贯叶金丝桃总黄酮纯化工艺研究

研究碱化法结合大孔树脂法纯化贯叶连翘总黄酮的工艺条件。方法:以静态饱和吸附量、静态解析率为指标对6种大孔树脂进行了筛选;又以总黄酮含量为指标对提取液上柱前的预处理方式、树脂吸附工艺参数进行了优选。结果:D101大孔树脂吸附量、解析率最好;上样液浓度为0.2 g生药/mL;上样速度为2BV/h;洗脱剂为60%乙醇;洗脱速度为3BV/h;洗脱剂用量为5BV/h。结论:优选的贯叶金丝桃总黄酮纯化工艺稳定、简便可行、适合大生产。     

大孔吸附树脂法分离纯化乌腺金丝桃总黄酮的研究

目的：研究AB-8大孔树脂吸附、纯化乌腺金丝桃总黄酮的工艺条件。方法：以乌腺金丝桃总黄酮的收率为指标,将影响树脂吸附性能及总黄酮的收率的三个因素：洗脱液浓度、洗脱液流速和洗脱体积,设计成3因素3水平正交试验,对AB-8大孔树脂吸附、纯化乌腺金丝桃总黄酮的工艺条件进行考察。结果：AB-8大孔树脂对乌腺金丝桃总黄酮吸附、纯化的最佳条件为树脂量与生药比4∶1,60%乙醇为洗脱剂,洗脱流速为1mL/min,洗脱体积为3倍树脂床体积。采用本工艺乌腺金丝桃总黄酮的收率达90%左右。结论：该工艺简便,适于乌腺金丝桃总黄酮的吸附纯化。     

顶空气相色谱法测定贯叶金丝桃提取物中大孔树脂有机溶剂残留物

目的 建立贯叶金丝桃大孔树脂提取物中正己烷、苯、甲苯、对二甲苯、邻二甲苯、苯乙烯、1,2-二乙基苯等7种有机溶剂的残留量的测定方法.方法 将提取物溶解于0.6％的十二烷基硫酸钠水溶液中,采用HP-INNOWAX毛细管柱和FID检测器,以高纯氮气为载气;应用顶空气相色谱法测定贯叶金丝桃大孔树脂提取物中7种有机溶剂的残留量.结果 该方法可将7种有机溶剂完全分离,且线性关系良好;精密度和重复性RSD均小于7％,平均同收率在82.6％ ～104.0％之间.结论 此法简便、快速、准确,可用于大孔树脂制备的贯叶金丝桃提取物中有机残留溶剂的质量控制.     

大孔吸附树脂法富集菟丝子总黄酮的实验研究

目的:研究大孔吸附树脂富集菟丝子总黄酮的工艺条件及参数。方法:以静态饱和吸附量、动态吸附洗脱率为考察指标,比较了6种大孔树脂纯化菟丝子总黄酮的工艺。又以总黄酮和金丝桃苷含量为指标。对最佳树脂吸附工艺条件进行了筛选。结果:6种树脂中,HPD-100型树脂具有良好的吸附,可使提取物中总黄酮的含量达到30.31%。结论:HPD-100型树脂可用作菟丝子总黄酮的分离纯化。     

大孔树脂纯化无花果叶总黄酮

目的:研究大孔树脂纯化无花果叶总黄酮的工艺条件.方法:采用静态吸附法对5种大孔树脂进行筛选,动态吸附法优选大孔树脂纯化无花果叶总黄酮工艺.结果:无花果叶总黄酮的纯化工艺为上样浓度2 g·L-1,上样速率2 BV·h-1,上样体积3 BV,2 BV去离子水冲洗;4 BV 80％乙醇以2 BV·h-1流速洗脱,收集洗脱液;此工艺条件下无花果叶总黄酮的转移率为77.6％,样品产物中总黄酮质量分数51.3％.结论:D140型大孔树脂对无花果叶总黄酮具有良好的富集纯化效果.     

