海珠益肝胶囊对免疫性肝损伤小鼠Th1／Th2细胞的调节作用

目的：探讨海珠益肝胶囊对免疫性肝损伤小鼠外周血Th1／Th2细胞平衡的调节作用。方法：应用尾静脉注射卡介苗（BCG）和脂多糖（LPS）建立免疫性肝损伤小鼠模型，分离小鼠淋巴细胞，经佛波醇乙酯（PMA）、离子霉素、莫能菌素刺激培养6h后，收获细胞，利用细胞内细胞因子染色流式细胞术检测Th1／Th2比例；另外经刀豆蛋白A（ConA）刺激培养72h后，收集培养上清，ELISA法检测IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10的水平。结果：在模型组，小鼠外周血PBMC中Th1型细胞因子IL-2、IFN-γ水平升高，Th2型细胞因子IL-4、IL-10水平降低，与正常对照组比较有显著性差异（P〈0．05）；Th1细胞的百分率升高，Th2细胞的百分率降低，Th1／Th2的比值增大，与肝组织损害程度呈现正相关。海珠益肝胶囊能够抑制Th1型细胞因子的分泌，降低Th1细胞的百分率，恢复Th1／Th2的比例，对肝组织损害具有保护和改善作用（P〈0．05）。结论：Th1／Th2细胞失衡是造成小鼠免疫性肝损伤的原因之一，Th1应答占主导地位，海珠益肝胶囊能够调节Th1／Th2细胞平衡，对肝组织损害具有保护和改善作用，可能是其免疫药理机制之一。     

朝药鹿茸对哮喘小鼠模型气道炎症的影响

目的：探讨朝药鹿茸对哮喘小鼠气道炎症和Th1／Th2类细胞因子变化的影响及其可能机制。方法：雄性BALB／c小鼠32只随机分成4组。分别采用酶联免疫吸附法（ELISA）和蛋白质印迹检测支气管肺泡灌洗液（BALF）中白细胞介素-4（IL-4）、IL-5、IL-13及γ-干扰素（IFN-γ）含量,观察BALF中炎症细胞变化。结果：与正常对照组比较,哮喘模型组小鼠BALF中炎症细胞计数、IL-4、IL-5、IL-13水平明显增高和IFN-γ水平显著降低（P〈0．05）。与哮喘模型组比较,朝药鹿茸低、高剂量组小鼠BALF中炎症细胞计数、IL-4、IL-5、IL-13水平降低,IFN-γ水平显著上升（P〈0．05）。结论：朝药鹿茸对哮喘小鼠具有保护作用,其机制可能与调节IL-4／IFN-γ平衡失调、减轻炎症细胞浸润有关。     

钩吻素子对小鼠CD4+T淋巴细胞Th1类及Th2类细胞因子分泌的影响

目的:研究钩吻素子(Koumine,Kou)对小鼠CD4 T淋巴细胞Th1类及Th2类细胞因子分泌的影响.方法:分离纯化小鼠脾脏CD4 T淋巴细胞,经刀豆球蛋白A(ConcanavalinA,ConA)刺激诱生细胞因子,然后加入不同浓度的Kou,继续培养24小时后离心收集细胞培养上清.用酶联免疫法(ELISA法)检测细胞上清中Th1类细胞因子IL2、IFN-γ以及Th2类细胞因子IL-4、IL-10的含量变化情况,观察药物对CD4 T淋巴细胞因子表达的影响.结果:对于Th1型细胞因子,各浓度组Kou作用24 h后均可显著降低IL-2、IFN-γ的水平,并呈剂量依赖性;对于Th2型细胞因子,Kou对IL-4表达影响不大,但中浓度组Kou(100μg/ml)可显著升高IL-10的水平.结论:对CD4 T细胞Th细胞因子分泌的调节可能是Kou治疗银屑病等T细胞活化异常炎症性疾病的免疫药理机制之一.     

