P16、细胞周期蛋白D1在大鼠胃黏膜萎缩过程中的表达变化及意义

目的研究慢性刺激所致大鼠萎缩性胃炎胃黏膜中P16,细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)表达情况。方法采用氨水、脱氧胆酸钠、酒精三因素联合作用制作萎缩性胃炎模型。胃黏膜组织分别行常规HE染色及免疫组织化学染色,免疫组化结果通过图像分析检测。结果模型组胃黏膜出现明显胃窦胃黏膜萎缩。在萎缩过程中,P16表达逐渐下降,Cyclin D1表达逐渐增强,其中,Cyclin D1表达于实验开始后2个月即明显高于对照组(P<0.01),中重度萎缩性胃炎较未萎缩组及轻度萎缩组阳性表达面积均明显高(P<0.01)。P16在6个月实验组的表达阳性面积与同期对照组有减少(P<0.05),中重度萎缩与未萎缩组比较阳性面积明显减少(P<0.01)。结论多因素长期慢性损伤可致大鼠胃黏膜萎缩,大鼠萎缩性胃炎胃黏膜细胞P16蛋白表达低下和Cyclin D1蛋白高表达,存在细胞增殖调控异常,是萎缩性胃炎发病及癌变的分子机制之一。     

萎缩性胃炎大鼠p16,bcl-2,PCNA的表达及叶酸的预防作用

目的 研究萎缩性胃炎大鼠胃黏膜中FCNA,p16,bcl-2蛋白表达情况,探讨这些调控因子改变及叶酸预防性治疗对萎缩性胃炎形成及增殖调控的影响.方法 大鼠随机分为对照组,模型组及叶酸预防组,制作萎缩性胃炎模型,叶酸预防组造模同时予叶酸溶液灌胃,共6个月.血清及组织叶酸采用化学发光法检测,胃黏膜组织分别行常规HE染色及免疫组织化学染色,免疫组化结果通过图像分析检测蛋白表达阳性面积及密度.结果 模型组较正常对照组萎缩程度重(P＜0.01);叶酸预防组较模型组萎缩程度轻(P＜0.01);与对照组比较,模型组血清及胃黏膜叶酸均无明显差异,叶酸预防组血清及胃黏膜组织叶酸均明显增高(P＜0.01);与对照组比较,模型组胃黏膜PCNA表达显著升高(P＜0.01),p16表达显著下降(P＜0.05),bcl-2表达显著增强(P＜0.01),叶酸预防组比模型组PCNA及bcl-2均有下降(P＜0.05),但PCNA仍高于对照组(P＜0.01),bcl-2表达与对照组比较无明显差异(P＞0.05),叶酸预防组p16仍低于对照组(P＜0.05),与模型组无明显差异(P＞0.05).结论 萎缩性胃炎大鼠胃黏膜细胞处于高增殖状态,并出现抑癌基因p16蛋白表达下调和凋亡抑制基因bcl-2蛋白高表达,存在细胞增殖和凋亡的不稳定状态;叶酸可在一定程度上预防胃黏膜萎缩,并能抑制bcl-2蛋白表达.     

Bcl-2和Bax在胃癌中的表达及其意义

背景：细胞凋亡异常在肿瘤发生中起重要作用,抑凋亡基因Bcl-2和促凋亡基因Bax与细胞凋亡密切相关。目的：探讨Bcl-2和Bax在胃癌中的表达及其意义。方法：采用免疫组化SP法检测30例慢性非萎缩性胃炎、30例慢性萎缩性胃炎和30例胃癌黏膜组织中Bcl-2和Bax表达水平。结果：慢性非萎缩性胃炎组Bcl-2和Bax表达阳性率与慢性萎缩性胃炎组相比无明显差异（Bcl-2：36．7％对43．3％,Bax：33．3％对50．0％,P〉0．05）,但均显著低于胃癌组（分别为66．7％和80．0％,P〈0．05）。结论：Bcl-2和Bax在胃癌中的表达明显增加,提示两者可能在胃癌的发生、发展中起重要作用。     

