基于UPLC多指标测定比较不同来源款冬花药材的质量

目的建立同时测定款冬花药材中12种成分的超高效液相色谱(UPLC)方法,并对不同产地药材的质量状况进行评价。方法采用BEH C18(100 mm×2.1 mm,1.7μm)色谱柱;流动相为乙腈(A)-0.03%三氟乙酸水(B),梯度洗脱,体积流量0.5 m L/min,检测波长254 nm,柱温40℃。通过计算不同成分的变异系数,采用聚类分析(HCA)和主成分分析(PCA)对不同产地的款冬花药材进行分析。结果建立的测定方法符合方法学要求,款冬花药材中不同成分的变异系数差别较大,其中金丝桃苷的变异系数达到0.91。PCA和HCA显示野生款冬和栽培款冬具有明显差异,其中野生款冬中绿原酸、咖啡酸、芦丁、金丝桃苷、异绿原酸B、异绿原酸A、异绿原酸C、款冬酮等成分量相对较高。结论不同产地款冬花药材存在较大差异,体现在不同成分的变异范围明显不同,野生和栽培药材存在差异,为保证临床用药的安全有效,款冬花药材间的差异性对临床疗效的影响有待进一步深入研究。     

液相色谱方法分析茜草中遗传毒性成分Lucidin及其苷

目的 :对茜草药材中是否含有有毒成分lucidin及其苷lucidin-3-O-primeveroside(EKU-4)进行初步研究。 方法 :分别采用RP-HPLC,HPLC-DAD,LC-MS对6份不同来源茜草药材进行了定性检测。 结果 :各个药材中均能检测到EKU-4信号;②,⑤,⑥号药材中检测到Lucidin信号。 结论 :茜草中含有遗传毒性成分EKU-4。     

款冬花药材掺杂部位对其质量的影响

目的针对款冬花药材掺杂现象,对款冬花药材中花蕾及其杂质(花梗、根茎、主根)的化学组成进行比较,为款冬花的质量控制提供依据。方法参照《中国药典》2015年版,采用HPLC测定款冬花蕾及其杂质中款冬酮的含量,同时建立款冬花指纹图谱,采用相似度评价和共有峰峰面积对花蕾及杂质进行比较,对药材中各成分含量与花蕾占比进行Pearson相关性分析,同时对花蕾和杂质进行主成分分析和聚类分析,并分析各类成分之间的相关性。结果款冬花蕾中款冬酮含量以及指纹图谱中13个共有峰的峰面积均明显高于其他掺杂部位,且与花蕾占比存在正相关。主成分分析和聚类分析结果显示,款冬花蕾与花梗、根茎、主根等掺杂部位可明显区分。指纹图谱各主要成分之间的相关性分析显示,咖啡酰奎宁酸类成分之间、黄酮类成分之间存在较强的正相关,倍半萜类成分中,款冬酮和款冬素酯存在较强的正相关,不同类别的成分也具有一定的相关性。结论款冬花药材中主要成分均主要分布于花蕾,当药材中花梗、主根、根茎等杂质较多时会严重影响款冬花药材质量。目前《中国药典》2015年版中款冬花项下尚未设置杂质检查项目,为了保证款冬花药材的质量,应增加其杂质检查。     

HPLC指纹图谱结合化学模式识别分析不同产地款冬花生品与蜜炙品

目的建立不同产地款冬花生品与蜜炙品的HPLC指纹图谱,为不同来源款冬花药材鉴别和质量评价提供依据。方法基于高效液相色谱法对36批不同产地款冬花生品与蜜炙品进行测定,采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012A版)计算相似度,运用聚类分析(HCA)、主成分分析(PCA)和最小偏二乘法-判别分析(PLS-DA)对款冬花生品与蜜炙品进行模式识别研究。结果建立了不同产地款冬花生品与蜜炙品的HPLC指纹图谱,标定了20个共有峰,并指认了其中10个共有峰;36批样品与对照指纹图谱的相似度在0.723～0.984,16批款冬花生品相似度在0.862～0.998,20批蜜炙品相似度在0.687～0.993;通过HCA、PCA和PLS-DA可将款冬花生品与蜜炙品完全区分开来,没食子酸、绿原酸、异绿原酸A、款冬酮等10个成分是导致二者差异性的主要标志物。结论 HPLC指纹图谱结合化学模式识别为款冬花生品与蜜炙品的质量控制和品质评价提供了更全面的参考。     