砒霜对狼疮鼠脾Th细胞及分泌细胞因子的影响

目的:探讨砒霜(Arsen ic Trioxide,As2O3)对体外MRL/lpr狼疮小鼠脾Th细胞及分泌相关细胞因子IFN-γ和IL-10的调节作用。方法:通过免疫磁珠分别分选MRL/lpr和C57BL小鼠脾Th细胞,Th细胞随机分PHA组和空白组,采用酶联免疫吸附反应(ELISA)和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法比较MRL/lpr和C57BL小鼠Th细胞分泌IFN-γ和IL-10及其mRNA水平的差异,然后观察As2O3对MRL/lpr小鼠Th细胞分泌IFN-γ和IL-10及其mRNA水平的影响。细胞计数试剂盒(CCK-8)观察不同浓度(0.5、1.0、1.5、2.0μmol/L)及作用时间As2O3对Th细胞增殖的影响。结果:(1)与C57BL相比,MRL/lpr小鼠各组Th细胞分泌的IFN-γ和IL-10水平显著增高,1.0μmol/L的As2O3能明显抑制MRL/lpr小鼠各组上述因子的分泌;(2)PHA组的IL-10 mRNA和IFN-γmRNA水平在MRL/lpr小鼠中表达均高于C57BL小鼠,As2O3能抑制MRL/lpr小鼠Th细胞空白组和PHA组中IL-10mRNA和IFN-γmRNA的高表达;(3)除0.5μmol/L的As2O3能刺激Th细胞的增殖,≥1.0μmol/L的As2O3能抑制Th细胞的生长,但浓度增加对细胞存活率有明显的影响。结论:适当浓度的砒霜能有效下调Th细胞因子IL-10和IFN-g mRNA的异常分泌及而影响因子的表达,但并不产生过度的免疫抑制,并能下调MRL/lpr狼疮小鼠脾脏Th细胞的异常增殖而不影响其存活率,从而调节狼疮鼠的异常免疫功能,可能是砒霜治疗SLE的重要机制之一。     

金银花、连翘对大肠杆菌感染模型小鼠血清Th1/Th2细胞因子的调节作用

目的探讨金银花、连翘对大肠杆菌感染小鼠的保护作用机制。方法将雌性昆明种小白鼠随机分为金银花组和连翘组,每组再分为正常组、中药组、模型组和治疗组4个亚组进行处理,观察小鼠的临床状态,双抗体夹心法酶联免疫吸附实验(Elisa)检测血清γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)和白细胞介素-10(IL-10)的表达水平。结果金银花(0.01 kg/L)、连翘(0.01 kg/L)水煎液对小鼠大肠杆菌的感染有保护作用。与正常组及中药组比较,模型组与治疗组小鼠血清IFN-γ、IL-4表达及IFN-γ/IL-4、IFN-γ/IL-10比值均显著升高(P均<0.01);金银花治疗组较模型组IL-10表达显著升高(P<0.05),IFN-γ表达与IFN-γ/IL-4比值有升高趋势,IL-4表达和IFN-γ/IL-10比值有下降趋势;连翘治疗组较模型组IFN-γ和IL-4表达以及IFN-γ/IL-10比值有下降趋势,IL-10表达和IFN-γ/IL-4比值有升高趋势,但均无显著性差异(P>0.05)。结论感染模型小鼠辅助性T淋巴细胞1型/2型(Th1/Th2)细胞因子分泌亢进,Th1/Th2平衡有向Th1型漂移的特点。金银花、连翘水煎液均能有效保护感染模型小鼠,其调节小鼠的免疫功能可能与调节Th1/Th2平衡相关。     

仲景合法方对BCG／LPS所致小鼠免疫性肝损伤免疫功能的影响

目的：探讨仲景合法方抗卡介苗（BCG）／脂多糖（LPS）免疫性肝损伤小鼠的免疫保护机制。方法：实验第1天小鼠尾静脉注射BCG 1mg，12天后再尾静脉注射LPS 10μg以制造免疫性肝损伤模型。造模同时，用药组给以仲景合法方不同剂量连续灌胃，连续12天。通过测定转氨酶、摘取胸腺称重，计算胸腺指数；MTT比色法检测T、B淋巴细胞增殖能力、绵羊红细胞吞噬法测定腹腔巨噬细胞吞噬能力、亚硝酸盐测定法测定NO诱生能力。生物活性法检测脾细胞产生Th1型细胞因子IFN-γ的能力，同时分离血清，用ELISA法检测Th2型细胞因子IL-4的含量。结果：仲景合法方有不同程度对抗BCB／LPS对胸腺的抑制作用，其中剂量效果最佳，而阳性对照药物联苯双酯则无效果。仲景合法方中剂量组则能对抗BCB／LPS的T、B淋巴细胞增殖作用，能够不同程度抑制T、B淋巴细胞转化、成熟。从巨噬细胞吞噬能力指标的检测中也发现，仲景合法方既能对抗BCB／LPS抑制巨噬细胞吞噬的作用，又能提高正常组的巨噬细胞吞噬能力，并促进NO的表达。仲景合法方降低损伤肝脏IFN-γ（Th1细胞因子）含量，也降低IL-4（Th2细胞因子）含量，使Th1／Th2平衡向Th1漂移回至正常。结论：仲景合法方对免疫性肝损伤小鼠具有保护作用，并能调节免疫功能。     

