水蛭不同提取物抗凝活性的体外实验研究

目的:研究水蛭不同提取物的抗凝活性,为水蛭的新药开发提供实验依据.方法:Wistar大鼠腹静脉取血,应用血凝仪体外测定凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)和活化的部分凝血活酶时间(APTT).结果:水蛭的乙酸乙酯部分能使大鼠的PT、TT、APTT显著延长.正己烷部分、水溶液部分能使大鼠的PT显著延长,正丁醇部分能使大鼠的APTT显著延长.结论:水蛭各提取物均有抗凝活性,水蛭中存在不同于水蛭素的新的抗凝血成分.     

重组水蛭素抗凝和抗血栓形成作用的实验研究

目的:观察重组水蛭素对凝血系统、血栓形成和血小板聚集的影响,研究其药理作用.方法:测定大鼠凝血时间(CT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、凝血酶原时间(PT)、纤维蛋白原含量(Fib)及抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)活性;采用A-V循环模型进行血栓形成实验;采用Born氏比浊法测定家兔血小板聚集.结果:重组水蛭素可显著延长大鼠血浆的CT、APTT、TT及PT(P＜0.001),明显降低Fib含量(P＜0.05),对AT-Ⅲ的活性无明显影响;明显减少血栓重量(P＜0.001);显著降低凝血酶诱导的家免血小板聚集率(P＜0.001),对胶原诱导的家兔血小板聚集率有降低趋势.结论:重组水蛭素具有抗凝、抑制血小板聚集和血栓形成的作用.     

水蛭乙醇提取物体外抗凝血活性研究

目的:研究水蛭不同提取物对人血浆的抗凝活性及作用环节。方法:测定水蛭乙醇提取物不同萃取部位对凝血酶原时间(PT),凝血酶时间(TT),活化的部分凝血活酶时间(APTT),纤维蛋白原凝固时间(FCT)的影响。结果:水蛭的乙酸乙酯部位显著地延长人PT,APTT,TT和FCT;石油醚部位、正丁醇部位、水部位也有较弱抗凝活性。结论:水蛭乙酸乙酯提取部分抗凝作用最强,直接抑制凝血酶催化的纤维蛋白原凝固。     

日本医蛭不同萃取部位体外抗凝活性的实验研究

目的研究日本医蛭不同萃取部位的抗凝活性,为日本医蛭的新药开发提供依据。方法SD大鼠腹主脉取血,应用血凝仪体外测定凝血酶原时间（PT）、凝血酶时间（TT）和活化的部分凝血活酶时间（APTT）。结果日本医蛭的总提物能使大鼠PT,TT,APTT时间显著延长;石油醚部位能使大鼠PT,APTT延长。结论中药日本医蛭的低极性小分子具有抗凝活性。     

水蛭、脉血康对急性血瘀模型大鼠血液流变学及凝血功能的影响

目的：观察水蛭和脉血康对急性血瘀模型大鼠血液流变学的影响,以及对凝血功能的作用。方法：大鼠连续给药两周后,采用皮下注射盐酸肾上腺复合冰浴的方法复制大鼠急性血瘀模型,通过测定全血黏度,血浆黏度,红细胞压积（Hct）,红细胞变形指数和红细胞聚集指数,观察水蛭和脉血康对血液流变学的影响;通过测定凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血酶时间（APTT）和凝血酶时间（TT）,纤维蛋白原（Fibg）的含量,血小板聚集率,凝血因子FⅡ、FⅤ、FⅦ、FⅧ、FⅩ的活度来观察对凝血系统的影响。结果：水蛭能够显著降低血瘀模型大鼠全血黏度、血浆黏度和血小板聚集率,抑制FⅡ的活度,延长APTT和TT;脉血康能够降低全血黏度和血小板聚集率,延长凝血时间APTT和TT。结论：水蛭和脉血康均有显著改善血液流变学和凝血功能的作用。     

水蛭抗凝血作用实验研究

目的 :观察水蛭对正常和高凝动物血液流变学及凝血系统的影响。方法 :小鼠连续给不同剂量药物后,以剪尾法测定出血时间(BT),以毛细管法测定凝血时间(CT),摘眼球取血测定凝血酶原时间(PT),活化部分凝血酶时间(APTT),凝血酶时间(TT)以及纤维蛋白原(Fibg)的含量;尾静脉注射鞣花酸溶液,测定BT和CT。大鼠连续给不同剂量药物后,舌下静脉注射鞣花酸溶液,测定全血黏度和血浆黏度以及血浆凝血时间APTT、PT、TT以及Fibg的含量。结果:水蛭能显著延长正常和高凝小鼠BT和CT,显著延长正常小鼠PT和APTT,显著降低高凝大鼠全血黏度和血浆黏度,显著延长PT、APTT和TT。结论:水蛭能显著改善血液流变学,有抗凝血作用。     

