川芎嗪注射液对体外培养软骨细胞影响的实验研究

目的：探讨川芎嗪对骨性关节炎的药理效应及作用机理。方法，采用家兔关节软骨细胞体外培养模型。加入不同浓度的川芎嗪药物，观察软骨细胞的增殖及总蛋白的合成，结果川节嗪不影响软骨细胞的活性，8%的川芎嗪可显著提高体外培养关节软骨细胞的增殖，4%-16%的川芎嗪对细胞蛋白质合成有促进作用，与对照组相比有非常显著意义。结论：川芎嗪的有效成分可促进软骨细胞分泌合成代谢因子，刺激细胞分泌合成代谢因子，刺激细胞增殖和蛋白质合成。     

清香散对湿热证大鼠中分子与巯基物质的影响

1　材料1 1　动物　清洁级Ｗｉｓｔａｒ大鼠 36只 ,购自华南实验动物中心 ,雌雄各半 ,体重 2 10～ 2 5 0ｇ ,随机分成 3组 ,每组各 12只。1 2　试剂　ＨＣＬＯ4由第一军医大学生化教研室提供 ;5 ,5’ -二巯基-2 ,2 -二硝基苯甲酸 (ＤＴＮＢ )为ＳＩＧＭＡ公司分装产品 ,批号 :ＢＲ0 90 3;Ｔｒｉｓ -ＨＣＬｂｕｆｆｅｒ购自ａｍｅｒｓｈａｍｐｈａｒｍａｃｉａ生物公司 ,批号 :ＵＳ2 2 6 39。清香散由香薷 15ｇ、地胆草 15ｇ、柴胡 10ｇ、黄芩 10ｇ、石菖蒲9ｇ、郁金 9ｇ、白术 10ｇ、茯苓 10ｇ等组成。由本校中药制剂室制成 1 2ｇ/ｍｌ生药…     

川芎嗪对放射损伤小鼠骨髓基质细胞FAK表达的影响

探讨川芎嗪对放射损伤小鼠骨髓基质细胞焦点黏附激酶（FAK）表达的影响及其意义。利用流式细胞仪检测骨髓基质细胞的细胞周期及凋亡率，蛋白质免疫印迹（Western blot)法检测骨髓基质细胞中FAK的表达水平，放射损伤后骨髓基质细胞明显阻滞于G0－G1期，凋亡率增加，同时FAK的表达明显下降，用川芎嗪注射治疗后骨髓基质细胞S期合成活跃，凋亡率下降，FAK的表达增加，川芎嗪改善放射损伤小鼠骨髓微环境，促进骨髓基质细胞增生可能是通过增强FAK的表达实现的。     

鼻敏灵口服液对实验性变应性鼻炎大鼠血浆中分子物质、巯基含量的影响

目的探讨中分子物质及巯基与变应性鼻炎是否有关,并观察鼻敏灵口服液对实验性变应性鼻炎大鼠血浆中分子物质及巯基含量的影响。方法用紫外线吸收法测定血浆中分子物质含量;用Ｅｌｍａｎ法测定血浆总巯基含量。结果变应性鼻炎大鼠血浆中分子物质及巯基含量下降,鼻敏灵口服液能提高其下降的血浆中分子物及巯基含量     

大黄素温敏凝胶对人牙周膜细胞的毒性作用

目的观察大黄素温敏凝胶对人牙周膜细胞的毒性作用,为其治疗牙周病提供依据。方法人牙周膜细胞在不同浓度的大黄素温敏凝胶中体外培养24、48、72、96h,用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定细胞相对增殖率(RGR),判断细胞毒性的级别。结果各组细胞不同时间点相对增殖率均在96%～188%之间,各浓度的大黄素温敏凝胶材料浸提液的细胞毒性均为0级或1级,完全符合生物材料的安全评价标准。结论大黄素温敏凝胶对人牙周膜细胞无毒性,用于牙周病局部治疗具有进一步的研究价值。     