黄芪甲苷对OVA诱导哮喘小鼠Th细胞亚群的影响

目的观察黄芪甲苷(AST IV)对卵白蛋白(OVA)诱导的哮喘小鼠脾源性Th1及Th2的免疫调节作用。方法建立OVA诱导的小鼠哮喘模型,分离培养脾单个核细胞,加入不同浓度的黄芪甲苷。采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定细胞培养液上清液细胞因子IFN-γ、IL-4及IL-13的表达;流式细胞术(FCM)在单个核细胞内测定IFN-γ、IL-4及IL-13的百分含量。结果与OVA组比较,不同剂量黄芪甲苷(25 mg/L、50 mg/L、100 mg/L)对OVA诱导的哮喘小鼠Th细胞亚群分泌的细胞因子IFN-γ、IL-4及IL-13均有一定的抑制作用(P0.05)。结论黄芪甲苷对OVA诱导的Th2细胞应答有抑制作用,通过抑制Th1及Th2细胞达到免疫调节作用。     

增液布津汤对干燥综合征小鼠细胞因子IFN-γ、IL-6、IL-1的影响

目的：探讨增液布津汤对干燥综合征（SS）小鼠细胞因子1干扰素（IFN-γ）、白细胞介素6（IL-6）、白细胞介素1（IL-1）的影响,探寻中药对SS干预作用机理。方法：取70只BALB／c小鼠,按体重随机分为正常组、模型组、六味地黄丸组、增液布津汤小剂量组、增液布津汤中剂量组、增液布津汤大剂量组共6组,各给药组均在第0天即开始给药,每天1次,直至第60天。于首次免疫后第61天球后静脉放血处死小鼠,解剖取相应脏器及检测外周血细胞因子。结果：与正常组比较,模型组IL-1、IFN-γ、IL-6均显著增加（P〈0．01）。而给予药物后,增液布津汤各剂量纽的IL-1、IFN-γ、IL-6含量下降,与模型组比较,差异有显著性或非常显著性意义（P〈0．05,P〈0．01）。增液布津汤小剂量组IFN-γ／IL-6较模型组下降,差异有显著性意义（P〈0．05）。结论：增液布津汤通过抑制细胞因子IL-6、IFN-γ蛋白合成及分泌,间接地抑制了Th细胞的分化与增殖,调节Th1／Th2平衡来治疗SS,从而缓解SS小鼠颌下腺淋巴细胞浸润,进一步说明细胞因子在SS唾液分泌过程中发挥重要作用。     

维药神香草对COPD小鼠Th1/Th2 和Th17/Treg 平衡的影响

目的：研究维药神香草对COPD 小鼠Th1/Th2 和Th17/Treg 平衡的影响,探讨神香草治疗COPD 的免疫作用机制。方法：复制前期熏烟法建立COPD 小鼠模型,将小鼠随机分为正常组、生理盐水组、神香草高、中、低剂量组。采用酶联免疫吸附法检测小鼠血清中IFN-酌、IL-4、IL-17 及IL-10 的水平。结果：与正常组比较,COPD 模型组小鼠血清IL-4、IL-17 水平明显升高（P<0.05）,IFN-γ、IL-10 的水平明显降低（P<0.05）;神香草治疗后,与模型组比较,小鼠血清IL-4、IL-17 水平明显降低,IFN-γ和IL-10 水平明显升高。相关性分析表明IFN-γ与IL-4,IL-17 与IL-10 都呈负相关。结论：神香草在纠正Th1/Th2 和Th17/Treg 失衡方面发挥了一定的作用。     

糙叶败酱提取物对荷瘤小鼠血清细胞因子水平的影响

目的:观察糙叶败酱提取物对Sarcom a 180腹水瘤荷瘤小鼠血清细胞因子水平的影响,初步探讨其抗肿瘤作用机制。方法:建立小鼠腹水瘤模型,采用糙叶败酱提取物高(2.0 g/kg)、中(1.0 g/kg)、低(0.5 g/kg)剂量腹腔注射治疗,1次/d,连续10 d。治疗结束后,采集小鼠血清,用双抗体夹心ELISA法检测血清Th1型细胞因子IL-2、IL-12、IFN-γ、TNF-α和Th2型细胞因子IL-6、IL-10的水平。结果:高剂量组血清IL-2、IFN-γ含量升高,与模型组比较,差异显著(P<0.05)。高、中剂量组血清IL-6和IL-10含量降低,与模型组比较差异显著(P<0.01)。结论:糙叶败酱提取物能促进Th1型细胞因子IL-2、IFN-γ的产生,同时抑制Th2细胞因子IL-6和IL-10分泌,通过增强抗肿瘤免疫反应而发挥抗肿瘤作用。