水提取法和仿生提取法研究水蛭不同炮制品的体外抗凝活性

为确定水蛭传统炮制的科学性,分别采用水提取法和仿生提取法提取水蛭清水吊干品、滑石粉烫制品、酒浸闷烘品中的抗凝活性成分,以活化部分凝血酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)、抗凝血酶活性作为活性指标进行抗凝测定,并采用考马斯亮蓝法,测定各炮制品提取物中的蛋白含量以初步解释抗凝活性变化原因。对比发现,采用水提取法时,APTT,PT,TT,抗凝血酶活性4种指标结果均显示,滑石粉烫制或酒浸闷烘后水蛭的抗凝活性降低,活性顺序为清水吊干品酒浸闷烘品滑石粉烫制品,此结果与水蛭不同炮制品水提物蛋白含量顺序一致;而采用仿生提取法时,除滑石粉烫制后APTT缩短外,其他结果均显示炮制使水蛭抗凝活性升高,且活性顺序为酒浸闷烘品滑石粉烫制品清水吊干品。仿生提取法与水提取法相比更符合水蛭口服后在人体内的吸收过程,结果更具科学性。所以,传统的炮制方法不仅可以矫味矫臭,还可增强水蛭的抗凝活性作用。     

土鳖虫提取物体外抗凝血活性研究

目的：比较土鳖虫不同提取物对人血浆的抗凝血活性,探讨其抗凝血机制。方法：测定土鳖虫提取物不同萃取部位对凝血酶原时间（PT）,凝斑酶时间（TT）,活化的部分凝血活酶时间（APTT）,纤维蛋白原凝固时间（FCT）的影响。结果：土鳖虫的乙酸乙酯部位显著地延长人门,APTT,下下和FCT;石油醚部位、正丁醇部位也有抗凝活性,作用较弱。结论：土鳖虫乙酸乙酯提取部分抗凝作用最强,能直接抑制凝血酶催化的纤维蛋白原凝固。     

蓬子菜中香叶木苷抗血栓形成作用的实验研究

目的：研究蓬子菜活性成分-香叶木苷的抗凝血和抗静脉血栓作用.方法：通过结扎大鼠下腔静脉造成下肢静脉血栓模型,通过对凝血四项指标：凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血酶时间（APTT）、血浆纤维蛋白原（FIB）、凝血酶时间（TT）的观察,及下腔静脉在光镜下的组织学变化,研究香叶木苷对血栓大鼠凝血功能的影响.结果：香叶木苷90、180、360mg/kg能明显延长PT和TT时间;180、360mg/kg能明显延长APTT时间;90、180、360mg/kg能显著降低FIB含量（P＜0.05或P＜0.01）.光镜观察香叶木苷高、中、低剂量组均能明显抑制大鼠下腔静脉血栓形成,保护血管内皮细胞,且中剂量组与阿司匹林组作用相当.结论：香叶木苷具有抗凝血和抗静脉血栓形成作用.     

水蛭素气雾给药对大鼠凝血功能和体内血栓形成的影响

目的考察水蛭素气雾给药对大鼠凝血功能及体内血栓形成的影响。方法测定大鼠凝血酶原时间（PT）、凝血酶时间（TT）、活化的部分凝血酶时间（aPTT），血浆纤维蛋白原（FIB）含量，观察水蛭素气雾给药的抗凝血作用；建立下腔静脉结扎模型和动-静脉旁路结扎模型，测定大鼠静脉及动脉血栓的湿重和干重。结果与正常对照组相比，水蛭素气雾给药中剂量和高剂量组（500U·kg^-1，1000U·kg^-1）对PT，T，aPTT有显著延长作用（P〈0．05或P〈0．01）；对大鼠静脉血栓、动脉血小板血栓形成均有显著的抑制作用（P〈0．05或P〈0．01），对FIB无明显影响（P〉0．05）。结论水蛭素气雾给药能够发挥其抗凝血作用。     

