益气养阴消癓通络中药对早期糖尿病大鼠肾组织p38 MAPK信号通路的影响

目的:探讨益气养阴消癓通络中药对早期糖尿病大鼠肾组织p38MAPK信号通路的作用.方法:将SD大鼠随机分为6组:单纯肾切组、模型组、厄贝沙坦组、中药低、中、高剂量组,按各组相应药物剂量灌胃.于第6周末检测各组大鼠24 h尿蛋白(UPro)量及肾功能水平;肾皮质p38MAPK mRNA,p-p38MAPK蛋白表达水平.结果:厄贝沙坦、中药低、中剂量组与模型组比较Upro量显著下降(P<0.05);治疗组与模型组比较,肾功能明显改善(P<0.05),且p38MAPK mRNA,p-p38MAPK蛋白表达水平显著下降(P<0.05).结论:益气养阴消癓通络中药可能通过抑制p38MAPK信号通路表达,发挥对糖尿病肾病大鼠的治疗作用.     

益气养阴消癥通络中药对糖尿病大鼠肾脏保护作用的研究

目的 探讨益气养阴消癥通络中药对糖尿病大鼠肾脏氧化应激的影响,以分析其对糖尿病肾病治疗作用机理.方法 将SD大鼠随机分为6组:肾切组,模型组,厄贝沙坦组,中药低、中、高剂量组,按各组相应药物剂量灌胃.于第6周末检测各组大鼠24 h尿蛋白(U Pro)量及肾功能水平;肾皮质丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性.结果 厄贝沙坦、中药低、中剂量组与模型组比较Upro量、MDA含量显著下降(P<0.05),SOD活性显著升高(P<0.05);各治疗组与模型组比较肾功能明显改善(P<0.05).结论 益气养阴消癥通络中药可能通过抑制氧化应激反应,发挥对糖尿病大鼠的肾脏保护作用.     

益气养阴消癥通络中药对糖尿病肾病大鼠胃动力障碍的干预作用

目的观察益气养阴消癥通络中药对糖尿病肾病大鼠胃动力障碍的作用及可能机制。方法选择雄性SD大鼠,随机分为对照组,模型组,益气养阴消癥通络中药低、中、高剂量组,用左肾切除术加ip链脲佐菌素(STZ)制备糖尿病肾病模型,对照组只行左肾切除术,益气养阴消癥通络中药低、中、高剂量组分别ig给药5.29、10.58、21.16 g/(kg.d),对照组、模型组大鼠ig相当剂量生理盐水,连续6周。实验结束测定胃排空率;取血清,测定胃泌素、胰高血糖素水平。结果模型组大鼠胃排空率明显下降(P0.05),血清胃泌素水平、胰高血糖素水平较对照组明显升高(P0.05);益气养阴消癥通络中药各组大鼠胃排空率明显升高,大鼠血清胃泌素、胰高血糖素水平明显降低,与模型组比较差异显著(P0.05);血清胃泌素水平、胰高血糖素水平与胃排空率呈明显负相关。结论益气养阴消癥通络中药能明显改善糖尿病肾病大鼠胃排空,其机制可能与降低大鼠血清胃泌素、胰高血糖素水平有关。     

基于TGF-β1/p38MAPK通路探讨益气升清方对糖尿病大鼠肾组织的影响

目的:探讨益气升清方对糖尿病大鼠肾组织TGF-β1/p38MAPK通路的影响。方法:SPF级大鼠60只，正常组10只，其余腹腔注射STZ制备DM模型。成模后随机分为模型组（等量蒸馏水）、厄贝沙坦组［27 mg/(kg·d)］、中药低剂量组［3.465 g/(kg·d)］、中药中剂量组［6.93 g/(kg·d)］、中药高剂量组［13.86 g/(kg·d)］，每组10只，给药8周，检测血糖、Scr、BUN，观察肾组织的病理，用荧光定量PCR和免疫组化法检测TGF-β1、p38MAPK、FN mRNA和蛋白的表达。结果:造模后各组血糖较正常组有显著性升高（P<0.01），但组间比较差异无统计学意义（P>0.05）。模型组大鼠血清BUN、Scr显著增高（P<0.01），肾组织有大量TGF-β1、p38MAPK、FN mRNA及蛋白表达（P<0.01）；与模型组比较，各观察组病理损害明显减轻，血清BUN、Scr明显降低（P<0.01），TGF-β1、p38MAPK、FN mRNA及蛋白表达明显减少（P<0.01），厄贝沙坦组、中药中、高剂量组优于中药低剂量组（P<0.01）。结论:糖尿病大鼠TGF-β1/p38MAPK通路的激活导致肾间质病变，益气升清方可减少TGF-β1、p38MAPK的表达，从而减少FN的沉积，起到保护肾脏的作用。     

