80例大鼠异位心脏移植的体会

为研究心脏移植后急性排异反应及心脏缺血再灌注损伤 ,我们建立了大鼠异位心脏移植模型。Wistar大鼠心脏的升主动脉及主肺动脉分别与SD大鼠的腹主动脉和后腔静脉做端侧吻合 ,将Wistar大鼠心脏移植于SD大鼠腹腔内。 80例大鼠异位心脏移植模型成功建立 ,手术成功率 90 0 %。我们从以下方面作了总结 :1 麻醉 ;2 供心的摘取及保存 ;3 受体的准备 ;4 心脏移植 ;5 术后处理     

大鼠腹腔内心脏移植模型的建立

目的:改进大鼠腹腔内心脏移植模型。方法:对Ono术式腹腔内心脏移植模型制作进行改进,其法为经升主 动脉用0～4℃乳酸钠林格氏液灌注心脏,供心的升主动脉和肺总动脉分别与受体的腹主动脉及下腔静脉行端侧吻 合。结果:共建立大鼠腹腔内心脏移植模型40例,供心总缺血时间(37±2)min,手术成功率90％,供心跳动时间 平均为10天。结论:模型制作成功的主要因素:(1)供心的低温保护及缺血时间的控制;(2)良好的血管吻合,避 免吻合口漏血及血流不畅;(3)适当的麻醉。     

大鼠腹腔内心脏移植模型的建立

目的改进方法,建立大鼠腹腔内心脏移植模型。方法在Ono术式的基础上进行改进,经升主动脉用0℃～4℃乳酸钠林格氏液灌注心脏,供心的升主动脉和肺总动脉分别与受体的腹主动脉及下腔静脉行端侧吻合。结果共建立大鼠腹腔内心脏移植模型40例,供心总缺血时间(37±2)min,手术成功率90%,供心跳动时间平均为10d。结论模型建立成功的主要因素:①供心的低温保护及缺血时间的控制;②良好的血管吻合,避免吻合口漏血及血流不畅;③适当的麻醉。     

大鼠腹腔异位心脏移植模型的复制

用改进方法复制大鼠腹腔内异位心脏移植模型。Wistar大鼠做供体 ,SD大鼠做受体 ,在 10倍手术显微镜下施行腹腔内异位心脏移植术。采用一次性集束结扎法取心 ,连续缝合法 ,行端侧血管吻合。吻合血管时控制室温 15℃。手术成功率为 90 % ,供心总缺血时间 35± 6min。     

大鼠腹部心脏移植模型的改进

目的:建立一种操作简单、成功率高的大鼠异位心脏移植模型。方法:以雄性SD大鼠为供体,Wistar大鼠为受体,切除受体鼠左肾,使供心升主动脉与受体腹主动脉端侧吻合,供心右肺动脉套接于受体左肾静脉。结果:50例实验成功46例,成功率92％,供心平均缺血时间为(38.9±1.8)min。失败原因:吻合口出血2只,血栓形成和套管扭转各1只。结论:该改良术式是建立大鼠心脏移植模型简单实用的方法之一。     

小鼠腹腔异位心脏移植模型的建立

采用供心主动脉与受体腹主动脉、供心肺动脉与受体下腔静脉端侧吻合方法建立小鼠腹腔异位心脏移植模型.手术成功率90%,长期存活率73%.供、受体手术时间分别为(7.33±1.73)min和(38.90±6.80)min;其中动脉吻合时间(10.63±3.60)min,静脉吻合时间(9.70±3.41)min.认为提高受体的血管吻合技术和加强供心的保护是成功建立模型的关键.     

小鼠腹腔异位心脏移植技术的改良

目的探讨小鼠腹腔异位心脏移植技术的改进。方法参考大鼠心脏移植Ono式模型,并在供心摘取、血管吻合区准备和血管吻合技术上加以改良,建立小鼠心脏异位腹腔移植模型。结果改良后的心脏移植模型简化了手术操作,减少了供心的总缺血时间,手术成功率达到了90%。结论采用新方法可提高小鼠腹腔异位心脏移植成功率。     

改进套管法建立大鼠颈部心脏移植模型

目的改进套管连接血管技术制作大鼠颈部异位心脏移植模型,建立更合理、符合实验需要的心脏移植模型。方法心脏移植供体为雄性Wistar大鼠80只,清洁级,体重250-300g;受体为雄性F344大鼠80只,清洁级,体重300-350g。用自制套管将供心肺动脉套接于受体右颈外静脉,将供心升主动脉套接于受体右颈总动脉。结果正式实验80次,移植成功77次,成功率96％。总手术时间50-70min,吻合时间2-4min,供心冷缺血时间10-15min。结论改进套管法建立大鼠颈部同种异体心脏移植模型无需显微外科操作,是一种经济实用、操作简单、稳定可靠、易于复制的动物模型,便于推广。     

