健脾解毒方介导p38MAPK信号转导下调幽门螺杆菌诱导的胃癌细胞环氧合酶2启动子活性

目的:探讨幽门螺杆菌(Helicobacter pylori)对人胃癌MKN45细胞环氧合酶2(Cyclooxygenase-2,COX-2)启动子荧光素酶报告基因重组质粒(pGL3-Basic-COX-2-promoter)活性的影响和健脾解毒方对其的调控作用及可能的机制。方法:将构建的pGL3-Basic-COX-2-promoter转染MKN45细胞,观察H.pylori对其活性的影响。运用p38MAPK特异性抑制剂SB203580阻断p38MAPK信号通路,观察H.pylori对MKN45细胞COX-2启动子活性的影响。Western blot法检测健脾解毒方对H.pylori感染的MKN45细胞p38MAPK信号通路及其下游激活转录因子-2(ATF-2)表达的影响。结果:H.pylori可增加COX-2启动子活性;抑制p38MAPK信号通路后,COX-2启动子活性明显下调;健脾解毒方能够抑制H.pylori诱导的p38MAPK及ATF-)的活性。结论:H.pylori通过p38MAPK信号通路上调胃癌细胞COX-2启动子活性;健脾解毒方通过调控p38MAPK/ATF-2信号通路,抑制COX-2启动子活性,是其防治H.pylori诱发胃癌的机制之一。     

健脾解毒方对幽门螺杆菌诱发胃癌过程微血管密度及环氧合酶表达的影响

目的 探讨健脾解毒方在幽门螺杆菌(Helicobacter pylori, H. pylori)长期感染诱发C57BL/6小鼠胃癌过程中对微血管密度(microvessel density, MVD)和环氧合酶-2(COX-2)的调控作用,为其治疗H. pylori相关性胃病提供实验依据。     

幽门螺杆菌相关性胃炎中医药研究进展

<正>幽门螺旋杆菌(H.pylori)是世界上最常见的感染之一,经研究表明,H.pylori感染与慢性胃炎、消化性溃疡、胃黏膜相关淋巴组织淋巴瘤及胃癌的发生密切相关。所以,控制H.pylori感染成为治疗H.pylori相关性胃病的重要课题。由于     

口臭与幽门螺杆菌感染的关系研究

目的研究口臭与幽门螺杆菌(H.pylori)感染的关系。方法对78例口臭患者(口臭组)与70例体检者(对照组)进行14C尿素呼气试验,判断H.pylori阳性感染率及感染程度。结果口臭组H.pylori感染率及感染程度均明显高于对照组(P<0.01);口臭组有明确慢性胃炎者H.pylori感染程度也显著重于无明确慢性胃炎者(P<0.05)。结论口臭与H.pylori感染关系密切,慢性胃炎H.pylori感染严重是口臭的主要原因之一,H.pylori参与口臭的病机过程。     

替硝唑等四联疗法治疗幽门螺杆菌阳性消化性溃疡疗效观察

消化性溃疡是胃酸相关性疾病 ,幽门螺杆菌 (H .pylori)感染是消化性溃疡复发的主要因素 ,对有H .pylori感染的消化性溃疡患者行根除H .pylori治疗已成共识。笔者采用替硝唑、阿莫西林、奥美拉唑、枸橼酸铋钾四联疗法治疗H .pylori阳性消化性溃疡患者取得较好疗效 ,现报道如下。     

戊己水煎液对幽门螺杆菌感染胃上皮细胞的保护作用

目的:探讨戊己水煎液(和剂局方)对幽门螺杆菌(H·pylori)感染的SGC-7901细胞的保护作用.方法:将H·pylori接种于SGC-7901细胞,然后加入不同浓度的戊己水煎液,采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT colorometric Assay)和酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测SGC-7901细胞存活率及所分泌细胞因子IL-8的含量.结果:戊己水煎液对H·pylori感染的SGC-7901细胞存活率明显高于对照组,差异有显著性(P<0.01);戊己水煎液组细胞分泌的IL-8含量明显低于对照组,差异有显著性(P<0.01).结论:戊己水煎液能提高由H·pylori感染的SGC-7901细胞的存活率;对H·pylori感染的SGC-7901细胞分泌的IL-8有抑制作用.     