复方芩柏颗粒剂对溃疡性结肠炎大鼠结肠黏膜p-p38MAPK、CK2表达的影响

目的:探讨复方芩柏颗粒剂对溃疡性结肠炎大鼠p38MAPK通路的影响及可能的作用机制。方法:将80只SD大鼠随机分为正常组、模型组、阻断剂组和中药组,每组各20只。对除正常组外的其余组大鼠采用TNBS法制备溃疡性结肠炎大鼠模型,造模2周后各组分别予相应药物进行灌胃,采用免疫组化法检测结肠组织中p-p38MAPK、CK2的表达。结果:与正常组比较,模型组、阻断剂组、中药组中p-p38MAPK、CK2的表达水平明显升高,差异具有统计学意义(P0.01);与模型组比较,阻断剂组、中药组中p-p38MAPK、CK2的表达水平明显降低,差异具有统计学意义(P0.01);阻断剂组与中药组p-p38MAPK、CK2的表达水平差异无统计学意义(P0.05)。结论:复方芩柏颗粒剂可能是通过抑制相关蛋白CK2的表达以弱化p38MAPK通路来发挥对溃疡性结肠炎的治疗作用。     

肾安提取液对糖尿病小鼠肾脏TGF-β1和p38MAPK表达的影响

目的探讨肾安提取液对链脲佐菌素诱导(STZ)的糖尿病小鼠肾脏转化生长因子-β1(TGF-β1)和p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)表达的影响。方法 STZ诱导的糖尿病小鼠模型,随机分为模型组、厄贝沙坦组[厄贝沙坦10mg/(kg.d)]、肾安提取液组[肾安提取液9.088 mg/(kg.d)],另设正常对照组,疗程4周。RT-PCR检测肾脏TGF-β1和p38MAPK mRNA的表达;免疫化学法检测肾脏磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)和纤连蛋白(FN)表达;并检测血糖、24 h尿蛋白定量、血尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)、肾质量指数、肾小球硬化指数、肾小球基底膜(GBM)厚度。结果肾安组及厄贝沙坦组肾脏TGF-β1和p38 MAPK mRNA表达较模型组明显降低(P<0.01),肾脏p-p38MAPK和FN的表达较模型组明显减少(P<0.01);24h尿蛋白定量、BUN、Scr、肾质量指数、肾小球硬化指数、GBM厚度均较模型组明显改善(P<0.01);肾安组及厄贝沙坦组间上述指标无显著性差异(P>0.05);模型组、厄贝沙坦组及肾安提取液组间血糖差异无统计学意义(P>0.05)。结论肾安提取液可延缓糖尿病肾病的发生发展,机制可能与抑制TGF-β1和p38MAPK的表达有关。     

