补肾健脾活血三类复方对下丘脑-垂体-肾上腺-胸腺轴及CRF基因表达的影响

目的：为从分子水平来阐明药物对肾阳虚证的主要调节点。方法：采用逆转录多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）化学发光定量法、放射免疫及细胞免疫技术，观察补肾、健脾、活血三类复方分别对下丘脑一垂体一肾上腺一胸腺（ＨＰＡＴ）轴受抑制模型的下丘脑促肾上腺皮质激素释放因子（ＣＲＦ）ｍＲＮＡ表达、神经内分泌和免疫功能的影响。结果：唯有补肾药可通过提高下丘脑ＣＲＦｍＲＮＡ表达来保护ＨＰＡＴ轴免受外源性皮质酮的抑制；健脾药对免疫系统有直接的促进作用；而活血药对ＨＰＡＴ轴无任何影响。结论：药物对肾阳虚证的主要调节点定位在下丘脑。     

补肾和健脾在延缓衰老作用中的对比研究

本文通过90例健康老年人随机分组,采用补肾、健脾、对照法服药2个月,服药前后进行各项检验。结果表明;补肾法和健脾法都能发挥非特异免疫功能增强剂的作用,而在提高血浆促黄体生成激素及皮质醇水平上,补肾法比健脾法的作用显著,说明补肾和健脾在神经内分泌及免疫系统上延缓衰老的作用各有侧重,而以补肾法更为广泛而显著。     

补肾中药对老年神经－内分泌和免疫系统作用机理的研究

在观察补肾中药对老年人肾上腺皮质储备机能、淋巴细胞糖皮质激素受体作用的基础上，从各内分泌轴不同层次的机能和下丘脑神经递质的变化，探讨了补肾中药的作用机理。认为衰老时机体神经－内分泌和免疫机能的下降系下丘脑在其中起到主导作用。补肾中药对衰老机体神经－内分泌和免疫系统的广泛作用，其关键在于调整了下丘脑的机能失调；补肾中药的作用方式可能是多成份、多环节、多途径、多层次的综合协调作用。     

补肾中药对老年神经－内分泌和免疫系统作用机理的研究

在观察补肾中药对老年人肾上腺皮质储备机能，淋巴细胞皮质激素受体作用的基础上，从各内分泌轴不同层次的机能和下丘脑神经递质的变化，探讨了补肾中药的作用机理，认为衰老时机体神经－内分泌和免疫机能的下降系下丘脑在其中起到主导作用，补肾中药对衰老机体神经－内分泌和免疫系统的广泛作用，其关键在一调整了下丘脑的机能失调；补肾中药的作用方式可能是多成份，多环节，多途径，多层次的综合协调作用。     

补肾健脾法防治自然流产的研究进展

中医学对自然流产的认识由来已久，多数医家认为肾不系胎，脾失摄养为本病之关键。中药治疗安全又有效，临床日趋广泛采用中医辨证论治和专方治疗，多以寿胎丸加减。药理实验研究表明，补肾药都有调节内分泌作用，有些有免疫调节作用，而健脾药能激发和促进细胞免疫。补肾药和健脾药成为近年来防治自然流产的首选中药。     

健脾补肾方对胃癌细胞系MGC-803线粒体膜电位和细胞内活性氧的影响

目的：研究健脾补肾方对MGC．803细胞凋亡的诱导作用及对线粒体膜电位和细胞内活性氧水平的影响。方法：应用流式细胞仪检测健脾补肾方含药血清诱导的MGC．803细胞凋亡及其线粒体膜电位和细胞内活性氧水平（分别用Annexin V、rhodamine 123和dihydrorhodamine 123）。结果：药物作用36h后，各用药组的细胞凋亡率显著高于空白血清组，药物作用有明显的时。效关系（P〈0．05）；药物作用36h后，中药组的细胞内活性氧水平基本稳定，而中西药组低于空白血清组和中药组（P〈0，05）；各用药组的线粒体膜电位水平随药物作用时间延长逐渐降低。结论：健脾补肾方可时间依赖地诱导MGC-803细胞凋亡，并可降低其线粒体膜电位，稳定细胞内活性氧水平；而且健脾补肾方与DDP具有协同作用。     