胃黏膜癌变过程中表皮生长因子受体、环氧合酶-2和三叶因子1的表达及其意义

胃黏膜癌变过程中存在癌基因激活和抑癌基因失活所致的细胞无限增殖和凋亡抑制，因此联合检测细胞增殖和凋亡相关因子对揭示胃黏膜的变化规律具有重要意义。目的：探讨表皮生长因子受体（EGFR）、环氧合酶（COX）．2和三叶因子（TFF）1在胃黏膜癌变过程中的变化规律及其意义。方法：经病理检查确诊的19例慢性非萎缩性胃炎、19例慢性萎缩性胃炎、18例慢性萎缩性胃炎伴肠化生、16例异型增生和16例胃腺癌纳入研究。以免疫组化方法检测各病变组织中EGFR、COX-2和TFF1的表达，并分析其间的相关性。结果：EGFR在非萎缩性胃炎组织中的表达显著低于其他胃黏膜病变组织（P〈0．01）；从非萎缩性胃炎→萎缩性胃炎→肠化生→异型增生→胃癌，COX-2的表达逐渐增高，而TFF1的表达逐渐减低。EGFR与COX-2的表达呈正相关（P〈0．01），与TFF1的表达呈负相关（P〈0．01）：COX-2与TFF1的表达呈负相关（P〈0．01）。结论：细胞增殖和凋亡相关因子EGFR、COX-2和TFF1表达异常在胃黏膜癌变过程中发挥重要作用。     

消痞颗粒对大鼠慢性萎缩性胃炎伴不典型增生胃黏膜Bcl-2和Bax表达的影响

[目的]从胃黏膜Bcl-2和Bax表达变化的角度探讨实验性慢性萎缩性胃炎（CAG）伴不典型增生（A）发病机制及消痞颗粒对其治疗作用的机制。[方法]将大鼠随机分为5组,采用综合法（幽门弹簧插入加高盐热糊法）复制大鼠CAG伴ATP模型,免疫组化法显示胃黏膜Bcl-2和Bax表达。[结果]正常大鼠胃黏膜基底有Bcl-2阳性表达,在胃黏膜ATP区域Bcl-2阳性表达增多（P〈0.01）,应用消痞颗粒剂治疗后,胃黏膜Bcl-2阳性表达明显减弱,与模型组、自然恢复组相比差异有统计意义（P〈0.01）;正常大鼠胃窦部黏膜的增殖带有Bax蛋白表达,而模型组Bax阳性表达显著减弱,经消痞颗粒治疗Bax表达有一定增强。[结论]消痞颗粒治疗后胃黏膜病变病理形态明显改善,可能是其通过抑制Bcl-2表达、上调Bax表达、调节细胞增殖凋亡而起作用。     

膀胱癌组织中Bcl-2、PCNA、p53的表达变化及意义

目的观察膀胱癌组织中Bcl-2、PCNA、p53的表达变化，并探讨其临床意义。方法用流式细胞术检测3l例膀胱癌组织中的Bcl-2、PCNA、p53，并与18例正常膀胱黏膜组织作对照。PI染色法和TUNEL法分别检测上述标本的细胞周期及凋亡细胞。结果31例膀胱癌组织中，Bcl-2阳性表达率为58．1％，p53为67．7％，PCNA中强度阳性。正常膀胱黏膜组织Bcl-2阳性表达率为16．7％、p53不表达、PCNA弱阳性，两者相比，P均〈0．01。Bcl-2、PCNA、p53的表达与膀胱癌的临床分级或分期相关。膀胱癌细胞周期分布异常，19例出现DNA异倍体，s期细胞增加，但未发现明显的周期阻滞现象。膀胱癌细胞凋亡增加。结论膀胱癌组织中Bcl-2、PCNA、p53过度表达，可出现DNA异倍体，均提示预后不良。     

加味左金丸对胃癌前病变大鼠胃黏膜组织细胞增殖与凋亡的影响

[目的]探讨加味左金丸对胃癌前病变大鼠胃黏膜组织细胞增殖与凋亡的影响。[方法]将以饮用甲硝基亚硝基胍为主24周制成的胃癌前病变模型大鼠随机分为模型组，维甲酸组，加味左金丸高、中、低剂量组，治疗16周，采用免疫组化SP法，TUNEL法检测胃黏膜组织细胞增殖细胞核抗原（PCNA）、Bcl-2蛋白及凋亡指数（AD）的表达情况。[结果]加味左金丸能明显下调胃癌前病变组织细胞的PCNA、Bcl-2的表达，上调AI。[结论]抑制细胞增殖，诱导细胞凋亡可能是该方的作用机制之一。     