知葛通脉汤对糖尿病周围神经病变大鼠背根神经节MAPK / ERK通路的影响

目的:研究知葛通脉汤对糖尿病周围神经病变背根神经节丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)/细胞外调节蛋白激酶(ERK)通路的影响。方法:选取无特定病原体级SD雄性大鼠50只为研究对象,随机选取10只作为对照组,其余40只为研究组,随机分为四组:知葛通脉汤低、中、高剂量组:分别按照每日2.5g/kg、7.5g/kg、15g/kg体重标准灌胃知葛通脉汤,模型组灌胃给予等量生理盐水,连续给药6周,观察记录大鼠背根神经节中磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)、p38MAPK、ERK、磷酸化ERK(p-ERK)活性和表达水平以及p38MAPK、ERKmRNA水平。结果:模型组p-p38MAPK、p-ERK活性和蛋白表达水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P0.05);知葛通脉汤低、中、高剂量组p-p38MAPK、p-ERK活性和蛋白表达水平明显低于模型组(P0.05);知葛通脉汤高剂量组p-p38MAPK、p-ERK活性和蛋白表达水平明显低于低剂量组(P0.05),各组之间p38MAPK、ERK活性和蛋白表达水平无明显差异(P0.05);模型组p38MAPK、ERKmRNA表达水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P0.05);知葛通脉汤低、中、高剂量组p38MAPK、ERKmRNA表达水平明显低于模型组(P0.05);知葛通脉汤高剂量组p38MAPK、ERKmRNA表达水平明显低于低剂量组(P0.05)。结论:知葛通脉汤可降低p-p38MAPK、p-ERK活性和蛋白表达水平,有效抑制背根神经节MAPK/ERK通路。     

肾络通对糖尿病肾病大鼠podocin、CD2AP的影响

目的:探讨肾络通(益气养阴消癥通络为法)对糖尿病肾病大鼠24 h尿白蛋白定量(UAlb)及肾组织podocin、CD2AP的影响。方法:70只大鼠随机选取10只作为正常对照组,其余60只大鼠均行腹腔注射STZ(55 mg·kg-1·d-1)1次,3 d后测空腹血糖≥16.7 mmol/L者按随机数字表法分为模型组、中药组及厄贝沙坦组,按各组相应药物剂量灌胃。于第24周末检测各组大鼠24 h UAlb定量,免疫组化法测肾组织podocin、CD2AP蛋白表达。结果:各治疗组与模型组比较24 h UAlb明显减少,podocin、CD2AP蛋白表达显著增加。结论:益气养阴、消癥通络中药肾络通可能通过减少podocin、CD2AP蛋白的丢失,使肾小球滤过膜的完整性得到一定程度的恢复,而减轻糖尿病肾病大鼠蛋白尿。     

化瘀通络中药对糖尿病肾病大鼠肾脏病理及肾脏TGF-β_1/Smad信号通路的影响

目的分析化瘀通络中药对糖尿病肾病(DN)大鼠肾脏病理及肾脏TGF-β_1/Smad信号通路相关因子表达的影响。方法糖尿病大鼠模型采用高脂饲料联合腹腔注射链脲佐菌素建立,大鼠分为正常对照组、模型组、中药组和厄贝沙坦组,各组相应药物剂量灌胃。灌胃16周检测各组大鼠空腹血糖(FBG)、血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、24 h尿蛋白定量(24hUTP),肾组织行光镜、电镜观察,Real-time PCR检测肾脏TGF-β_1、Smad2、Smad7mRNA的表达。结果与正常对照组比较,模型组各项指标均有差异(P0.05);与模型组比较,两治疗组Scr、BUN、24hUTP及TGF-β_1、Smad2 mRNA表达水平明显下降(P0.05),Smad7 mRNA表达水平明显上升(P0.05),病理损伤明显减轻;与厄贝沙坦组比较,中药组24hUTP明显降低(P0.05)。结论化瘀通络中药对糖尿病肾病大鼠肾脏有保护作用,其机制可能与调节TGF-β1/Smad信号通路有关。     

肾消通络方对糖尿病肾病大鼠血管细胞黏附分子、结缔组织生长因子及纤维粘连蛋白表达的影响

目的初步探索肾消通络方对糖尿病肾病大鼠肾组织血管细胞黏附分子(VCAM)、结缔组织生长因子(CTGF)及纤维粘连蛋白(FN)表达的影响。方法将实验动物分为正常组、模型组、厄贝沙坦组及中药组4组,中药组按生药20g/kg·d进行干预。采用免疫组化法测定肾组织中的VCAM的表达;采用Western blot测定肾组织中CTGF、FN的表达;采用SPSS13.0统计软件进行数据资料分析。结果模型组、厄贝沙坦组、中药组VCAM的表达水平较正常组明显升高;厄贝沙坦组和中药组VCAM的表达水平较模型组有所降低,厄贝沙坦组和中药组之间差异不明显。模型组、厄贝沙坦组、中药组CTGF、FN水平较正常组明显升高(P0.05),中药组、厄贝沙坦组的CTGF、FN水平较模型组明显降低(P0.05),但中药组高于厄贝沙坦组(P0.05)。结论肾消通络方能够降低肾组织中VCAM、CTGF、FN的水平,减少细胞外基质积聚,减轻肾脏纤维化,发挥肾脏保护作用。     