补肾、健脾、活血中药及活髓片、活髓膏对溶血性贫血大鼠造血及GM-CSF、EPO、IL-2的影响

目的观察补肾、健脾、活血中药对溶血性贫血大鼠造血及红细胞生成素(GM-CSF)、粒-巨噬细胞集落刺激因子(EPO)、白介素-2(IL-2)的影响。方法采用乙酰苯肼造成大鼠溶血性贫血,对造模成功者分别给予补肾药、健脾药、活血药、活髓片、活髓片与活髓膏合用,共13天。用放射免疫法检测血中GM- CSF、EPO及IL-2。结果健脾组大鼠存活率及血红蛋白均最高；对GM-CSF的影响,补肾组、健脾组及合治组高于正常组、对照组、活血组(P＜0．05)；造模大鼠各组IL-2均高于正常组,实验各组之间差异无显著性(P＞0．05)；健脾组EPO最高,高于补肾组、活血组及活髓组(P＜0．05),各用药组与对照组比较差异有显著性(P＜0．05,P＜0．01)。结论补肾、健脾、活血中药促进造血的机制与环节有所不同。     

补肾中药干预人体免疫系统的研究进展

通过总结补肾药干预免疫系统的临床及实验文章,了解补肾药对免疫系统的效应及作用范围,有效成分以及可能的作用机制。并提出需要解决的问题和思考。     

健脾活血补肾汤体外干预AS 患者外周血单个核细胞IL-23 与IL-17 表达的实验研究

目的：观察健脾活血补肾汤体外对强直性脊柱炎（AS）患者外周血单个核细胞IL-23 与IL-17表达的影响,从而探讨健脾活血补肾汤治疗AS 的可能机制。方法：制备不同浓度健脾活血补肾汤大鼠含药血清,用ELISA 方法检测经不同浓度大鼠含药血清培养的AS 患者和健康志愿者PBMCs 上清液中IL-23与IL-17 水平。结果：AS 患者PBMCs 经72、36 g·kg-1·d-1 两组浓度大鼠含药血清培养后,与生理盐水组及18 g·kg-1·d-1 组相比,上清液中IL-23 与IL-17 水平显著下降（P<0.01）,但健脾活血补肾汤组含药大鼠血清对健康自愿者PBMCs 上清液中IL-23 与IL-17 表达水平影响均没有统计学意义。结论：健脾活血补肾汤可能通过下调炎症因子IL-23 和IL-17 的表达而起到延缓关节炎性骨质破坏的作用。     

补肾药对心理应激下生殖轴内分泌网络影响的因子分析模型

为了探讨补肾药对心理应激下生殖轴内分泌网络的影响,从动物实验得到的原始生物学数据入手,对生殖轴内分泌网络的6个重要的生物调节因子做因子分析,建立了补肾药对心理应激下的生殖轴内分泌网络影响的因子分析模型。发现补肾药干预下各个生物因子之间的控制关系进一步复杂,各个生物因子之间相互制约,并有一种向均衡化方向发展的趋势,这是补肾药整合调节作用的结果,起到改善机体功能的作用。     

补肾健脾活血三类复方对下丘脑-垂体-肾上腺-胸腺轴及CRF基因表达的影响

为从分子水平来阐明药物对肾阳虚证的主要调节点。采用逆转录多聚酶链反应化学发光定量法、放射免疫及细胞免疫技术，观察补肾，健脾，活血三类复方分别对下丘脑－垂体－肾上腺－胸腺轴受抑制模型的下丘脑促肾上腺皮质激素释放因子ｍＲＮＡ表达，神经内分泌和免疫功能的影响。     

