小鼠Ｂ     

川芎嗪对骨髓移植小鼠骨髓造血的影响

目的：探讨川芎嗪对同基因骨髓移植（bone marrow transplantation,BMT)小鼠BMT后骨髓造血的影响。方法：建立典型同基因BMT小鼠模型，随机分成两组：骨髓移植（BMT）组和BMT加川芎嗪处理组（川芎嗪组），另设正常组（未做任何处理）。BMT组胃饲生理盐水，每次0.2ml/kw，每天2次。川芎嗪组胃饲磷酸川芎嗪注射液，每次0.2ml/只，每天2次。分别于BMT后第1、7、14天观察外周血细胞，骨髓单个核细胞（BMMNC），采用免疫组化SABC－AP法测定骨髓组织切片中硫酸肝素（HS）表达水平；基质细胞来源因子－1（stromal derived factor,SDF-1)的表达水平；CXC趋化因子受体4（CXCR4）表达水平；基质细胞来源因子－1（stromal derived factor,SDF-1)的表达水平；CXC趋化因子受体4（CXCR4）表达水平。结果：川芎嗪组第7、14天外周血白细胞、红细胞、血小板、BMMNC及CXCR4、HS、SDF－1表达水平均显著高于BMT组（P＜0．05或P＜0．01）。结论：川芎嗪能够在骨髓移植造血重建早期促进骨髓造血。     

复方活血汤对免疫诱导再生障碍性贫血小鼠骨髓微环境的 …

目的：探讨临床上治疗再生障碍性贫血加用活血化瘀药物提高疗效的机制。方法：建立免疫介导的再障小鼠模型，胃饲１００％复方活血汤注身线次０．２ｍｌ，每天２次，每１０天观察骨髓组织学、体外成纤维细胞集落形成单位（ＣＦＵ－Ｆ）、培养基质细胞层的附能力、骨髓氧分压（ＰＯ２）。结果：昨方活血汤组小鼠白细胞计数，骨髓有核细胞计数，骨髓造血组织容量、ＣＦＵ－Ｆ计数，均较再障组有明显升高；且基质细胞粘附功能、骨髓ＰＯ     

川芎嗪对急性放射损伤小鼠骨髓碱性成纤维细胞生长因子及其受体表达水平的影响

目的 探讨急性放射损伤小鼠骨髓碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)及其受体(basic fibroblast growth factor receptor,bFGFR)的表达及川芎嗪对其影响。方法 56只清洁级昆明小鼠,随机分为3组：正常组,急性放射损伤对照组,川芎嗪组。将对照组和川芎嗪组小鼠用6．0Gy^60Coγ射线一次性全身均匀照射,吸收剂量率为0．56Gy／min。照射后即分别胃饲生理盐水0．2ml／只及川芎嗪2mg／只,每天2次,连续13天。分别于照射后第3、7、14天颈椎脱臼法处死小鼠,取双侧股骨骨髓细胞制备单个核细胞(bone marrow mono-nuclear cells,BMMNC)悬液,用流式细胞仪检测小鼠BMMNC表面bFGFR的表达水平;取单侧肱骨切片后用免疫组织化学SABC—AP法检测小鼠骨髓组织中bFGF的表达水平。结果 急性放射损伤后第3、7、14天,对照组、川芎嗪组小鼠骨髓组织中bFGF表达显著低于正常组(P<0．05或P<0．01),同一时间点川芎嗪组bFGF、bFGFR的表达均显著高于对照组(P<0．05或P<0．01)。结论 川芎嗪通过促进骨髓组织中bFGF、BMMNC表面bFGFR的表达加速骨髓造血微环境的修复,可能是川芎嗪促进急性放射损伤后骨髓造血重建机制之一。     

雷公藤多甙在胰岛移植治疗I型糖尿病中的作用

对３０例接受胰岛移植后服用雷公藤多甙（ＴⅡ）的Ｉ型糖尿病患者（ＴⅡ组）与２４例胰岛移植后未应用任何免疫抑制剂的患者（对照组），分别在移植前及后１５天、１个月、６个月、１年检测外周血Ｔ细胞亚群、血清Ｃ肽，并与２０例健康人作对照。结果：移植前两组患者ＣＤ２．ＣＤ４均明显低于正常（Ｐ＜０．０１），ＣＤ４／ＣＤ８比值在１．２－２．０之间，移植后两组患者ＣＤ２、ＣＤ４均升 高，ＴⅡ组接近正常（Ｐ＞０．０５）     