紫菀丸对血热出血大鼠血液流变性、凝血时间及肺部的影响

目的:考察紫菀丸对血热出血模型大鼠血液流变性、凝血时间及肺部的影响.方法:SD大鼠随机分为6组,分别为空白对照组,模型对照组,云南白药组(0.5 g·kg-1),紫菀丸高、中、低(5,2.5,1.25 g·kg-1)剂量组.将供试品按每日20 mL·kg-1的剂量灌胃(ig),2次/d,给药7d.除空白对照组外,其余组复制血热出血大鼠模型,并比较紫菀丸对其血液流变性、凝血酶时间(TT)、活化部分凝血酶原时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)、纤维蛋白含量(FIB)以及肺部的影响.结果:模型对照组较空白对照组有显著性差异,明显升高全血黏度,血浆黏度,TT,APTT明显延长,PT显著缩短,FIB含量显著增加.紫菀丸中剂量组能够显著降低血热出血模型大鼠的全血黏度,血浆黏度,APTT,TT,明显增加FIB的含量.紫菀丸高剂量组能明显缩短TT,紫菀丸低剂量组能显著延长PT.紫菀丸中剂量组依次为全血黏度200 s-1(5.87±0.24) mPa·s,30 s-1(7.60±0.36) mPa·s,5 s-1(13.70±0.51) mPa·s,1 s-1(32.38±2.06) mPa·s,APTT(17.11 ±0.78)s,TT(30.07±2.00) s,FIB(5.56±0.14) g·L-1;紫菀丸高剂量组为TT(30.74±2.96)s;紫菀丸低剂量组为PT(14.63±1.14)s;与模型对照组比较P＜0.05或P＜0.01.在肺体征方面,紫菀丸能够改善血热出血大鼠肺部损伤的相关症状,中剂量效果最好,其次是高、低剂量.结论:紫菀丸中剂量组能够改善血热出血大鼠异常的血液流变学指标,通过影响内、外源性凝血酶及纤维蛋白原来达到止、凝血效果,紫菀丸高剂量组对部分血液流变学和凝血指标有一定的效果.紫菀丸剂量组对模型组大鼠肺部的损伤都有一定的治疗作用.     

17-甲氧基-7-羟基-苯并呋喃查尔酮对大鼠凝血功能和血小板聚集的影响

目的:研究17-甲氧基-7-羟基-苯并呋喃查尔酮(YLSC)对体内外血小板聚集和凝血功能的影响.方法:将50只SD大鼠随机分为5组:对照组(含0.5％ DMSO的生理盐水),YLSC低、中、高剂量组(2.5,5,10 mg·kg-1),阳性药阿司匹林组(10 mg·kg-1).尾静脉注射相应药物1周后,腹主动脉采血,分别加入二磷酸腺苷(ADP)、胶原和花生四烯酸(AA)诱导血小板聚集,测定大鼠体内外血小板聚集率;同时观察YLSC对大鼠凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血激酶时间(APTT)及凝血酶时间(TT)的影响.结果:与对照组相比,YLSC能显著抑制ADP和胶原诱导的大鼠体内、外血小板最大聚集率(P＜0.05或P＜0.01),最大抑制率分别为38.4％,42.5％,对AA诱导的血小板聚集无明显抑制作用;YLSC能显著延长大鼠血浆TT,APTT(与对照组比较,P＜0.05或P＜0.01),对PT无显著影响.结论:YLSC具有对抗血小板聚集和抗凝血作用.     

舒脑欣滴丸与华法林钠抗凝血相互作用研究

目的考察舒脑欣滴丸单独或与华法林钠联合应用时抗凝血作用及对血小板聚集的影响。方法采用比浊法,体外测定对照组和舒脑欣滴丸低、高剂量(4.54、22.70 mg/mL)组的血小板聚集率;体内实验设对照组。舒脑欣滴丸低、高剂量(45.36、90.72 mg/kg)组,华法林钠(临床等效剂量0.4 mg/kg)组,联合给药低、高剂量(舒脑欣滴丸45.36、90.72 mg/kg+华法林钠0.4 mg/kg)组。大鼠ig给予舒脑欣滴丸及华法林钠3 d,腹主动脉取血,分离血小板,采用比浊法测定血小板聚集率;分离血清利用半自动凝血仪测定实验各组活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)和凝血酶时间(TT)。结果与对照组比较,舒脑欣滴丸体外具有较强的抗血小板聚集作用,在体内抑制血小板聚集作用随剂量的增大而略有增加。并且舒脑欣滴丸可以显著延长APTT、PT和TT;与单独用药组比较。联合给药组对血小板聚集作用影响不明显,但可显著延长大鼠APTT、PT和TT。结论舒脑欣滴丸具有一定抑制血小板聚集和抗凝血作用;与华法林钠联用能够协同增强抗凝血作用。     