大黄[庶虫]虫丸抗实验性动脉粥样硬化的拆方研究

目的:观察大黄(庶虫)虫丸各功效组分对家兔实验性动脉粥样硬化(AS)的作用.方法:采用免疫损伤加高脂饲料喂养建立家兔AS模型.将雄性新西兰家兔随机分为9组,正常组,模型组,丹参组每日给予丹参0.5 g·kg-1,拆方1号低、高剂量组每日分别给予0.5,1.0 g·kg-1,拆方2号低、高剂量组每日分别给予0.75,1.5 g·kg-1,拆方3号低、高剂量组每日分别给予0.8,1.6 g·kg-1,连续给药60 d后处死.从大体形态、病理形态及超微结构方面观察药物作用,同时采用图像分析系统测定AS斑块面积、血管内膜厚度(IT)和内-中膜厚度(IMT).结果:大黄(庶虫)虫丸各功效组分均能减少家兔主动脉内膜脂质沉积,使AS斑块面积减小(P＜0.05);抑制血管平滑肌细胞增殖和胶原纤维增生,减轻内膜增厚;降低IT,IMT,IT/IMT比值(P＜0.05),干预收缩性血管重塑;减轻线粒体肿胀,减少泡沫样细胞形成.结论:大黄(庶虫)虫丸各功效组分均有一定的抗AS作用,其中以拆方1号作用最为明显,这可能与其疏通经络、活血化瘀、破瘀生新等功效有关.     

化瘀祛痰方及其拆方对HepG2细胞胆固醇代谢的影响及机制研究

目的:观察化瘀祛痰方药及其拆方对人肝癌细胞株HepG2胆固醇代谢的影响,探讨该方药的作用机制,并比较方药全方及各拆方的疗效及调控作用.方法:SD大鼠随机分为空白对照组、化瘀祛痰方全方组、补气组、化瘀组、祛痰组,生理盐水和相应中药予以ig,连续8d.给药量为全方组17.9g·kg-1,补气组7.5 g·kg-1,化瘀组5.4 g·kg-1,祛痰组4.2 g·kg-1,空白对照组ig等量生理盐水.第9天腹主动脉采血,分离血清.体外培养HepG2细胞,随机分为6组,即①空白对照组、②ox-LDL刺激组、③化瘀祛痰方全方组、④补气组、⑤化瘀组、⑥祛痰组.其中②组加入终质量浓度为50 mg·L-1 ox-LDL,③～⑥组用相应含药血清(10％)预处理24 h后加入终质量浓度为50 mg·L-1 ox-LDL,各组细胞培养24 h后进行各项指标测定.采用MTT法检测细胞活性;胆固醇氧化酶终点法检测HepG2细胞总胆固醇含量;反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)定量分析3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(HMGCR)、B类Ⅰ型清道夫受体(SR-BⅠ)、胆固醇7α-羟化酶(CYP7A1) mRNA表达.结果:50 mg·L-1 ox-LDL作用于HepG2细胞使其细胞活力显著降低至对照组的(59.37±18.21)％,细胞总胆固醇含量显著升高(幅度为71.52％).而化瘀祛痰方全方、补气方、化瘀方、祛痰方显著升高细胞活力分别至(76.52±24.38)％,(68.13±20.35)％,(72.63±21.56)％,(73.92±23.47)％(P＜0.05或P＜0.01),全方、化瘀方、祛痰方能显著降低HepG2细胞胆固醇含量,幅度分别为:28.77％,17.18％,25.09％.RT-PCR结果表明经ox-LDL诱导HepG2细胞HMGCR mRNA相对表达显著减少(P＜0.01),而SR-BⅠ和CYP7A1 mRNA相对表达显著增加(P＜0.01,P＜0.01).化瘀祛痰方及祛痰方含药血清均能显著降低HepG2细胞HMGCR mRNA水平(P＜0.01,P＜0.05),显著升高SR-BⅠ和CYP7A1mRNA水平(均P＜0.01).结论:化瘀祛痰方药全方及祛痰方可通过降低HMGCR水平和升高SR-BⅠ,CYP7A1水平从而影响胆固醇合成、摄取和转化,这可能是其调控脂质代谢发挥抗AS作用的机制之一.     