糙叶五加叶中总黄酮的纯化工艺研究

目的研究优化糙叶五加叶总黄酮的大孔吸附树脂纯化工艺。方法以处理后的总黄酮的质量分数和总黄酮得率为考察指标,采用单因素实验结合响应曲面设计法进行纯化工艺优化研究。结果 D101型大孔吸附树脂对糙叶五加叶总黄酮有较好的吸附和洗脱效果,其最佳的纯化工艺条件为色谱柱的径高比为1∶10,25.0 g D101大孔树脂的上样量为750 mg,溶剂体系为50%乙醇,洗脱体积流量为5 m L/min,洗脱体积为130 m L。在此最佳优化条件下,糙叶五加叶总黄酮的理论质量分数为75.69%,实际质量分数达到75.87%;总黄酮得率为30.13%。结论 D101型大孔吸附树脂宜于纯化糙叶五加叶中的总黄酮,且响应面法能有效地优化其纯化工艺。     

贯叶连翘总黄酮的纯化工艺研究

目的:研究大孔吸附树脂富集贯叶连翘总黄酮的工艺条件及参数。方法:以静态饱和吸附量、静态解吸率为考察指标,比较了6种大孔树脂纯化贯叶连翘总黄酮的工艺。又以总黄酮含量为指标,对最佳树脂吸附工艺条件进行了筛选。结果:HPD-600树脂吸附和解吸效果最佳,上样液的质量浓度3.81g·L-1,吸附流速1BV·h-1,洗脱剂70%乙醇,洗脱流速3BV·h-1,洗脱剂用量3BV。     

大孔吸附树脂分离纯化山楂叶总黄酮的研究

目的:研究D101大孔树脂吸附、纯化山楂叶总黄酮的工艺条件及参数。方法:以山楂叶总黄酮的收率为指标,对D101大孔树脂吸附纯化山楂叶总黄酮的工艺条件进行了筛选。结果:D101大孔树脂对山楂叶总黄酮吸附纯化的最佳条件为树脂投量与生药比为4∶1,以70%乙醇作为洗脱剂,洗脱流速为2 ml/min,溶剂用量与生药比为20∶1,吸附时间为1.5 h。采用本工艺山楂叶总黄酮的得率达5.17%,纯度达67.22%。结论:该工艺简便,适于山楂叶总黄酮的吸附纯化。     

贯叶金丝桃中苯并二蒽酮类成分的超声提取和大孔树脂的吸附研究

目的研究贯叶金丝桃中苯并二蒽酮类成分的超声提取以及大孔吸附树脂纯化工艺。方法采用单因素实验研究超声提取条件,以每克药材中金丝桃素和伪金丝桃素提取量之和为指标,考察了超声提取中影响苯并二蒽酮类成分提取量的因素。通过静态吸附和动态吸附实验选择分离介质,并对所选树脂的分离工艺进行研究。结果贯叶金丝桃中苯并二蒽酮类成分最优提取条件为:15倍量70%的乙醇超声提取2次,每次40min。选取D101大孔树脂为分离介质,上样流速为0.5 BV/h,以6BV 70%乙醇以2BV/h流速洗脱目标物,最终产品中含苯并二蒽酮类成分约6.3mg/g。结论该贯叶金丝桃中苯并二蒽酮类成分的超声提取和大孔树脂分离富集工艺操作条件温和,稳定可靠。     

大孔吸附树脂纯化贯叶连翘提取物的工艺

目的筛选纯化贯叶连翘提取物的最佳树脂型号及其最佳工艺。方法以金丝桃素为指标,对大孔吸附树脂的类型进行筛选,并采用正交试验,对最佳大孔吸附树脂工艺进行考察。结果最佳大孔吸附树脂为LSA-10,其最佳工艺为比上柱量1.954 2 mg/g;径高比1∶20;药液浓缩比1∶1,药液上样体积流量2 BV/h,分别以4 BV蒸馏水、3 BV 20%乙醇、8 BV 70%乙醇为洗脱剂洗脱,贯叶连翘提取物中的金丝桃素量提高到1.5%以上。结论该工艺合理、稳定,纯化效果好。     

Purification of total flavonoid glycosides from Hypericum perforatum by macroporous adsorption resin with on-line detection system

OBJECTIVE: To design a macroporous resin chromatography system with on-line detector which can be used to purify total flavonoid glycosides from Hypericum perforatum. METHOD: Compared with the present detection methods, the ultraviolet detector which can be applied to flow liquid, and a self-made shunt were applied to design the on-line detection system. This system was successfully applied to purify the total flavonoid glycosides from H. perforatum. RESULT: This on-line detection system was simple and feasible, and the results were accurate and reliable. The purity of total flavonoid glycosides from H. perforatum. separated by this system was higher than 90%. CONCLUSION: This technique provides a simple and reliable on-line detection method for industrial chromatography purification of TCM extracts, which is the basis of automatic manufactory of TCM purification.     