热水诱导慢性萎缩性胃炎大鼠胃黏膜组织p53和增殖细胞核抗原蛋白的表达

背景：慢性萎缩性胃炎（CAG）属胃癌癌前状态,高热饮食是CAG发生的危险因素之一。目的：观察热水诱导CAG大鼠胃黏膜组织中p53和增殖细胞核抗原（PCNA）蛋白的表达,探讨长期高热饮食与CAG和胃癌的可能关系。方法：以55℃蒸馏水灌胃建立大鼠CAG模型。分别于灌胃第8、12、24、32和65周取腺胃组织,光学显微镜下观察胃黏膜组织学改变;采用免疫荧光技术标记p53和PCNA蛋白,行激光扫描共聚焦显微镜观察。结果：热水灌胃组第24周时胃黏膜开始出现萎缩改变。温水灌胃组各时间点胃黏膜均未见p53和PCNA蛋白表达。热水灌胃组第24周时胃黏膜细胞核中即可见p53蛋白绿色荧光和PCNA蛋白红色荧光表达,第32周和65周时表达更为明显。免疫荧光双标记时可见两种蛋白共表达。结论：热水灌胃可致大鼠CAG并引起胃黏膜癌相关基因p53和PCNA蛋白表达增强,可能与胃癌的发生有关。     

细胞增殖与凋亡在十二指肠胃反流患者胃黏膜病变进展中的变化

目的探讨细胞增殖与凋亡在原发性十二指肠胃反流（DGR）患者胃黏膜病变的发生发展中的作用。方法对58例原发性病理性DGR患者进行24h胃内胆汁监测,并行胃镜检查及胃黏膜活检,采用免疫组化方法分析不同病变胃黏膜组织Ki-67、Bcl-2蛋白的表达,采用TUNEL技术观察胃黏膜细胞凋亡情况。结果1．原发性病理性DGR患者胃黏膜上皮细胞增殖指数（PI）和凋亡指数（AI）均显著高于正常对照组（P〈0．05）,高反流组PI、AI均高于低反流组（P〈0．05）;2．高反流组胃窦部萎缩性胃炎的检出率高于低反流组（P〈0．05）;3．在正常胃黏膜→浅表性胃炎→萎缩性胃炎→肠上皮化生发展过程中,PI、AI均逐渐升高且呈一致性升高。在发生异型增生时PI仍显著增加而AI显著下降。4．呈异型增生的患者胃黏膜上皮细胞Ki-67表达阳性率显著升高（P〈0．05）,呈异型增生的患者胃黏膜上皮细胞Bcl-2阳性率高于其它各组（P〈0．05）。结论细胞增殖与凋亡失调可能在十二指肠反流液造成胃黏膜病变的进展中发挥重要作用,Ki-67、Bcl-2蛋白表达异常可能是DGR患者胃黏膜损伤及癌变的分子机制之一。     

胃炎Ⅰ号对慢性萎缩性胃炎PCNA、Bcl-2和Bax表达的影响

目的:以增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)和B细胞淋巴瘤基因-2(B cell lymphoma 2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)两种蛋白为切入点,研究胃炎Ⅰ号对大鼠慢性萎缩性胃炎(chronic atrophic gastritis,CAG)癌前病变治疗的作用机制.方法:制备大鼠治疗CAG模型,分别用免疫组织化学LSAB法(labeled streptavidinbiotin method)染色和链酶亲和素一过氧化物酶复合物(streptavidin peroxidase conjugate,SP c o n j u g a t e)免疫组织化学法染色检测大鼠PCNA和Bcl-2、Bax两种蛋白的表达.结果:所有大鼠胃黏膜的PCNA显色反应均为阳性,但正常组呈阳性的细胞很少,规律分布,且显色弱,主要分布在增殖带;而模型组显阳性的细胞则明显增多,密度与正常组相比,差异有统计学意义;胃炎Ⅰ号组呈阳性的细胞面密度(阳性细胞面积与统计场总面积的比值)与自然恢复组相比显著减少,与正常组相比差异无统计学意义;阳性对照组与自然恢复组相比差异无统计学意义.而阳性细胞周密度,即阳性细胞周长与统计场总面积的比值统计结果为:模型组减小不明显,较正常组显著增高;胃炎Ⅰ号组和阳性对照组与正常组差异无统计学意义.胃炎Ⅰ号组PCNA阳性细胞的面密度较自然恢复组显著降低,但阳性对照组与自然恢复组相比则差异无统计学意义;治疗组PCNA表达明显减弱,大鼠胃黏膜Bax阳性表达明显增强,Bcl-2表达则明显减弱.结论:抑制胃黏膜PCNA和Bcl-2的表达,促进Bax的表达是胃炎Ⅰ号治疗CAG癌前病变的机制之一.     