柴朴汤对哮喘模型大鼠气道炎症及ERK/p38 MAPK信号通路的影响

目的:观察柴朴汤对哮喘模型大鼠气道炎症及细胞外信号调节激酶(ERK)/p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号通路的影响。方法:SD大鼠随机分为空白组、模型组、柴朴汤低、中、高(0.75,1.5,3.0 g·kg-1)组,地塞米松组。采用卵蛋白(OVA)致敏激发建立大鼠哮喘模型。柴朴汤低、中、高剂量组于激发前0.5 h给予相应剂量柴朴汤灌胃;地塞米松组于激发前0.5 h给予地塞米松(0.005 g·kg-1)灌胃;模型组于激发前0.5 h给予等体积生理盐水灌胃;空白组以生理盐水代替OVA进行腹腔注射及雾化吸入;隔日1次,共激发28 d。观察各组大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数及分类细胞计数的变化;酶联免疫吸附法(ELISA)检测肺组织磷酸化ERK(p-ERK),磷酸化p38 MAPK(p-p38 MAPK)的活性;实时荧光定量PCR(Real-time PCR)分析检测ERK,p38 MAPK mRNA的表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测ERK,p-ERK,p38MAPK,p-p38 MAPK蛋白的表达;光镜下观察病理组织形态学变化及进行炎症评分。结果:模型组大鼠BALF中细胞总数和分类细胞计数;肺组织p-ERK,p-p38 MAPK的活性,ERK,p38 MAPK mRNA的表达,p-ERK,p-p38 MAPK的表达,炎症评分均明显高于空白组(P0.01);柴朴汤低、中、高剂量组和地塞米松组上述指标则明显低于模型组(P0.05,P0.01)。结论:柴朴汤可改善哮喘模型大鼠气道炎症,其机制可能与其抑制ERK/p38 MAPK信号通路有关。     

祛痰活血颗粒对NAFLD模型大鼠脂肪组织AQP7，p38MAPK表达的影响

目的:探讨祛痰活血颗粒治疗非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠的作用,并探讨其相关的作用机制。方法:40只SD大鼠随机分成正常组(6只),模型组(34只);除正常组外,采用高脂饮食诱导的方法诱导NAFLD大鼠模型,确认造模成功后,将剩余模型组(30只)随机分为5组,每组6只,分别为模型组,祛痰活血颗粒高、中、低剂量组(10,5,2.5 g·kg~(-1)),SB203580组(3 mg·kg~(-1)),分别予以灌胃祛痰活血颗粒及腹腔注射p38MAPK抑制剂SB203580,连续干预4周。苏木素-伊红(HE)及油红O染色观察肝脏病理变化;试剂盒测定血清甘油三酯(TG),总胆固醇(TC),天门冬氨酸氨基转移酶(AST),丙氨酸氨基转移酶(ALT),肝脏TG;实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测脂肪组织水通道蛋白7(AQP7)及p38分裂原激活的蛋白激酶(p38MAPK)mRNA表达,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测肝脏游离脂肪酸(FFA),脂肪组织AQP7和磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠肝脏脂肪变性明显,血清TG,TC,AST,ALT和肝脏TG,FFA明显升高,脂肪组织中AQP7 mRNA及AQP7含量表达降低,p38MAPK mRNA及p-p38MAPK含量升高(P0.05);与模型组比较,祛痰活血颗粒和SB203580可减轻NAFLD大鼠肝脏脂肪变性程度;明显降低NAFLD大鼠的血清TG,TC,AST,ALT,肝脏TG,FFA(P0.05);各中药组和SB203580组大鼠脂肪组织AQP7 mRNA和AQP7含量表达明显升高,p38MAPK mRNA和pp38MAPK含量明显降低(P0.05)。结论:祛痰活血颗粒能减轻或者逆转肝脏的脂肪变性,其机制可能与抑制脂肪组织p38MAPK活化、上调AQP7表达,增加甘油入血代谢,减少进入肝脏的FFA,从而降低肝脏TG蓄积有关。     