款冬花药典质量标准探究

目的:对《中国药典》2010年版中款冬花药材的薄层色谱检测方法及款冬酮含量测定检测方法同时进行改进。方法:使用正相硅胶薄层板,通过尝试不同展开系统和检测方法,并与药典方法相对照;采用高效液相色谱法(HPLC)法测定款冬花中款冬酮的含量。色谱柱:I ner t si l ODS-SP C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:甲醇-水(77∶23);流速:1.0 m L/mi n;检测波长:219 nm。结果:在新薄层色谱条件下,对照品斑点具有更好的分离度,无干扰,易于检测;款冬酮在0.524~1.572μg范围内具有良好的线性关系(r=0.999 9,n=5);平均回收率:98.70%,RSD=0.80%(n=9)。结论:新方法优于药典方法,可用于款冬花药材中款冬酮的定性、定量测定。     

不同产地款冬花中款冬酮的测定

目的 建立款冬花中款冬酮的RP-HPLC定量测定方法。方法 采用RP-HPLC法测定款冬花中款冬酮的量，色谱柱：Dikma Technologies C₁₈(200 mm×4.6 mm，5 μm)，流动相：甲醇-水(77∶23)，体积流量：1 mL/min，柱温：25 ℃，检测波长：219 nm。结果 款冬酮在0.15～6 μg线性关系良好，回归方程为Y=3E+06 X-9 588.3, r=0.999 8(n=2)，平均回收率(n=3)为99.78%，RSD为2.08%。结论 款冬酮的RP-HPLC定量测定方法简便、准确，重现性好，可用于款冬花药材中款冬酮的定量测定。     

基于HS-GC-IMS技术分析款冬花蜜炙前后挥发性有机物的差异性

目的 获得款冬花Farfarae Flos炮制前、后生品和蜜炙品中挥发性有机物的特征及其变化规律。方法 采用顶空-气相色谱-离子迁移质谱(HS-GC-IMS)测定款冬花生品和蜜炙品的挥发性有机物，构建HS-GC-IMS指纹图谱，VOCal软件对检测到的成分进行定性和定量分析，运用主成分分析(principal component analysis,PCA)和邻近距离法对样品进行差异性分析。结果 基于HS-GC-IMS技术从款冬花生品和蜜炙品中共获得了61种挥发性有机物，定性鉴别出53种；构建了款冬花生品和蜜炙品的HS-GC-IMS指纹图谱，通过PCA和邻近距离法分析可将款冬花生品与蜜炙品进行区分，甲硫醚(dimethyl sulfide)、2-甲基丙烯醛(2-methyl-2-propenal)等9种物质可作为款冬花生品的特征性成分；乙酸D(acetic acid D)、乙酸M(acetic acid M)等14种物质可作为款冬花蜜炙品的特征性成分。结论 HS-GC-IMS指纹图谱可用于识别与评价款冬花生品和蜜炙品挥发性有机物的种类和差异，为款冬花饮片的质量控制及临床应用提供参考。     

河北蔚县款冬花药材主要成分含量的分析研究

目的 HPLC法同时测定蔚县等地款冬花主要成分芦丁、款冬酮的含量,比较分析不同产地款冬花在主要成分含量上的差异,为河北蔚县等款冬花主产区款冬花的临床应用、深入研究提供参考。方法用甲醇提取,HPLC法定性并定量分析。色谱柱:Inertsustain~C_(18)(4.6mm×250mm,5μm)。分析时间为35min,柱温:25℃。流动相:乙腈-0.15%磷酸水;检测波长:0~20min为254nm,20~35min为220nm。结果芦丁、款冬酮在0.15~4.8ug范围内线性关系良好(r=0.9997和0.9998),平均回收率分别为99.85%、98.86%,不同来源的款冬花芦丁、款冬酮的含量范围分别为0.448%~0.992%、0.108%~0.319%。结论不同来源的款冬花芦丁、款冬酮的含量显著的差异,河北蔚县产款冬花主要成分含量明显高于其他产地,可作为款冬花药材的重点产地发展种植、研究,并为临床应用的选择提供参考。     