中药葛根、吴茱萸对双氢埃托啡耐受小鼠的影响

目的：探讨中药对延缓ＤＨＥ耐受小鼠脑内的下丘脑以及杏仁核ＣＣＫｍ ＲＮＡ 表达的影响。方法：采用热板法,以添足底反应潜伏期为痛阈。Ｑ５００ＩＷ 软包分析小鼠脑内ＣＣＫｍ ＲＮＡ 表达量。结果：小鼠接受混合中药后,从第３ｄ 开始到第７ｄ 为止,ＡＵＣ值一直保持较高的水平。第７ｄ ＡＵＣ值与单纯ＤＨＥ组比较,前者为（４４５８．４±１３５７．６）,而后者（１７７３．６±１１４４．２）,两者存在差异有显著意义（Ｐ＜ ０．０５）。ＣＣＫｍ ＲＮＡ 原位杂交信号经图像处理结果：下丘脑和杏仁核ＣＣＫｍ ＲＮＡ 表达,耐受组分别为１０３．９２和１８１．１９,明显高于混合中药组和对照组（４５．７２和７０．１３）Ｐ＜ ０．０５,而中药组为５１．０３和９２．２９与对照组相比无明显差异Ｐ＞ ０．０５。结论：ＤＨＥ耐受小鼠,脑内下丘脑和杏仁核ＣＣＫｍ ＲＮＡ 表达的增加,可能是产生ＤＨＥ耐受的原因之一。     

复方活血汤对免疫诱导再生障碍性贫血小鼠骨髓微环境的作用研究

目的 :探讨临床上治疗再生障碍性贫血 (再障 )加用活血化瘀药物提高疗效的机制。方法 :建立免疫介导的再障小鼠模型 ,胃饲 1 0 0 %复方活血汤注射液每次 0 2ml,每天 2次 ,第 1 0天观察骨髓组织学、体外成纤维细胞集落形成单位 (CFU -F)、培养基质细胞层的粘附能力 ,骨髓氧分压 (PO2 )。结果 :复方活血汤组小鼠白细胞计数 ,骨髓有核细胞计数 ,骨髓造血组织容量、CFU -F计数 ,均较再障组有明显升高 (P <0 0 1 ) ;且基质细胞粘附功能、骨髓PO2 已恢复至正常。结论 :复方活血汤可促进再障小鼠骨髓微环境的修复及供氧 ,从而促进骨髓造血。     

补肾化痰活血中药对再生障碍性贫血小鼠骨髓CD_(34)~+和细胞因子表达的影响

目的:观察和比较补肾化痰活血中药对再生障碍性贫血小鼠骨髓造血生长因子SCF mRNA、GM-CSF mRNA表达和骨髓CD34+的影响。方法:建立再障小鼠模型,各组小鼠分别胃饲生理盐水、补肾化痰活血中药、康力龙和再障生血片,连续喂养14天后,采集骨髓进行单个核细胞培养,应用流式细胞术检测骨髓CD3+4抗原水平;应用RT-PCR方法检测SCFmRNA、GM-CSF mRNA表达水平。结果:①模型组骨髓CD3+4抗原检测结果显著低于正常对照组,治疗后各组小鼠骨髓CD3+4抗原水平明显提高,差异有显著性。②模型组骨髓造血生长因子SCF mRNA、GM-CSF mRNA表达水平均低于正常对照组,治疗后各组小鼠骨髓造血生长因子表达水平均明显提高,差异均有显著性。结论:补肾化痰活血方可能通过增强再障小鼠骨髓造血生长因子GM-CSFmRNA、SCFmRNA表达水平,刺激造血细胞分化成熟,达到调控骨髓造血的目的。     

