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相似文献
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1.
目的观察RNA干扰技术沉默Annexin-1基因表达对膀胱癌T24细胞增殖能力的影响。方法针对Annexin-1基因不同部位设计并化学合成3对不同的靶向小干扰RNA(siRNA),脂质体介导瞬时转染膀胱癌T24细胞,转染后应用半定量RT-PCR和Western印迹法检测Annexin-1mRNA和蛋白的改变,透射电镜观察细胞凋亡情况,用MTT法检测沉默Annexin-1表达对膀胱癌T24细胞增殖的影响。结果转染siRNA后膀胱癌T24细胞Annexin-1mRNA和蛋白水平显著下降(P0.05),转染siRNA沉默Annexin-1基因表达后膀胱癌T24细胞出现典型凋亡细胞,增殖能力显著下降(P0.05)。结论 RNA干扰Annexin-1基因后其mRNA和蛋白水平显著下降,诱导了膀胱癌T24细胞凋亡,并且抑制细胞的增殖。  相似文献   

2.
目的 观察RNA干扰沉默膜联蛋白-1(Annexin-1)基因表达技术对膀胱癌T24细胞Annexin-1基因表达和顺铂耐药的影响.方法 针对Annexin-1基因不同部位设计并化学合成3对不同的靶向小分子干扰RNA(siRNA),脂质体介导瞬时转染膀胱癌T24细胞,转染后应用半定量RT-PCR和Western印迹检测Annexin-1 mRNA 和蛋白的改变,用MTT法检测沉默Annexin-1表达在膀胱癌T24细胞对顺铂敏感性的变化.结果 转染siRNA后膀胱癌T24细胞Annexin-1的mRNA和蛋白水平显著下降(P<0.05),增强细胞对顺铂的敏感性(P<0.05).结论 RNA 干扰Annexin-1基因后其mRNA 和蛋白水平显著下降,并且增强T24细胞对顺铂的敏感性.  相似文献   

3.
目的 构建前列腺癌树突细胞(DC)瘤苗,并探讨其体内外抗前列腺癌的作用。方法 分离C57BL/6小鼠骨髓前体细胞制备DC,光镜下观察DC的形态学特征,混合淋巴细胞试验、辣根过氧化物酶(HRP)吞噬试验观察DC的生物学特性。经RM-1前列腺癌细胞裂解产物致敏构建DC瘤苗,将DC瘤苗皮下注射于18只前列腺癌模型小鼠。结果成熟DC突起多而长,胞内囊泡少,刺激T细胞增殖能力强;DC瘤苗分泌IL-12能力增强;小鼠应用DC瘤苗后,其脾脏T细胞对RM-1细胞具有特异性杀伤作用;荷瘤小鼠肿瘤生长缓慢,坏死明显,瘤体内及肿瘤周围有大量炎细胞浸润。结论小鼠骨髓单核细胞在粒细胞/巨细胞集落刺激因子(GM-CSF)和IL-4诱导下可转化为DC。RM-1前列腺癌细胞裂解物致敏构建的DC瘤苗能诱导T细胞对RM-1细胞产生特异性杀伤作用,且能分泌更多的IL-12,可用于前列腺癌的免疫治疗。  相似文献   

4.
目的探讨miR-455在前列腺癌中的表达及相关功能。方法定量PCR检测前列腺癌患者血清和正常组中miR-455表达水平,同时基因转染抑制前列腺癌细胞系中miR-455表达,细胞划痕实验、CCK-8实验检测前列腺癌细胞系功能变化。结果前列腺癌患者血清中miR-455表达水平高于正常组。miR-455被抑制后,前列腺癌细胞增殖和迁移能力降低。结论 miR-455高表达利于前列腺癌细胞增殖,是前列腺癌发生发展的重要因素。  相似文献   

