脾虚大鼠血及延髓VIP/NO信号转导通路变化

目的:探讨脾虚证小肠运动异常的细胞信号转导机制。方法:采用“破气苦降加饥饱失常法”塑造大鼠脾气虚证模型,分别采用放射免疫法、硝酸还原酶法及分光光度法测定各组大鼠延髓和血中血管活性肠肽(VIP)、一氧化氮(NO)含量与一氧化氮合酶(NOS)活性。结果:脾虚组大鼠延髓中VIP、NO含量与NOS活性明显低于正常组和四君子汤组,四君子汤组和正常组之间无显著差别;血中VIP、NO含量与NOS活性则比正常组和四君子汤组显著升高,四君子汤组和正常组之间差异不显。结论:脾虚证与VIP/NO信号通路之间具有广泛相关性,该信号通路变化可能是脾虚证小肠运动异常以及脾虚证主要病理生理机制之一。     

脾虚证模型大鼠血清中血管活性肠肽和胆囊收缩素的变化及四君子汤的干预作用

目的研究脾虚证模型大鼠血清中血管活性肠肽(VIP)和胆囊收缩素(CCK)的变化以及四君子汤的干预作用,探讨四君子汤调节大鼠胃肠动力的机制。方法采用饥饱失常加劳倦加破气耗气方法复制脾虚大鼠模型,将60只大鼠随机分为正常组、模型组、四君子汤组、莫沙必利组,用Elisa法测定每组大鼠血清中血管活性肠肽和胆囊收缩素的含量。结果模型组大鼠血清中血管活性肠肽含量(28.60±41.88)明显减少,与正常组(51.55±16.22)比较差异具有统计学意义(P<0.05);模型组大鼠血清中胆囊收缩素(3.55±2.53)含量明显升高,与正常组(2.05±0.67)比较差异具有统计学意义(P<0.05)。经治疗后,四君子汤组大鼠血清中血管活性肠肽(57.51±13.25)、莫沙必利组大鼠血清中血管活性肠肽(61.63±27.46)均较模型组显著升高(P<0.05),四君子汤组大鼠血清胆囊收缩素(2.29±0.81)较模型组显著降低(P<0.05)。结论四君子汤能调节脾虚证大鼠的胃肠激素,从而纠正其胃肠功能紊乱,这是四君子汤治疗脾虚证的作用机制之一。     

脾虚大鼠超氧化物岐化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的改变及加味四君子汤对其影响

采用应激过劳和饥饱法经21天造成脾虚证模型,发现此脾虚大鼠全血SOD活力比正常大鼠明显降低,血浆MDA含量升高。加味四君子汤能明显促进脾虚大鼠SOD活力恢复正常,并能降低脾虚大鼠血浆MDA的含量。结果提示脾虚证可能与衰老有关,而加味四君子汤具有某些抗衰老作用。     

四君子汤对脾虚模型大鼠胃动素和前列腺素E2含量的影响

用利血平造成脾虚证大鼠模型，用ＲＩＡ测定发现其血浆和近段空肠组织ＭＯＴ的含量明显下降，降结肠和直肠组织ＰＧＥ２的含量明显升高，在四君子汤４ｇ／只鼠·ｄ连续灌胃１４天后，上述改变明显恢复正常。提示四君子汤益气健脾作用与其调正胃肠激素失衡有关。     

脾气虚证小肠运动异常的VIP/NO信号转导机制初探

目的探讨脾气虚小肠运动异常的细胞信号转导机制。方法Wistar健康大鼠30只,随机分为正常组、模型组、四君子汤防治组,每组10只。采用“破气苦降加饥饱失常法”塑造大鼠脾气虚证模型,分别采用放射免疫法、硝酸还原酶法及分光光度法测定各组大鼠十二指肠、空肠、回肠平滑肌中血管活性肠肽(VIP)、一氧化氮(NO)含量与一氧化氮合酶(NOS)活性;同步观察各组大鼠十二指肠、空肠、回肠平滑肌张力变化。结果模型组大鼠十二指肠、空肠、回肠平滑肌中VIP、NO含量与NOS活性明显低于正常组和四君子汤组,四君子汤组和正常组之间无显著差别;模型组大鼠十二指肠、空肠、回肠平滑肌张力较正常组和四君子汤组明显增强,但四君子汤组和正常组之间未见明显改变。结论脾气虚证与小肠平滑肌VIP/NO信号通路之间具有较好的相关性,该信号通路变化可能是脾虚证小肠运动异常以及脾虚证主要病理生理机制之一。     

