离体条件下培养物中冬凌草甲素积累与其组织结构关系

目的： 研究冬凌草甲素动态积累变化关键期培养物显微、超微结构的变化,探讨培养物组织结构与冬凌草甲素积累的相关性。 方法： 采用高效液相色谱法研究了离体培养过程中培养物内冬凌草甲素积累的动态变化规律。在此基础之上,采用石蜡切片、透射电镜方法研究了培养物组织结构与冬凌草甲素积累的关系。 结果： 离体培养过程中培养物中冬凌草甲素积累表现出有-无-有的规律性,随着叶片外植体的脱分化,培养物内叶绿体数目逐渐减少,冬凌草甲素的含量也随之逐渐降低,当冬凌草甲素再次积累时,培养物内叶绿体数目再次增多且出现了维管组织的分化。 结论： 冬凌草甲素积累合成与培养物叶绿体数目的多少及内部维管系统的分化有着紧密的联系。     

稀土元素对冬凌草愈伤组织生长及冬凌草甲素、乙素含量的影响

目的:探讨稀土元素镧、铈对冬凌草愈伤组织生长及冬凌草甲素、乙素含量的影响.方法:冬凌草均匀愈伤组织在添加不同浓度La3或Ce3的培养基中培养,通过质量法测定愈伤组织鲜质量、绘制生长曲线,HPLC测定甲素、乙素含量.结果:CeCl3·7H2O浓度为1μmol·L-1时,愈伤生物量最高,是空白条件下的2.4倍.空白及对照条件下甲素含量均为0;空白条件下乙素含量最低为0.11％,随着Ce3+浓度升高而升高,当浓度为10 μmol· L-1时高达0.58％;乙素随着La3+浓度升高而降低,当浓度为0.1 μmol· L-1时含量高达0.44％.结论:0～ 10 μmol·L-1的La3+及Ce3+均有利于冬凌草愈伤生物量的积累及乙素的合成,对甲素的合成无影响,将CeCl3 ·7H2O浓度10 μmol· L-1作为最佳条件选择.     

高效液相色谱法测定冬凌草中冬凌草甲素及冬凌草乙素的含量

目的：建立冬凌草的质量控制方法。方法：高效液相色谱法同时对冬凌草中冬凌草甲素、冬凌草乙素进行了含量测定。采用C18柱，以甲醇-水(55：45)为流动相，检测波长238nm。结果：冬凌草甲素的浓度在0．152～1．52μg／ml，冬凌草乙素的浓度在0．2～2μg／ml范围内，线性关系良好(冬凌草甲素r=0．9998，n=5；冬凌草乙素r=0．9992，n=5)，平均回收率冬凌草甲素为99．1％，RSD为0．4％；冬凌草乙素为98．0％，RSD为0．6％。结论：该法准确、灵敏、可靠，可用于冬凌草的质量控制。     

HPLC法测定冬凌草中冬凌草甲素的含量

目的:建立冬凌草药材中冬凌草甲素的含量测定方法。方法:采用RP-HPLC法测定冬凌草甲素的含量。色谱柱Agilent ZORBAX SB-C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为甲醇—水(52∶48),检测波长239 nm,柱温35℃,流速1 mL/min。结果:冬凌草甲素在124～1 240 ng范围内呈良好线性关系(r=0.999 997),平均回收率为100.28%,RSD为3.0%。结论:该方法简便、快速、准确,具有良好的重复性和回收率,可作为冬凌草药材的质量控制方法。     

冬凌草片中冬凌草甲素的含量测定

目的:通过对25批次农村基本药物冬凌草片的含量测定的结果比较,考察冬凌草片中冬凌草甲素的稳定性.方法:采用HPLC法对冬凌草片中的冬凌草甲素进行含量测定.结果:25批次冬凌草片中24批次含量合格,1批不合格.结论:冬凌草片中冬凌草甲素的稳定性相对较差.     

冬凌草中冬凌草甲素的提取工艺研究

目的：优选冬凌草中冬凌草甲素的最佳提取工艺。方法：采用正交试验法,以冬凌草甲素的提取量为考察指标,对乙醇浓度、乙醇用量、回流时间和次数等因素进行研究。结果：最佳提取工艺为加85％乙醇8倍,回流3次,每次1h。结论：该提取工艺为冬凌草工业化生产提供了科学依据。     