大黄虫丸拆方抗家兔动脉粥样硬化的机制研究

目的：研究大黄虫丸拆方抗家兔动脉粥样硬化(AS)的作用机制。方法：采用免疫性内皮损伤合并高脂饲料喂养建立家兔AS模型。将雄性新西兰家兔随机分为9组,正常对照组、模型对照组、丹参阳性药对照组,大黄虫丸拆方1,2,3号各设低、高2个剂量组。灌胃给药60 d后处死,测定各组动物的血脂、血清丙二醛(MDA)和一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)、血浆内皮素(ET)、血管壁羟脯氨酸及蛋白的含量。结果：与模型对照组相比,大黄虫丸拆方各组对AS模型家兔的血脂水平无明显影响,但均可降低血清MDA和ET水平(P<0.05),升高SOD活性和NO含量(P<0.05),并减少血管壁羟脯氨酸及蛋白含量(P<0.05)。结论：大黄虫丸拆方各功效组分通过抗脂质过氧化、保护内皮功能、减少血管壁胶原及蛋白的合成而减少细胞外基质(ECM)形成等非降脂的作用机制,以防治AS的发生与发展,其中以拆方1号作用最显著,这可能与其疏通经络、活血化瘀、破瘀生新等功效有关。     

补肾、健脾和补肾健脾方对尾部悬吊大鼠钙、磷代谢的影响

目的:观察补肾、健脾和补肾健脾3方对模拟失重大鼠钙、磷代谢的作用,比较其促进骨矿化能力的异同.方法:大鼠随机分为正常对照、悬吊、补肾、健脾和补肾健脾共5组.后4组大鼠头低位-30度尾部悬吊连续21 d模拟失重,补肾、健脾和补肾健脾组大鼠从实验第1天开始依次按2.4,3.2,5.7g·kg-1·d-1给予补肾方、健脾方和补肾健脾方灌胃,其余各组大鼠灌服等容积的生理盐水.实验第22天取材,双能X射线骨密度仪测左侧胫骨骨密度,全自动生化分析仪检测血和尿中钙磷含量,EDTA法检测粪钙和饲料钙含量.结果:较之正常对照组,悬吊组大鼠左侧胫骨骨密度显著降低(P＜0.01),血钙和血磷含量、钙的表观吸收率明显降低(P＜0.01),尿钙、尿磷、粪钙含量明显增高(P＜0.01);较之悬吊组,补肾健脾组大鼠左侧胫骨骨密度、血钙和血磷含量、摄入钙量、钙的表观吸收率明显升高(P＜0.01),尿钙、尿磷、粪钙含量明显降低(P＜0.01),补肾组和健脾组大鼠左侧胫骨骨密度、血钙升高(P＜0.05),钙的表观吸收率均明显升高(P＜0.01),补肾组大鼠血磷含量明显升高(P＜0.01),尿钙、尿磷含量显著降低(P＜0.01),粪钙含量降低(P＜0.05),健脾组大鼠血磷和摄入钙量增加(P＜0.05),尿钙、尿磷和粪钙含量降低(P ＜0.05,P＜0.01);较之补肾健脾组,补肾组和健脾组大鼠左侧胫骨骨密度、血钙含量降低(P＜0.05),补肾组大鼠钙的表观吸收率明显降低(P＜0.01).结论:补肾、健脾和补肾健脾3方均能改善模拟失重引起的钙磷代谢异常,健脾方在促进钙吸收和维持血钙处于正常水平方面对补肾方具有协同增效作用.     

补肾法延缓免疫衰老的临床与实验研究

目的：观察补肾法延缓免疫衰老的临床疗效及相应的实验研究。方法：老年人22对（44名），采用随机分组，双盲给药（补方即补肾益寿胶囊和安慰剂）；实验研究则比较两个补肾方（右归饮和补肾益寿胶囊）和活血方（桃红四物汤）对老年大鼠T细胞凋亡及Fas、FasL基因表达的调控作用。结果：临床结果显示补肾组T细胞凋亡率比安慰剂组明显降低（P＜0．01），FasL基因表达亦明显降低（P＜0．05）。动物实验显示两个补肾方组老年大鼠T细胞凋亡均明显降低（P＜0．05），FasL基因表达亦明显降低（P＜0．01），而活血方组均无变化。结论：补肾法对老年人与老年大鼠T细胞FasL基因的转录具有负调控作用。这是补肾法下调老年人与老年大鼠T细胞过度凋亡的分子机理之一。     