益气通络汤对心瓣膜置换术后气虚血瘀证患者的有效性及安全性评价

目的:观察益气通络汤对心瓣膜置换术后气虚血瘀证患者的疗效以及抗凝效果。方法:选择心脏瓣膜置换术患者共88例,所有患者按数字表法随机分成观察组和对照组各44例。对照组服用华法林钠片,第1~3天剂量为3~4 mg·d-1,第3天后给维持量2.5 mg·d-1,根据国际标准化比值(INR)每次加减华法林钠片剂量,使INR值达2~3。观察组给予益气通络汤治疗,常规水煎煮,分早晚2次内服;两组患者均连续观察3个月。比较两组中医(TCM)症状评分及凝血酶时间(TT),活化部分凝血酶时间(APTT),凝血酶原时间(PT),血浆纤维蛋白原(FIB);检测两组术后1 d和术后3个月患者的血液流变学指标水平;记录两组患者的并发症发生和死亡情况。结果:观察组术后3个月中医临床症状各指标积分均明显低于对照组(P0.01);术后3个月,两组间TT,APTT,PT以及血浆FIB比较差异无统计学意义;随访1年,观察组术后发生并发症3例(6.82%),对照组术后发生并发症12例(27.27%),比较差异有统计学意义(P0.05)。两组术后3个月血液流变学各指标水平比较差异均无统计学意义。随访1年,观察组死亡1例(2.27%),对照组死亡2例(4.55%),比较差异无统计学意义。结论:心瓣膜置换术后气虚血瘀证患者应用益气通络汤干预抗凝效果确切,且安全性好,值得临床应用。     

熟地黄炭补血止血作用的炮制机制探索

目的:筛选熟地黄炭止血的主要药效部位,探讨其补血止血作用的炮制机制。方法:以小鼠的出血时间(BT)和凝血时间(CT)为指标筛选熟地黄炭止血的有效部位;以SD大鼠为研究对象,通过腹腔注射环磷酰胺同时结合尾部放血,以8%无水乙醇代替自由饮水的方法共同建立大鼠血虚出血模型,观察其一般体征、病理组织,测定大鼠的血常规指标即红细胞总数(RBC),血红蛋白含量(HGB)和白细胞总数(WBC);检测血液流变学指标(高、中、低切下全血还原黏度及血浆黏度)和凝血4项指标[凝血酶原时间(PT),凝血酶时间(TT),活化部分凝血活酶时间(APTT)和血浆纤维蛋白原(FIB)]。结果:与空白组比较,熟地黄炭组、熟地黄炭水部位组均可缩短小鼠BT和CT。与空白组比较,血虚出血模型组大鼠的RBC,HGB和WBC均明显降低;高、低切下的全血还原黏度升高;PT,TT和APTT均延长,FIB增多。与模型组比较,熟地黄炭组大鼠的RBC,HGB和WBC均明显升高;高、中、低切下的全血还原黏度及血浆黏度均降低;PT,TT和APTT均缩短,FIB减少。与模型组比较,熟地黄炭水部位组大鼠的RBC和HGB均升高;高切下的全血还原黏度降低;PT,TT和APTT均缩短,FIB减少。结论:熟地黄炭通过升高大鼠RBC,提高HGB,改善环磷酰胺与放血所致血虚大鼠的体征,表现了其补血的作用;同时通过缩短大鼠TT,PT和APTT,降低FIB的含量,表现了其止血的作用。提示熟地黄炭针对血虚出血大鼠模型发挥了较好的补血止血作用。     

独一味水提取物止血作用及其机理的初步研究

目的研究藏药独一味水提取物(HLRE)的止血、促凝血作用及其机理。方法小鼠灌胃给予HLRE高、中、低剂量,3天后测定止血时间(BT)和凝血时间(CT),同时进行血小板计数(PLC);大鼠不同剂量口服给药14d后,颈总动脉采血,测定凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、纤维蛋白原(FIB)含量以及肝功能和血脂等指标。结果HLRE2g/kg剂量组与1g/kg剂量组与生理盐水组比,出血时间和凝血时间都显著缩短,但各给药组血小板计数无显著性差异。PT、APTT无差异;TT明显缩短;FIB、Alb(白蛋白)显著增加;转氨酶、血脂有降低趋势。结论HLRE具有较好的止血、促凝血作用,推测其可能是通过增加纤维蛋白原(FIB)的含量,缩短大鼠凝血酶时间(TT)来发挥上述作用的。     