慢性肾炎中医辩证分型与血浆中分子物质关系的研究

为了探讨慢性肾炎患者中医辩证分型与血浆ＭＭＳ之间存在的关系，对２９例慢性肾炎及３１例正常人血浆中分子物质进行测试，结果显示慢性肾炎患者ＭＭＳ明显高于正常人，与血尿素氮和血肌酐的升高呈正相关，且ＭＭＳ的产尿素氮和肌酐改变出现早，由此提示ＭＭＳ能更灵敏反映肾功能的改变，可以将其作为估计肾功能状态的指标。     

川芎嗪与葛根素合用对海马神经元损伤后的影响

目的:探讨β-淀粉样蛋白(amyloid-beta protein,Aβ)对原代培养海马神经元丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活力及乳酸脱氢酶(LDH)漏出量的影响及葛根素与川芎嗪合用对Aβ25~35诱导神经元损伤的保护作用。方法:通过Aβ25~35诱导体外培养的海马神经元,建立阿尔茨海默(AD)细胞模型,检测空白组(正常海马神经元)、模型组、脑复康组(终浓度为50μmol.L-1)、川芎嗪组(终浓度为50μmol.L^-1)、葛根素组(终浓度为60μmol.L^-1),川芎嗪加葛根素组(葛根素注射液终浓度为30μmol.L^-1,川芎嗪注射液终浓度为25μmol.L^-1)对海马神经元SOD活性、MDA含量及LDH漏出量的影响。结果:成功建立海马神经元AD细胞模型,经检测模型组MDA含量及LDH漏出量显著高于空白对照组且SOD活力明显低于空白对照组,差异具有显著意义(P<0.01);脑复康组、川芎嗪加葛根素组MDA含量及LDH漏出量均低于模型组,且SOD活力明显高于模型组,差异均具有显著意义(P<0.01);川芎嗪与葛根素合用组在降低MDA含量及LDH漏出量及提高SOD活性方面的效果显著强于川芎嗪与葛根素单用,差异具有显著意义(P<0.01)。结论:Aβ25~35诱导海马神经元存在自由基损伤,葛根素、川芎嗪能抗自由基损伤,对神经元具有保护作用,且二者合用在抗自由基损伤上具有协同作用。     

川芎嗪、阿魏酸及其配伍对心肌缺血再灌注模型大鼠的保护作用及对黏附分子的影响

目的 观察川芎嗪、阿魏酸及其配伍对心肌缺血再灌注模型大鼠的保护作用.方法 122只SD大鼠随机分为对照组,模型组,假手术组,盐酸川芎嗪高、低剂量(18、9 mg/kg)组,阿魏酸高、低剂量(3、1.5 mg/kg)组及盐酸川芎嗪(9 mg/kg)配伍阿魏酸(1.5 mg/kg)组,舌下iv给药3 d.末次给药后5 min,制备大鼠心肌缺血再灌注模型.再灌后6 h检测血清肌酸磷酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)水平,再灌后24 h检测缺血半暗带黏附分子表达.结果 与假手术组比较,模型组血清CK、LDH显著升高(P<0.05);心脏微血管内皮细胞表达黏附分子水平升高.各用药组不同程度降低血清CK、LDH水平,减少心肌组织E选择素、P选择素、ICAM-1 mRNA表达,其中盐酸川芎嗪配伍阿魏酸作用显著.结论 川芎嗪、阿魏酸及其配伍均可以通过抑制内皮细胞黏附分子E选择素、P选择素、ICAM-1 mRNA表达减轻心肌缺血再灌注损伤,其中盐酸川芎嗪配伍阿魏酸作用显著.     

鼻敏灵口服液对实验性变应性鼻炎大鼠血浆中分子物质,巯 …

目的 探讨中分子物质及巯基与变应性鼻炎是否有关,并观察鼻敏灵口服液对实验性变应性鼻炎大鼠血浆中分子物质及巯基含量的影响。方法 用紫外线吸收法测定血浆中分子物质含量。用Ｅｌｌｍａｎ法测定血浆总巯基含量。结果 变应性鼻炎大鼠血浆中分子物质及巯基含量下降,鼻敏灵口服液能提高其下降的血浆只的及巯基含量。     