脾虚血淤大鼠肠道菌群和川芎嗪的药物动力学特征初探

实验表明利血平化脾虚血淤大鼠的肠道菌群在量方面存在着异常：Ｇ＋杆菌和霉菌所占比例增加，优势菌种检出率以金黄色葡萄球菌和厌氧梭状芽胞杆菌为最高（Ｐ＜０．０５）。与健康组比较脾虚血淤大鼠的磷酸川芎嗪（ＴＭＰＰ）药动学特征为ＴＭＰＰ在体内的空间处置状态由双室变为单室模型，空间“转运”速率显著改变，吸收加快，生物利用度增强，分布减少。提示脾虚血淤、机体血液流变性的改变和肠道菌群失调可能是ＴＭＰＰ在脾虚血淤大鼠应答的明显变化的机理之一二，并初步验证了我们提出的“辨证药动学”假说。     

脾虚大鼠的川芎嗪药物动力学特征与血液流变学研究

从机体对药物作用特征的角度，探索中医证本质。同步研究了健康与利血平致脾虚大鼠的血液流变学及磷酸川芎嗪（ＴＭＰＰ）灌胃后的药物动力学（药动学）。在本实验条件下与健康组相比，脾虚组的药动学特征为：ＴＭＰＰ在体内的空间处置状态由双室变为单室模型；药物浓度值增加（Ｐ＜０．０５、０．０１）；血药浓度－时间曲线下面积（ＡＵＣ）增强（Ｐ＜０．０１）。７项血液流变学指标（Ｐ＜０．０５～０．０１）示脾虚大鼠处于典型     

利血平所致脾虚大鼠脾阳虚证和脾气虚证的证候属性

目的 研究利血平所致脾虚大鼠的脾阳虚证和脾气虚证的证候属性.方法 SD大鼠80只,模型组和治疗组腹腔注射利血平造成脾虚模型,选用分别代表脾气虚证和脾阳虚证的四君子汤和理中丸作为治疗药物,检测各项指标,并将检测结果作为多元统计分析对象,采用聚类分析法,分析样本及指标的区分度,以探讨不同指标与脾气虚证和脾阳虚证的相关性.结果 12项指标在正常组和模型组有较好的区分度;从白细胞介素1(IL-1)及血管活性肠肽含量和动物体重等指标看,二者有相同的变化趋势;从脾T细胞增殖、转化生长因子β(TGF-β)等指标看,理中丸组高于四君子汤组;从胃泌素、外周血中T细胞亚群CD4 /CD8-的比值和白细胞介素6(IL-6)含量等指标看,理中丸组低于四君子汤组.结论 模型组与正常组有很好的区分度,利血平脾虚证模型成功;理中丸和四君子汤对脾虚大鼠的作用既有相同之处,也有不同之处,与中医理论相符.     

大鼠脾虚模型血浆及胃肠组织中生长抑素含量的实验研究

本实验应用RIA测定了大鼠脾虚模型血浆及胃肠组织中SS含量,结果血浆、胃窦及结肠组织中SS含量均较正常对照组显著升高(P分别<0.05、<0.05、<0.05、<0.01),而且脾虚模型血浆中SS含量与胃窦组织中SS含量呈显著正相关(P<0.01),用四君子汤治疗后的脾虚大鼠胃窦组织中SS含量较自然恢复组明显减少(P<0.05),提示SS含量的升高可能是脾虚证的病理基础之一,血浆中SS含量的升高可作为脾虚证的辨证客观指标,四君子汤之所以能治脾虚证,可能是通过阻断SS释放,以达到健脾益气的功效。     