补肾活血法对再障小鼠骨髓基质黏附分子的影响

目的:观察补肾活血法对再障小鼠骨髓基质黏附能力及黏附分子CD106/CD49d的影响。方法:用免疫介导法复制小鼠再障模型,并给予补肾活血方药(参芪益肾饮),体外培养再障小鼠骨髓基质细胞,碘化丙啶染色检测其细胞周期,用流式细胞仪测定骨髓基质黏附分子表达水平。结果:再障小鼠骨髓基质细胞绝大部分处于G0/G1期,处于S期及G2+M期的细胞比例明显降低,中药组小鼠骨髓基质细胞处于S期及G2+M期的比例较模型组小鼠明显增加;模型组骨髓基质细胞黏附能力下降,中药组基质细胞黏附能力回升,与正常组无区别;模型组骨髓基质细胞CD106、CD49d表达均降低,中药组CD106、CD49d水平有所升高。结论:补肾活血法提高再障小鼠骨髓基质黏附分子表达水平,可能是其治疗再障的机制之一。     

三七总皂甙对免疫介导性再生障碍性贫血小鼠造血祖细胞的增殖作用

目的：探讨三七总皂甙(PNS)对免疫介导性再生障碍性贫血(再障)小鼠模型血细胞生成的作用。方法：采用免疫介导法进行再障造模,Balb／c小鼠经^60Coγ射线亚致死量照射后,自尾静脉输入DBA／2小鼠的淋巴细胞,随机分成4组,即模型组、PNS治疗高、中和低剂量组(每只3．2、1．6、0．8mg／d),并设正常对照组。腹腔注射给药,模型组和正常对照组注射生理盐水。治疗12天后,做血白细胞计数、骨髓病理检查和粒系、红系造血祖细胞(CFU-GM、CFU-E)集落培养。结果：(1)PNS升高白细胞数,与模型组比较,PNS高、中和低剂量组的白细胞数提高率分别为(34．3±2．9)％,(29．2±1．7)％和(14．5±1．6)％(P<0．01或P<0．05)。(2)改善骨髓抑制,骨髓病理检查模型组出现大片空白区,被大量的脂肪组织代替,而PNS治疗组造血组织结构较完整,造血细胞量丰富。(3)促进造血祖细胞增殖,高、中和低剂量PNS对CFU—GM集落提高率分别为(64．4±2．8)％、(67．3±2．4)％和(21．9±1．8)％(均P<0．01);CFU—E集落的提高率分别为(31．9±3．6)％、(20．7±2．4)％和(12．8±2．6)％(P<0．01或P<0．05)。结论：免疫介导性再障小鼠在骨髓抑制、造血功能低下时,PNS通过促进骨髓粒系、红系造血祖细胞的增殖,改善骨髓造血组织增生,从而促进血细胞的生成。     

参麦注射液对慢性再生障碍性贫血患者血清肿瘤坏死因子及骨髓CD34+细胞凋亡的影响

目的:探讨参麦注射液治疗慢性再生障碍性贫血(chronic aplastic anemia,CAA)的疗效及其作用机制。方法:将65例CAA患者随机分为治疗组和对照组,治疗组采用参麦注射液配合西药常规治疗,对照组单用西药治疗,治疗后进行疗效评价,并分别于治疗前后检测患者血清肿瘤坏死因子(tumornecrosisfactor-α,TNF-α)水平,以及采用免疫磁珠分离系统(MACS)分离纯化骨髓CD₃₄⁺细胞,用DNA末端原位标记(TUNEL)技术分析骨髓CD₃₄⁺细胞原位凋亡状况。结果:治疗组总有效率为63.6%,对照组总有效率为40.6%,治疗组疗效明显优于对照组(P<0.01);治疗前,CAA患者血清TNF-α浓度、骨髓CD₃₄⁺细胞凋亡率均明显高于健康对照组(P<0.01),治疗后,治疗组血清TNF-α浓度明显降低(P<0.01),骨髓CD₃₄⁺细胞凋亡率减低(P<0.05),与对照组相比均有显著差异(P<0.05)。结论:参麦注射液治疗CAA疗效确切,其机制可能为降低CAA患者血清TNE-α浓度,减少骨髓CD₃₄⁺细胞凋亡。     