慢性萎缩性胃窦炎与生长抑素水平降低的关系探讨

目的 探讨人慢性萎缩性胃窦炎与生长抑素(SST)水平降低、胃黏膜适应性保护的关联.方法 收集慢性萎缩性胃窦炎患者的胃黏膜活检标本,采集外周血样.放射免疫法测定组织标本和血样的SST水平.光镜下观察组织学变化.透射电镜观察超微结构变化.免疫组化法检测SST在胃窦黏膜中的分布并予半定量分析.结果 慢性萎缩性胃窦炎患者胃窦D细胞数量明显减少,黏液上皮细胞胞质内线粒体肿胀,线粒体嵴断裂,粗面内质网扩张,黏原颗粒减少,细胞内核膜消失,染色质聚集.放射免疫法显示,慢性萎缩性胃窦炎患者血、上皮+隐窝部SST水平[(10.50±7.59)pg/100μl、(1.28±1.57)pg/μg蛋白]均较正常者[(21.16±12.79)pg/100 μl、(4.77±9.52)Pg/μg蛋白]显著降低.免疫组化法显示,慢性萎缩性胃窦炎患者隐窝SST水平(6780±3140)亦较正常者(36840±15230)显著降低.67.7%的慢性萎缩性胃窦炎患者血SST水平低于10 pg/100 μl.结论 在无全身炎性反应状态下,人幽门腺D细胞产生SST能力降低,与慢性萎缩性胃窦炎及胃黏膜适应性保护削弱有关.     

幽门螺杆菌及胃粘膜肠上皮化生与CD_(44)V_6表达的关系

目的　探讨幽门螺杆菌 (Hp)感染及慢性萎缩性胃窦炎伴肠上皮化生与CD4 4V6表达程度之间的关系。方法　以单克隆抗体及免疫组化技术等方法对Hp阴性单纯慢性胃炎、Hp阴性萎缩性胃炎伴肠上皮化生、Hp阳性萎缩性胃窦炎伴肠上皮化生、胃窦腺癌的胃镜下活检组织标本进行测定分析。结果　在Hp阴性单纯性胃炎组粘膜上皮未见CD4 4V6表达 ,Hp阴性萎缩性胃窦炎伴肠上皮化生、Hp阳性萎缩性胃窦炎伴肠上皮化生、胃窦腺癌各组CD4 4V6表达程度依次逐渐升高 ,各组之间比较差异有显著性 (P <0 .0 5 )。结论　CD4 4V6的表达可能是上皮细胞癌前病变出现的早期生物学信号 ,肠上皮化生细胞可能诱导CD4 4V6的表达 ,而Hp感染则有促进这种诱导表达的作用。     

胃祺饮阻断胃癌前病变组织增殖作用的实验研究

目的：观察益气化瘀之胃祺饮阻断慢性萎缩性胃炎合并胃癌前病变（PLGC）的抗增殖作用。方法：甲基亚硝基胍溶液诱发Wistar大鼠癌前病变状态,用胃祺饮（中药组）与叶酸（对照组）预防和治疗,观察对胃粘膜萎缩和不典型增生的预防和治疗作用,以及对病变粘膜组织中增殖细胞核抗原（PCNA）、P21 H－ras基因蛋白、细胞凋亡水平的影响。结果：中药组能明显阻断化学致癌物对粘膜的炎性损伤,改善癌前病变组织粘膜萎缩和不典型增生程度,结果优于对照组（P＜0．05）。同时中药组合治疗后PCNA指数、P21 H－ras基因蛋白阳性指数分别为12．78％、10．34％,并能增强癌前病变组织细胞凋亡指数,疗效明显高于对照组（P＜0．05）。结论：益气化瘀为主的胃祺饮通过改善PLGC患者气虚血瘀的血瘀的病理基础,降低病变组织增殖水平,诱导细胞正常调邙,从而对胃癌前病变细胞的增殖和良好的阻断作用。     

Relationship between gastrin cell number, serum, antral mucosa and luminal gastrin concentration and gastric acidity in antral atrophic gastritis.

