核因子-κB介导非对称性二甲基精氨酸上调大鼠腹腔巨噬细胞诱导型一氧化氮合酶的表达

目的:探讨非对称性二甲基精氨酸(ADMA)上调大鼠腹腔巨噬细胞诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达是否受核因子-κB(NF-κB)调控。方法:分离培养原代Wistar大鼠腹腔巨噬细胞。分组:①正常对照组:以含10%胎牛血清(FBS)DMEM培养液与巨噬细胞共孵育;②氧化型LDL(oxLDL)组:在培养液中加oxLDL50mg/L;③A+O组:在培养液中加ADMA(15μmol/L)和oxLDL(50mg/L);④P+A+O组:在培养液中加NF-κB特异性抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC,25μmol/L)、ADMA(15μmol/L)和oxLDL(50mg/L)。以实时荧光定量PCR和Westen blotting分别检测iNOSmRNA和蛋白表达,以电泳迁移率变动分析(EMSA)和增强化学发光法(ECL)检测NF-κB活性。结果:①与正常对照组相比,oxLDL组与A+O组iNOSmRNA和蛋白表达增强,以A+O组尤为明显,2组比较差异有统计学意义(P0.05);P+A+O组iNOSmRNA和蛋白表达降低,与A+O组比较差异有统计学意义(P0.05)。②与正常对照组相比,oxLDL组与A+O组NF-κB活性增强,以A+O组尤为明显,2组相比差异有统计学意义(P0.05);P+A+O组NF-κB活性降低,与A+O组相比差异有统计学意义(P0.05)。③相关分析:NF-κB活性与iNOSmRNA和蛋白表达量均呈正相关。结论:ADMA可能通过NF-κB途径增强iNOS表达而促进巨噬细胞转化为泡沫细胞、促进动脉粥样硬化的发生发展。     

辛伐他汀对脓毒症大鼠心肌细胞核因子-κB、诱导型一氧化氮合酶表达的影响及意义

目的 观察核因子(NF)-κB和诱导型一氧比氮合酶(iNOS)在脓毒症大鼠心肌细胞的表达,同时探讨辛伐他汀对其表达的影响,以及他汀类药物的心肌保护性作用.方法 雌性Wistar大鼠30只随机分为三组:正常组(N组),盲肠结扎穿孔术组(CLP组)和辛伐他汀组(S组),处理方法:①S组:喂养辛伐他汀20 mg/kg每天一次共2w.②2w后S组与CLP组大鼠行盲肠结扎穿孔术.③术后48 h取各组大鼠心肌组织制成石蜡切片,采用HE染色和免疫组织化学染色的方法检测心肌纤维iNOS和NF-κB的蛋白表达.结果 HE染色显示CLP组大鼠心肌纤维水肿,疏松,间质充血水肿,而S组心肌的组织病理学改变较CLP组轻.免疫组织化学染色显示CLP组大鼠心肌细胞iNOS与NF-κB蛋白表达于术后48 h较N组明显增加(P＜0.05),S组大鼠心肌细胞iNOS与NF-κB蛋白表达与CLP组相比明显减弱(P＜0.05),与N组相比无明显差异(P＞0.05).结论 辛伐他汀可以减弱脓毒症大鼠心肌细胞iNOS和NF-κB的蛋白表达,改善脓毒症时的心脏功能.     

培哚普利和缬沙坦对兔动脉粥样硬化脑组织核转录因子-κB,诱导型一氧化氮合酶表达的影响

目的建立兔高胆固醇-动脉粥样硬化模型,观察脑组织核转录因子κB(NF-κB)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的阳性表达,探讨培哚普利、缬沙坦的干预效果及临床意义.方法30只雄性新西兰大白兔,随机分为4组:正常对照组(A组);高脂饮食组(B组);高脂饮食加培哚普利组(C组);高脂饮食加缬沙坦组(D组);喂饲8周后,取脑组织标本用免疫组化方法(SABC法)测定NF-κB的表达;分光光度法测定脑组织iNOS的活力.结果与对照组相比,高脂饮食组脑组织中NF-κB,iNOS水平明显升高(P<0.05);高脂饮食加培哚普利组及高脂饮食加缬沙坦组NF-κB,iNOS水平明显降低(P<0.05),但仍显著高于对照组(P<0.05).结论动脉粥样硬化致脑组织中NF-κB,iNOS表达发生的变化,与肾素-血管紧张素系统(RAS)的激活有关,培哚普利和缬沙坦从不同水平阻断RAS后,可减轻NF-κB,iNOS的表达,达到保护脑组织的作用.     