不同产地、不同采收期款冬花的质量评价

目的:测定不同产地、不同采收期的款冬花药材以及款冬根茎中款冬酮、绿原酸、芦丁和异槲皮苷4个指标性成分的含量,根据含量的差异及动态变化得到最佳款冬花产地及最佳款冬花采收期。方法:采用高效液相色谱法分别测定款冬花中款冬酮、绿原酸、芦丁和异槲皮苷的含量。结果:不同产地款冬花药材中4个指标性成分的含量差异较大,其中甘肃产款冬花的含量普遍高于其他产地;4个不同采收期甘肃产款冬花的含量动态比较结果显示,款冬酮含量在11月份达到峰值,绿原酸、芦丁和异槲皮苷含量在12月份达到峰值;款冬根茎中未检测出芦丁和异槲皮苷。结论:甘肃产款冬花的质量较好,甘肃陇西产款冬花11~12月药材质量较佳,与传统采收期相符。此方法简便、灵敏、准确,为寻找更佳款冬花产地及款冬花采收期提供了依据。     

苦参药材中氧化苦参碱和苦参总黄酮含量的比较研究

目的测定不同产地和来源的苦参药材中氧化苦参碱和苦参总黄酮的含量。方法采用高效液相色谱法检测苦参中氧化苦参碱的含量,紫外分光光度法检测苦参中苦参总黄酮的含量。结果比较了10批不同产地和来源的苦参药材中氧化苦参碱和苦参总黄酮的含量,其中河南产苦参(批号:110613)氧化苦参碱含量最高,广西产苦参(批号:110930)中苦参总黄酮含量明显高于其他产地的苦参。结论不同产地和来源的苦参药材中有效成分的含量差异较大,在临床用药时应引起重视,在含苦参的复方制剂生产中应建立药材的检测标准。     

基于UPLC-MS/MS同时测定款冬花中吡咯里西啶生物碱及其氮氧化物的含量

目的:建立一种同时测定15个吡咯里西啶生物碱(pyrrolidine alkaloids,PAs)及其氮氧化物的超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC/MS/MS),完成15批不同来源的款冬花样品的含量测定。从而初步了解不同来源款冬花中PAs的分布现状,为药材的安全合理使用提供相关参考。方法:采用Agilent Eclipse Plus C18色谱柱(3. 0 mm×150 mm,1. 8μm),流动相为含0. 05%甲酸和2. 5 mmol·L-1甲酸铵的水溶液(A)以及含0. 05%甲酸和2. 5 mmol·L-1甲酸铵的甲醇(B),梯度洗脱,流速0. 4 m L·min-1,进样量2μL,柱温40℃。采用Agilent 1290-6470 QQQ型超高效液相色谱-三重四级杆质谱联用仪,离子化模式为ESI+,多反应监测模式(MRM)。利用外标法计算药材样品中所测成分的含量,通过计算不同成分的相对标准偏差(RSD)对样品间的差异进行分析。结果:建立的测定方法灵敏度高,分离度良好,方法学考察结果良好。样品测定结果表明,15批药材均含有PAs及其氮氧化物,且所含PAs种类基本相同。克氏千里光碱(senkirkine)是款冬花中最主要的PAs类成分。药材款冬花中不同PAs的含量与分布有较大差异。结论:款冬花中普遍含有吡咯里西啶生物碱及其氮氧化物,且以具有显著肝毒性的克氏千里光碱为其中最主要种类。针对PAs的含量测定为确保款冬药材的用药安全提供了有效的保证。     