The aim of our study was to investigate the relationship between gastrin producing cell density with antral mucosa, luminal and serum gastrin concentration in antral atrophic gastritis. Our study group consisted of 17 patients: six with mild atrophic gastritis, seven with moderate atrophic gastritis and four with severe atrophic gastritis. None of the patients had type-A atrophic gastritis but the body mucosa was affected by superficial gastritis at various extent in some. A group of 15 healthy subjects served as control. All subjects underwent gastroscopic examination with multiple bioptic sampling. Radioimmunoassay was used for gastrin determination and photomicroscopy for gastrin producing cell density assessment. Electron microscopy was used to assess the gastrin producing granule density index. Patients with moderate and severe atrophic gastritis showed a lower gastric acidity and acid output as compared to control. Serum gastrin did not show significant differences among the groups. In moderate and severe atrophic gastritis, gastrin producing cell granule density index, gastrin producing cell density and antral mucosa gastrin concentration were significantly lower when compared with control and decreased with advancing of the severity of atrophic gastritis. In atrophic gastritis, however, the latter two measurements were not correlated. In moderate and severe atrophic gastritis luminal gastrin concentration significantly increased, compared with control, after the severity of atrophic gastritis. Gastrin producing cell granule density index and luminal gastrin concentration showed a significant correlation with gastric pH. These data suggest that in antral atrophic gastritis with reduced gastric acidity, the decrement of gastrin producing cells is followed by gastrin producing cell hyperfunction with increased luminal release of gastrin.     

脾胃湿热证胃病患者胃黏膜细胞凋亡基因相关蛋白的表达

[目的]探讨脾胃湿热证胃病患者胃黏膜细胞凋亡基因相关蛋白的表达。[方法]选取脾胃湿热证胃病患者70例,检测胃黏膜Fas、p53、增殖细胞核抗原(PCNA)、Bcl-2凋亡基因相关蛋白。并与70例脾胃虚寒证胃病患者进行对照。[结果]脾胃湿热证以糜烂性胃炎多见(58.6%),而脾胃虚寒证以萎缩性胃炎多见(22.9%)。脾胃湿热证患者Fas、p53表达明显高于脾胃虚寒证患者,阳性率分别为74.3%、75.7%和55.7%、64.3%(P<0.05),而PCNA、Bcl-2表达则与脾胃虚寒证患者差异无统计学意义。[结论]脾胃湿热证胃病患者胃黏膜细胞有促凋亡基因相关蛋白的过度表达。     

Evolution of gastritis in patients with gastric erosions

OBJECTIVE: Gastric erosions are mainly associated with Helicobacter pylori infection and non-steroidal anti-inflammatory drugs (NSAIDs), but there has been no information available on the long-term evolution of gastritis in subjects with erosions. MATERIAL AND METHODS: A series of 117 patients with gastric erosions without peptic ulcer disease and matched controls without erosions or ulcers were studied. Available subjects underwent endoscopy and biopsy 17 years later. Parietal cell antibodies were analysed at the first visit. RESULTS: Fifty-two patients and 67 controls were available for follow-up. Since H. pylori was a major determinant of gastritis, only subjects with unchanged H. pylori status were included in the evaluation of gastritis progression. At the follow-up visit, gastric erosions were present in 38% (16/42) of the patients and 11% (5/46) of the controls (p=0.005). In H. pylori-negative subjects, no evolution of histological changes was seen. In H. pylori-positive subjects, body gastritis was initially less active in the erosion group. With time, antral gastritis worsened only in the erosion group. Parietal cell antibodies were more common in the control group (23%; erosion patients 0%; p=0.01), which also showed worsening of gastritis (p=0.003) and aggravation of atrophy (p=0.002) in the body mucosa. CONCLUSIONS: Gastritis in H. pylori-positive subjects with gastric erosions shows evolution of antral predominance, body predominance including development of atrophic changes being rare. Accordingly, patients with erosions share the characteristics of gastritis of the duodenal ulcer phenotype. These findings support the importance of H. pylori and acid in the pathogenesis of gastric erosions in H. pylori-positive patients.