Puerarin reduces apoptosis in rat hippocampal neurons cultured in high glucose medium by modulating the p38 mitogen activated protein kinase and c-Jun N-terminal kinase signaling pathways

OBJECTIVE: To investigate the neuroprotective effect of puerarin on rat hippocampal neurons cultured in high glucose medium, and to examine the role of the p38 mitogen activated protein kinase(p38 MAPK) and c-Jun N-terminal kinase(JNK) signaling pathways in this effect.METHODS: Primary cultures of hippocampal neurons were prepared from newborn Sprague Dawley rats. Neuron-specific enolase immunocytochemistry was used to identify neurons. The neurons were cultured with normal medium(control group) or with high-glucose medium(high-glucose group),and puerarin(puerarin group), a p38 MAPK inhibitor(SB239063; p38 MAPK inhibitor group) or a JNK inhibitor(SP600125; JNK inhibitor group) were added. After 72 h of treatment, terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated d UTP nick end labeling assay was performed to detect apoptosis, and western blotting was used to assess protein levels of p-p38, p38, p-JNK and JNK.RESULTS: In the high-glucose group, the neuronal apoptosis rate and the p-p38/p38 and p-JNK/JNK ratios were higher than in the control group. The p38 MAPK and JNK inhibitors prevented this increase in the apoptosis rate. The apoptosis rates in the puerarin group, the p38 MAPK inhibitor group and the JNK inhibitor group were significantly decreased compared with the high-glucose group.Moreover, protein levels of p-p38 and p-JNK were significantly reduced, and the p-p38/p38 and p-JNK/JNK ratios were decreased in the puerarin group compared with the high-glucose group. In addition, compared with the high-glucose group,p-p38 levels and the p-p38/p38 ratio were reduced in the p38 MAPK inhibitor group, and p-JNK levels and the p-JNK/JNK ratio were decreased in the JNK inhibitor group.CONCLUSION: Puerarin attenuates neuronal apoptosis induced by high glucose by reducing the phosphorylation of p38 and JNK.     

红花黄色素调控p38MAPK信号通路保护大鼠糖尿病视网膜神经节细胞的实验研究

目的探讨红花黄色素通过调控p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号通路对糖尿病(DM)大鼠视网膜神经节细胞(RGC)的保护作用。方法取50只大鼠,其中40只采用单次ip链脲佐菌素法制备DM大鼠模型,并将其随机分为模型组和红花黄色素低、中、高剂量组,其余10只为对照组;红花黄色素低、中、高剂量组分别ip 20、40、80 mg/kg红花黄色素,对照组和模型组ip等量生理盐水溶液,连续给药6周。观察大鼠一般状态,采用苏木精-伊红(HE)染色法观察RGC形态学变化并计数;采用原位凋亡(TUNEL)法检测并对比RGC凋亡率;采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法和蛋白免疫印迹法检测各组大鼠视网膜组织中p38MAPK、磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(Caspasae-3)、血管内皮生长因子(VEGF)m RNA和蛋白表达情况,并对比p-p38MAPK与p38MAPK蛋白表达比值。结果实验期间所有大鼠均存活,对照组大鼠无异常;模型组大鼠血糖较高、饮食量及尿量较大,体质量减轻;红花黄色素低、中、高剂量组大鼠各指标较模型组均有所改善。病理学观察发现,对照组大鼠视网膜各层细胞均无异常;模型组大鼠RGC排列紊乱、细胞核稀疏,双极细胞层及感光细胞层细胞数目减少,排列稀疏;红花黄色素低、中、高剂量组大鼠RGC及外层双极细胞层和感光细胞层异常程度均较模型组减轻,其中红花黄色素高剂量组减轻最为明显。与对照组比较,模型组大鼠RGC数量显著减少(P0.05),凋亡率显著升高(P0.05),视网膜中Caspase-3、VEGFm RNA及蛋白表达水平显著升高(P0.05),p-p38MAPK/p38MAPK值显著升高(P0.05);与模型组比较,红花黄色素低、中、高剂量组大鼠RGC数量显著增多(P0.05),RGC凋亡率显著降低(P0.05),视网膜Caspase-3、VEGF mRNA及蛋白表达水平显著降低(P0.05),p-p38MAPK/p38MAPK值显著降低(P0.05),且各剂量组间比较差异显著(P0.05)。结论红花黄色素可通过抑制p38MAPK信号通路保护DM大鼠RGC,减少其凋亡,其中80 mg/kg的红花黄色素保护作用最佳。     