Genistein对内皮细胞内皮型一氧化氮合酶和核因子κB表达的影响

目的探讨植物雌激素Genistein对氧化型低密度脂蛋白干预的内皮细胞内皮型一氧化氮合酶和核因子κB表达的影响。方法体外培养人脐静脉内皮细胞,在氧化型低密度脂蛋白(100mg/L)干预内皮细胞的基础上,不同浓度的Genistein(10、50和100nmol/L)孵育,MTT法观察Genistein对细胞活力的影响,实时定量逆转录聚合酶链反应检测内皮型一氧化氮合酶mRNA的表达,Western blotting检测内皮型一氧化氮合酶和核因子κB蛋白的表达。结果与空白对照组相比,氧化型低密度脂蛋白(100mg/L)明显抑制细胞活力,下调内皮型一氧化氮合酶mRNA和蛋白表达,上调核因子κB蛋白表达(P0.05);Genistein明显增高细胞活力,上调内皮型一氧化氮合酶mRNA和蛋白表达,抑制核因子κB蛋白表达(P0.05),且呈浓度依赖性(P0.05)。结论 Genistein能够促进内皮型一氧化氮合酶的表达,抑制核因子κB的表达。     

芪苈强心胶囊联合卡维地洛对心力衰竭患者核因子κB及诱导型一氧化氮合酶水平的影响

目的：观察芪苈强心胶囊联合卡维地洛对慢性心力衰竭患者核因子κB（NF κB）及诱导型一氧化氮合酶（iNOS）水平的影响。方法120例慢性心力衰竭患者随机分为常规组、卡维地洛组、芪苈强心胶囊联合卡维地洛组（联合组）,各40例。采用荧光定量PCR法和酶联免疫分析方法分别测定各组治疗前及治疗12周后血液 NF κB和 iNOS的水平,测定左室射血分数,并进行6 min 步行试验。结果治疗12周后,卡维地洛组、芪苈强心胶囊联合卡维地洛组血液NF κB和iNOS水平均较常规组明显下降（P〈0.01）,6 min步行距离显著增加（P〈0.05）,左室射血分数明显提高（P〈0.05）;卡维地洛组与联合组相比较,血液 NF κB和iNOS水平下降（P〈0.05）,而6 min步行距离、左室射血分数无统计学意义。结论芪苈强心胶囊联合卡维地洛治疗慢性心力衰竭可提高患者运动耐力,并改善心脏功能,推测芪苈强心胶囊联合卡维地洛可能通过抑患者炎性因子的表达而改善心功能。     

暴发性肝功能衰竭大鼠肝组织核因子-κB和诱导型一氧化氮合酶的表达及其意义

目的 探讨核因子-κB(NF-κB)在暴发性肝功能衰竭肝细胞炎性反应中的作用机制.方法 Wistar大鼠腹腔注射D-氨基半乳糖(D-Gain)和脂多糖(LPS)制作暴发性肝功能衰竭模型.免疫组织化学技术分别观察注药后2、4、8、12和24 h大鼠肝组织中NF-κB和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达情况,分析NF-κB、iNOS与暴发性肝功能衰竭的关系.结果 模型组NF-κB p65蛋白表达阳性细胞主要为肝细胞、库普弗细胞.造模后4、8和12 h时,核阳性表达的细胞数逐渐增多,明显高于对照组.2 h组主要是非实质细胞的胞质着色;而4、8、12和24 h组以肝细胞胞核着色为主.对照组不同时间点NF-κB p65蛋白表达差异无统计学意义(P＞0.05),模型组则随肝细胞坏死程度的加重而增加(r=0.694,P＜0.01).随着肝细胞炎性反应、坏死程度的增高,模型组肝细胞质iNOS表达逐渐增多(r=0.867,P＜0.01),以肝细胞表达为主.对照组肝细胞质iNOS表达较弱(P＞0.05).肝组织中NF-κB活化与iNOS表达呈正相关(r=0.801,P＜0.01).结论 NF-κB可能是暴发性肝功能衰竭肝细胞炎性反应、坏死过程中的关键环节.     