贯叶金丝桃总黄酮对小鼠抑郁症模型的实验研究

目的:观察贯叶金丝桃总黄酮的药理作用。方法:通过皮下注射利血平诱导小鼠抑郁症模型,测定药物对利血平效应及单胺类递质含量的影响;此外,测定药物对小鼠脑内单胺氧化酶(MAO)活性、小鼠行为绝望及获得性无助、睡眠等的影响。结果:贯叶金丝桃总黄酮可降低MAO活性,对抗利血平致小鼠抑郁症模型,明显抑制利血平效应引起的小鼠眼睑下垂及自主活动减少,显著增加脑内5羟色胺(5HT)、去甲肾上腺素(NE)的含量,可使原来不会引起异常反应的5羟色胺酸(5HTP)剂量引起小鼠产生震颤反应;此外,明显对抗小鼠行为绝望及获得性无助,延长小鼠睡眠时间。结论:贯叶金丝桃总黄酮对抑郁症有明确的治疗作用。     

高速逆流色谱应用于黄酮类成分分离与纯化研究进展

高速逆流色谱（HSCCC）是一项无固体载体即一种连续高效的新型液-液分配色谱技术,主要利用化合物在溶剂系统中分配系数的差异达到分离目的,在化合物分离以及单体制备等方面有广泛运用。综述了近年来高速逆流色谱技术在分离纯化黄酮苷元和黄酮苷类化合物中的应用,包括高速逆流色谱技术分离纯化已知和未知天然产物黄酮类成分、筛选黄酮活性成分,为今后高速逆流色谱在分离黄酮类化合物中的应用提供借鉴。     

HPLC指纹图谱技术对3种贯叶连翘提取物制备工艺的评价

目的:比较3种贯叶连翘提取物制备工艺的稳定性与重复性.方法:建立提取物的HPLC指纹图谱,对不同批次提取物进行相似度分析、聚类分析和模式识别.结果:3种工艺均具有良好的稳定性与重复性,且酶解后优于酶解前,纯化后优于纯化前,以酶解后经大孔树脂LSA-10纯化所得提取物的制备工艺为最佳.不同批次提取物的镜像度较高,具有良好的相似性(＞0.9).结论:HPLC指纹图谱可用于同类提取物的质量控制和制备工艺评价.     

炮制对王不留行中刺桐碱及黄酮苷类成分含量及溶出率的影响

目的:研究炮制对王不留行中刺桐碱及黄酮苷类成分含量的影响,探索炮制对王不留行主要化学成分及其溶出率的影响。方法:采用HPLC测定炮制前后王不留行中刺桐碱、王不留行黄酮苷、肥皂草苷、异牡荆素-2″-O-阿拉伯糖苷和王不留行黄酮苷H的含量及水煎溶出率,流动相乙腈(A)-水(B)梯度洗脱(0~12 min,13%A;12~18 min,17%A;18~30 min,20%A),检测波长280 nm。结果:炮制前,这5个成分的质量分数分别为0.13%,0.70%,0.018%,0.051%,0.11%,炮制后则分别为0.12%,0.52%,0.016%,0.098%,0.091%;5个成分的水煎溶出率分别升高了7.7%,10.2%,10.8%,11.4%,17.8%。结论:炮制后异牡荆素-2″-O-阿拉伯糖苷含量有较大幅度上升,而王不留行黄酮苷含量有较大下降,其余成分含量有少量下降。炮制对王不留行中刺桐碱及黄酮苷类成分含量的影响存在一定差异,但炮制后这些成分的水煎溶出率均上升。     