幽门螺杆菌感染性胃癌组织中Legumain、MMP-9的表达及其临床意义

目的探讨幽门螺杆菌(H.pylori)感染性胃癌组织中半胱氨酸蛋白酶(Legumain)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达情况及其临床意义。方法选取手术切除胃癌组织标本109例,采用Warthin-Starry银染色法检测H.pylori感染情况,根据其H.pylori感染情况分为H.pylori阳性组59例和H.pylori阴性组50例,同时选取癌旁正常胃组织标本55例作为对照组,采用免疫组化方法检测各组Legumain、MMP-9表达情况。结果胃癌组织Legumain阳性率、MMP9阳性率均明显高于对照组(P均<0.05)。H.pylori阳性组Legumain、MMP-9表达均与患者性别、组织分化程度、临床分期和淋巴结转移相关;其中男性、组织学分化程度越低、临床分期越高及合并淋巴结转移患者Legumain阳性表达率、MMP-9阳性表达率均明显高于H.pylori阴性组(P均<0.05);Legumain、MMP-9阳性表达率越高;经Pearson相关性分析发现:胃癌组织Legumain与MMP-9表达呈正相关(r=0.46,P<0.05)。结论胃癌组织Legumain、MMP-9呈过度表达,其中H.pylori感染性胃癌组织Legumain、MMP-9阳性表达更显著,且两者表达与胃癌病情发生与发展密切相关,H.pylori感染可作为胃癌发生和发展的独立危险因素之一。     

~(14)C呼气试验联合幽门螺杆菌抗体对143例特发性血小板减少性紫癜患者幽门螺杆菌的检测

目的通过14C呼气试验联合幽门螺杆菌(H.pylori)抗体对143例特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者H.pylori的检测,了解ITP患者H.pylori感染情况。方法对ITP患者同时进行14C呼气试验及H.pylori抗体检查。结果 14C呼气试验阳性者占54.55%,H.pylori抗体阳性者占58.04%。2种方法检测结果有较好的一致性,均可作为临床诊断H.pylori感染指标。结论 14C呼气试验或H.pylori抗体检测均可准确了解ITP患者H.pylori感染状态。     

幽门螺杆菌感染中医治法研究进展

<正>幽门螺杆菌(H.pylori)与多种消化系统疾病密切相关,已被WHO列为胃癌的第一类致癌因子。随着抗H.pylori临床干预的普及,H.pylori耐药问题已成为H.pylori感染根除失败的主要因素[1],寻找安全有效抗H.pylori的非抗生素药物意义重大。中医药治疗H.pylori感染积累了丰富的经验,多种中医治法和方药被用于H.pylori感染的治疗,现将中医     

功能性消化不良中医体质类型与H.pylori感染的相关性研究

目的:探讨功能性消化不良中医体质类型与H.pylori感染的相关性,从中医体质的角度为中医药防治H.pylori感染提供理论依据。方法:采用王琦的标准化的9种中医体质量表对200例功能性消化不良患者进行调查,并行C14呼气试验。结果:功能性消化不良患者各中医体质类型中气虚质、湿热质H.pylori阳性率最高,与其他体质类型比较差异有统计学意义(P0.05)。结论:功能性消化不良中医体质类型与H.pylori感染存在一定的相关性,气虚质、湿热质对H.pylori有一定的易感性。     

健脾解毒方介导p38MAPK/ATF-2信号通路抑制幽门螺杆菌诱导的人胃癌细胞COX-2表达

目的 探讨健脾解毒方对幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染人胃癌MKN 45细胞环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)表达及其p38MAPK信号通路的调控机制。     

健脾益气法对结直肠炎病变后诱发结直肠癌小鼠的影响研究

目的:观察健脾益气中药对结直肠炎病变后诱发结直肠癌小鼠白细胞介素(Interleukin,IL)-6和表皮细胞生长因子(Epidermal Growth Factor,EGF)蛋白的影响。方法:将30只雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组、模型组和治疗组,每组10只。采用偶氮氧化甲烷/葡聚糖硫酸钠方法建立结直肠炎相关结直肠癌小鼠模型,治疗组以加减四君子汤颗粒加蒸馏水配成溶液,药物质量浓度19.92%,3.32 g/kg灌胃,模型组以蒸馏水灌胃。4周后处死各组小鼠并留取血液和结直肠组织组织标本,酶联免疫吸附试验(Enzyme-linked immunosorbent method,ELISA)法检测血清IL-6浓度,苏木精-伊红染色法(Hematoxylin-eosin Staining,简称HE染色法)染色镜下观察小鼠结肠组织病理变化,Western-blot法检测EGF蛋白表达。结果:健脾益气治疗组小鼠的体质量较模型组明显增加,差异有统计学意义(P<0.01);治疗组小鼠血清IL-6表达量比模型组显著下降,差异有统计学意义(P<0.01);治疗组小鼠的EGF蛋白表达显著降低,与模型组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:健脾益气中药能增加结直肠炎病变后诱发结直肠癌小鼠的体质量,减少炎症因子IL-6的表达和降低EGF蛋白表达,可为健脾益气中药抗结肠癌临床应用提供科学依据。     