6种人参属药材体外抗凝血活性与皂苷含量的相关性研究

目的分析不同功效的6种人参属药材提取物的体外凝抗血活性差异。方法采用凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血酶原时间(APTT)、纤维蛋白原(FIB)实验,探讨6种人参属药材提取物抗凝血活性的差异性;分析其抗凝血活性与皂苷含量的相关性。结果竹节参、珠子参及三七可显著延长PT、APTT,降低FIB水平,呈现明显的量效关系;而人参、西洋参及屏边三七无显著变化。竹节参、珠子参提取物的抗凝血活性明显强于三七提取物。6种人参属药材中人参皂苷含量与其抗凝血活性的相关性分析表明,PT与人参皂苷Rb2含量呈现显著的正相关;且人参皂苷Rb2可显著延长PT、APTT。结论 6种人参属药材抗凝血活性存在差异,且抗凝血活性与人参皂苷Rb2含量相关。     

水蛭素对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质损伤及MCP-1、ICAM-1的干预效应研究

[目的]观察水蛭素对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾间质纤维化的干预作用,并探索其作用机制。[方法]健康雄性SD大鼠120只,随机分为假手术组24只和造模组96只。造模组再分为模型组24只、水蛭素高剂量组24只、水蛭素低剂量组24只、贝那普利组24只。各组于术后第3、7、14天分批随机处死。取梗阻侧肾组织行逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、蛋白免疫印迹(Western Blot)分子技术,检测梗阻侧肾组织单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的分子表达变化。[结果]苏木精-伊红(HE)染色显示,与模型组相比:各用药组肾间质损伤及纤维化程度均有不同程度改善。RT-PCR显示,与模型组相比:水蛭素高剂量组各时间点及水蛭素低剂量组第7、14天ICAM-1相对表达量均明显降低(P0.05);水蛭素高剂量组第7、14天MCP-1表达显著降低(P0.01);水蛭素高剂量组第3天及水蛭素低剂量组各时间点MCP-1表达量明显降低(P0.05)。Western Blot显示,与模型组相比:水蛭素高剂量组第7天ICAM-1蛋白表达量显著减少(P0.01);水蛭素高剂量组第3、14天及水蛭素低剂量组第14天各时间点ICAM-1蛋白表达均明显降低(P0.05);水蛭素高剂量组第14天MCP-1蛋白表达显著降低(P0.01);水蛭素高剂量组第3、7天MCP-1蛋白表达明显降低(P0.05)。[结论]水蛭素能不同程度地改善UUO大鼠肾间质损伤程度,延缓间质纤维化进展,其机制可能与水蛭素干预了UUO大鼠肾间质MCP-1、ICAM-1 mRNA及蛋白质的表达有关。     

鲜地黄及保鲜加工品对血热出血模型大鼠凉血止血药效比较

目的：比较鲜地黄及其保鲜加工品对血热出血模型大鼠凉血止血作用的区别。方法：SD雄性大鼠80只,以干姜水煎剂15 g·kg^-1灌胃结合5%乙醇代替自由饮水,联合给药15 d 建立大鼠血热出血模型,造模成功后将造模组动物随机分为模型组、云南白药组、鲜地黄组、鲜地黄汁组、鲜地黄粉组、鲜地黄颗粒组、鲜地黄饮片组,各组灌胃给予相应药物15 d,模型组给与等体积的蒸馏水,余下各组剂量分别为：0.66,9,9,2,9,2 g·kg^-1。给药后观察各组大鼠摄食量、饮水量、粪便含水量的变化,以及舌、胃、肺部出血情况。通过测定全血及血浆黏度以及凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血活酶时间（APTT）、凝血酶时间（TT）、纤维蛋白原（FIB）含量等指标,考察鲜地黄及其保鲜加工品对模型动物血液系统的影响。结果：造模后大鼠肛温升高,饮水量明显增加,摄食量减少,体重减轻,粪便含水量明显减少（P<0.05,P<0.01）;全血高、中、低切黏度及血浆黏度明显增加（P<0.05,P<0.01）;凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血活酶时间（APTT）、凝血酶时间（TT）明显延长（P<0.05,P<0.01）,纤维蛋白原（FIB）含量极显著增加（P<0.01）。灌胃给药鲜地黄及其加工品后大鼠热盛症状明显减轻,全血黏度和血浆黏度以及凝血功能指标（PT,TT,APTT,FIB）渐趋于正常。病理组织学观察发现,鲜地黄及其炮制加工品能够改善血热出血大鼠舌、肺、胃部出血损伤的相关症状。结论：鲜地黄及其保鲜加工品能够减轻血热出血大鼠的热象症状,改善异常的血液流变学、凝血系统指标,具有凉血止血功效。