一测多评法测定银杏叶提取物中总黄酮醇苷的含量

目的：建立银杏叶提取物中总黄酮醇苷含量测定的一测多评法。方法：采用药典含量测定操作方法,以槲皮素为内标,通过测定山柰素、异鼠李素与槲皮素在固定配比和正交设计的不同配比下的响应因子,计算相对校正因子,进而考察相关影响因素并确立相对校正因子;样品测定中以槲皮素含量按相对校正因子直接计算出山柰素和异鼠李素的含量,三者相加计算总黄酮醇苷的含量,从而建立起仅以槲皮素为对照品的一测多评法,并通过与外标法实测值比较验证。结果：相对校正因子分别为f 山柰素/槲皮素=1.020,f 异鼠李素/槲皮素=1.033,RSD分别为1.23%,1.03%,重复性良好;8份样品的一测多评法计算值与外标法实测值之间没有显著性差异。结论：实验测得的相对校正因子及建立的银杏叶提取物中总黄酮醇苷含量测定的“一测多评法”准确可靠,为实际工作中银杏叶提取物中总黄酮醇苷的常规化、多批次含量测定带来了方便,具有较好的实用价值。     

大孔树脂分离纯化广东紫珠中苯乙醇苷的工艺研究

目的 研究大孔树脂分离纯化广东紫珠中苯乙醇苷类成分的工艺。方法 以连翘酯苷B和金石蚕苷的量之和为考察指标,采用HPLC法考察10种大孔树脂对苯乙醇苷的吸附分离性能,并考察分离纯化苯乙醇苷类成分的最佳工艺条件。结果 以X-5型大孔树脂为吸附剂,优选的纯化工艺为树脂的最佳吸附量为32.79 mg/g,先以4 BV的水洗脱,除去大部分水溶性杂质,再以7 BV 30%乙醇溶液洗脱,体积流量为2 BV/h,所得提取物中苯乙醇苷的量达52.8%（n＝3）。结论 该优选的工艺简便可行,可作为分离纯化广东紫珠中苯乙醇苷类成分的有效方法。     

HPLC-MS/MS联用技术分析鉴定苏薄荷中的黄酮类成分

目的：分析鉴定苏薄荷中的黄酮类成分。方法：运用高效液相色谱分离与电喷雾（ESI）质谱技术对苏薄荷提取物中的黄酮类成分进行分析鉴定。结果：共分析了8个黄酮类成分，其中鉴定了1个黄酮苷元：香叶木素（diosmetin），4个黄酮苷：橙皮苷（hesperidin）、香叶木素-7-0-葡萄糖苷（diosmetin-7-0-glucoside）、蒙花苷（1inarin）、椴树素（tilianine），推断了2个黄酮苷和1个黄酮苷元的可能结构，其中橙皮苷、香叶木素-7-O-葡萄糖苷和香叶木素为首次从苏薄荷中发现。结论：HPLC-MS／MS能快速、准确地鉴定出天然产物中的化学成分。     

高速逆流色谱法分离制备益母草中益母草碱

目的建立高速逆流色谱(HSCCC)技术高效快速地分离制备益母草中益母草碱的方法。方法单因素实验优化益母草碱的提取工艺,而后考察不同的HSCCC溶剂体系,根据分配系数(K),确定溶剂体系为醋酸乙酯-正丁醇-水(3∶2∶5),以其上相为固定相,下相为流动相,转速850 r/min,体积流量2.2 mL/min,检测波长为277 nm,对益母草样品进行HSCCC分离。结果益母草正丁醇萃取部位通过HSCCC可分离得到益母草碱,该方法成功应用于益母草粗提物中益母草碱的分离:1次HSCCC运行可从2.48 g益母草70%乙醇粗提物(益母草碱质量分数为3.01%)中分离得到68 mg益母草碱,质量分数为96.2%,得率为2.74%。结论建立的方法可高效分离纯化益母草中的益母草碱,为得到高纯度的益母草碱提供了制备技术。     

大孔树脂富集纯化藏药独一味总环烯醚萜苷

目的：进行藏药独一味止血活性成分总环烯醚萜苷的富集纯化。方法：以一阶导数分光光度法检测,以总环烯醚萜苷含量为跟踪指标,比较10种不同厂家、不同型号的大孔树脂对独一味水提取物中环烯醚萜苷类成分的吸附与解吸附条件,优选最佳的纯化工艺。结果：富集后总环烯醚萜苷的含量达到67.53％。结论：XDA-1型大孔吸附树脂对独一味水提取物中环烯醚萜苷类成分有较好的吸附能力,50％乙醇溶液解吸附快速有效。树脂重复利用度高。