健脾消癌方及其拆方对肠癌模型裸鼠体质量、瘤体、转移率及Caspase-3,Bcl-xL,Bax蛋白表达的影响

目的:观察健脾消癌方及其拆方对肠癌模型裸鼠体质量、瘤体、转移率及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3),抗凋亡蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-x L(B-cell lymphoma/leukemia-x L,Bcl-x L)和Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)表达的影响。方法:建立裸鼠肠癌原位瘤模型,分为模型组,健脾益气组(15 g·kg-1),化瘀解毒组(15 g·kg-1),健脾消癌方组(全方组,15 g·kg-1),5-氟尿嘧啶组(5-Fu,20 mg·kg-1),共5组。分别予以相应药物干预4周,观察裸鼠体重、瘤体抑制率、转移率,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Caspase-3,Bcl-x L,Bax蛋白表达。结果:健脾益气组、全方组体重下降低于模型组(P0.05),化瘀解毒组体重下降高于模型组(P0.05);健脾益气组对瘤体的抑制与模型组比较无统计学差异,与空白组比较,化瘀解毒组、全方组对瘤体均有较好抑制作用(P0.05);各组均出现不同程度地转移,其中模型组、健脾益气组总体转移率达90%,化瘀解毒组、全方组转移率分别为70%,60%,低于模型组(P0.05);与模型组比较,化瘀解毒组及全方组能够上调Bax蛋白表达,下调Caspase-3,Bcl-x L蛋白表达(P0.01)。结论:健脾消癌方中健脾益气组优势在于稳定体重,化瘀解毒组优势在于抑制肿瘤,抑制转移;全方组能够稳定体质量,抑制肿瘤,抑制转移,全方配伍疗效最优,其抗肿瘤机制可能是上调凋亡相关蛋白Bax及下调Caspase-3,Bcl-x L,诱导肿瘤细胞凋亡。     

健脾解毒方介导JNK/SAPK信号通路调控人结肠癌细胞多药耐药

目的:探讨健脾解毒方(JPJD)介导JNK/SAPK信号通路对人结肠癌细胞多药耐药的调节机制。方法:人结肠癌细胞HCT8和多药耐药细胞HCT8/V常规培养,应用Western Blot检测健脾解毒方药物血清对P-糖蛋白(P-gp)以及c-Jun氨基端激酶(JNK)信号通路中c-Jun63/73磷酸化水平;RFQ-PCR检测MDR1 mRNA的表达;电感耦合等离子质谱法(ICP-MS)检测细胞内奥沙利铂(L-OHP)药物浓度的改变。结果:人结肠癌多药耐药细胞HCT8/V的P-gp和c-Jun的磷酸化表达明显高于HCT8细胞;与对照组比较,健脾解毒方药物血清作用48h后HCT8/V细胞的c-Jun的Ser63/73磷酸化、P-gp、MDR1 mRNA水平显著降低(P0.01),细胞组内L-OHP浓度明显增高(P0.01)。结论:健脾解毒方通过降低c-Jun的Ser63/73磷酸化,抑制JNK信号通路的激活,降低P-gp的表达,逆转HCT8/V细胞的多药耐药。     

健脾解毒方对人结肠癌多药耐药细胞的逆转作用

目的:探讨健脾解毒方对人结肠癌多药耐药细胞HCT8/V的逆转作用及其可能机制.方法:人结肠癌HCT8/V多药耐药细胞常规培养,5％健脾解毒方药物血清作用48 h后,MTT法检测HCT8/V细胞对化疗药敏感性的影响,高效液相色谱法( HPLC)检测耐药细胞内长春新碱(VCR)药物浓度,流式细胞仪分析健脾解毒方对5-氟尿嘧啶(5-Fu)诱导的HCT8/V细胞凋亡和细胞周期的影响.结果:健脾解毒方能增加HCT8/V细胞对VCR、顺铂(DDP)、5-Fu、吡柔比星(THP)4种化疗药物的敏感性,4种化疗药的IC50分别从( 191.08±18.18 )mg·L-1下降到(90.13±6.33 )mg·L-1;(290.79±28.38) mg·L-1下降到(22.16±1.82) mg·L-1;(23.12±1.99) mg·L-1下降到(9.88±0.86 )mg·L-1;(26.40±2.92) mg·L-1下降到(19.41±1.48) mg·L-1;健脾解毒方药物血清作用HCT8/V细胞48 h后细胞内VCR浓度明显增高(P＜0.01),且呈剂量依赖性.健脾解毒方能提高5-Fu诱导的HCT8/V细胞的凋亡率,使细胞阻滞于G1期.结论:健脾解毒方通过增加结肠癌多药耐药细胞内化疗药物浓度,抑制细胞增殖,诱导其凋亡,逆转HCT8/V细胞株的多药耐药性.     