款冬花及其总生物碱的肝脏毒性

目的: 对款冬花的肝脏毒性进行初步的研究探讨。 方法: 昆明种小鼠 ig 款冬花水煎液生药20,40 g·kg^-1连续4周,测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT),门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性,肝组织称重,计算肝脏系数,观察肝脏病变情况并评分;利用精密肝切片培养技术,将款冬花水煎液0.005,0.05 g·L^-1和总生物碱0.5,2.0 g·L^-1与肝切片分别共同培养24,6 h后,制备肝组织匀浆, BCA法测定匀浆液中蛋白含量,连续监测法测定并计算每微克蛋白中ALT,AST,乳酸脱氢酶(LDH),γ-谷氨酰胺转移酶(GGT)的漏出率。 结果: 款冬花水煎液40 g·kg^-1ig 4周后,镜下观察雌性动物款冬花水煎液组与对照组比较有明显病理改变,且伴有肝脏系数的明显增加;款冬花水煎液及总生物碱与肝切片共培养后,水煎液2个剂量组均能引起ALT漏出率的显著升高;总生物碱0.5 g·L^-1组能引起肝切片LDH,ALT漏出率显著升高,2.0 g·L^-1组能引起肝切片GGT漏出率显著升高,蛋白含量显著下降。 结论: 款冬花体内体外试验均显示出一定的肝脏毒性。     

款冬花饮片标准汤剂制备及其指纹图谱研究

目的:制备款冬花饮片标准汤剂,并进行质量标准研究。方法:收集3个产地15批款冬花饮片,按照中药饮片标准汤剂工艺规范制备款冬花饮片标准汤剂,计算出膏率,采用HPLC测定饮片和标准汤剂中指标成分款冬酮的量,计算转移率,并建立款冬花标准汤剂HPLC指纹图谱分析方法。结果:15批款冬花饮片制成的标准汤剂平均出膏率为36.41%,RSD为4.21%;款冬花饮片和标准汤剂中款冬酮的质量分数分别为0.146%~0.420%、0.006%~0.022%;款冬酮转移率为0.60%~3.85%,平均转移率为2.01%;指纹图谱共有峰11个,确认2个,分别为芦丁和款冬酮。结论:建立了款冬花饮片标准汤剂指纹图谱,该方法简便、稳定、重复性较好,可为款冬花水提取物样品及其配方颗粒的质量控制提供参考。     

款冬花不同炮制品的HPLC指纹图谱比较

目的:采用HPLC指纹图谱技术,综合运用相似度评价、聚类分析(CA)及主成分分析(PCA)对款冬花炮制前后化学成分变化进行研究。方法:采用HPLC-DAD建立10个产地款冬花不同炮制品的指纹图谱,流动相乙腈-0.03%三氟乙酸水溶液梯度洗脱,检测波长240 nm;运用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统"(2004A版)软件,CA及PCA综合探索款冬花不同炮制品的质量及成分变化规律。结果:建立了不同炮制品的HPLC共有模式,款冬花生品、蜜炙品、甘草炙品指纹图谱的相似度分别为0.867~0.991,0.785~0.979,0.785~0.980。CA将不同炮制品均分为4类,与相似度评价结果基本一致,表明不同产地间款冬花炮制品具有一定的相似性和稳定性。PCA筛选出方差累计值达74.230%的2个主成分,并得到与之相关的成分群,不同产地炮制品的综合得分情况表明该成分群在生品、蜜炙品及甘草炙品中稳定存在。结论:指纹图谱技术结合相似度评价,CA,PCA能对款冬花炮制品的质量进行系统评价,可为其他中药炮制品的评价提供参考。     

不同产地款冬花药材质量比较研究

目的比较不同产地款冬花药材的质量,为款冬花的利用和开发提供依据。方法采用高效液相色谱法测定不同产地款冬花中芦丁和款冬酮的含量,称量记录百蕾干重和蕾色,并对各项指标进行统计分析。结果不同产地款冬花中芦丁、款冬酮含量及百蕾干重存在显著差异,且芦丁和款冬酮含量存在显著正相关。主成分和因子分析表明,山西榆社、宁武、广灵的款冬花质量较优。结论不同产地款冬花药材质量存在差异,山西榆社、宁武、广灵的野生款冬花可作为优质种源。     

蜜炙款冬花HPLC指纹图谱研究

目的:建立蜜炙款冬花的HPLC指纹图谱,为该药材炮制品的质量评价提供实验依据。方法:采用HPLC技术,采用大连依利特C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为0.1%磷酸-乙腈梯度洗脱,体积流量为1.0 mL/min,检测波长240 nm,室温,进样量20μL。结果:建立了蜜炙款冬花的HPLC指纹图谱,方法学考察的各项参数均符合有关规定。结论:HPLC指纹图谱的建立为蜜款冬花药材的质量评价提供了实验依据。     