HPLC测定冬凌草饮片中冬凌草甲素含量

目的:建立冬凌草饮片的含量测定方法,并对市售饮片进行含量分析,以考察其质量。方法:色谱柱:Agilent ZORBAX Eclispse XDB-C18柱(4.6mm×150mm,5μm),流动相:甲醇∶水(50∶50),检测波长:240nm。结果:冬凌草甲素在0.41～1.02μg范围内呈良好线性关系,r=0.9998,加样回收率平均为99.2%(n=9,RSD=1.5%)。结论:该法灵敏度高、操作简便、结果准确。可用于冬凌草饮片的含量测定。     

薄层扫描法测定冬凌草中冬凌草甲素的含量

利用CS-9301双波长薄层扫描仪对冬凌草中冬凌草甲素进行了含量测定。该法简便快速、准确灵敏、结果稳定、重现性好,回收率为98.03％。     

冬凌草的形态组织鉴别及冬凌草甲素的含量测定

本文对冬凌草 Rabdosia rubescens进行了生药性状、显微组织特征鉴定,并以高效液相色谱法测定其所含冬凌草甲素的含量。     

冬凌草甲素的提取工艺研究

目的 采用近红外光谱(NIR)技术对冬凌草中冬凌草甲素的提取工艺进行研究。方法 采用柱色谱法分离冬凌草甲素，应用NIR技术寻找最佳工艺条件。结果 此工艺所得冬凌草甲素纯度较高，且样品与对照品的HPLC峰保留时间相同，NMR和IR图谱相同。结论 本法洗脱速度快，安全、成本低、方便，并且重现性好。     

聚乙二醇-6000对冬凌草种子萌发、幼苗生长及 次生代谢产物积累的影响

目的:研究干旱胁迫对冬凌草种子萌发及其次生代谢产物形成的影响,揭示冬凌草中有效成分的积累与干旱胁迫的关系。方法:采用聚乙二醇(PEG)-6000及高效液相色谱技术(HPLC)对干旱胁迫下的冬凌草种子萌发、幼苗生长及次生代谢物的积累进行了研究。结果:干旱胁迫下,冬凌草种子萌发、幼苗生长受到不同程度的抑制,其内冬凌草甲素含量,随着胁迫程度的增加受到明显的影响,但迷迭香酸含量无明显的变化。结论:干旱胁迫下对冬凌草种子萌发、幼苗生长及其内冬凌草甲素的合成有着明显的影响。     

Pb2+胁迫对冬凌草种子萌发和幼苗生长的影响

以冬凌草种子为材料,研究铅(Pb2+)溶液(0,135,270,540,1 080 mg·L-1)对冬凌草种子萌发和幼苗生长的影响。结果表明:1低浓度Pb对冬凌草种子萌发无显著影响,Pb质量浓度135 mg·L-1条件下的种子发芽势高于对照,发芽速度快于对照,但差异均不显著;中高质量浓度Pb(270~1 080 mg·L-1)对种子萌发有显著的抑制效应,随着Pb浓度的升高,种子发芽率、发芽势和发芽指数呈递减趋势,均显著低于对照(P<0.05),发芽率比对照低23.97%~55.37%。2低质量浓度Pb(135 mg·L-1)条件下,冬凌草幼苗生长活力指数低于对照,但差异不显著;中高质量浓度Pb(270~1 080 mg·L-1)对幼苗生长有显著抑制效应(P<0.05),胚根长、胚芽长、生物量、生长活力指数均显著低于对照;胚芽和胚根生长受Pb胁迫,其中胚根生长受抑制程度大于胚芽,胚根长比对照低43.09%~100%。3冬凌草Pb富集系数为0.76~2.59,随Pb浓度增高而增大;Pb生物富集是抑制幼苗生长的主要原因。4经拟合模型预测分析,比对照发芽率和生物量鲜重降低10%的Pb临界质量浓度分别为195.18,101.65 mg·L-1。     

TLC测定冬凌草叶中冬凌草甲、乙素的含量

 目的：研究冬凌草叶中冬凌草甲、乙素的含量测定。方法：采用薄层扫描法进行测定。结果：冬凌草甲素浓度在9.50μg～47.50μg之间线性关系良好,相关系数R=0.999,回收率为98.54%,测定的RSD＝1.41%。冬凌草乙素浓度在9.98μg～49.90μg之间线性关系良好,相关系数r＝0.999,回收率为98.07%,测定的RSD＝1.36%。结论：本法简便、准确、灵敏,重现性好,可用于冬凌草的质量控制。由本法测定结果表明,生长在济源太行山区8月份的冬凌草叶中冬凌草甲、乙素的含量最高。     