体外培养海马神经元糖氧剥夺损伤模型的建立及川芎嗪对其胞内钙离子的影响

目的研究川芎嗪对体外培养海马神经元糖氧剥夺损伤细胞内钙离子[Ca^2＋]i的影响。方法建立体外培养海马神经元糖氧剥夺（OGD）模型,应用激光共聚焦显微技术检测不同剂量川芎嗪对OGD状态下海马神经元内Ca^2＋的影响。结果成功建立海马神经元OGD模型,经检测模型组[Ca^2＋]i高于空白对照组（P〈0．05）;阳性药组和川芎嗪大、中剂量组[Ca^2＋]i均低于模型组（P〈0．05）。结论海马神经元OGD存在钙超载,川芎嗪具有钙拮抗作用,对脑组织有保护作用。     

大黄素诱导人肾上皮HK-2细胞凋亡及内质网应激的介导作用

目的 研究大黄素诱导人肾小管上皮HK-2细胞凋亡的作用及其机制是否与内质网应激有关.方法 不同浓度大黄素处理HK-2细胞不同时间.MTT法检测细胞存活率,实时荧光定量PCR (RT-PCR)检测葡萄糖调节蛋白78 (GRP78)、CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)、转录激活因子3(ATF3)和X盒结合蛋白1(XBP1)的基因表达,Western blotting 法检测caspase-3、GRP78、CHOP、真核生物启动因子2α (eIF2α)的蛋白表达.结果 大黄素以浓度相关方式降低HK-2细胞存活率,诱导caspase-3剪切.RT-PCR检测表明,大黄素能诱导内质网相关基因GRP78、CHOP、ATF3基因表达,Westernblottinh检测结果进一步证实大黄素能诱导GRP78、CHOP的蛋白表达.大黄素还明显诱导eIF2α磷酸化和XBP1 mRNA剪切.在大黄素给药之前给予内质网应激干扰药4-苯基丁酸和salubrinal,能增加HK-2细胞的存活率.结论 大黄素能诱导HK-2凋亡,内质网应激参与了大黄素诱导HK-2细胞凋亡的作用.     

人参总皂苷对人胚胎神经干细胞增殖及定向诱导为多巴胺能神经元的影响

目的：探讨人参总皂苷(TSPG)对人胚胎神经干细胞(NSC)增殖和分化为多巴胺(DA)能神经元的影响。方法：从7～12周人工流产胚胎脑组织中分离培养人胚胎NSC,免疫细胞化学鉴定NSC特异性nestin抗原表达,在NSC的培养体系中加入TSPG,采用流式细胞术和MTT法检测不同浓度TSPG以及TSPG与EGF,bFGF联合应用对人胚胎NSC增殖的影响；经免疫细胞化学检测培养细胞酪氨酸羟化酶(TH)表达,分析不同浓度TSPG以及TSPG与IL-1联合应用对NSC定向诱导为DA能神经元的影响。结果：TSPG对NSC的增殖有促进作用,TSPG与EGF、bFGF联合应用的促增殖作用是EGF和bFGF联合应用时的2倍；TSPG能促进神经干细胞定向分化为DA能神经元,TSPG与IL-1联合诱导的效果是单用IL-1的5倍。结论：TSPG能促进人胚胎NSC的增殖,并能诱导NSC向DA能神经元分化。     

金丝桃苷对原代培养的大鼠心肌细胞缺氧-再给氧损伤的影响

目的探讨金丝桃苷对原代培养的大鼠心肌细胞缺氧-再给氧损伤的保护作用。方法采用显微镜和M TT法观察缺氧-再给氧导致培养的大鼠原代心肌细胞的损伤和金丝桃苷的保护作用;流式细胞术观察金丝桃苷对心肌细胞凋亡的影响;并观察乳酸脱氢酶(LDH)水平的变化和细胞内C a2 浓度的变化。结果金丝桃苷对缺氧-再给氧导致的心肌细胞损伤有一定的保护作用,可以抑制心肌细胞凋亡的发生;0.5~50μm o l/L金丝桃苷可以剂量依赖性地抑制心肌细胞中LDH的形成和细胞内C a2 超载。结论金丝桃苷具有对抗缺氧-再给氧导致心肌细胞损伤的作用,其机制可能与抑制心肌细胞凋亡、钙超载和抗自由基形成有关。     