国家中药质量标准中含款冬花成方制剂的归纳与分析

对包括《中华人民共和国药典》2020年版在内的国家中药质量标准中64种含款冬花成方制剂的中药味数、剂型、制备方法、功能主治及注意事项等进行归纳总结。其中,处方16味药以下的占75%,处方以款冬花净制品投料的占75%,处方配伍以款冬花-苦杏仁药对应用最多,占61%。64种含款冬花的成方制剂均为口服剂型,其中固体制剂占72%。药品制备方法包括粉碎、回流、浸渍、蒸馏、渗漉等。制剂的功能主治为止咳定喘、化痰祛痰的占82%以上。从质量标准项目设置看,仅11%的成方制剂设置了款冬花相关的专属性鉴别项目,未设置质量标志物的含量测定项目,质量标准亟待提高和完善。这些分析可为深入挖掘款冬花药用价值、开展含款冬花制剂处方配伍研究、提高完善制剂的质量标准提供参考。     

响应面法优化甘草制款冬花微波炮制工艺

目的 优化甘草制款冬花的微波炮制工艺。方法 以单因素实验作为基础,以紫外分光光度法(UV)和高效液相法(HPLC)测定甘草制款冬花中总生物碱、款冬酮、芦丁和异槲皮苷含量,结合醇浸出物含量的总评归一值为评价指标,对闷润时间、甘草用量、微波火力和炮制时间4个因素进行响应面实验研究,优化甘草制款冬花的微波炮制工艺。结果 甘草制款冬花的响应面法得出最佳工艺条件为闷润时间4.5 h、甘草用量15%,微波火力100%,炮制时间83 s,总生物碱、款冬酮、芦丁、异槲皮苷和醇浸出物含量分别为0.002 1%、0.283 6%、0.7%、1.44%和27.6%。结论 优选得到的甘草制款冬花炮制工艺合理、稳定、可行,可为甘草制款冬花的工业化生产提供理论依据。     

款冬花紫菀配伍对绿原酸在大鼠体内药代动力学影响

目的：研究款冬花、紫菀配伍对绿原酸在大鼠体内药代动力学参数的影响。方法：在筛选款冬花止咳有效部位、紫菀止咳增效部位的基础上,将SD大鼠随机分成4组,分别灌胃给予绿原酸单体、款冬花部位、紫菀部位、款冬花部位＋紫菀部位（即部位配伍）,采用HPLC法测定血浆中的绿原酸浓度,并用WinNonlin药动学软件根据非房室模型法计算药动学参数。结果：大鼠灌胃绿原酸单体、款冬花部位、紫菀部位、部位配伍后的主要药动参数：AUC0-t分别为245．09±14．05,349．27±62．15,105．11±18．57,496．77±77．75μg·mL^-1·min^-1;t1/2分别为323．70±51．00,464．53±126．10,408．27±31．30,203．02±7．12min;Cmax分别为1．05±0．13,1．52±0．55,0．63±0．04,4．49±0．59μg·mL^-1;Tmax分别为60．00±0．00,15．00±0．00,15．00±0．00,15．00±0．00min。结论：紫菀能促进大鼠对款冬花中绿原酸的吸收,加快绿原酸的消除,减少绿原酸在体内的蓄积,可以部分诠释款冬花、紫菀“相须配伍”增效的机理。     

RRLC/MS/MS测定菊花中农药残留量

目的 建立中药材中113种农药残留量的测定方法,并用该方法测定了菊花中的农药残留量.方法 菊花样品经高速均质器提取、石墨化碳-氨基固相萃取柱(SPE)净化后,用高效液相色谱串联质谱仪(RRLC/MS/MS)进行定性、定量分析.结果 经方法学验证,113种农药重复性和精密度良好,回收率在72.3％ ～ 115.2％之间,相对标准偏差小于15％,检测限大多低于0.001mg/kg,符合农药多残留测定要求.与农药质谱数据对照,发现菊花中农药残留有13种之多.结论 本方法前处理简便、灵敏度高、重复性好,可用于菊花样品中农药残留的筛查和定量测定.