核因子-κB与支气管哮喘

核因子-κB(NF-κB)是众多细胞因子和炎症介质表达的主要转录调控因子之一,在支气管哮喘和其它许多炎症疾病中发挥着重要作用。本文就NF-κB的主要激活机制,其在支气管哮喘中的作用及NF-κB抑制剂等方面作一介绍。     

一氧化氮对核因子-κB的反馈调节作用

一氧化氮(NO)的合成受转录因子核因子-κB(NF-κB)调控的同时,对NF-κB的活性具有反馈调节作用,主要表现为稳定IκBα而抑制NF-κB的DNA结合活性,从而减少下游靶基因的表达,发挥抗炎作用。但亦有NO对NF-κB发挥正反馈激活作用的报道,表现出NO在细胞内信息调控作用中的复杂性。深入探讨NO-NF-κB信息通路在疾病发生中的意义对于明确发病机制和探索新的治疗途径具有重要意义。     

核因子κB与支气管哮喘发病关系及其临床意义

核因子κB(nuclear factor-κB,NF-κB)是一种调控基因表达的蛋白质核转录因子.它可以调控与炎症免疫反应有关的炎症因子、细胞因子、氧化应激相关酶等的基因表达,从而参与肺部的炎症及免疫反应,在支气管哮喘(简称哮喘)的发病机制中发挥着重要作用.NF-κB抑制剂通过阻断NF-κB激活通路上的多个环节,以达到治疗哮喘的目的,将会成为哮喘治疗研究的热点.     

核因子κB与支气管哮喘发病关系及其临床意义

核因子κB（nuclearfactor-κB,NF-κB）是一种调控基因表达的蛋白质核转录因子。它可以调控与炎症免疫反应有关的炎症因子、细胞因子、氧化应激相关酶等的基因表达,从而参与肺部的炎症及免疫反应,在支气管哮喘（简称哮喘）的发病机制中发挥着重要作用。NF-κB抑制剂通过阻断NF-κB激活通路上的多个环节,以达到治疗哮喘的目的,将会成为哮喘治疗研究的热点。     

还原型谷胱甘肽降低糖尿病大鼠心肌NF-κB和诱导型一氧化氮合酶表达

以链脲佐菌素制备糖尿病大鼠模型，造模后以还原型谷胱甘肽（GSH）治疗12周，结果显示GSH治疗组较糖尿病组心肌组织病理学损害改善，NF—κB活性降低，诱导型一氧化氮合酶表达下降。     

一氧化氮对急性肺损伤发病过程中核因子-κB活化的调节作用

目的:探讨一氧化氮(NO)在急性重症胰腺炎急性肺损伤大鼠发病中的作用及肺泡巨噬细胞核因子-κB(NF-κB)活化的关系．方法:健康雄性SD大鼠随机分为:假手术组、模型组、硝普钠(SNP)组、左旋精氨酸组、氨基胍组,每组6只．经胰管逆行注入去氧胆酸钠复制大鼠急性重症胰腺炎急性肺损伤模型．采用凝胶电泳迁移率方法检测肺泡巨噬细胞中NF-κB活性,RT-PCR分析iNOS mRNA 的表达,同时亦检测NO、TNF-α、iNOS的水平和肺组织病理学的改变．结果:模型组中NF-κB活性、iNOS mRNA表达及TNF-α、NO、iNOS的含量均显著高于假手术组(P=0．02)．肺组织病理学显示严重损害．NO的供体硝普钠及iNOS选择性抑制剂氨基胍可降低NF-κB活性(213．47±12．34, 222．98±17．69 vs 327．13±13．46,P<0．05),下调iNOS mRNA表达(SNP:2．35±0．34 vs 3．1 ±0．38,P<0．05)以及TNF-α(0．38±0．034, 0．45±0．043 μg/L vs 0．76±0．045 μg/L)、 NO(168．2±0．78,146．4±0．59 mmol/L vs 229．3 ±0．98 mmol/L)的水平,减轻肺组织病理学损伤．而左旋精氨酸组则无明显调节作用．离体实验结果与体内试验一致．结论:外源性NO可抑制NF-κB活化,降低 iNOS mRNA的表达,进而减少NO、TNF-α的释放．同样,经iNOS选择性抑制剂抑制内源性 NO的产生,也可控制机体的过度炎症反应．     