5.
目的 探讨表浅性膀胱癌细胞中DNA核酸内切酶ERCC1基因的表达在介导顺铂(Cisplatin)耐药中的作用.方法 用分步诱导法在体外建立耐Cisplatin不同浓度、不同天数表浅性膀胱癌细胞KU7和253JB-V (0 nmol/L,0 d;0.4 nmol/L,30、75 d;0.8 nmol/L,30 d)和T24(0 nmol/L,0 d;0.2 nmol/L,90 d).MTT方法检测Cisplatin对建立的耐药株细胞系的半数抑制浓度(IC50);RT-PCR方法检测ERCC1、膜连蛋白-1(Annexin-1)mRNA的表达变化.结果 MTT结果显示:Cisplatin作用96 h后,耐药株细胞的耐药程度明显增强;对KU7耐药株细胞、253JB-V耐药株细胞和T24耐药株细胞而言,KU7 +0.4 nmol/L Cisplatin(75 d)和KU7+ Cisplatin 0.8 nmol/L(30 d)对Cisplatin的敏感性下降,其IC50由0.8 nmol/L(0 nmol/L,0d)逐步增高到1.45 nmol/L;同样的情况也发生在253JB-V耐药株细胞和T24耐药株细胞中.RT-PCR结果显示:KU7耐药株细胞、253JB-V耐药株细胞的ERCCl mRNA表达增多,且在高浓度和天数多时更为明显,Annexin-1基因无明显变化.T24耐药株细胞中ERCC1基因及Annexin-1基因均无明显变化.结论 成功地在体外诱导了耐Cisplatin不同浓度的KU7耐药株细胞、253JB-V耐药株细胞各两株,T24耐药株细胞一株.其中KU7耐药株细胞、253JB-V耐药株细胞ERCC1基因的表达量随着加药浓度和天数的增加而增多,Annexin-1基因无明显变化.T24耐药株细胞的ERCC1基因及Annexin-1基因表达均无明显的变化.  相似文献   

6.
目的 观察人前列腺癌细胞株 (PC- 3) TGF-β1 m RNA表达变化特点。方法 采用 RT- PCR方法检测 TGF-β1 在 m RNA水平的表达。结果 体外培养的前列腺癌 PC- 3细胞 TGF- β1 在 m RNA水平表达量明显增强 (P<0 .0 0 1 )。结论 提示前列腺癌 PC- 3细胞 TGF- β1 在 m RNA水平表达增强可能在前列腺癌的病理过程中起促进作用  相似文献   

7.
目的 观察前列腺癌 (PCa)细胞连接蛋白 (Connexin ,Cx)表达和细胞间隙连接交流(GJIC)状况 ,探讨胸苷激酶 (TK)自杀基因治疗前列腺癌时旁观者效应不够强大的原因以及GJIC与前列腺癌发生的关系。 方法 分别采用逆转录 聚合酶链式反应 (RT PCR)、链霉亲和素免疫组化法 (SABC法 )和划痕标记染料示踪技术 (SLDT)检测前列腺癌细胞系PC 3m的连接蛋白 4 3(Cx4 3)mRNA、蛋白表达和GJIC功能状况 ,并观察Cx4 3蛋白在正常前列腺和前列腺癌组织中的表达。 结果 PC 3m有Cx4 3mRNA和蛋白表达 ,但其表达较弱 ,且Cx4 3蛋白大多异常定位于细胞浆中而非细胞膜上 ;组织切片显示前列腺癌组织Cx4 3蛋白异常定位且表达水平较正常前列腺组织明显减弱 ,与病理分级呈负相关关系 (χ2 =4 0 2 5 ,P <0 0 5 ) ,高分化和中等分化、低分化腺癌的表达率分别为5 2 9%及 7 1%。此外 ,PC 3m细胞GJIC功能低下 ,半定量为 ( )或 (- )。 结论 前列腺癌细胞GJIC功能低下 ,Cx4 3基因下调表达和蛋白异常定位均可能为导致这一现象的原因。GJIC功能缺陷可能是引起单纯疱疹病毒 胸苷激酶 /更昔洛韦系统杀伤前列腺癌细胞时旁观者效应不够强大的原因 ,亦可能是前列腺癌发生、发展中的分子事件。  相似文献   

8.
目的探讨胶原诱导性关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)大鼠滑膜组织膜联蛋白-1 (Annexin-1)的表达及意义。方法采用Western blot法检测模型组及正常组大鼠在不同时间点滑膜组织Annexin-1的表达,运用ImageTool 3.0灰度扫描软件对结果进行半定量分析。结果正常组及模型组皆表达Annexin-1。模型组Annexin-l表达在25、35和45d水平递减,45d与25d相比,差异有统计学意义(P<0.05)。45d Annexin-1表达明显低于正常组(P<0.05)。结论CIA大鼠滑膜组织Annexin-1表达下调。  相似文献   