大白鼠同种异位心脏移植术的改进

目的：探讨大白鼠同种异位心脏移植术的改进。方法：用Wistar大白鼠做供体,SD大白鼠做受体,进行了腹腔内异位心脏移植。将供心主动脉、肺动脉分别与受体腹主动脉、下腔静脉进行端侧吻合。用腹部触诊、心电图判断心脏移植是否成功。结果：供心总缺血时间平均35分钟,手术成功率89．83％。结论：本实验的关键在于确切吻合,良好的供心保护,避免出血。     

小鼠异位心脏移植模型的建立

目的 采用小鼠清洁级近交系Balb/c和C57BL/6雄性小鼠进行同种、同基因和同种异基因间心脏移植.方法 在受体小鼠建立颈部的异位心脏移植模型,手术将供体小鼠心脏的升主动脉和肺动脉分别与受体小鼠颈总动脉和颈外静脉进行端端吻合,移植后的心脏位于小鼠颈部.血流途径为:受体颈总动脉、供心主动脉、供心冠状动脉、供心冠状静脉、供心右心房、供心右心室、供心肺动脉、受体颈外静脉.供心处于无负荷搏动状态.结果 成功建立37对小鼠颈部心脏移植模型,手术成功率(37/45,82%).总手术时间为(64±9) min,供心缺血时间为(31±10) min.同种、同基因和同种异基因间心脏移植存活时间分别为:90 d以上,90 d以上和(6.8±1.2)d.结论 小鼠颈部心脏移植模型简单、经济、稳定性强、重复性好,是进行心脏移植免疫学研究的较理想模型;Balb/c和C57BL/6小鼠品系纯正,是进行心脏移植免疫学研究的理想组合.     

建立一种快速有效的大鼠腹腔心脏移植模型

目的探讨一种快速而有效地建立大鼠腹腔异位心脏移植模型的方法。方法采用Ono术式并加以改良。供心摘取时,于心脏完全停跳后,在主动脉和肺动脉下过1/0丝线,一并结扎上、下腔静脉和肺静脉,提起丝线,同时剪断心脏各血管。实验组(Wistar-SD)和对照组(Wistar-Wistar)每组供、受体各20只。术后受体和移植心脏均存活72h视为手术成功,术后第4天两组供心组织行病理学观察。结果手术成功率为90%,供心摘取时间为(3.2±0.6)min。实验组移植心脏心肌组织呈急性排斥反应表现;对照组无急性排斥反应表现。结论该方法与目前应用较广泛的大鼠改进的Ono术式比较,取心时间明显缩短;实验组非同系(Wistar-SD)异位心脏移植复制出的大鼠供心排斥反应模型,可用于相关实验研究。     

套管改良法建立大鼠腹部心脏移植模型

目的使用改进套管连接血管技术建立大鼠腹部异位心脏移植模型。方法SD大鼠作为供体和受体。受体行左肾切除术,并游离肾动静脉分别用自制的聚乙烯套管套好备用。摘取供心后采用套管法分别连接供心无名动脉与左肾动脉、供心主肺动脉与受体左肾静脉。结果手术成功率90.6%(29/32)。结论本术式操作简单实用,不需手术显微镜,易于推广。     

门静脉回流的胰肾联合移植大鼠模型制备

目的探索建立大鼠胰肾联合移植（SPK）模型的手术技巧。方法以雄性健康近交封闭群SD大鼠作为供体，Wistar大鼠作为受体，行整块胰肾十二指肠移植。采用供体腹主动脉和受体腹主动脉端侧吻合，供体门静脉和受体肠系膜上静脉端侧吻合，供体肾静脉和受体肾静脉袖套式吻合，供体输尿管膀胱瓣与受体膀胱吻合，最后将十二指肠近端结扎，远端腹壁造瘘。结果共正式实验40例，手术成功率为85％。供体肾、胰植入受体后立即恢复良好的血液循环，移植后24h血糖、肌酐降为正常，术后移植胰腺具有内分泌功能。结论此模型切实可行，手术成功率高，术后并发症少，可用于SPK基础方面的研究。     