利拉鲁肽通过抑制核因子κB p65磷酸化调控人脐静脉内皮细胞一氧化氮合酶的表达

目的 探讨利拉鲁肽在高糖环境下对人脐静脉内皮细胞（HUVECs）功能的影响及其可能机制.方法 高糖环境下（25 mmol/L葡萄糖）培养人脐静脉内皮细胞,分别给予10、100、1 000 μg/L利拉鲁肽进行干预,采用实时定量聚合酶链反应（RT-PCR）和Western blotting法分别检测内皮型一氧化氮合酶（eNOS）、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）以及核因子κB p65 （NF-κB p65）的mRNA、蛋白表达水平;应用肿瘤坏死因子-α（TNF-α）干预利拉鲁肽处理后的HUVECs,观察eNOS、iNOS、NF-κB p65的mRNA、蛋白表达水平的变化.研究结果多组间采用单因素方差分析,两组间比较采用SLD分析.结果 与普通培养基（7 mmol/L葡萄糖）组相比,高糖环境下HUVECs的eNOS mRNA和蛋白表达均降低,iNOS mRNA和蛋白表达及磷酸化NF-κB p65蛋白表达均增高（t=2.79、5.75、4.32、4.85、7.12,均P＜0.05）.与0μg/L组相比,1 000μg/L利拉鲁肽干预组HUVECs的eNOS mRNA、eNOS蛋白表达均上调,iNOS mRNA、iNOS蛋白表达及NF-κB p65磷酸化蛋白表达均下调（t=5.12、9.34、6.70、5.50、8.94,均P＜0.05）.与单独使用利拉鲁肽组相比,TNF-α联合利拉鲁肽组HUVECs的eNOSmRNA和蛋白表达均下调,iNOS mRNA和蛋白表达及磷酸化NF-κB p65蛋白表达均上调（t=3.33～7.87,均P＜0.05）.结论 利拉鲁肽可通过抑制NF-κB p65磷酸化在转录和翻译水平上增加eNOS表达、降低iNOS的表达,从而改善内皮细胞功能,预防糖尿病动脉粥样硬化.     

1,25-二羟维生素D3对支气管哮喘大鼠气道炎症和肺内诱导型一氧化氮合酶的影响

目的本文探讨1,25-二羟维生素D3[1,25-dihydroxy vitmin D3,1,25-(OH)2D3]对于支气管哮喘(简称哮喘)大鼠气道炎症和肺内诱导型一氧化氮合酶(induced nitric oxide synthase,iNOS)的影响。方法50只Wistar大鼠随机分为四组:正常对照组,哮喘组,预防处理组和治疗组。用卵蛋白作为致敏原制备哮喘大鼠模型,第一组预防处理组在致敏前三天给予口服1,25-(OH)2D3,共给药3周,第二组预防组则于致敏第1天和第7天给予肌注维生素D3。治疗组则于支气管激发开始前给药处理。应用动物肺功能仪测定大鼠对于乙酰甲胆碱刺激的气道反应性,测定支气管肺泡灌洗液(BALF)细胞总数及嗜酸粒细胞计数和肺组织病理变化。检测肺组织中一氧化氮(NO)含量,iNOS活性和iNOS mRNA表达水平,用免疫组织化学染色方法检测肺组织iNOS的表达并观察iNOS在气道组织分布的改变。结果1,25-(OH)2D3预防及治疗组可减轻BALF中细胞总数及嗜酸粒细胞计数,同时降低肺组织中NO含量、iNOS活性及大鼠肺组织中iNOS mRNA的表达水平。免疫组织化学结果显示,干预组可降低哮喘大鼠气道组织中上皮细胞和巨嗜细胞中iNOS阳性。结论1,25-(OH)2D3可降低哮喘大鼠气道炎症及iNOS表达水平,提示1,25-(OH)2D3对于哮喘可能有潜在的治疗作用。     

核因子-κB在老年支气管哮喘发病中的作用

老年支气管哮喘是多种炎症细胞之间相互作用引起的支气管慢性炎症。感染因素在其发生发展过程中具有非常重要的地位。核因子-κB（NF-κB）作为一种重要的核转录因子，可以促进细胞因子、黏附因子、趋化因子等转录，与炎性疾病密切相关。老年性支气管哮喘与NF-κB的关系尚不清楚。本研究通过测定老年支气管哮喘患者T细胞NF-κB蛋白表达水平．探讨它们之间的关系。     

哮喘小鼠核因子-κB表达及卡介苗多糖核酸的干预作用

目的观察卡介苗多糖核酸(BCG)对支气管哮喘小鼠核因子-κB(NF-κB)表达的影响,探讨NF-κB与支气管哮喘发病之间的关系及BCG的调节作用。方法 35只小鼠随机分为对照组、卵蛋白(OVA)组、BCG6w龄组、BCG6w龄+OVA组、BCG1w龄+OVA组。所有动物于第40、41天雾化吸入OVA进行气道激发,第42天取支气管、肺组织标本。用免疫组织化学染色方法检测支气管、肺组织NF-κB的表达。结果 OVA致敏后支气管、肺组织中NF-κB的表达明显增加;BCG免疫后NF-κB的表达下降(均P0.05)。结论支气管哮喘小鼠中NF-κB的表达增加,BCG免疫可降低NF-κB的表达。     