逍遥散对肝郁脾虚证实验大鼠的治疗作用

目的：观察逍遥散对肝郁脾虚证实验大鼠的治疗作用。方法：以慢性束缚应激方法建立肝郁脾虚证大鼠模型，模型大鼠随机分为逍遥散治疗组、自然恢复组和模型组。正常组大鼠给予生理盐水每日灌胃。观察各组大鼠宏观表征、体重变化，利用Observer 5．0和Etho Vision3．0分析软件监测大鼠行为学变化。结果：①灌胃1周后逍遥散组大鼠宏观表征、体重、行为等各项指标变化明显，与正常组相比无明显差异，与自然恢复组相比有明显差异。②与模型相比，自然恢复组各项指标无显著性变化。结论：逍遥散对慢性束缚应激肝郁脾虚证大鼠有良好的治疗作用。本课题组所采用慢性束缚应激法建立的肝郁脾虚证大鼠模型有着良好的稳定性。     

实验性脾气虚大鼠胃泌素的基因表达及四君子汤的干预作用

目的:观察脾气虚证大鼠胃窦黏膜胃泌素(gastrin,GAS)基因表达的改变及不同用药时间段四君子汤对其调整作用,探讨脾气虚证的本质及四君子汤的作用机制。方法:以三因素复合的方法复制脾气虚证大鼠模型,造模大鼠随机分成模型组、四君子汤组,在干预后不同时间段,用逆转录聚合酶链反应方法(RT-PCR)检测四君子汤对脾气虚大鼠胃窦GAS mRNA表达的影响。结果:脾气虚模型组血清GAS水平、胃窦GAS mRNA表达下降,与正常组比较差异有显著性(P<0.05);四君子汤组血清GAS含量、胃窦GAS mRNA表达随用药时间的延长呈递增的趋势,用药21天时,与模型组比较,差异有显著性(P<0.05)。结论:GASmRNA表达失衡是脾气虚证的本质之一,而四君子汤上调GAS mRNA表达是其治疗脾气虚证的机制之一。     

四君子汤对两种脾虚模型大鼠肠道菌群紊乱的影响

目的 观察两种脾虚模型大鼠肠道菌群的变化,研究四君子汤对肠道菌群紊乱的影响。     

不同剂量四君子汤对脾虚证小鼠消化和免疫功能的影响

目的探讨四君子汤对脾虚证小鼠消化和免疫功能的影响及治疗用最佳药物剂量。方法大黄煎液制备小鼠脾虚证模型后,以3种剂量(12.5、25、37.5g/kg)的四君子汤进行治疗,测定小鼠体重、体温、消化道内食糜平均滞留时间、胃排空速率、胃泌素与胃动素水平、脾脏和胸腺脂数。结果脾虚证小鼠体重增长缓慢,体温降低、消化道内食糜平均滞留时间缩短、胃排空加快、胃泌素的量降低、胃动素的量升高,脾脏和胸腺指数降低。3种剂量的四君子汤对脾虚证小鼠以上各指标的变化均有明显的矫正作用,以高剂量效果最佳。结论高剂量四君子汤(37.5g/kg)可能为治疗脾虚证小鼠消化及免疫功能紊乱的适宜剂量。     

四君子汤对脾气虚证大鼠血清胃泌素影响的实验研究

目的:探讨四君子汤对脾气虚证大鼠血清胃泌素(GAS)的影响。方法:以大黄法、游泳力竭法、饥饿法三因素复合方法复制脾气虚证大鼠模型,造模大鼠随机分成模型组和四君子汤组,在用药后不同时间(7d1、4d、21d)观察四君子汤对血清GAS含量的影响。结果:四君子汤组的血清GAS含量随着用药时间的延长呈递增的趋势,用药21d时与模型组比较,差异有显著性(P<0.05)。结论:四君子汤能改善脾气虚证大鼠的低GAS水平,这可能是其治疗脾气虚证的机理之一。     

四君子汤对实验性脾虚大鼠胃排空率的影响

目的：观察四君子汤对实验性脾虚大鼠胃排空作用的影响,并从胃、二二指肠肌电及脑－肠肽浓度方法面探讨四君子汤健脾益气的作用机制。方法：用利血平制作实验性脾虚大鼠模型１４天后,大鼠随机分为：Ａ组（四群子汤治疗）、Ｂ组（六味地黄汤治疗）、Ｃ组（自然恢复）、Ｄ组（脾虚模型）,持续１４天;并与Ｅ活动,用放射免疫分析法（ＲＩＡ）测定下丘脑和血浆中胃动素（ＭＯＴ）、胆囊收缩素（ＣＣＫ）及生长抑素（ＳＳ）的浓度。结     