健脾化瘀解毒法对慢性萎缩性胃炎的临床疗效及对细胞周期蛋白E表达的影响

目的:观察健脾化瘀解毒法对慢性萎缩性胃炎(CAG)癌前病变(PLGC)病人的疗效以及对细胞周期蛋白E(Cyclin E protein)表达的影响.方法:60例患者随机分为治疗组和对照组各30例.另设10例健康对照组.对照组采用胃复春片,4片/次,3次/d.治疗组采用健脾化瘀解毒方治疗,常规水煎服分3次服用,1剂/d.疗程均为24周.观察两组的临床疗效、胃镜、病理及幽门螺杆菌(HP)的改变;测定Cyclin E蛋白的表达量.结果:治疗组总有效率93.33％,对照组总有效率86.67％,差异不明显;治疗组胃镜总有效率(80.00)优于对照组(60.00％)(P＜0.05);治疗组病理疗效总有效率(76.67％)优于对照组(60.00％)(P＜0.05);治疗组HP根除率(68.18％)明显优于对照组(21.05％)(P＜0.05);两组治疗后Cyclin E蛋白的表达均降低,治疗组降低更显著(P＜0.01).结论:健脾化瘀解毒法能提高CAG胃镜及病理疗效,HP根除率高;健脾化瘀解毒法能调节Cyclin E蛋白的表达,从而阻止胃癌前病变发展.     

氢溴酸槟榔碱对C57BL/6和W/W^v突变小鼠离体胃肠平滑肌条动力的作用研究

目的利用C57BL/6和W/W^v突变小鼠研究Cajal间质细胞(interstitial cells of Cajal,ICC)对小鼠胃肠各部位平滑肌条运动的影响,并通过胆碱能受体拮抗剂阿托品和钠通道阻断剂河豚毒素(tetrodotoxin,TTX)给药干预初步探讨氢溴酸槟榔碱(arecoline hydrobromide,Ah)促进小鼠平滑肌条动力作用的机制。方法制备C57BL/6和W/W^v突变小鼠胃肠各部位(胃体、胃窦、空肠和结肠)平滑肌环形肌条标本,分别观察和记录2种小鼠离体胃肠各部位平滑肌条的运动,比较2种小鼠胃肠各部位肌条收缩情况(收缩振幅、收缩频率和张力),并观察Ah对2种小鼠胃肠各部位肌条收缩的影响及阿托品、TTX对Ah促动力作用的干预。结果C57BL/6小鼠胃体部平滑肌环形肌条的收缩为具有较高振幅储存食物和低频率少量推进性的收缩波形,胃窦部为高振幅高张力较高频率推进性的收缩波形,空肠部为低振幅高频率快速推进性的收缩波形,结肠部为分散性中等振幅和频率的收缩波形;W/W^v突变小鼠胃体部环形肌条的收缩频率、收缩振幅都在较低水平,张力较其他部位偏高,胃窦部收缩频率、收缩振幅和张力都在较高水平,空肠部的收缩频率仍是最高,收缩振幅和张力却最低,结肠部的收缩频率最低,收缩振幅和张力处于中等水平;C57BL/6小鼠各部位肌条的收缩力均远大于W/W^v突变小鼠(P<0.05,P<0.01,P<0.001);Ah能明显增加C57BL/6小鼠各部位肌条的收缩力(P<0.05,P<0.01,P<0.001),对W/W^v突变小鼠各部位肌条的收缩力只有轻微增加(P<0.05,P<0.001);阿托品能抑制Ah的促动力作用,而TTX并不能阻断。结论ICCs在调控小鼠胃肠平滑肌条运动中具有重要作用,氢溴酸槟榔碱的促动力作用机制除了ICCs网络的调控外,还有一部分神经调控。另外,氢溴酸槟榔碱可能是经M型受体起作用的。     

二次免疫诱导C57BL/6J小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎动物模型的建立

目的:探讨C57BL/6J小鼠建立实验性自身免疫性脑脊髓炎模型的可能性及其发病特点。方法:使用小鼠脑脊髓匀浆(spinal cord homogenate,SCH)免疫C57BL/6J小鼠,完全福(氏)免疫佐剂为免疫佐剂,并在尾静脉注射百日咳杆菌,建立EAE模型。结果:自制SCH免疫C57BL/6J小鼠可见明显脱髓鞘改变。两次免疫法与一次免疫法相比,发病率较高(P>0.05),神经功能评分较高(P>0.05),发病时间延长(P>0.05)。结论:SCH免疫C57BL/6J小鼠的EAE动物模型,主要表现为急性单相病程,从临床表现和病理学特点来看符合人类MS的病理特点,值得在以后的研究中进一步研究探讨。