β-淀粉样蛋白致大鼠行为学改变及对海马核因子-κB和一氧化氮合酶表达的影响

目的研究β-淀粉样蛋白(amyloid-beta protein,Aβ)对大鼠学习记忆功能及海马区内核因子kB(NF-kB)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)蛋白表达的影响及其相互关系。探讨NF-kB在阿尔茨海默病(AD)发病中的可能作用。方法采用大鼠侧脑室立体定向注射Aβ25-35的方法建立AD的动物模型,通过Morris水迷宫检测大鼠学习、记忆能力,通过免疫组化的方法观察Aβ25-35对大鼠海马区内NF-kB及iNOS蛋白表达的影响,并分析NF-kB与iNOS表达的关系。结果大鼠经侧脑室立体定向注射10μmol／L Aβ25-35 5μl后,(1)模型组大鼠Morris水迷宫检测逃避潜伏期(3 d分别为42．19±12．29,31．28±20．59,23．91±8．05)较对照组(3 d分别为27．35±14．96,13．17±6．79,13．01±6．38)明显延长(P<0．05或P<0．01);(2)模型组大鼠海马区内NF-kB蛋白表达(29．40±4．01)及iNOS蛋白表达(34．42±5．99)较空白对照组(分别为23．36±2．31和11．56±4．09)均有明显升高(P<0．01),(3)NF-kB与iNOS阳性细胞密度具有显著相关性(r=0．453,P< 0．05)。结论Aβ能够明显降低大鼠短期学习记忆能力,并诱导大鼠海马区内NF-kB和iNOS的蛋白表达增强,同时NF-kB与iNOS的表达呈正相关关系。提示NF-kB和iNOS均参与了由Aβ诱导的炎性反应过程,NF-kB可能是iNOS表达的介导因子之一。     

支气管哮喘中核因子κB治疗靶点

转录因子可能在慢性气道疾病的病理生理中扮演重要角色,并可能是一类新颖的抗炎治疗靶点.核因子κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)可能是支气管哮喘(简称哮喘)发病的关键环节.N F-κB靶点的药理抑制剂和基因沉默均已初显平喘端倪.NF-κB亚单位是动物肺部变态反应性炎症和气道高反应性所必需.亚单位可能是哮喘NF-κB治疗靶点的未来研究重点与希望所在,尤其是c-Rel亚单位.     

支气管哮喘中核因子κB治疗靶点

转录因子可能在慢性气道疾病的病理生理中扮演重要角色,并可能是一类新颖的抗炎治疗靶点。核因子κB（nuclear factor kappa B,NF-κB）可能是支气管哮喘（简称哮喘）发病的关键环节。NF—κB靶点的药理抑制剂和基因沉默均已初显平喘端倪。NF—κB亚单位是动物肺部变态反应性炎症和气道高反应性所必需。亚单位可能是哮喘NF-κB治疗靶点的未来研究重点与希望所在,尤其是c-Rel亚单位。     

辛伐他汀对脓毒症大鼠肺组织诱导型一氧化氮合酶表达的影响

目的:探讨辛伐他汀对脓毒症大鼠肺组织诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达的影响.方法:90只健康SD大鼠随机分为对照组(生理盐水2 mL静脉滴注)、内毒素(LPS)组(LPS 5 mg/kg,用生理盐水稀释至2 mL静脉滴注)、LPS+辛伐他汀(Sta)组(LPS 5mg/kg,Sta 20mg/kg,生理盐水稀释至2 mL静脉滴注),每组30只.分别在用药后2、4、6、12、24 h处死大鼠,取右肺下叶用RT-PCR法检测肺组织iNOS mRNA表达.结果:光镜下对照组各时点肺泡结构正常;LPS组2h出现炎症损伤,以6h最为显著;LPS+ Sta组中性粒细胞浸润较LPS组减轻.LPS组iNOSmRNA表达较对照组和LPS+ Sta组明显增高(均P＜0.05),6h达高峰,12 h开始下降;LPS+ Sta组各时点iNOSmRNA表达趋势同LPS组,但接近对照组水平(P＞0.05).结论:辛伐他汀能改善脓毒症时肺组织的病理性炎症损伤,辛伐他汀能减低脓毒症时肺组织iNOS mRNA的表达.