Huangkui capsule,an extract from Abelmoschus manihot (L.) medic,ameliorates adriamycin-induced renal inflammation and glomerular injury via inhibiting p38MAPK signaling pathway activity in rats

Ethnopharmacological relevance

Abelmoschus manihot (L.) medic (AM) is a natural medicinal plant used for the treatment of inflammatory diseases in China. Huangkui capsule (HKC), an extract from AM, has been proved clinically effective in improving renal inflammation and glomerular injury in chronic kidney disease (CKD). However, the dose-effects and the mechanisms involved in vivo are still unclear.

Aim of the study

This study was performed to examine the dose-effects of HKC on renal inflammation and glomerular lesion in adriamycin-induced nephropathy (ADRN), then to clarify the mechanisms in vivo of HKC by investigating its actions on modulating the activation of p38 mitogen-activated protein kinase (p38MAPK) signaling pathway.

Materials and methods

The rats with chronic ADRN, created by the unilateral nephrectomy and twice adriamycin injections (ADR, 4 mg/kg and 2 mg/kg) within 4 weeks, were divided into four groups, a Sham group, a Vehicle group, a high-dose HKC group, and a low-dose HKC group, and that, sacrificed at the end of the 4th week after the administration. The rat's general status, renal morphological appearance, proteinuria, blood biochemical parameters, glomerular morphological changes, podocyte shape, and macrophage (ED1⁺ and ED3⁺ cells) infiltration in glomeruli were examined, respectively. The protein expressions of inflammatory cytokines including tumor necrosis factor (TNF)-α and interleukin (IL)-2, as well as p38MAPK signaling molecules such as transforming growth factor (TGF)-β1, p38MAPK, and phosphorylated-p38MAPK (p-p38MAPK), were also evaluated individually.

Results

HKC at high dose of 2 g/kg/d not only significantly ameliorated the rat's general status, renal morphological appearance, proteinuria, albumin, and glomerulosclerosis, but also obviously reduced the infiltrated ED1⁺ and ED3⁺ macrophages in glomeruli and TNF-α protein expression in the kidney, in addition to these, evidently down-regulated TGF-β1 and p-p38MAPK protein expressions in ADRN rats, but had no influence on podocyte shape and renal function.

Conclusion

HKC could dose-dependently ameliorate renal inflammation and glomerular injury in ADRN rats, by way of reducing the infiltration and the activation of macrophages in glomeruli, and TNF-α protein expression in the kidney, as well as inhibiting p38MAPK signaling pathway activity via the down-regulation of p-p38MAPK and TGF-β1 protein expressions in vivo.     