9.
目的观察小檗碱对体外培养人前列腺癌PC3细胞凋亡的作用。方法体外培养前列腺癌PC3细胞,分别用10、20和40μmol/L小檗碱处理细胞后,采用MTT法检测其对细胞增殖的影响,20μmol/L小檗碱处理细胞后流式细胞术检测细胞周期,吖啶橙染色法检测细胞凋亡情况,并通过Western印迹法检测Bcl-xL及前列腺特异性抗原(PSA)蛋白表达。结果小檗碱处理后,PC3细胞出现增殖抑制,细胞周期停滞于G2/M期,吖啶橙染色呈黄染,PSA及Bcl-xL蛋白表达明显下调。结论小檗碱可诱导人前列腺癌PC3细胞凋亡,其作用机制可能与Bcl家族信号通路有关。  相似文献   

10.
目的观察SIRT1抑制剂sirtinol对前列腺癌DU145细胞系细胞凋亡和细胞凋亡关键调控因子(Bcl-2、Bax、Cytochrome C和Caspase-3)表达变化的影响,探讨SIRT1在前列腺癌发生的可能机制。方法体外培养DU145细胞,实验分对照组(DMSO组)和sirtinol组(终浓度为10,25和50μmol/L),Western印迹检测DU145细胞SIRT1蛋白表达水平;流式细胞术检测细胞凋亡;Western印迹检测DU145细胞中细胞凋亡关键调控因子Bcl-2、Bax、Cytochrome C和Caspase-3的蛋白表达。结果与对照组相比,随着sirtinol浓度的增加,SIRT1蛋白表达水平逐渐降低,细胞凋亡比例增加,诱导细胞发生凋亡。不同浓度sirtinol作用DU145细胞后Bcl-2蛋白表达减少,且随剂量增加表达越低;Bax蛋白表达增加,Bcl-2/Bax比率降低;伴随Cytochrome C的释放和Caspase-3的激活。结论下调SIRT1表达诱导前列腺癌细胞DU145细胞凋亡,其机制可能与改变细胞凋亡关键调控因子Bcl-2、Bax、Cytochrome C和Caspase-3的蛋白表达相关。  相似文献   

11.
目的研究丹参酮ⅡA诱导PC-3人前列腺癌细胞凋亡的细胞周期调控机制。方法 PC-3人前列腺癌细胞与不同浓度的丹参酮ⅡA共同培养48 h后,MTT法检测细胞增殖能力;流式细胞仪分析细胞周期;检测细胞周期调控因子CyclinD1和CDK4的表达。结果与对照组相比,0.25、0.5、1 mg/L丹参酮ⅡA组G0/G1期细胞数明显增多,S期细胞数明显减少(P<0.01);CyclinD1和CDK4的表达量均随丹参酮ⅡA剂量增加而减少(P<0.05,P<0.01)。结论丹参酮ⅡA拮抗PC-3人前列腺癌细胞增殖,其主要机制可能与CyclinD1及CDK4低表达所致细胞周期抑制有关。  相似文献   

12.
目的 检测抗凋亡因子XIAP与PED/PEA-15在前列腺癌细胞(PC-3)中的表达,探讨二者对前列腺癌细胞凋亡的影响。方法 应用半定量RT—PCR法检测前列腺癌细胞(PC-3)中PED/PEA-15和XIAP的表达。设计并构建PED/PEA-15和XIAP特异的siRNA载体,以脂质体法转染二者的siRNA载体至前列腺癌细胞(PC-3)中,半定量RT-PCR法检测特异siRNA载体对PED/PEA-15和XIAP转录的影响;光镜观察细胞形态改变;流式细胞法检测细胞凋亡的变化。结果 半定量RT-PCR显示PED/PEA-15和XIAP均在前列腺癌细胞(PC-3)中高表达。酶切和DNA测序证实XIAP和PED/PEA-15siRNA载体构建成功。共转染XIAP和PED/PEA-15siRNA载体入PC-3细胞,可导致XIAP和PED/PEA-15的转录抑制,并增加PC-3细胞对阿霉素的敏感性,凋亡明显增加,处理组凋亡率为79%,对照组为46%,两组差异有统计学意义(P〈0.05)。结论 PED/PEA-15和XIAP在前列腺癌的凋亡中可起重要作用。  相似文献   