微小RNA在大鼠心脏逆重构中的变化

目的 构建大鼠心脏肥厚及移植模型来模拟临床心脏重构及逆重构过程,检测该过程中心脏胶原、转化生长因子-β(TGF-β)及微小RNA(miRNA)的改变,阐述TGF-β胶原轴在该过程中的变化并筛选部分可能参与该过程的miRNA.方法 实验Lewis大鼠分为4组,分别为假手术组、心脏肥厚组、肥厚移植组及单纯移植组.以动物超声心动图、免疫组织化学、心肌细胞横截面积检测、实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测等方法对模型心肌细胞、心脏胶原和TGF-β的表达进行检测.miRNA芯片检测各组心脏组织miRNA的变化,对其中部分有意义的miRNA进行qRT-PCR验证,并通过miRNA靶点数据库分析其功能.结果 心脏肥厚组大鼠心脏重量、左心室重量、心室壁厚度和心肌横截面积均高于假手术组,而肥厚移植组均低于心脏肥厚组.单纯移植组心脏重量及心脏与整体重量比值均低于假手术组.心脏肥厚组胶原及TGF-β表达均高于假手术组,肥厚移植组中其表达高于心脏肥厚组.经基因芯片检测发现有82个miRNA在4个实验组中发生了2倍以上的变化,心脏肥厚组有1个miRNA高于假手术组,9个miRNA低于假手术组;肥厚移植组有26个miRNA高于心脏肥厚组,6个低于心脏肥厚组;单纯移植组有29个miRNA高于假手术组,11个低于假手术组.对其中6个miRNA进行验证,结果发现各组均发生了显著性变化,各组间△△CT差大于2倍,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 大鼠心肌肥厚及卸负荷模型能较好的模拟心脏重构及逆重构过程.胶原和TGF-β在心脏肥厚模型中增加,且经卸负荷处理后增加更多.较多miRNA在肥厚过程中发生了改变,经对部分miRNA作用靶点的查找发现,miRNA可能通过不同的机制影响心脏重构及逆重构过程.

Abstract：

Objective To establish a reverse remodeling heart model in rats and observe collagen and TGF-β expression and relevant rmicroRNAs changes during reverse remodeling. Methods Lewis rats were divided into four groups including sham(NL, n = 10), abdominal aortic constriction(AAC, n = 10),heterotopic transplantation of abdominal aortic constriction(AAC-HT, n = 9)and heterotopic transplantation of normal heart(HT, n = 8). Left ventricular wall thickness and LV cavity were measured by echocardiography. The cardiomyocyte cross-sectional area(CSA)was determined on HE stained sections.Immunohistochemical and qRT-PCR were used to detect collagen and TGF-β expressions. miRNAs were detected by MicroRNA microarray. Results Heart weight, left ventricular wall thickness and CSA were significantly increased in AAC hearts compared to those in the NL and AAC-HT hearts. The collagen and TGF-β were increased in AAC hearts and further increased in AAC-HT hearts. miRNA microarray evidenced more than two folds changes on 82 miRNAs compared to NL(10 in AAC, 32 in AAC-HT and 40 in HT).Conclusion Rat abdominal aortic constriction and heterotopic transplantation could be used as a reverse remodeling heart model and significant collagen and TGF-β as well microRNA expression changes were evidenced in this model.     

Formation of microchimerism in rat small bowel transplantation by splenocyte infusion

AIM: To investigate the effect of donor splenocyte infusion combined with cyclosporine A (CsA) on rejection of rat small bowel transplantation (SBT). METHODS: Male Sprague-Dawley (SD) rats and female Wistar rats weighing 230-270 g were used as donors and recipients respectively in the study. Heterotopic small bowel transplantation was performed. The rats were divided into three groups: group one receiving allotransplantation (SD rarr Wistar), group two receiving allotransplantation (SD rarr Wistar) + donor splenocyte infusion, group three receiving allotransplantation (SD rarr Wistar) + donor splenocyte infusion + CsA followed by CsA 10 mg/kg per day after transplantation, in which recipient Wistar rats were injected with 2 x 10(8) SD splenocytes 28 d before transplantation, and treated with CsA after transplantation. Finally, the specific DNA fragment of donor Y chromosome was detected in recipient peripheral blood and skin by PCR. The survival time after small bowel transplantation was observed. Gross and histopathological examinations were performed. RESULTS: The survival time after small bowel trans-plantation was 7.1 +/- 1.2 d in group 1, 18.4 +/- 3.6 d in group 2 and 31.5 +/- 3.1 d in group 3. The survival time was significant longer (P < 0.01) in group 3 than in groups 1 and 2. The gross and histopathological examination showed that the rejection degree in group 3 was lower than that in groups 1 and 2. CONCLUSION: Donor splenocyte infusion combined with CsA decreases remarkably the rejection and prolongs the survival time after rat small bowel transplantation.