HPLC测定冬凌草中迷迭香酸、冬凌草甲素和猫眼草黄素的含量

建立同时测定冬凌草药材中迷迭香酸、冬凌草甲素和猫眼草黄素含量的高效液相色谱方法。采用Ultimate C₁₈色谱柱(4.6 mm×250 mm, 5 μm);流动相甲醇-0.1%甲酸水溶液,梯度洗脱;流速1.0 mL·min^-1;柱温30℃;检测波长338,242 nm。迷迭香酸、冬凌草甲素和猫眼草黄素的线性范围分别为0.222~2.78,0.227~2.84,0.005 68~0.071 μg;平均加样回收率分别为102.9%(RSD 1.9%),99.6%(RSD 1.1%),102.5%(RSD 0.94%) 。该方法简便、准确,重复性好,可用于冬凌草药材的质量控制。     

Antimicrobial activities of methanol extract and compounds from stem bark of Vismia rubescens

Ethnopharmacological relevance

The plant, Vismia rubescens (Guttiferae) is popularly used in Cameroon and in several parts of Africa as febrifugal and for the treatment of various microbial infections (skin diseases, diarrhoea and venereal diseases).

Aim of the study

This study was mapped out to evaluate the antimicrobial activities of the methanol extract and compounds from the stem bark of Vismia rubescens.

Materials and methods

Structures of the compounds obtained after column chromatography of the methanol-soluble fraction were determined by spectroscopy and in comparison with published data. The broth micro-dilution method was used to evaluate the antimicrobial activities against three bacteria species (Salmonella typhi, Stahylococcus aureus and Pseudomonas aeruginosa) and four yeast species (Candida albicans, Candida tropicalis, Candida parapsilosis and Cryptococcus neoformans).

Results

Chemical analysis of the methanol extract from the stem bark of Vismia rubescens yielded five known compounds 1,4,8-trihydroxyxanthone (1), 1,7-dihydroxyxanthone (2), physcion (3), friedelin (4) and friedelanol (5). The crude extract and compounds 1, 2 and 3 exhibited both antibacterial and antifungal activities that varied between the microbial species (MIC = 3.12–1000 μg/ml). Compounds 2 and 3 were the most active (MIC = 3.12–100 μg/ml) while Stahylococcus aureus and Pseudomonas aeruginosa were sensitive to all the tested compounds. The antimicrobial activity of this plant as well as that of compounds 1 and 2 is being reported here for the first time.

Conclusion

These results provide promising baseline information for the potential use of this plant as well as some of the isolated compounds in the treatment of skin diseases and diarrhoea.     

蓝萼香茶菜的抗补体活性成分研究

目的:在前期研究基础上,深入研究蓝萼香茶菜的化学成分及其抗补体活性.方法:通过溶血试验,对蓝萼香茶菜各部位进行抗补体活性测试,以抗补体活性作为导向分离手段,运用多种色谱方法分离纯化蓝萼香茶菜中的化学成分,采用现代谱学技术进行结构鉴定,确定抗补体活性成分.结果:蓝萼香茶菜的正丁醇部位活性较强,从蓝萼香茶菜中分离得到11个化合物,分别为豆甾醇(1),豆甾醇-9(11)-烯-3-醇(2),蓝萼丁素(3),尾叶香茶菜丙素(4),山楂酸(5),科罗索酸(6),minheryins Ⅰ (7),香叶木素(8),咖啡酸乙烯酯(9),咖啡酸(10),牡荆苷(11).抗补体活性实验表明,化合物9,10以及前期分离得到的异槲皮苷、芦丁、槲皮素、槲皮素-3-甲醚、木犀革素、木犀草素-7-甲醚和芹菜素对经典途径的补体激活具有不同程度的抑制作用.结论:化合物2,4,6～9,11为首次从该植物中获得,咖啡酸的抗补体活性最强,CH50为0.041 g·L-1.     

河南产冬凌草的质量评价

目的:对产于河南济源地区不同品种冬凌草资源进行质量评价.方法:以冬凌草甲素为对照,按照《中国药典》(2010年版),采用高效液相色谱法,Agilent TC-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相甲醇-水(55∶45),检测波长239nm,柱温25℃,流速1 mL· min-1,对收集到的34个不同品种冬凌草中冬凌草甲素的含量进行测定.回归方程为Y=1006X+9.046(r =0.9999),线性范围在0.488 ～4.88 μg与峰面积线性关系良好,平均回收率为98.80％,RSD 2.17％.结果:不同品种的冬凌草中冬凌草甲素的含量有显著的差异,其中最低含量是0.63％,最高含量是1.98％,均符合药典标准.结论:冬凌草甲素是冬凌草的主要有效成分,可以作为冬凌草质量评价的一个重要指标.本方法简单易行,重复性好且分离度高,为评价冬凌草的质量提供科学依据.