电针“内关”对心肌肥厚模型大鼠p38丝裂原激活蛋白激酶信号通路的影响

目的:探讨电针“内关”穴治疗心肌肥厚的作用机制.方法:SD大鼠40只用随机数字表法分为正常组、模型组、模型+p38抑制剂组、模型十电针组,每组10只.采用皮下注射盐酸异丙肾上腺素3 mg/(kg·d)建立心肌肥厚大鼠模型,模型+p38抑制剂组在造模基础上每日皮下注射0.3 mg/kg p38丝裂原激活蛋白激酶(p38 MAPK)特异性抑制剂SB 203580;模型十电针组电针“内关”穴,采用连续波,频率2 Hz,强度1 mA,通电20 min,1次/d,共14 d.其他两组不予治疗干预.放射免疫法技术检测心肌组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)含量,免疫印迹法检测p38MAPK、磷酸化p38 MAPK(p-p38 MAPK)含量.观察电针“内关”穴对TNF-α和IL-1β、p38 MAPK、p-p38 MAPK的影响.结果:与正常组大鼠比较,模型组大鼠TNF-α和IL-1β、p38 MAPK、p-p38 MAPK均显著升高(均P＜0.01);经抑制剂和电针处理后,模型+p38抑制剂组和模型十电针组大鼠TNF-α、IL-1β、p38 MAPK、p-p38 MAPK均明显降低,与模型组比较差异有统计学意义(均P＜0.05),与正常组比较差异亦有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01);模型+p38抑制剂组和模型十电针组之间比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论:电针“内关”可以明显抑制心肌肥厚p38 MAPK的磷酸化,这种保护作用可能通过抑制TNF-α、IL-1β等炎性因子的表达实现对p38 MAPK信号通路调节.     

基于p38MAPK通路探讨丹蛭降糖胶囊对2型糖尿病模型大鼠血管病变的影响

目的:基于p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号通路观察丹蛭降糖胶囊对实验性2型糖尿病(T2DM)模型大鼠血管内皮功能受损的影响。方法:采用高脂高糖饮食及腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立T2DM大鼠模型,将104只大鼠随机分成正常组,模型组,丹蛭降糖胶囊高、中、低剂量(1.08,0.72,0.54 g·kg^-1·d^-1)组,吡格列酮(10 mg·kg^-1·d^-1)组,丹蛭-吡格列酮(1.08+0.01 g·kg^-1·d^-1)组。造模成功后分别按相应剂量ig药物,每日1次。给药8周后,所有大鼠麻醉后腹主动脉采集血液样本和处死剪取腹主动脉进行相关检测,分析其作用机制。结果:治疗8周后,与正常组相比,模型组磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38MAPK),MAPK激酶3/6(MKK3/6),核转录因子cAMP反应元件结合蛋白1(CREB1),环氧化酶-2(COX-2),细胞间黏附分子(ICAM-1)蛋白表达水平均有上调,丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1(MKP-1)蛋白表达水平下调;与模型组相比,给药组大鼠p-p38MAPK,MKK3/6,CREB1,COX-2,ICAM-1蛋白表达水平均有下调,MKP-1蛋白表达水平明显上调(P<0.05,P<0.01)。腹主动脉免疫组化示,给药组p38MAPK蛋白表达量与模型组相比明显降低。结论:丹蛭降糖胶囊能调节T2DM模型大鼠血管p38MAPK蛋白表达水平,并可能从而改善大鼠血管内皮功能受损。     

温阳补心汤对慢性心衰大鼠心肌线粒体能量代谢及MAPK/PPAR-γ信号通路的影响

目的观察温阳补心汤基于p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)/过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)信号通路对慢性心衰(CHF)大鼠心肌线粒体能量代谢的影响。方法在48只大鼠中随机抽取12只作为假手术组,其余运用腹主动脉缩窄法建立CHF模型,取造模成功36只大鼠,随机分为模型组、温阳补心汤组、琥珀酸美托洛尔组。温阳补心汤组和琥珀酸美托洛尔组给予相应药物,假手术组、模型组给予等量的去离子水10 mL/(kg·d),各组均每日灌胃1次。给药后8周,观察CHF大鼠各项指标变化情况。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠外周血中三磷酸腺苷(ATP)、二磷酸腺苷(ADP)、氨基末端B型钠尿肽原(NT-proBNP)的含量;采用彩色多普勒超声检测大鼠心室功能;采用蛋白免疫印迹法(Western blotting)检测大鼠心肌组织中p38MAPK、p-p38MAPK、PPAR-γ的蛋白表达量。结果与假手术组比较,模型组大鼠ATP含量显著下降,ADP、NT-proBNP含量显著升高(P <0.01);与模型组比较,温阳补心汤组、琥珀酸美托洛尔组大鼠ATP表达升高,ADP、NT-proBNP表达下降(P <0.05)。与假手术组比较,模型组p38MAPK、p-p38MAPK蛋白表达水平明显升高(P <0.05),PPAR-γ蛋白表达水平明显下降(P <0.05);与模型组比较,温阳补心汤组、琥珀酸美托洛尔组p38MAPK、p-p38MAPK蛋白表达水平下降(P <0.05),PPAR-γ蛋白表达水平升高(P <0.05)。琥珀酸美托洛尔组与温阳补心汤组的心室功能相关指标[左心室舒末内径(LVDD)、左心室缩末内径(LVDS)、左心室射血分数(LVEF)、左心室舒张末期后壁厚度(LVPWD)、左心室收缩末期后壁厚度(LVPWS)],与模型组比较差异具有统计学意义(P <0.05)。结论温阳补心汤能改善心衰,延缓病情进展,其机制可能与p38MAPK通路被抑制及PPAR-γ通路被激活,促进线粒体合成有关。     