壮医药线点灸对脾虚大鼠垂体生长抑素的影响

目的:探讨壮医药线点灸对实验性脾虚大鼠垂体生长抑素(Somatostatin)的影响。方法:用耗气破气加饥饱失常法建立100只大鼠实验性脾虚模型,用放射免疫分析法检测壮医药线点灸治疗前后大鼠垂体及血浆中SS的含量,并设立空线点灸对照、中药四君子汤治疗对照、模型自然恢复对照及正常健康对照。结果:脾虚大鼠脑垂体和血浆中的SS含量明显高于同期正常健康对照(P<0.01)。壮医药线点灸治疗后,脑垂体及血浆中的SS含量明显降低,治疗前后比较差异有显著性,P<0.05;治疗后与同期模型组及空线点灸治疗对照组比较差异也有显著性,P<0.05;与中药治疗组比较差异无显著性,P>0.05。结论:壮医药线点灸对实验性脾虚大鼠垂体SS有调整作用。     

糖胃康对糖尿病胃轻瘫大鼠血浆胃动素水平的影响

目的探讨糖胃康对糖尿病胃轻瘫(DGP)大鼠血浆胃动素的影响,进而探讨其对改善DGP的作用机制。方法采用链脲佐菌素和高热量饮食复合诱导DGP大鼠模型,将大鼠分为空白组、模型组、糖胃康大剂量组、糖胃康小剂量组、吗丁啉组,灌胃4周后采用放射免疫法测定其血浆胃动素水平。结果治疗后糖胃康大剂量组大鼠血浆胃动素含量明显低于模型组、小剂量组和吗丁啉组(P<0.05),与空白组比较无显著性差异(P>0.05)。结论糖胃康有降低DGP大鼠血浆胃动素水平,促进胃肠运动,从而降低血糖的作用,且呈一定的量效关系。     

微透析法进行芎冰喷雾剂鼻腔给药的脑内药动学研究

目的:测定芎冰喷雾剂经鼻腔给药后主要成分磷酸川芎嗪(TMPP)在大鼠脑内的药代动力学参数。方法:大鼠鼻腔或静脉注射给予芎冰喷雾剂后,利用微透析技术进行脑内药动学研究,高效液相色谱法测定透析液样品中TMPP的浓度,用Das2.0药动学软件计算主要药动学参数。结果:鼻腔给药和静注给药后TMPP在脑内的吸收均符合一室模型,芎冰喷雾剂鼻腔给药与静注给药TMPP都迅速进入脑内达到峰浓度,鼻腔给药TMPP在脑内的停留时间更长。结论:微透析法能较好的反映芎冰喷雾剂鼻腔给药后TMPP的药动学特征,鼻腔给药是治疗缺血性脑血管机能不全急性期的一种速效途径。     

复方隔山消颗粒对胃肠运动的影响及其机制

目的:探讨复方隔山消颗粒对胃肠运动的影响及其机制。方法:将实验动物随机分为正常对照组、模型对照组、西沙必利(小鼠0.003 g.kg-1,大鼠0.001 5 g.kg-1)组和高、中、低隔山消颗粒(小鼠:10,5,2.5 g.kg-1,大鼠:5,2.5,1.25 g.kg-1)组。按20 mL.kg-1剂量给药6 d后,用硫酸阿托品抑制小鼠小肠推进运动,测定各组小鼠的小肠推进率;以夹尾刺激法制造大鼠功能性消化不良(FD)模型,按10 mL.kg-1剂量给药7 d,测定各组大鼠胃黏膜一氧化氮(NO)含量和血中胃肠激素水平。结果:西沙必利组和高、中、低隔山消颗粒组小鼠小肠推进率均显著高于模型对照组,西沙必利组和高、中、低隔山消颗粒组大鼠胃黏膜NO含量均明显低于FD模型对照组,西沙必利组和高、中隔山消颗粒组大鼠血清胃泌素(GAS)和血浆胃动素(MTL)含量均明显高于FD模型对照组(P<0.05或P<0.01)。结论:复方隔山消颗粒能促进胃肠运动,其机制可能与其降低胃黏膜NO含量,提高血清GAS和血浆MTL水平有关。