13.
目的探讨早期诊断前列腺癌和逆转前列腺癌转移的标志物。方法采用一维SDS—PAGE结合高效液相色谱-串联质谱的方法分离并鉴定PC-3M细胞中的膜蛋白。结果在严格的过滤参数条件下(当Charge+1,Xcorr≥1.9;当Charge+2,Xcorr≥2.2;当Charge+3,Xcorr≥3.75;其中DelCN≥0.1),PC-3M细胞中鉴定出2023个蛋白,其中1391(69%)个蛋白经过基因本体评注(GOA)显示为已知细胞组分,其余为未知细胞组分。在已知细胞组分中527(38.30%)个蛋白为膜蛋白或者膜相关蛋白,其中18.32%的蛋白被预测至少有1个跨膜区,49.62%的蛋白有1~3个跨膜区,19.08%的蛋白有4~9个跨膜区,9.92%蛋白预测有≥10个跨膜区。除了已知的与膜相关的蛋白,很多新的蛋白也被鉴定,其中包括假设蛋白和一些cDNA序列。结论一种明显独特的质膜蛋白表达模式存在于高转移前列腺癌细胞系中。这将帮助进一步理解前列腺癌侵袭和转移的分子机制,并且为寻找前列腺癌转移相关的靶标分子提供实验基础。  相似文献   

14.
目的探讨向日葵盘黄酮对前列腺癌细胞株DU145的影响。方法应用不同浓度向日葵盘黄酮培养DU145细胞,倒置显微镜观察细胞形态,检测细胞的生长抑制率、细胞凋亡情况及细胞周期。结果不同浓度的黄酮化合物均对细胞生长具有明显的抑制作用,且随着浓度的增加和作用时间的延长,对DU145细胞的生长抑制率逐步提高。倒置显微镜显示细胞有凋亡小体等形成,且琼脂糖凝胶电泳显示不同浓度黄酮作用DU145细胞24h后,细胞发生了凋亡,并且处在晚期凋亡阶段。流式细胞仪检测显示不同浓度黄酮作用细胞48h后,随着黄酮浓度的增高,DU145细胞S期细胞增多,M期细胞有减少趋势,同时可检测到凋亡细胞的亚G1峰。结论向日葵盘黄酮可抑制人前列腺癌细胞株DU145的生长,能使细胞凋亡增加,G/M期细胞百分数升高,并能引起细胞凋亡相关基表达改变。  相似文献   

15.
目的 探讨吴茱萸碱诱导人前列腺癌PC-3细胞凋亡的不同机制。方法 应用MTT法检测吴茱萸碱对PC-3细胞生长的抑制作用,Western blot法检测吴茱萸碱诱导PC-3细胞凋亡的信号通路。结果 吴茱萸碱(≥1μmol/L)明显抑制PC-3细胞生长,吴茱萸碱作用24 h后,caspase蛋白酶凋亡通路被激活,caspase-3和caspase-9的表达增加,同时bcl-2蛋白表达减少而bax蛋白表达增加。结论 吴茱萸碱对前列腺癌PC-3细胞主要是通过激活caspase通路及下调bcl-2表达和增加bax表达等信号通路诱导细胞凋亡。  相似文献   

16.
目的检测DU145、PC-3和LNCaP前列腺癌细胞中趋化因子CXC配体(L)12及其受体(R)4的表达,探讨重组人CXCL12对上述细胞增殖的影响及其机制。方法逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)研究CXCL12/CXCR4在DU145、PC-3和LNCaP细胞的表达;CCK-8实验研究重组人CXCL12对DU145、PC-3和LNCaP细胞增殖的作用;Wettern印迹实验研究重组人CXCL12对DU145细胞外调节蛋白激酶(ERK)和磷酶化ERK(pERK)表达的影响。结果 DU145、PC-3和LNCaP细胞均表达CXCL12和CXCR4,重组人CXCL12可明显促进上述细胞的增殖,重组人CXCL12虽然不能改变DU145细胞ERK1/2表达,但可上调pERK1/2的表达。结论前列腺癌细胞表达CXCL12及其受体CXCR4,CXCL12/CXCR4可通过活化丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)/ERK信号通路促进前列腺癌细胞的增殖。  相似文献   