桦褐孔菌醇提物对胃癌模型裸鼠和BGC-823胃癌细胞Ras/MAPK信号通路的影响

目的：观察桦褐孔菌醇提物对胃癌模型裸鼠和人系胃癌细胞株BGC-823 Ras/MAPK信号通路相关蛋白表达的干预作用。方法：采用体内与体外实验相结合的方式。体内实验中将49只裸鼠随机分为空白组、模型组、阴性对照组、西药组和桦褐孔菌醇提物高、中、低剂量组。除空白组外，其余6组裸鼠腋下皮肤接种0.2 mL BGC-823细胞(2×10⁷个/mL)，建立荷瘤小鼠模型，桦褐孔菌醇提物高、中、低剂量组分别灌胃给予桦褐孔菌醇提物1.56、0.78、0.39 mg/g，西药组灌胃给予卡培他滨0.5 mg/g，阴性对照组灌胃给予CMC溶剂，空白组和模型组不给药，每日1次，连续21 d，免疫组织化学法检测荷瘤裸鼠肿瘤中Ras、JNKS、p38MAPK蛋白表达。体外实验中将对数生长期的BGC-823细胞随机分为模型组、阴性对照组、西药组、高剂量组、中剂量组和低剂量组。模型组给予同体积培养液，阴性对照组给予同体积二甲基亚砜，西药组给予5-氟尿嘧啶120 mg/mL，高、中、低剂量组分别给予桦褐孔菌醇提物0.4、0.2、0.1 mg/mL。RT-PCR和Western blot检测信号通...     

温阳振衰颗粒对慢性心力衰竭大鼠干预机制研究

目的:研究温阳振衰颗粒对慢性心力衰竭(CHF)大鼠外泌体微小RNA-21(miR-21)、心肌p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号通路的影响。方法:取40只清洁级SD雄性大鼠作为研究对象,随机分为正常组、模型组、依那普利组、温阳振衰组,每组10只。正常组正常喂养,其他三组采用阿霉素诱导建立CHF模型。模型组、依那普利组、温阳振衰组分别给予0.9%氯化钠溶液、依那普利及温阳振衰颗粒灌胃处理。分别在灌胃前、灌胃完成后采血,提取外泌体,检测外泌体miR-21水平。在灌胃结束后4周处死大鼠,取心肌组织,检测p38MAPK和p-p38MAPK水平。结果:灌胃前,模型组、依那普利组、温阳振衰组LVEF低于正常组,E/A、LVDD、LVPW水平高于正常组,差异有统计学意义(均P<0.05)。灌胃后,温阳振衰组、依那普利组LVEF高于模型组,差异有统计学意义(均P<0.05)。灌胃后,温阳振衰组、依那普利组血清外泌体miR-21、心肌miR-21 mRNA高于模型组,差异有统计学(均P<0.05)。温阳振衰组、依那普利组p38MAPK和p-p38MAPK mRNA和蛋白水平低于模型组,差异有统计学意义(均P<0.05)。结论:温阳振衰颗粒治疗CHF效果较好,其机制可能与上调外泌体miR-21,抑制p38MAPK信号通路活性有关。