梅花鹿鹿茸Ⅰ型胶原对大鼠成骨样细胞(ROS1728)的影响及其分子机制的研究

该文研究梅花鹿鹿茸I型胶原(SPC-I)对大鼠成骨样细胞ROS1728的影响,为SPC-I抗骨质疏松的治疗提供理论依据。采用贴壁法培养大鼠成骨样细胞ROS1728,通过CCK-8法检测SPC-I对ROS1728细胞增殖的影响,利用RT-PCR法检测成骨相关基因Runx2,osernix,ALP,Coll-I,OC的表达,利用Western-bolt法检测Runx2蛋白的表达。结果表明SPC-I质量浓度5g·L~(-1)组轻度抑制ROS1728细胞的增殖,但能够明显促进ROS1728细胞特异性转录因子Runx2,osterix m RNA的表达,Runx2蛋白的表达,以及标志基因ALP,Coll-I,OC m RNA的表达(P0.01),并且呈现出时间依赖性。SPC-I质量浓度2.5,10 g·L~(-1)组均明显抑制ROS1728细胞的增殖(P0.01),并抑制相关基因的表达。该实验证明质量浓度5 g·L~(-1)组轻度抑制ROS1728细胞的增殖,但可以明显增强ROS1728细胞的功能,通过调控Runx2基因的表达,促进ROS1728细胞的分化、成熟。     

番酯素诱导人肺癌A549细胞凋亡及其分子机制的实验研究

目的研究番酯素抑制人肺腺癌细胞A549增殖和诱导凋亡的作用及其机制。方法①MTT法观察番酯素对人肺腺癌A549细胞株、人肺腺癌NCI-H460细胞株体外增殖的影响;②流式细胞仪检测番酯素对细胞凋亡的影响。结果番酯素在体外对人肺腺癌细胞A549有一定的抑制作用,且这种抑制作用具有量-效关系,剂量越大,抑制作用越强;细胞经过番酯素处理72 h后,与对照组比较,番酯素各剂量线细胞均出现不同程度的凋亡,且总凋亡随着剂量的增加而增加。结论番酯素具有抑制人肺腺癌细胞A549增殖的作用,可以诱导其凋亡。     

蝎毒多肽干预急性白血病髓外浸润传变的机制

目的:观察蝎毒多肽(PESV)对人白血病NOD/SCID小鼠髓外浸润模型体内uPA、uPAR、MMP2、MMP9表达的影响,探讨PESV干预急性白血病髓外浸润传变的机制。方法:首先选取急性白血病患者骨髓单个核细胞注入经过铯-137源照射的NOD/SCID小鼠体内,建立人白血病NOD/SCID小鼠髓外浸润模型;对实验小鼠随机分组,用Real-time PCR及Western Blot检测PESV治疗后小鼠体内MMP2、MMP9 mRNA和蛋白表达水平,用ELISA法检测小鼠血清uPA及uPAR表达水平。结果:PESV能够抑制模型小鼠体内MMP2、MMP9 mRNA及蛋白水平表达,能够抑制uPA及uPAR过度表达,其抑制效果与PESV浓度具有相关性。结论:PESV通过干预细胞外基质降解机制,阻抑急性白血病髓外浸润传变进展。     

电针对慢性应激抑郁模型大鼠大脑皮层5HT1和5HT2受体数量和结合活性的影响

目的探讨电针"百会"足三里"穴对抑郁症的调节作用.方法复制慢性应激抑郁大鼠模型,施以电针"百会"足三里"穴治疗.采用美国GraphPad Prism 3.02专用统计软件,以非线性回归方法计算最大结合率(Bmax)和平衡解离常数(Kd),推测5-HT1A和5-HT2A的受体数量与结合活性.结果(1)慢性应激抑郁模型大鼠大脑皮层5-HT1受体的Bmax值明显低于正常组(P<0.01),电针可增加其Bmax值.(2)抑郁模型大鼠大脑皮层5-HT2受体的Bmax值明显高于正常组(P<0.01),电针可降低其Bmax值;抑郁模型大鼠5-HT2受体的Kd也高于正常组(P<0.05),电针治疗后Kd值也有所下降.结论5-HT受体功能不平衡是导致抑郁症的重要原因之一,电针"百会"足三里"穴有明显的调节作用.