17.
P27蛋白在非小细胞肺癌中表达的预后意义   总被引:3,自引:0,他引:3  
P2 7蛋白具有限制性调节细胞周期进程的作用 ,这一作用主要通过抑制细胞周期蛋白依赖性激酶 (CDKS)复合物的功能来实现。P2 7蛋白表达与预后的关系在乳癌、淋巴瘤、前列腺癌以及消化道肿瘤已有报道[1] ,而在肺癌中的研究甚少。我们运用免疫组化法检测P2 7在非小细胞性肺癌组织中的表达水平 ,从而探讨其在非小细胞性肺癌中的意义。对象和方法  1 对象 :5 6例非小细胞肺癌 (NSCLC)病例均在本院接受治疗及随访。其中男 42例 ,女 14例 ,年龄39~ 77岁 ,平均 6 0岁。中位随访时间 2年 (1~ 5年 ) ,5 6例NSCLC中 ,腺癌 36例 ,鳞…  相似文献   

18.
雄激素依赖性前列腺癌细胞(LNCaP细胞)和雄激素非依赖性前列腺癌细胞(LNCaP-C81细胞)分别培养,各自分为对照组和实验组.两个实验组均给予双氢睾酮(DHT)-PROTACS,4组细胞培养后分别取培养液上清并检测PSA表达的情况.LNCaP-C81对照组、实验组和LNCaP对照组、实验组的PSA分泌值分别为(411.89±22.25)、(102.66±12.06)、(339.81±26.41)和(123.85±16.84)ng/ml.各实验组和对照组比较,P均<0.05.认为DHT-PROTACS处理前列腺癌细胞(LNCaP细胞和LNCaP-C81细胞)后,均能导致前列腺癌细胞分泌PSA减少.  相似文献   

19.
目的 研究组蛋白去乙酰化酶抑制剂对前列腺癌PC-3细胞株的增殖抑制和诱导凋亡作用.方法 前列腺癌PC-3细胞经不同剂量组蛋白去乙酰化酶抑制剂作用后, MTT法测定组蛋白去乙酰化酶抑制剂对PC-3细胞的增殖抑制率,流式细胞仪检测细胞周期及凋亡峰,荧光分光光度计测定caspase-3的活性.结果 组蛋白去乙酰化酶抑制剂对PC-3细胞有显著的增殖抑制作用,呈时间剂量依赖性;细胞周期被阻滞于G_1 /G_0期,S期细胞减少;组蛋白去乙酰化酶抑制剂作用后加药组caspase-3表达增加,与对照组比较有显著差异(P<0.01).结论 组蛋白去乙酰化酶抑制剂对PC-3细胞具有抑制增殖和诱导凋亡作用.  相似文献   

20.
目的探讨人前列腺癌组织和细胞株中环氧化酶的表达情况,研究环氧化酶抑制剂对丁肿瘤细胞生长的影响和作用机制。方法用Trizol提取正常前列腺组织,前列腺增生组织和前列腺癌细胞株PC-3、LNCaP中总RNA,用半定量RT—PCR法分别检测各组织细胞中cox-1、cox-2基因的表达水平。用不同配制浓度的环氧化酶抑制剂对人前列腺癌细胞株PC-3和LNCaP的培养进行干预,观察细胞的存活率,并用Western blot分析细胞中COX-2蛋白的表达。结果cox-1基因在正常前列腺组织、前列腺增生组织和前列腺癌组织中均有表达。cox-2基因在正常前列腺组织中未见表达,在前列腺增生组织中表达较弱,在前列腺癌组织中有明显表达。cox-1基因和cox-2基因在PC-3和LNCaP细胞株中都有高表达。当在不同时间段使用不同浓度的环氧化酶抑制剂干预以后,细胞中COX-2蛋白表达出现下调,前列腺癌细胞的存活率有下降,这种下降与干预时间和浓度有相关性。结论人前列腺癌细胞中存在着环氧化酶的高表达。环氧化酶抑制剂能影响前列腺癌细胞的生长。可以考虑将环氧化酶抑制剂用于治疗前列腺癌。  相似文献   

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