益髓生血颗粒对AA大鼠CD4 + CD25 + Foxp3调节性T细胞的影响

目的：观察益髓生血颗粒对再生障碍性贫血（Aplastic Anemia,AA）大鼠CD4 + CD25 + 调节性T细胞（Regulatory T Cell,Treg细胞）的影响及其治疗AA的作用机制。方法：取雄性SD大鼠按体重随机分组。其中模型组连续7周隔天皮下注射苯（1 mL ? kg -1 ）、取材10天前开始腹腔注射环磷酰胺（25 mL ? kg -1 ）,连续3天,第4周将模型组大鼠按体重随机分为模型组、司坦唑醇组、益髓生血颗粒组,灌胃给药。正常组及模型对照组给予等体积生理盐水。实验结束时,检测外周血WBC、RBC、HGB、PLT;制备血涂片、骨髓涂片;免疫组织化学法检测脾组织Treg细胞Foxp3蛋白表达;RT-PCR法检测骨髓组织Foxp3 mRNA的表达。结果：与正常组比较,模型组WBC、RBC、HGB、PLT均显著减少（P<0.01）,血涂片示血细胞通透性差、白细胞减少、退化细胞增多,骨髓涂片示脂肪滴明显增加、造血细胞均明显降低、非造血细胞增多;经益髓生血颗粒组治疗后WBC、RBC、HGB、PLT均显著增加（P<0.01）,血涂片及骨髓涂片显示细胞通透性好转、形态趋于正常、脂肪滴明显减少,造血细胞均明显增加,脾组织Foxp3蛋白及骨髓组织Foxp3 mRNA表达明显升高（P<0.01）。结论：益髓生血颗粒可上调Foxp3的因及蛋白表达,调控AA免疫功能,进而改善AA免疫环境,促进骨髓造血功能的恢复,发挥治疗AA的重要作用。     

生血丸1号对免疫介导的再生障碍性贫血小鼠骨髓增殖及细胞周期蛋白D_3表达的影响

目的:探讨生血丸1号(简称生血丸)对免疫介导的再生障碍性贫血(简称再障)小鼠骨髓增殖及细胞周期蛋白 D_3(Cyclin D_3)表达的影响。方法:建立免疫介导的再障模型,胃饲生血丸1号水提液,每次0.1ml/10g 体重,每天2次,连续9天,并以康力隆为对照。第10天处死动物,采用流式细胞仪检测小鼠骨髓有核细胞(BMNC)G_0/G_1期百分率,免疫组织化学超敏 S-AP 法检测股骨中段骨髓 Cyclin D_3表达水平。结果:生血丸组 G_0/G_1期细胞百分率较再障模型组显著降低(P<0.05),而 Cyclin D_3表达水平明显高于再障模型组(P<0.01),两项指标之间呈显著负相关(r=-0.8219,P<0.05)。结论:生血丸1号能提高免疫介导的再障小鼠骨髓 Cyclin D_3的表达水平,从而促进造血细胞由 G_0/G_1期进入增殖期。     

益血生髓颗粒对苯试剂诱导的再生障碍性贫血小鼠造血功能及T细胞亚群的影响

目的:研究益血生髓颗粒对苯试剂诱导的再生障碍性贫血(AA)模型小鼠造血及免疫功能的影响。方法:72只SPF级BALB/c小鼠随机分为正常对照组、AA模型组、益血生髓颗粒低剂量组(低剂量组)、益血生髓颗粒高剂量组(高剂量组)和司坦唑醇阳性药组(阳性对照组),除正常对照组其他各组小鼠注射苯和玉米油混合液2 ml/kg,每周4次,建立AA模型,正常组注射同体积玉米油,7周后,低剂量组用药1.2 g/(kg·d),高剂量组用药4.8 g/(kg·d),阳性对照药组予司坦唑醇2 mg/(kg·d),连续给药15 d后,检测血细胞(WBC、RBC、HGB、PLT)、骨髓有核细胞数(BMNC)、T淋巴细胞亚群(CD3⁺CD4⁺、CD3⁺CD8⁺、Th₁、Th₂)、血清白介素2(IL-2)、粒细胞集落刺激因子(G-CSF)、巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)和HE染色骨髓病理学的变化情况。结果:与AA模型组比较,低、高剂量组和阳性对照组小鼠外周血四种血细胞数量、血清M-CSF、CD3⁺CD4⁺T和CD4⁺/CD8⁺比值升高(P<0.05),CD3⁺CD8⁺T、IL-2水平和Th₂细胞百分数降低(P<0.05),骨髓病理学显示骨髓组织增生较模型组活跃,造血细胞增多,非造血细胞减少。结论:益血生髓颗粒可通过对AA小鼠T细胞亚群的免疫调节和促进造血细胞增殖达到一定恢复造血功能的作用。