化瘀祛痰方药及其拆方含药血清对脂多糖诱导的人脐静脉内皮细胞炎症因子表达的影响

目的:观察化瘀祛痰方药及其拆方对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导人脐静脉内皮细胞EA.hy926炎症因子表达的影响。方法:SD大鼠随机分为空白对照组、全方组、补气组、化瘀组、祛痰组,生理盐水和相应中药予以ig,第9天腹主动脉采血,分离血清。体外培养EA.hy926细胞,随机分为①正常对照组、②LPS刺激组、③全方组、④补气组、⑤化瘀组、⑥祛痰组、⑦空白血清对照组。其中②组加入终浓度为10 mg.L-1 LPS,③～⑦组用相应含药血清(浓度为10%)预处理24 h后加入终浓度为10 mg.L-1 LPS,各组细胞培养24 h后进行各项指标测定。RT-PCR法检测核因子-κB(NF-κB)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA表达;ELISA法检测TNF-α蛋白的表达;免疫荧光细胞化学法检测NF-κB蛋白的表达。结果:经LPS刺激后NF-κB和TNF-α的表达与正常组比较均明显升高(P<0.01)。全方组NF-κB和TNF-α的表达与刺激组相比明显受抑制(P<0.01);拆方各组中,化瘀组NF-κB和TNF-α的表达显著减少。补气、祛痰、空白血清对照组NF-κB和TNF-α的表达显著高于全方组;而化瘀组NF-κB和TNF-α的表达与全方组相比较无统计学差异。结论:化瘀祛痰方药及化瘀拆方可显著抑制内皮细胞炎症因子NF-κB和TNF-α的表达,这可能是其抗动脉粥样硬化的作用机制之一。     

化瘀祛痰方药对巨噬细胞源性泡沫细胞ABCA1、CD36表达的影响

目的:观察化瘀祛痰方药及其拆方对THP-1源性泡沫细胞腺苷三磷酸结合盒转运体A1(ABCA1)、CD36表达的影响,探讨该方药的作用机制,并比较方药全方及各拆方的疗效及调控作用。方法:体外培养THP-1细胞,佛波酯(PMA)使之巨噬化,氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)使巨噬细胞泡沫化。细胞随机分为空白对照组、模型组、补气组、化瘀组、祛痰组和全方组。油红O染色观察细胞浆脂滴变化,酶法测定细胞内总胆固醇(TC)、游离胆固醇(FC)、胆固醇酯(CE)的含量,并计算CE/TC值。反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)定量分析ABCA1、CD36 mRNA水平。结果:模型组细胞TC、FC、CE含量及CE/TC值均显著高于对照组(P<0.01);与模型组相比,全方组和祛痰组细胞TC、FC、CE含量及CE/TC值均显著降低。RT-PCR结果提示模型组细胞ABCA1、CD36 mRNA水平显著升高;而化瘀祛痰方药及祛痰拆方含药血清可显著升高ABCA1 mRNA,显著降低CD36 mRNA水平。结论:化瘀祛痰方药及祛痰方可抑制ox-LDL诱导的THP-1细胞泡沫化,该作用可能与其上调ABCA1基因、下调CD36基因表达,从而减弱THP-1细胞对ox-LDL摄取有关。     

二仙汤及其药物血清对GT1-7细胞增殖及胰岛素样生长因子-1 mRNA的影响

目的 GT1-7细胞株是促性腺激素释放激素(GnRH)神经内分泌细胞株,本实验观察补肾方二仙汤及其温肾、滋阴两个拆方药物血清对 GT1-7细胞株增殖及胰岛素样生长因子-1(IGF-I)mRNA 的影响。方法运用 Northern blot 方法观察 IGF-I mRNA 水平的变化;用 MTT 法观察 GT1-7细胞增殖情况。结果 (1)二仙汤及其温肾、滋阴两个拆方药物血清都能增加 IGF-I mRNA 的表达,其中以滋阴组作用最显著;(2)全方组和滋阴组药物血清能促进 GT1-7细胞增殖,而温肾组无明显变化。结论补肾方二仙汤可能通过作用于 IGF-I 的mRNA 水平而影响 GT1-7细胞的增殖和 GnRH 释放,温肾组和滋阴组作用于该细胞的机制可能有所不同。